Sera of Chagasic patients react with antigens from the tomato parasite Phytomonas serpens

The genus Phytomonas comprises trypanosomatids that can parasitize a broad range of plant species. These fagellates can cause diseases in some plant families with a wide geographic distribution, which can result in great economic losses. We have demonstrated previously that Phytomonas serpens 15T, a tomato trypanosomatid, shares antigens with Trypanosoma cruzi, the agent of human Chagas disease. Herein, two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and mass spectrometry (MS) were used to identify proteins of P. serpens 15T that are recognized by sera from patients with Chagas disease. After 2D-electrophoresis of whole-cell lysates, 31 peptides were selected and analyzed by tandem mass spectrometry. Twenty-eight polypeptides were identifed, resulting in 22 different putative proteins. The identifed proteins were classifed into 8 groups according to biological process, most of which were clustered into a cellular metabolic process category. These results generated a collection of proteins that can provide a starting point to obtain insights into antigenic cross reactivity among trypanosomatids and to explore P. serpens antigens as candidates for vaccine and immunologic diagnosis studies.

Regulação da linfoproliferação e da síntese de citocinas por prostaglandinas na infecção experimental por Trypanosoma cruzi / Regulation of lymphoproliferation and cytokines synthesis by prostaglandins in experimental Trypanosoma cruzi infection

A fase aguda da infecçao experimental pelo Trypanosoma cruzí caracteriza-se por apresentar supressao das respostas linfoproliferativas para mitógenos e antígenos do parasito. Este fenômeno tem sido explicado por vários mecanismos, incluindo a produçao exacerbada de óxido nítrico (NO) por macrófagos ativados e IL-2 insuficiente para sustentar o crescimento. Quando a supressao é máxima, o bloqueio da produçao de NO com NMLA (N _G_Monometil-L-arginina) nao restaura por completo a linfoproliferaçao ou aumenta a síntese de IL-2. Esses dados sugerem que outros mediadores contribuem para imunossupressao observada na infecçao pelo T. cruzi. Neste trabalho nós investigamos a regulaçao de prostaglandinas (PG), fator de necrose tumoral (TNF-a) e NO sobre a produçao de citocinas e respostas linfoproiiferativas de células de baço (SC), obtidas de camundongos infectados com 5 x 103 formas sanguícolas de T. cruzi (cepa Y). Foram estudadas as respostas proliferativas destas células para antígenos do parasito e à Concanavalina A (Con A), utilizando como parâmetros: proliferaçao (incorporaçao de 3 H-Timidina) e quantificaçao de PGE2, nitrito e das citocinas IFN-g, IL-2, IL-12, TNF-a, IL-10 e IL-4, presentes nos sobrenadantes de culturas tratadas ou nao com inibidores da COX (indometacina), da iNOs (NMLA) e anticorpo monoclonal anti-TNF-a. Altos níveis de PGE2 TNF-a e NO foram produzidos durante a infecçao. TNF-a estimulou a síntese de PGE2 e NO, enquanto ambos mediadores inibiram a síntese de TNF-a. O bloqueio da produçao de PG também reduziu a síntese de NO, indicando que PG estimula a produçao de NO. O tratamento com indometacina ou NMLA estimulou a linfoproliferaçao das células de baço obtidas de animais com 6 e 22 dias de infecçao; no dia 14, quando a supressao da proliferaçao e produçao de NO era máxima, a inibiçao combinada da produçao de NO e PG, restaurou as respostas proliferativas antígeno-específicas e para Con A. O bloqueio da produçao de PG ou NO aumentou a síntese de IL-2, IFN-g e TNF-a mas nao de IL-12 e IL4 pelas células de baço; enquanto que os níveis de IL-10 nao foram reduzidos. Foi analisado também o fenótipo das células que proliferam (blastos) em resposta à estimulaçao com T-Ag e tratadas com indometacina, NMLA ou indometacina + NMLA. Nossos resultados sugerem uma expansao maior de populaçoes blásticas no compartimento T CD4+, pela açao dos inibidores utilizados. Camundongos infectados e tratados com indometacina ...(au)