Separación de aminas biogénicas mediante cromatografía líquida de alta resolución / High-performance liquid chromatographic determination of biogenic amines

En este trabajo se han compilado los distintos modos cromatográficos y sistemas de detección utilizados en la cromatografía líquida de alta resolución de aminas biogénicas. Se indican las características generales del intercambio catiónico, fase reversa, fase reversa de pares iónicos y cromatografía de partición con fase reversa de pares iónicos. También se analizan comparativamente la detección UV, detección fluorimétrica usando fluorescencia nativa o bien derivatización pre- y postcolumna y detección electroquímica de gran utilidad para esta extensa familia de compuestos. Se dan ejemplos de aplicación de interés en el campo bioquímico-clínico, con el análisis de ácido homovainillínico, ácido 3,4-dihidroxifenilacético y ácido 5-hidroxiindolacético en líquido cefalorraquídeo, metanefrinas, ácido 3,4-dihidroxifenilacético, catecolaminas, ácidos urinarios y 3-metoxi-4-hidroxifenilglicol en orina, catecolaminas y 3-metoxi-4-hidroxifenilglicol en plasma, catecolaminas, 3-metoxi-4-hidroxifenilglicol y otros neurotransmisores en cerebro de rata. Se discuten, también, los tratamientos previos requeridos especialmente para orina y plasma, así como las condiciones de conservación y su incidencia en los resultados obtenidos

Método rápido y sensible para detectar aminas primarias y secundarias no fenólicas en orina humana / A fast and sensitive method to detect primary and secondary non-phenolic amines in human urine

En este trabajo se desarrolló una metodología cromatográfica rápida y precisa para buscar aminas primarias y secundarias O-metiladas, típicas de ciertos desórdenes mentales, en muestras de orina humanas de 24 horas. La extracción de la orina fue llevada a cabo bajo condiciones alcalinas para evitar la interferencia de catecolaminas y ácidos urinarios. Después de la extracción alcalina, a cada muestra se la hizo reaccionar con cloruro de dansilo en acetonitrilo en presencia de bicarbonato de sodio en exceso, para formar las correspondientes dansilamidas. Las fenetilamidas y las indolalquilaminas O-metiladas fueron visualizadas en placas de fase reversa de alta resolución (HP-TLC), por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y por cromatografía gas-líquido (CGL) y, además, fueron identificadas por cromatografía gas-líquido acoplada con espectrometría de masas (CGL-EM). Este método es lo suficientemente sensible para estos metabolitos en muestras de orina y, por lo tanto, resulta útil para investigaciones biomédicas y clínicas de aminas primarias y secundarias no fenólicas en orina

Separación de aminoácidos mediante cromatografía líquida de alta resolución / Amino acid analysis by high-performance liquid chromatography

Se presenta una compilación de la aplicación de la cromatografía líquida de alta resolución en el análisis de aminoácidos. Se analizan las formas de derivatización, se comparan los distintos derivados según sus alcances y limitaciones, la forma de detección y los distintos modos cromatográficos: cromatografía de intercambio iónico, cromatografía en fase normal, cromatografía en fase reversa y cromatografía en fase quiral. También se presentan los métodos automatizados comerciales más recientes para este tipo de análisis. Se dan ejemplos de aplicación de interés en el campo clínico-bioquímico, con el análisis de muestras de líquido cafalorraquídeo, de orina y de plasma/sangre o manchas de sangre seca. El análisis de los aminoácidos de hidrolizados de proteínas y de péptidos resulta más complejo y las condiciones de hidrólisis juegan un rol muy importante en los resultados, que son tratados en esta compilación. Se incluyen, además, aspectos referidos al análisis de los aminoácidos lábiles en proteínas, la preparación de las muestras, las recomendaciones prácticas al hacer HPLC y la influencia de los buffers