RESUMO
Cell surface adhesion is considered an essential step in the spread, infection and persistence of Candida yeasts in the host. Their ability to adhere on biotic and abiotic surfaces depends on several factors, including hydrophobicity. Once attached, these yeasts are capable of growing in biofilms, which are constituted of structured communities of encapsulated cells within an extracellular matrix, resistant to antifungal agents. In this context, this study aimed to analyze the cell surface hydrophobicity and specific biofilm formation of six Candida strains in different culture media: Sabouraud dextrose broth (SDB), artificial saliva (AS), Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI 1640) and N-acetylglucosamine-yeast nitrogen base proline (NYP). Six yeasts of the genus Candida were studied: three C. albicans (Ca): Ca ATCC 10231 and the clinical isolates Ca34 and Ca05 and C. parapsilosis (Cp): Cp ATCC 22019 and the clinical isolates Cp120 and Cp38. Hydrophobicity was calculated as the percentage reduction in turbidity of the aqueous phase, due to the retention of the hydrophobic cells in hydrocarbon by the hydrocarbon-water biphasic assay following the MATH (Microbial Adhesion to Hydrocarbon) method. The biofilm formation index was calculated as the optical density obtained by the growth of the yeasts in the culture media in a polystyrene microtiter plate, subsequently stained with 1% violet crystal. The results showed that hydrophobicity varied according to the media and the yeasts studied, and two of these (Ca34 and Ca10231) presented significant variation between the media. A more hydrophobic character was observed in yeasts grown on RPMI-1640 medium, and those grown on Sabouraud dextrose broth appeared more hydrophilic. The specific biofilm formation index was more intense for RPMI 1640 than in other media, which was expected, due to its ability to induce the transition between yeast-hyphae morphology, which is one of the key factors involved in the adhesion of C. albicans on different surfaces. RPMI 1640 was the best medium for obtaining biofilm in vitro, due to its greater hydrophobicity, which can enhance cell adhesion to the polystyrene plate, and due to its nutrient content, necessary for complete cell growth and biofilm formation.
A adesão é considerada um passo essencial para a disseminação, infecção e persistência das leveduras do gênero Candida nos hospedeiros. A habilidade dessas leveduras em se aderir a superfícies bióticas e abióticas depende de fatores, incluindo a hidrofobicidade da superfície celular. Uma vez aderidas, estas leveduras são capazes de crescer como biofilmes, os quais são caracterizados como comunidades estruturadas de células encapsuladas dentro de uma matriz extracelular, resistentes a drogas antifúngicas. Neste contexto, objetivou-se analisar a hidrofobicidade da superfície celular e a formação específica de biofilme de Candida spp. em diferentes meios de cultura: caldo Sabouraud dextrose (CSD), saliva artificial (SA), Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI 1640) e N-acetylglucosamineyeast nitrogen base-proline (NYP). Foram estudadas seis leveduras do gênero Candida, sendo três C. albicans (Ca): Ca ATCC 10231 e os isolados clínicos Ca34 e Ca05 e C. parapsilosis (Cp): Cp ATCC 22019 e os isolados clínicos Cp120 e Cp38. A hidrofobicidade foi calculada como a porcentagem da redução da turbidez da fase aquosa, devido a retenção das células hidrofóbicas no hidrocarboneto pelo método bifásico água-hidrocarboneto MATH (Teste de Adesão Microbiana a Hidrocarbonetos). O índice de formação de biofilme foi calculado com as densidades ópticas obtidas por meio do crescimento das leveduras nos meios de cultura em poços de placa de microtitulação de poliestireno e posteriormente corados com cristal violeta a 1%. Os resultados demonstraram que a hidrofobicidade variou de acordo com os meios e as leveduras estudadas, sendo que duas (Ca34 e Ca10231) apresentaram variação significativa entre os meios. Foi verificado um caráter mais hidrofóbico das células crescidas em RPMI 1640 e mais hidrofílico nas células crescidas em caldo Sabouraud dextrose. A formação específica de biofilme apresentou-se mais intensa em RPMI 1640 do que nos outros meios, o que já era esperado pela sua capacidade de induzir o processo de transição levedura-hifa, o qual é considerado um dos fatores cruciais envolvidos na adesão de leveduras. Com os resultados obtidos, infere-se que o RPMI 1640 é o melhor meio para obtenção de biofilme in vitro, pois as células foram mais hidrofóbicas, o que pode aumentar a adesão das