Hyperbaric oxygen therapy and ischemia and reperfusion: a valuable association to attenuate ischemic lesion and hepatic reperfusion

PURPOSE: To investigate the consequences of the association between hyperbaric oxygen therapy and hepatic ischemia / reperfusion. METHODS: Wistar rats were divided into three groups: SHAM, rats submitted to surgical stress and anesthetic but not hepatic ischemia or reperfusion, I / R, rats submitted to total hepatic pedicle ischemia for 30 min, followed by 5 min of reperfusion; HBO120, rats submitted to 120 min of hyperbaric oxygen therapy at two absolute atmospheres and immediately after submitted to the experimental protocol of ischemia and reperfusion. The preservation of the hepatic function was evaluated by determining mitochondrial swelling and malondialdehyde tissue level, as well as alanine aminotransferase and aspartate aminotranferase serum levels. The results were analyzed using the Mann-Whitney test and differences were considered significant for p<0.05. RESULTS: There were significant differences in values: mitochondrial swelling of the I / R group compared to SHAM and HBO120; malondialdehyde between SHAM vs. I / R, SHAM vs HBO120, and I / R vs HBO120, alanine aminotransferase between SHAM vs. I / R . There was no significant difference between groups in aspartate aminotransferase serum levels. CONCLUSION: The association between hyperbaric oxygen therapy and hepatic ischemia and reperfusion process was positive.

Effect of hyperbaric oxygen therapy on liver function during intermittent ischemia / Efeito da oxigenoterapia hiperbárica sobre a função hepática na isquemia intermitente

PURPOSE: To analyze the effects of hyperbaric oxygen therapy on liver function in rats previously subjected to ischemia and reperfusion. METHODS: A randomly distribution of 23 Wistar rats was conducted into three groups: SHAM, animals subjected to surgical stress without restricting blood flow by clamping the hepatic pedicle, IR, rats underwent hepatic vascular occlusion intermittently for two complete cycles of 15 minutes of ischemia followed by 5 min of reperfusion, IR / HBO, rats underwent hepatic pedicle clamping and thereafter exposed to hyperbaric oxygen pressure of 2 absolute atmospheres for 60 minutes. We evaluated liver function through mitochondrial function, determined by the stages 3 and 4 of respiration, respiratory control ratio (RCR) and mitochondrial permeability transition (Swelling). Serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) were also quantified . We analyzed the results using the Mann-Whitney test and were considered significant all results with p <0.05. RESULTS: There were significant differences between the results of stage 3 in SHAM vs IR group ; of the stage 4 in the groups IR vs SHAM and SHAM vs IR /HBO; of the Respiratory Control Ratio (RCR) in the group IR vs IR / HBO ; of alanine aminotransferase in the groups IR vs SHAM , SHAM vs IR/HBO and IR vs IR / HBO; aspartate aminotransferase in the groups SHAM vs IR and SHAM vs IR / HBO. CONCLUSION: The whole analysis of the mitochondiral function indicators permits us to conclude that the hyperbaric oxygen therapy acted as a protective agent of the mitochondrial function, minimizing the ischemia-reperfusion injury of the hepatic parenchyma.

OBJETIVO: Analisar os efeitos da oxigenoterapia hiperbárica sobre a função hepática de ratos previamente submetidos à isquemia e reperfusão. MÉTODOS: Realizou-se a distribuição aleatória de 23 ratos Wistar em três grupos: SHAM, animais submetidos ao estresse cirúrgico sem restrição de fluxo sanguíneo por clampeamento do pedículo hepático; IR ratos submetidos a oclusão vascular hepática de maneira intermitente em dois ciclos completos de 15 minutos de isquemia, seguidos por 5 min de reperfusão; IR/HBO, ratos submetidos ao clampeamento do pedículo hepático e ,ulteriormente , expostos a oxigenoterapia hiperbárica a pressão de 2 atmosferas absolutas durante 60 minutos. Avaliou-se a função hepática através da função mitocondrial, determinada pelos estados 3 e 4 da respiração mitocondrial, razão de controle respiratório(RCR) e transição de permeabilidade mitocondrial (Swelling) .Quantificou-se também alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase séricas. Analisou-se os resultados pelo teste de Mann-Whitney e foram considerados significativos os valores de p < 0,05. RESULTADOS:Houve diferença significativa nos valores do estado 3 no grupo SHAM vs IR; estado 4 nos grupos SHAM vs IR, SHAM vsIR/HBO; Razão de Controle Respiratório(RCR) no grupo IR vs IR/HBO; alanina aminotransferase nos grupos SHAM vs IR, SHAM vs IR/HBO, IR vs IR/HBO; aspartato aminotransferase nos grupos SHAM vs IR , SHAM vs IR/HBO. CONCLUSÃO: A análise dos parâmetros mitocondriais como um todo permitiu concluir que a oxigenoterapia hiperbárica atuou como agente protetor da função mitocondrial, minimizando os efeitos deletérios da lesão de isquemia e reperfusão do parênquima hepático.

Effects of hyperbaric oxygen (HBO), as pre-conditioning in liver of rats submitted to periodic liver ischemia/reperfusion / Efeitos da oxigenoterapia hiperbárica como pré-condicionamento em fígados de ratos submetidos à lesão hepática de isquemia/reperfusão intermitente

PURPOSE: to assess the effect of hyperbaric oxygen (HBO) as pre-conditioning on periodic liver ischemia/reperfusion injury. METHODS: Thirty-six male Wistar rats were divided into 4 groups (SHAM, I/R , HBO-I/R and CONTROL). The surgical technique consisted of total clamping of the hepatic pedicle for 15 min followed by twice repeated reperfusion for 5 min (unclamping). HBO was applied in a collective chamber (simultaneous exposure of 4 rats) directly pressurized with oxygen at 2 ATA for 60 min. Hepatic mitochondrial function was determined using samples of the median lobe obtained after exactly 5 min of reperfusion for the analysis of mitochondrial respiration based on the determination of states 3 and 4, the respiratory control ratio and the transition of mitochondrial permeability (mitochondrial swelling).Data were analyzed by the Mann-Whitney test and the level of significance was set at p < 0.05. RESULTS: There was a statistically significant difference (p< 0.05) in state 3 between the CONTROL and I/R and HBO-I/R groups, in state 4 between the CONTROL and I/R and HBO-I/R groups; in respiratory control ratio (RCR) between the CONTROL and I/R and HBO-I/R groups and between the CONTROL and Sham groups, and in mitochondrial swelling between the CONTROL and I/R and HBO-/R groups and between the Sham and I/R and HBO-I/R groups. CONCLUSION: In this process of periodic ischemia and reperfusion, hyperbaric pre-conditioning did not improve significantly hepatic mitochondrial function.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos da oxigenoterapia hiperbárica (HBO), como pré-condicionamento, em lesão hepática de isquemia/reperfusão intermitente. MÉTODOS: Foram avaliados 36 ratos Wistar machos, distribuídos em 4 grupos (SHAM, I/R , HBO - I/R e CONTROLE). A técnica operatória consistiu em pinçamento total do pedículo hepático durante 15min, seguido de reperfusão por 5 min (desclampeamento), por duas vezes. A aplicação de HBO foi realizada em câmara coletiva (exposição simultânea de 4 ratos) diretamente pressurizada com oxigênio a 2ATA, durante 60min. Determinou-se a função mitocondrial hepática através de amostras do lobo mediano colhidas com exatos 5min de reperfusão para análise da respiração mitocondrial, através da determinação dos estados 3 e 4, razão de controle respiratório e transição de permeabilidade mitocondrial (intumescimento osmótico - swelling mitocondrial).Os resultados foram analisados pelo teste de Mann-Whitney e foi considerado significativo todo valor de p < 0,05. RESULTADOS: Houve diferença estatistica significativa (p< 0,05) no Estado 3 nos grupos CONTROLE vs I/R e HBO - I/R, no Estado 4 nos grupos CONTROLE vs I/R e HBO - I/R; na Razão de controle respiratório(RCR) nos grupos CONTROLE vs I/R e HBO-IRe CONTROLE vs Sham e no Swelling mitocondrial nos grupos CONTROLE vs I/R e HBO - I/R, I/R vs HBO-IRe Sham vs I/R e HBO-IR. CONCLUSÃO: O pré-condicionamento hiperbárico não melhorou a função mitocondrial hepática significativamente neste processo de isquemia e reperfusão intermitente.

Biochemical liver function after partial hepatic resection with or without partial hepatic vascular exclusion / Função bioquímica do fígado após ressecção hepática parcial com ou sem exclusão vascular hepática parcial

PURPOSE: The aim of the present study was to assess the advantages and disadvantages of liver vascular partial exclusion (LVPE) (liver dysfunction due to ischemia) during liver resection in patients submitted to partial hepatectomy. METHODS: A total of 114 patients were submitted to partial hepatectomy (minor versus major resections) with LPVE being used in 57 of them but not in the remaining 57. Patient age ranged from 35 to 73 years and 57 percent were women. Mitochondrial function was assessed 30 minutes after liver resection in the remnant liver and serum aminotransferases were determined before surgery and for seven days postoperatively. LPVE time ranged from 30 to 60 minutes. Data were analyzed statistically by the Student T test (5 percent level of significance). RESULTS: Mitochondrial function was similar in the minor and major liver resections. The maximum postoperative aminotransferase peak was similar in the groups with and without LPVE. CONCLUSION: LPVE did not induce mitochondrial changes in hepatic tissue in either type of surgery, and aminotransferase levels were similar for patients with and without LPVE. Thus, the results show that LPVE is a safe procedure that does not induce the significant changes typical of ischemia and reperfusion in the liver remnant.

OBJETIVO: Avaliar as vantagens e desvantagens da oclusão vascular parcial do fígado durante ressecções hepáticas parciais. MÉTODOS: Cento e quatorze pacientes foram submetidos a hepatectomia parcial(ressecção maior versus ressecção menor) com liver partial vascular exclusion (LPVE) sendo utilizada em 57 deles. A idade dos pacientes variou entre 35 e 73 anos e 57 por cento deles eram mulheres. A função mitocondrial foi avaliada por método polarografico avaliada 30 minutos após a ressecção hepática no fígado remanescente, e o perfil das aminotransferase foi determinado antes da cirurgia e durante sete dias de pós-operatório. A EVPH variou de 30 a 60 minutos. Dados foram analisados estatisticamente pelo teste T Student (nível de significância de 5 por cento). RESULTADOS: Nas ressecções hepáticas maiores e menores, a função mitocondrial do fígado remanescente foi semelhante dos dois grupos. O pico máximo de aminotransferases ocorreu as 24 horas de pós-operatório e o perfil enzimático de ALT e AST foi semelhante nos grupos estudados ( minor vs major hepatectomy.) CONCLUSÃO: A EVPH não induziu alterações mitocondriais no tecido hepático em qualquer tipo de cirurgia, e os níveis de aminotransferases foram similares para pacientes hepatectomizados com e sem LPVE.Assim a LPVE foi um procedimento seguro que não induziu alterações significativas típicos de isquemia e reperfusão no fígado remanescente.

Effect of the aqueous extract of Sida cordifolia on liver regeneration after partial hepatectomy / Efeito do extrato aquoso de Sida cordifolia na regeneração hepática após hepatectomia parcial

PURPOSE: The use of medicinal plants for the treatment of human diseases has increased worldwide. Many of them are used by oral administration and, after absorption, may affect many organs. Therefore, this study aimed at assessing the effects of the aqueous extract of Sida cordifolia leaves, popularly known in Brazil as "malva-branca", on liver regeneration. METHODS: Twenty rats were divided into four groups: control, Sida100, Sida200 and Sida400 groups. All animals were submitted to oral administration of distilled water, 100, 200 and 400 mg/kg of the aqueous extract of Sida cordifolia, respectively. Immediately after this, they underwent 67 percent partial hepatectomy. Twenty four hours later, their livers were removed. Hepatic regeneration was assessed by immunohistochemical staining for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) using the PC-10 monoclonal antibody. RESULTS: Sida100 and Sida200 groups disclosed higher liver regeneration indices than control group (p<0.001 and p<0.05, respectively). CONCLUSION: The aqueous extract of Sida cordifolia stimulates liver regeneration after 67 percent partial hepatectomy in rats.

INTRODUÇÃO: O uso de plantas medicinais para o tratamento de patologias humanas tem aumentado em todo mundo. Muitas delas são usadas por administração oral, e após a absorção podem afetar muitos órgãos. OBJETIVO: Esse estudo, tem como objetivo verificar o efeito do extrato aquoso de Sida cordifolia, popularmente conhecida no Brasil como "malva-branca", na regeneração hepática. MÉTODOS: Vinte ratos foram divididos em 4 grupos: controle, Sida 100, Sida 200 e Sida 400. Os animais foram submetidos a administração oral de água destilada, 100, 200 e 400 mg/kg de extrato aquoso de Sida cordifolia, respectivamente. Imediatamente após, foi realizada hepatectomia parcial 67 por cento. Vinte quatro horas após, os fígados foram removidos. A regeneração hepática foi avaliada por imunohistoquímica (PCNA), usando o anticorpo monoclonal PC-10. RESULTADOS: Os grupos Sida100 e Sida200 mostraram índices de regeneração hepática maiores que o grupo controle (p<0.001 e p<0.05, respectivamente). CONCLUSÃO: O extrato aquoso de Sida cordifolia estimula a regeneração hepática após hepatectomia parcial a 67 por cento em ratos.

Funçäo mitocondrial hepática compensatória na coletase extra hepática aguda / Compensatory hepatic mitochondrial function in acute extrahepatic cholestasis

A atividade compensatória mitocondrial é um mecanismo que permite a alguns orgãos manter seu nível energético em situações adversas. Este presente estudo visa analisar a função mitocondrial hepática em ratos submetidos à OBEH. Foram estudados 10 ratos Wistar machos (180 a 230 g), divididos em dois grupos. Grupo operação simulada - OS e grupo obstrução biliar extra hepática (OBEH). Após 24 h. foram coletadas amostras de sangue e biópsia hepática para a dosagem do nível sérico das enzimas hepáticas e a atividade mitocondrial. Houve aumento significativo das aminotranferases, da FA e BT (tabela 1).Verificou-se aumento do Estado 3 da respiração mitocondrial. Analisando os resultados, observou-se que as mitocôndrias hepáticas apresentaram atividade compensatória no sentido de preservação da função hepatocelular.

Níveis séricos de gama-glutamil transptidase e fosfatase alcalina na obstruçäo biliar extra-hepática em ratos / Serum levels of gama-glutamyl transpeptidase and alkaline phosphatase in extrahepatic biliary obstruction in the rats

O presente estudo foi realizado no sentido de se comparar os níveis séricos de fosfatase alcalina (FA) e da gama-glutamil transpeptidase (GGT) após diferentes tempos de obstruçäo biliar extra-hepática (OBE) em ratos. Foram utilizados ratos machos Wistar (n=60) com peso entre 270 e 330g. Quarenta animais foram divididos em 4 grupos de dez e submetidos à ligadura do ducto hepático (LDH). Amostras de sangue foram colhidas da veia cava inferior 1,24,48 e 168 horas após LDH para determinaçäo dos níveis séricos da FA e GGT. Os resultados foram comparados com os obtidos em animais controles submetidos à operaçäo simulada para OBE (5 para cada grupo), e estudados nos mesmos intervalos de tempo. A análise estatística foi feita pelo teste ANOVA ("Two way" e "One way"). Os níveis séricos de FA aumentaram significativamente com 24 horas de LDH (24 vs 1h, p >0,01) e näo foram diferentes daqueles obtidos nos tempos de 48 e 168 horas. Os níveis de GGT foram menores nos animais com OBE de 24 e 48 horas em relaçäo aos controles. O aumento da FA foi maior que o da gama-glutamil em todos os temos estudados após LDH. Näo se observou correlaçäo significante entre as duas enzimas na OBE. Isto mostra que os níveis séricos da GGT näo servem como indicadores de colestase extra-hepática nos animais estudados