Simulating stress condition through compaction in banana plant cultivated In vitro / Mulação de estresse por compactação em bananeiras cultivadas In vitro

Banana cultivation is an agricultural activity practiced in different regions and constantly subjected to abiotic stresses that limit its productivity. To treat the effect of these stresses research can be undertake by simulating them in vitro since it limit the effect of the external factor in the experiment. Therefore, the objective of this study was to simulate the compaction in banana plant cultivated in vitro using Phytagel. To realize the experiment, we used MS culture medium with two distinct consistency added in the testing tubes. In the bottom part was added 10 mL of culture medium with consistency of jellification: 1.8, 2.8, 3.8, 4.8 and 5.8 g L-1 of Phytagel. Over this culture medium was added 5mL of half MS with consistency standard 1.8 g L-1 of Phytagel. Posteriorly, the planting materials from cultivar Grand Naine, BRS Vitória and BRS Princesa were inoculated in the growth medium. After 30 days of culture the plant materials were submitted for agronomic and physiological evaluation. The result showed non-significant difference among the compaction factors on physiological parameters however variety Grand Naine presents better performance in this character. Besides variety Grand Naine increased the rate of photosynthesis under compaction. This behaviour probably occurred due to overcoming the effect of stress by the variety. Therefore, it can be concluded that the cultivar Grand Naine is superior to cultivars BRS Vitória and BRS Princesa since it produces superior performance on rate of photosynthesis, stomatal conductance, and transpiration under simulated compaction conditions that favor the accumulation of plant biomass.

A bananicultura é uma atividade agrícola difundida em diferentes áreas e constantemente sujeita a estresses abióticos, os quais limitam sua produtividade. Para sanar o efeito dos estresses abióticos pesquisas podem ser simuladas in vitro, pois devido à característica de ambiente controlado pode proporcionar efeito puro do fator de estresse. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi simular a compactação em bananeiras cultivadas in vitro mediante o uso de Phytagel. Para instalação do experimento utilizou-se o meio de cultura MS em duas consistências distintas, adicionadas a tubos de ensaios. Na parte inferior desses, adicionou-se 10 mL do meio de cultura com distintas consistências de geleificação: 1,8; 2,8; 3,8; 4,8 e 5,8 g L-1 de Phytagel. Sobre este meio de cultura foi adicionado mais 5 mL de meio MS, mas na consistência padrão de 1,8 g L-1 de Phytagel. Posteriormente foram inoculados propágulos das cultivares Grand Naine, BRS Vitória e BRS Princesa. Aos 30 dias de cultivo o material vegetal foi submetido a avaliações fitotécnicas e fisiológicas. Observa-se que as variáveis fitotécnicas não foram significativas para o fator compactação e que a cultivar Grand Naine obteve maior desempenho nessa característica. Observa-se também que a cultivar Grand Naine aumenta sua taxa fotossintética mediante a compactação. Esse comportamento provavelmente ocorre visando a superação desse estresse e explica porque as variáveis fitotecnicas não são comprometidas. Portanto, conclui-se que a cultivar Grand Naine é superior as cultivares BRS Vitória e BRS Princesa, porque mediante a simulação de compactação apresenta superioridade em taxa fotossintética, condutância estomática e transpiração, favorecendo o acumulo de biomassa vegetal.

Endoreduplication in floral structure, vegetative and fruits of red pitaya with white pulp / Endorreduplicação em estrutura floral, vegetativa e frutos de pitaya vermelha de polpa branca

Endoreduplication is the change of cellular cycle that result DNA duplication without cell division and could result endopolyploid cells. This phenomenon is common in plants and animals and considered as evaluative strategy. Although endoreduplication reported in various plant species, the information about these phenomena in red pitaya is rare. Therefore, this work was done with the objective of studying the endoreduplication in Hylocereus undatus Haw. using flow cytometry analysis. In this study were used the tissue from the flower structure, fruits, roots, cladode, and thorns of the pitaya plant.To determine the DNA content approximately 50 mg the sample of each treatment with Pisum sativum (the internal standard reference) were grind in plate of petri dishes contained 1 mL of cold Marie buffer to release the nucleus.The nuclear suspension was filtered through 50 µm mesh. The nucleuses were colored with 25 µL of 1 mg/L mL of propidium iodide. For each treatment, three samples of 10 thousand nucleuses were analyzed in cytometry Facscalibur (Becton Dickinson). The content of nuclear DNA (pg) was estimated as the ratio between fluorescence intensity of the G1 nucleus of the standard and the G1nucleus of the sample multiplied by the quantity of DNA of the internal reference. In conclusion, the endoreduplication occurred in all part of the plants analyzed except in the aculeus and the roots. The analysis evidenced different index of DNA content in the tissues analyzed being observed up to four different ploidy levels. The phenomena of endoreduplication occurs in all parts of the plant analyzed except in aculeus and roots.

A endorreduplicação é uma alteração do ciclo celular, ocorrendo a replicação do DNA sem a divisão celular, podendo resultar em células endopoliploides. É um fenômeno comum em plantas e animais, sendo considerada uma estratégia evolutiva. Embora a endorreduplicação seja relatada em diversas espécies de plantas, as informações sobre este fenomeno em pitaia vermelha são escassas. Assim, objetivou-se com este trabalho estudar a endorreduplicação em Hylocereus undatus Haw. pela técnica de citometria de fluxo. Foram analisados tecidos de estruturas florais, de frutos, raiz, cladódio e acúleos de plantas de pitaia. Para a determinação do conteúdo de DNA, aproximadamente 50 mg de amostra de cada tratamento, juntamente com Pisum sativum (padrão de referência interno) foram triturados em placa de Petri contendo 1 mL de tampão Marie gelado para a liberação dos núcleos. A suspensão de núcleos foi filtrada através de malha de 50 µm. Os núcleos foram corados com 25 µL de solução de 1 mg/1 mL de iodeto de propídeo para cada amostra. Para cada tratamento, três amostras de 10 mil núcleos foram analisadas em citômetro Facscalibur (Becton Dickinson). O conteúdo de DNA nuclear (pg) foi estimado utilizando-se a razão entre as intensidades de fluorescência dos núcleos G1 do padrão de referência e dos núcleos G1 da amostra, multiplicando-se esta razão pela quantidade de DNA do padrão de referência. Conclui-se que a endorreduplicação ocorre em todas as partes da planta analisada, exceto no acúleo e na raiz. As análises evidenciam diferentes índices de conteúdo de DNA nos tecidos, sendo observados até quatro diferentes níveis de ploidia. O fenômeno da endorreduplicação ocorreu em todas as partes da planta analisadas, exceto nos acúleos e raízes.

Utilização da modelagem matemática (redes neurais artificiais) na classificação de autotetraploides de bananeira (Musa acuminata Colla) / Use of mathematical modeling (artificial neural networks) in classification of banana autotetraploid (Musa acuminata Colla)

Objetivou-se desenvolver uma metodologia para possibilitar a classificação de plantas de bananeira submetidas à indução de duplicação cromossômica utilizando Redes Neurais Artificiais (RNA). Os dados utilizados neste trabalho foram retirados de uma tese já apresentada, cujo autor estudou a correlação entre a massa fresca de discos foliares e o conteúdo de DNA. A RNA foi implementada com a função de classificação. A taxa de aprendizado e o termo momentum adotados foram respectivamente iguais a 0,01 e 0,2, o número de épocas de treinamento foi 1000. Esses valores foram determinados por meio de tentativa e erro. Para o treinamento, 90% das plantas foram utilizadas e, para validação, 10% do total de 114 autotetraploides produzidos artificialmente por meio de exposição ao antimitódico colchicina. A RNA classificou corretamente 10 das 11 amostras utilizadas para validação. A estatística Kappa foi de 63,33%, o que indica que a RNA pode ainda ser melhorada. A rede neural artificial do tipo Multi Layer Perceptron implementada é eficaz na préseleção de poliploides desejáveis de bananeira Tong Dok Mak.

The objective was to develop a methodology to enable the classification of banana crop subjected to induction of chromosome doubling using Neural Networks (NN). The data used in this study were taken from a thesis already presented, whose authors studied the correlation between fresh weight of leaf discs and DNA content. The NN was implemented by the ranking function. The learning rate and momentum term used were respectively equal to 0.01 and 0.2, the number of training epochs was 1000. These values were determined by trial and error. For training, 90% of the plants were employed, and for validation, 10% of the total of 114 autotetraploids artificially produced by exposure to antimitodic agent colchicine. The NN correctly classified 10 of the 11 samples used for validation. Kappa statistics was 63.33%, which indicates that the NN can be further improved. The artificial neural network-type Multi Layer Perceptron is effectively implemented in the pre-selection of polyploid desirable banana Tong Dok Mak.

Micropropagação e endorreduplicação em pitaya vermelha / Micropropagation and endoreduplication in red pitaya

A micropropagação facilita a obtenção de mudas de mudas de pitaya, Hylocereus undatus Haw; porém, pode propiciar alterações genéticas, como a polissomatia, endopoliploidia ou endorreduplicação. Neste trabalho, objetivou-se desenvolver protocolo para micropropagação e verificar a endorreduplicação em pitaya vermelha. Cladódios de pitaya foram micropropagados em meio de cultura MS, com 0,1 mg L-1 de ANA, acrescido de BAP e cinetina, nas dosagens 0, 1, 5 e 10 mg L-1, sendo o meio MS sem reguladores de crescimento utilizado como tratamento controle. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em fatorial 2x8 (ausência e presença de luz e 8 diferentes meios de cultura), totalizando 16 tratamentos, sendo 4 repetições de 3 explantes. O experimento foi conduzido na presença e ausência de luz em sala de crescimento a 25 ± 2ºC, irradiância média de 42 W m-2 e fotoperíodo de 16 horas, por 120 dias. A análise de citometria de fluxo foi utilizada em 3 explantes por tratamento. Amostras de cladódios, juntamente com o padrão interno (ervilha) foram triturados com 1 mL de tampão de extração LB01 e 25 mL de iodeto de propídeo, analisados em citômetro de fluxo. Os explantes submetidos à ausência de luz não responderam aos tratamentos. O meio de cultura que proporciona melhor crescimento e desenvolvimento in vitro é o MS acrescido de 0,1 mg L-1 de ANA e BAP ou cinetina nas concentrações de 1 ou 5 mg L-1. O meio de cultura que proporciona aos explantes maior variação na quantidade de DNA é MS com 10 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA. O fenômeno da endorreduplicação é observado em todos os tratamentos analisados.

Micropropagation makes the obtaining of seedlings of red pitaya easier, but, it can cause genetic mutations such as polysomaty, endopolyploidy or endoreduplication. In this work, it was aimed to develop a protocol for micropropagation and check the endoreduplication in red pitaya. Pitaya cladodes were micropropagated im MS culture medium with 0.1 mg L-1 of ANA added of BAP and kinetin at the dosages of 0, 1, 5 and 10 mg L-1, the MS medium without any growth regulators being used as the control treatment. The experimental design utilized was the completely randomized in factorial 2 x 8 (absence and presence of light and 8 different culture media), amounting to 16 treatments, namely, 4 replications of 3 explants. The experiment was conducted in the presence and absence of light in a growth room at 25 ± 2 ºC, average irradiance of 42W m-2 and photoperiod of 16 hours for 120 days. The flow cytometry analysis was utilized on three explants per treatment. Cladode samples, along with the internal pattern (pea) were ground with 1 ml of extraction buffer LB 01 and 25 mL of propide iodide, analyzed in flow cytometer. The explants submitted to the absence of light did not respond to the treatments. The culture medium which brings about the best in vitro growth and development is the MS added of 0.1 mg L-1 of ANA and BAP or kinetin at the concentrations of 1 or 0.5 mg L-1. The culture medium which provides to the explants greatest variation in the amount of DNA is MS with 10 mg L-1 of BAP and 0.1 mg L-1 of ANA. The phenomenon of endoreduplication is found in all the treatments investigated.

Fontes de silício no desenvolvimento de plântulas de bananeira 'Maçã' micropropagadas / Sources of silicon in the development of micropropagated seedlings of banana 'Maçã'

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes fontes de silício durante a fase de enraizamento in vitro de bananeira 'Maçã' por meio de análise fisiológica, fitotécnica e ultraestrutural. Foram utilizados propágulos já estabelecidos in vitro e inoculados em meio MURASHIGE & SKOOG (MS), adicionado de 30g L-1 de sacarose, 1mg L-1 de ANA (ácido naftalenoacético) e solidificado com 1,8g L-1 de PhytagelTM. Foram testadas três fontes de silicato acrescidas ao meio MS, silicato de sódio, silicato de potássio e silicato de cálcio, na dosagem de 1g L-1 e o meio MS sem silicato como testemunha. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com quinze repetições. Os propágulos foram mantidos por 45 dias em sala de crescimento, sob condições controladas. Verificou-se aumento nos teores de clorofila a, b e total na presença de silicato de cálcio. A suplementação do meio de cultura com silicato de sódio promoveu aumento de comprimento, massa fresca e seca de parte aérea. O silício proporciona adequado desenvolvimento das plântulas.

The objective of the research was to evaluate the effect of different sources of silicon during the in vitro rooting phase of 'Maçã' banana tree by means of physiological, phytotechnical and ultrastructural analysis. It was used propagules already established in vitro which were inoculated in MURASHIGE & SKOOG (MS) medium, added of 30g L-1 of sucrose, 1mg L-1 of NAA (naphthalene acetic acid) and solidified with 1.8g L-1 of PhytagelTM. It was tested three sources of silicate added to MS medium, sodium silicate, potassium silicate and calcium silicate, at a dose of 1g L-1 and MS medium without silicate as a witness. The experimental design was completely randomized with fifteen replicates. The propagules were kept for 45 days in a growth room under controlled conditions. There was an increase in levels of chlorophyll a, b and total in the presence of calcium silicate. Supplementation of culture medium with sodium silicate promoted increase in length, fresh and dry weight of shoots. The silicon provides adequate seedling development.

Caracterização morfológica de cultivares de bananeira micropropagadas em estádio juvenil / Morphological characterization of banana micropropagated cultivars in juvenile phase

O objetivo deste trabalho foi determinar descritores morfológicos que possibilitassem a caracterização de cultivares de bananeira provenientes de micropropagação ainda na fase juvenil. Foram utilizadas 12 cultivares de bananeira de diferentes grupos genômicos e graus de ploidia, que foram cultivadas in vitro e posteriormente aclimatizadas em casa de vegetação. Após o período de três meses, foram avaliadas características morfológicas quantitativas e caracteres descritivos das plantas. Com base nos resultados obtidos, foi possível separar todas as cultivares estudadas e elaborar uma chave analítica que permite a identificação dessas cultivares após o período de apenas três meses de aclimatização.

The aim of this study was to determine morphological descriptors that could enable the characterization of banana cultivars from micropropagation process during the juvenile phase. Twelve cultivars from different genomic groups and with different ploidy levels were grown in vitro and acclimatized in greenhouse for three months. After this period, plants quantitative morphological and descriptive characteristics were evaluated. The results allowed ranking the cultivars and preparing an analytical key to identify these cultivars after the period of three months of acclimatization.

Cloreto de sódio e ácido naftalenoacético no enraizamento de microestacas de amoreira-preta cv. Brazos in vitro / Sodium chloride and naphthaleneacetic acid on in vitro rooting of blackberry cv. Brazos

A micropropagação de amoreira-preta (Rubus sp.) é utilizada, principalmente, para a obtenção de plantas livres de vírus e num curto espaço de tempo. No presente trabalho foram testadas diferentes concentrações de cloreto de sódio (NaCl) e do ácido naftalenoacético (ANA)adicionados ao meio de cultura in vitro de amoreira-preta. O meio foi constituído de sais MS, acrescidos de 30 g L-1 de sacarose e 6 g L-1 de ágar, e o pH ajustado para 5,8 antes da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Os tratamentos consistiram em concentrações de NaCl (0; 25; 50; 75 e 100 mg L-1) e de ANA (0; 0,1; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1), em todas as combinações possíveis e da amoreira-preta cv. Brazos. Segmentos nodais, oriundos de plântulas preestabelecidas in vitro foram excisados e introduzidos em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio de cultura. Posteriormente, os tubos foram transferidos para sala de crescimento a 25 ± 2ºC, irradiância de 35 mmol.m-2.s-1 e fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado, utilizando-se 4 repetições com 12 plântulas cada. O experimento foi avaliado após 70 dias de cultivo in vitro. O desenvolvimento in vitro da cv. Brazos foi favorecido nos tratamentos com 50-75 mg L-1 de NaCl e 1,0-1,5 mg L-1 de ANA, enquanto melhor resultado de enraizamento foi obtido no tratamento com 100 mg L-1 de NaCl e 1,5 mg L-1 de ANA.

The blackberry (Rubus sp.) micropropagation is used, mainly for obtaining virus-free plants in short period of time. In the present work different concentrations of sodium chloride (NaCl) and naphthaleneacetic acid (NAA) were tested added to in vitro culture medium of blackberry cv. Brazos. The culture medium consisted of MS salts, with 30 g L-1 sucrose 6 g L-1 agar and pH adjusted to 5.8 before the sterilization at 121ºC and 1 atm for 20 minutes. The treatments consisted of NaCl (0; 25; 50; 75 and 100 mg L-1) and NAA (0; 0.01; 0.5; 1.0 and 1.5 mg L-1) concentrations, in all possible combinations. Nodal segments, originating from plants established in vitro were excised and introduced in tubes containing 15 mL of culture medium. After that, the tubes were transferred to growth room at 25 ± 2ºC, irradiance of 35 mmol m-2 s-1 and photoperiod 16 hours. A completely randomizel block design with four replicates and 12 plants per replicate was used. The experiment was evaluated after 70 days of in vitro cultivation. The in vitro development of the cv. Brazos was favored in the treatments with 50 to 75 mg L-1 NaCl and 1.0 to 1.5 mg L-1 NAA, while the best rooting results were obtained using 100 mg L-1 NaCl and 1.5 mg L-1 NAA.

Crescimento in vitro de amoreira-preta: efeito de reguladores de crescimento e da cultivar / In vitro blackberry growing: effect of growth regulators and cultivar

Desenvolveu-se, este trabalho, no intuito de aprimorar técnicas de propagação in vitro de amoreira-preta. Testou-se em um experimento a influência de cinco diferentes concentrações de ANA (0; 0,1; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) e cinco de GA3 (0; 2; 4; 6 e 8 mg L-1), adicionadas ao meio de cultura MS, sob a amoreira-preta cultivar Ébano e; num segundo experimento testaram-se seis diferentes concentrações de ANA (0; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg L-1) e duas cultivares de amoreira-preta (Tupy e Brazos), no crescimento in vitro de plântulas. Segmentos nodais com 2 cm, de plântulas preestabelecidas in vitro, foram excisadas e inoculadas, em meio MS. O experimento foi inteiramente casualisado, utilizando-se três explantes por repetição e quatro repetições por tratamento. O pH do meio foi ajustado para 5,8 depois da adição de 6 g L-1 de ágar e 30 g L-1 de sacarose, ocorrendo depois a autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Após a inoculação, os tubos de ensaio foram mantidos por 60 dias, em sala de crescimento a 27 ± 1ºC, irradiância de 35 mmol.m-2.s-1 e fotoperíodo de 16 horas, avaliando-se assim o número de folhas, número de raízes, comprimento da maior raiz, comprimento da parte aérea, peso da matéria fresca e seca da parte aérea. Altas concentrações de GA3 associadas a baixas de ANA promoveram maior comprimento da parte aérea da amoreira-preta, cultivar Ébano. Maior comprimento da parte aérea de 'Brazos' foi verificado na presença de 1,0 mg L-1 de ANA. Verificou-se surgimento de calos na cultivar Ébano em todas as concentrações de GA3 associadas a 0,5-1,5 mg L-1 de ANA e nas cultivares Tupy e Brazos em todas as concentrações de ANA. Melhores resultados na micropropagação da amoreira-preta cultivares Tupy e Ébano foram obtidos com a adição de 1,0 mg L-1 de ANA e melhores resultados no enraizamento da amoreira-preta cultivar Ébano foram obtidos com baixas concentrações de ANA e na ausência de GA3.

This work was developed with the aim of improving technics of in vitro propagation of blackberry. So, one tested in an experiment the influence of five different ANA concentrations (0; 0,1; 0,5; 1,0 and 1,5 mg L-1) and five AG3 (0; 2,0; 4,0; 6,0 and 8,0 mg L-1), added to the culture medium MS, to the blackberry cv. Ebano and; in a second experiment was tested six different ANA concentrations (0; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 and 2,0 mg L-1) and two blackberry cv. (Tupy and Brazos), in vitro plants growing. Nodal segments with 2 cm, of in vitro plants, were excised and inoculated, in a MS culture medium. The experiment was entirely randomized blocks using three explants by repetition and four repetitions per treatment. The pH of the culture medium was adjusted for 5.8 after the addition of 6 g L-1 agar and 30 g L-1 sucrose, happening sterilization later at 121ºC and 1 atm per 20 minutes. After the inoculation, the tubes were maintained by 60 days, in growth room at 27 ± 1ºC, irradiance of 35 mol.m-2.s-1 and photoperiod of 16 hours, being evaluated the number of leaves, number of roots, length of the largest root, length of the aerial part, dry weight of the fresh and dry matter of the aerial part. High concentrations of AG3 associated to low concentrations of ANA promoted larger length of the aerial part of the blackberry cv. Ebano. Larger length of the aerial part of ' Brazos' was verified in the presence of 1.0 mg L-1 ANA. Appearance of callus was verified in blackberry cv. Ebano in all the AG3 concentrations associated to 0.5-1.5 mg L-1 ANA and in cv. Tupy and Brazos in all the ANA concentrations. Better results in the blackberry micropropagation cv. Tupy and Ebano were obtained with the addition of 1.0 mg L-1 ANA and better results in the blackberry rooting cv. Ebano were obtained with low ANA concentrations and AG3 absence.

Efeito de concentrações de glicina e inositol no cultivo in vitro de duas frutíferas de clima temperado / Effect of glycine and inositol concentrations on two in vitro cultivated temperate fruit trees

A fim de aprimorar técnicas de cultivo in vitro de duas frutíferas de clima temperado (amoreira-preta cv. Tupy e porta-enxerto de videira cv. Kobber 5BB), testaram-se diferentes concentrações de glicina e inositol, adicionadas ao meio de cultura. Para plântula de amoreira-preta, o meio foi constituído do meio básico MS, acrescido de 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar, e o pH ajustado para 5,8 antes da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos; e do meio básico DSD1 para porta-enxerto de videira cv. Kobber 5BB, acrescido de 20 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar, e o pH ajustado para 6,4. O experimento com amoreira-preta consistiu de 5 diferentes concentrações de glicina (0; 1,0; 2,0; 4,0 e 8,0 mg L-1), 5 de inositol (0; 50; 100; 200 e 400 mg L-1) e suas combinações. O experimento com videira consistiu de 4 diferentes concentrações de glicina (0; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1), 4 de inositol (0; 10; 20 e 40 mg L-1) e suas combinações. Segmentos nodais, oriundos de plântulas preestabelecidas in vitro foram excisados e introduzidos em tubos de ensaio contendo 15 mL dos meios de cultura. Posteriormente, os tubos de ensaio foram transferidos para sala de crescimento a 25 ± 2ºC, irradiância de 32 mmol m² s¹ e fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualisado, utilizando-se de doze plântulas por tratamento. Após 70 dias de cultivo in vitro, melhores resultados para a amoreira-preta cv. Tupy foram obtidos com concentração de glicina até a recomendada no meio de cultura MS (2,0 mg L-1) e 4 vezes o valor de inositol. Para o porta-enxerto de videira, melhores resultados foram obtidos na ausência e/ou com baixas concentrações de glicina e concentração de inositol igual ou superior à recomendada no meio de cultura DSD1.

Aiming to improve the in vitro cultivation techniques of two temperate fruit i.e. blackberry cv. Tupy and grapevine rootstock cv. Kobber 5BB, different glycine and inositol concentrations in the culture medium were tested. The culture medium was constituted of MS basal medium, added of 30 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar, and the pH adjusted to 5.8 before the sterilization of 121ºC and 1 atm for 20 minutes, and DSD1 basal medium for grapevine rootstock cv. Kobber 5BB, added of 20 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar, and the pH adjusted to 6.4. The work with blackberry consisted of 5 different concentrations of glycine (0; 1.0; 2.0; 4.0 and 8.0 mg L-1), 5 of inositol (0; 500; 100; 200 and 400 mg L-1) and its combinations. The work with grapevine composed of 4 different concentrations of glycine (0; 1.0; 2.0 and 4.0 mg L-1), 4 of inositol (0; 10; 20 and 40 mg L-1), and its combinations. Nodal segments from in vitro plants was excised and introduced into test tubes containing 15 mL of culture medium. After that, the culture tubes were transferred in a growth room to 25 ± 2ºC, irradiance of 32 mol m-2.s-1 and photoperiod of 16 hours. The experiments were settled in a completely randomized design, using twelve explants per treatment. After 70 days of in vitro cultivation, better results for the blackberry cv. Tupy were obtained with glycine concentration as recommended in the MS culture medium (2 mg L-1) and 4 fold of the inositol value. For the grapevine rootstock, better results were obtained in the absence and/or with low glycine concentrations and the same or higher inositol concentration as recommended in the DSD1 culture medium.

Prolongamento do período de colheita da tangerineira Ponkan com aplicação de GA3 e 2,4-D / Harvest season extent of tangerin 'Ponkan' fruits with the application of GA3 AND 2,4-D

Conduziu-se, este experimento em pomar comercial, dez anos após o plantio, localizado no município de São João Del Rei - MG, visando ampliar o período de colheita de frutos da tangerineira 'Ponkan' (Citrus reticulata Blanco). Foram avaliados os efeitos do ácido giberélico (GA3) à 0, 10, 20 e 30 mg.L-1 e do Ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) à 0 e 10 mg.L-1 aplicados em duas vezes: 24/4 e 17/5 quando os frutos apresentavam-se com coloração verde da casca e foram realizadas duas avaliações sendo a primeira no dia 25/7, quando já se aproximava a fase final de colheita da região, e a segunda 30 dias após. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, em esquema fatorial 4 x 2 x 2, com quatro repetições em parcelas subdivididas. Os resultados mostraram que o 2,4-D, à 10 mg.L-1 influenciou na textura dos frutos, propiciando o prolongamento da colheita de tangerina 'Ponkan'; ¹ aumentou a acidez dos frutos e reduziu a relação sólidos solúveis totais /acidez; que a utilização de 20 mg.L-1 de GA3 promoveu incremento no diâmetro e no peso dos frutos; que o maior rendimento foi obtido no mês de agosto e que não houve diferença no teor de sólidos solúveis nas diferentes épocas de colheita.

This experiment was carried out on a ten year-old commercial orchard in São João Del Rei county-MG in order to extend the harvest season of tangerine Ponkan (Citrus reticulate Blanco). One evaluated the effects of Giberelic Acid (GA3) at 0, 10, 20 and 30 mg.0L-1 and Diclorofenoxiacetic acid (2,4- D) at 0 and 10 mg.L-1 applied two times: on 4/24 and 5/17 when the fruits still had a green peel color the evaluations were made: the first one on 7/25, when the harvest time in the region was ending, and the second 30 days after. The experimental design adopted was the one of randomized blocks, with a factorial of 4 x 2 x 2, with four split-plot replicates. The results showed that 2,4-D at 10 mg.L-1 influenced fruits texture and extended the harvest and also increased fruit acidity and reduced the ratio; GA3 at 20mg.L-1 increased the diameter and weight of the fruits harvested in August and presented higher juice rate and there was no difference on total soluble sugar in solid solute tenor.

Cloreto de potássio e fosfato de sódio na multiplicação in vitro de amoreira-preta cv. Tupy / Effect of KCl and NaH2PO4.H2O on in vitro multiplication of blackberry cv. Tupy

A micropropagação da amoreira-preta pode gerar plantas livres de vírus e em curto espaço de tempo. Com o objetivo de aprimorar técnicas de micropropagação de amoreira-preta cv. Tupy (Rubus spp.), segmentos nodais com cerca 2 cm e 2 gemas axilares, oriundos de plantas pré estabelecidas in vitro, foram excisados e inoculados em meio de cultura MS, suplementado com diferentes concentrações de fosfato de sódio (0, 125, 250, 500 e 1000 mg L-1) e de cloreto de potássio (0, 125, 250, 500 e 1000 mg L-1). O pH foi ajustado para 5,8 antes da adição de 6 g L-1 de ágar e da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Após a inoculação, os explantes foram transferidos para sala de crescimento a 25 ± 1ºC, irradiância de 35 mmol m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas, onde permaneceram por 60 dias. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado, utilizando-se de quatro repetições constituídas de três tubos de ensaio contendo um explante cada. O número de brotos e o comprimento da parte aérea das plantas foi menor em função de maiores concentrações de cloreto de potássio. Melhores resultados foram obtidos na ausência de KCl e na presença de fosfato de sódio, principalmente para comprimento e matéria fresca da parte aérea.

The micropropagation of blackberry can generate virus-free plants in short time. In order to improve micropropagation techniques of blackberry cv. Tupy (Rubus spp.), nodal segments with 2 cm length and 2 axillary buds originating from plants in vitro were excised and inoculated in MS culture medium, supplemented with different concentrations of sodium phosphate (0, 125, 250, 500 and 1000 mg L-1) and potassium chloride (0, 125, 250, 500 and 1000 mg L-1). The pH was adjusted to 5.8 before the addition of 6 g L-1 agar and sterilization at 121ºC and 1 atm for 20 minutes. After the inoculation, the explants were transferred to growth room at 25 ± 1ºC, 35 mmol m-2 s-1 irradiance and photoperiod of 16 hours, where they stayed for 60 days. The experiment was arranged in a completely randomized design, using four repetitions with 12 plants each. Number of sprouts and length of the aerial part of plants were smaller, due to larger concentrations of potassium chloride. Better results were obtained in the absence of KCl, and in the presence of sodium phosphate, mainly for length and fresh weight of the aerial part.

Viabilidade do pólen de laranjas doces em diferentes condições de armazenamento / Viability of citrus pollen in different storage conditions

O presente trabalho foi realizado visando avaliar a viabilidade de grãos de pólen armazenados das cultivares copas cítricas Natal, Pêra e Valência. O pólen foi submetido a 3 temperaturas de armazenamento: -10°C (freezer), 4°C ( refrigerador) e temperatura ambiente; 2 ambientes (com e sem dessecador) e na presença e ausência de sílica-gel. A avaliação do índice de germinação foi feita com o pólen fresco e a cada 7 dias, durante 9 semanas. Para avaliar a germinação foi utilizado meio constituído de 1 por cento de ágar e 10 por cento de sacarose, 800 mg L-1 de nitrato de cálcio (Ca(NO3)2 4H2O), 200 mg L-1 de Acido Bórico (H3BO3) e pH corrigido para 6,5. Os grãos de pólen foram incubados à temperatura de 25 ± 2°C por 12 horas. As avaliações foram realizadas através da porcentagem de grãos de pólen germinados. Constatou-se que os grãos de pólen possuem redução na viabilidade com o aumento do tempo de armazenamento; o armazenamento em freezer (-10°C) foi mais eficiente do que em refrigerador (4°C) e à temperatura ambiente. Melhores resultados foram alcançados com os tratamentos em freezer com sílica-gel dentro de dessecador e em freezer sem sílica-gel dentro de dessecador. A cultivar Valência apresentou-se superior às demais em todos os tratamentos.

The present work was accomplished to evaluate the effects of storage on the viability of pollen grains from Natal, Pêra and Valência cultivars of sweet oranges. The grains were stored at 3 temperatures: -10°C (freezer), 4°C (refrigerator), and room temperature; 2 environments (with or without desiccator) and in the presence or absence of silica-gel. The germination was evaluated every 7 days, during 9 weeks. To evaluate the germination, a medium consisting of 1 percent and sucrose 10 percent, 800 mg L-1 calcium nitrate (Ca(NO3)2 4H2O), 200 mg L-1 boric acid (H3BO3) and pH 6,5 was used. The pollen was incubated at 25 ± 2°C temperature for 12 hours. The evaluation was performed using the percentage of pollen grains germinated. It was observed that pollen grains viability diminished as the storage time increased; the storage in freezer temperature (-10°C) was much more efficient than in refrigerator (4°C) and in room temperature. The best results were reached when freezer and desiccator were used. Valência cultivar was superior when compared whit the others, in all treatments.