Avaliação da perda óssea periodontal em ratos por meio dos métodos radiográfico e morfométrico / Evaluation of periodontal bone loss in rats for radiographic and morphometric methods

O presente estudo se propôs a avaliar morfometricamete (região da ligadura ou hemiarco) e radiograficamente (suporte ósseo periodontal) a perda óssea na periodontite experimental em ratos. Ligaduras de algodão foram posicionadas em torno do segundo molar maxilar e primeiro molar mandibular direitos em 14 ratas fêmeas (Wistar). Os molares contralaterais serviram como controle intragrupo. Após quatro semanas os ratos foram sacrificados e suas mandíbulas e maxilas foram removidas. Os espécimes foram radiografados e posteriormente dissecados, corados e fotografados. As alterações do suporte ósseo periodontal (SOP) foram avaliadas nas radiografias do 1° molar mandibular, 1° e 2° molares maxilares. Nas imagens a reabsorção óssea foi avaliada pelas alterações das medidas da distância da junção esmalte-cemento até a crista óssea alveolar nas raízes do dente, considerando hemiarco ou apenas a região da ligadura, por face livre. Verificou-se que não ocorreram diferenças estatísticas entre as alterações de SOP nos diferentes dentes. A reabsorção óssea foi significativamente maior na vestibular da maxila considerando tanto a região da ligadura em relação ao hemiarco quanto em relação às demais localizações (palatina da maxila e lingual da mandíbula). Conclui-se que o SOP expressa o percentual de alteração óssea independente do dente avaliado e que a análise morfométrica deve ser na região envolvida com a ligadura e não no hemiarco, sendo a vestibular da maxila a região onde se verificou a maior perda óssea em periodontite induzida em ratos

The present study aimed to morphometrically (region of ligature or hemiarco) and radiographically (periodontal bone support) the bone loss in experimental periodontitis in rats. Ligatures of cotton were positioned around the right second upper molar and around the first mandibular molar rights in 14 female Wistar rats. The contralateral molars served as intragroup controls. After four weeks, the rats were sacrificed and their mandible and maxilla were removed. The specimens were radiographiced and after dissected and stained with methylene blue dye. The periodontal bone support (PBS) was assessment in radiograph of 1° mandibular molar, 1° and 2° maxillary molars. The bone loss was evaluated by the distance from the cemento enamel junction to the alveolar bone crest inthe roots of teeth associating with ligature and by hemiarco for free side. The different tooth showed no significant differences among the alteration of the percentages of PBS. The results indicated that the maxilla by buccal presented greater bone loss on region of roots associated with the ligature than hemiarco and than among others localizations (palatal of maxilla and lingual of mandible). The present study concluded that the alteration of PDS was independent of teeth evaluated and the morphometric methodology may be used on ligature regions and that the maxilla for buccal side showed more elevated bone loss in periodontitis in rats.

Evaluation of two morphometric methods of bone loss percentages caused by periodontitis in rats in different locations

ABSTRACT OBJECTIVE: The present study evaluated morphometrically bone loss percentages in experimental periodontitis in rats, comparing different locations (lingual mandible, palatal maxilla and buccal maxilla) and two evaluation methods (distance and area methods). MATERIAL AND METHODS: Ligatures were placed around the maxillary right second molar and around the mandibular right first molar in 14 female Wistar rats. The contralateral molars served as intragroup controls. After 4 weeks, the rats were sacrificed and their mandible and maxilla were removed. The specimens were dissected and stained with methylene blue dye. Bone loss was evaluated by two different methods on the surfaces of the defleshed jaw. In the first method, the distance from the cementoenamel junction (CEJ) to the alveolar bone crest was measured in the roots of teeth associated with ligature. In the second method, the area of bone loss was determined using the alveolar tissue bone, CEJ and the proximal region of roots associated with the ligature as reference. The data were converted to bone loss percentages caused by ligature: (ligated - unligated) x 100/ligated. RESULTS: When comparing the distance and area methods, no statistically significant difference was observed (p>0.05). Both methodologies indicated that the maxilla presented greater bone loss than the mandible and it was more accentuated on the buccal side than on the palatal side (p<0.05). CONCLUSIONS: The findings of this study show that both the area and the distance methods can be used to evaluate bone loss caused by ligature placement in rats, and suggest applying the morphometric methodology to the maxilla on the buccal side.

Influência do alendronato sódico durante a indução de periodontite em ratas com presença ou ausência de hormônios ovarianos / The influence of sodium alendronate during periodontitis induction in female rats in presence or absence of ovarian hormones

Bisfosfonatos são medicamentos que inibem a reabsorção óssea e são utilizados para o tratamento da osteoporose, interferindo na ação dos osteoclastos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do alendronato sódico durante a indução de periodontite em ratas com presença ou ausência de hormônios ovarianos. Foram utilizados 40 animais, com três meses, sendo que na metade deles foi realizada ovariectomia, e o restante foi falso-operado (sham). Aos quatro meses, as ratas sofreram indução de periodontite, através da inserção de fio de algodão ao redor dos segundos molares superiores. A partir de então, os grupos foram subdivididos em: tratado, que recebeu via oral 2 mg/kg/dia de alendronato, e controle, que recebeu o mesmo volume de água filtrada, diariamente. Após cinco semanas de tratamento, os animais foram sacrificados, e as maxilas esquerdas radiografadas. Após as medidas radiográficas das distâncias entre o ápice da raiz e a ponta da cúspide; entre o ápice da raiz e o fundo do defeito e do ângulo entre esses dois segmentos, foi calculada a porcentagem de suporte ósseo da raiz distal do segundo molar. As medidas foram tomadas três vezes e as médias, submetidas à ANOVA, (p< 5%). Não houve diferença significante entre os valores de suporte ósseo dos grupos, porém os animais que receberam alendronato tiveram valores numericamente maiores que aqueles que receberam placebo. Não houve diferença entre os animais ovariectomizados ou não. Concluiu-se que o alendronato não inibiu significantemente a perda óssea alveolar induzida nos animais, com presença ou ausência de hormônios ovarianos.

The influence of ovariectomy, simvastatin and sodium alendronate on alveolar bone in rats

Bisphosphonates are currently used in the treatment of many diseases involving increased bone resorption such as osteoporosis. Statins have been widely used for the treatment of hypercholesterolemia and recent studies have shown that these drugs are also capable of stimulating bone formation. The purpose of this study was to evaluate the influence of an estrogen deficient state and the effects of simvastatin and sodium alendronate therapies on alveolar bone in female rats. Fifty-four rats were either ovariectomized (OVX) or sham operated. A month later, the animals began to receive a daily dose of simvastatin (SIN - 25 mg/kg), sodium alendronate (ALN - 2 mg/kg) or water (control) orally. Thirty-five days after the beginning of the treatment, the rats were sacrificed and their left hemimandibles were removed and radiographed using digital X-ray equipment. The alveolar radiographic density under the first molar was determined with gray-level scaling and the values were submitted to analysis of variance (a = 5 percent). Ovariectomized rats gained more weight (mean ± standard deviation: 20.06 ± 6.68 percent) than did the sham operated animals (12.13 ± 5.63 percent). Alveolar radiographic density values, expressed as gray levels, were lowest in the OVX-water group (183.49 ± 6.47), and differed significantly from those observed for the groups receiving alendronate (sham-ALN: 193.85 ± 3.81; OVX-ALN: 196.06 ± 5.11) and from those of the sham-water group (193.66 ± 4.36). Other comparisons between groups did not show significant differences. It was concluded that the ovariectomy reduced alveolar bone density and that alendronate was efficient for the treatment of this condition.

Os bisfosfonatos são empregados atualmente para o tratamento de várias doenças caracterizadas pelo aumento da reabsorção óssea, como a osteoporose. As estatinas são amplamente utilizadas para redução de níveis elevados de colesterol e estudos recentes têm revelado sua ação anabólica no osso. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da deficiência estrogênica e dos tratamentos com sinvastatina ou alendronato sódico no osso alveolar em ratas. Cinqüenta e quatro ratas sofreram ovariectomia (OVX) ou cirurgia simulada ("sham"). Um mês após, os animais passaram a receber diariamente, via oral, 25 mg/kg de sinvastatina (SIN), 2 mg/kg de alendronato (ALN) ou água (controle). Trinta e cinco dias depois do início do tratamento os animais foram sacrificados, as hemimandíbulas esquerdas removidas e radiografadas em aparelho de raios X digital. Foi calculada a densidade radiográfica em tons de cinza da área de osso alveolar sob o primeiro molar mandibular e os valores foram submetidos a ANOVA, ao nível de 5 por cento. Ratas ovariectomizadas ganharam mais peso (média ± desvio-padrão: 20,06 ± 6,68 por cento) que as demais (12,13 ± 5,63 por cento). Os valores de densidade radiográfica, em tons de cinza, foram menores nos animais do grupo OVX-água (183,49 ± 6,47), significantemente diferentes daqueles observados nos grupos que receberam alendronato ("sham"-ALN: 193,85 ± 3,81; OVX-ALN: 196,06 ± 5,11) e no grupo "sham"-água (193,66 ± 4,36). Outras comparações entre grupos não revelaram diferenças estatísticas. Concluiu-se que a ovariectomia reduziu a densidade óssea alveolar e que o tratamento com alendronato sódico foi eficiente para o tratamento desta situação.

The effect of alcohol consumption on periodontal bone support in experimental periodontitis in rats

OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of the alcohol consumption on the periodontal bone support (PBS) in experimental periodontitis in rats. MATERIALS AND METHODS: Sixty-three male rats were divided into seven groups: G1 (control); G2 (10 percent ethanol); G3 (nutritional control of G2); G4 (20 percent ethanol); G5 (nutritional control of G4); G6 (30 percent ethanol) and G7 (nutritional control of G6). The groups G3, G5 and G7 received controlled diets with equivalent caloric amounts to those consumed in G2, G4 and G6 respectively, with the ethanol replaced by sucrose. After anesthesia, ligatures were installed around the mandibular first molar, leaving the contralateral teeth unligated. After 8 weeks, the rats were killed and their mandibles were radiographed to measure the percentage of PBS on the distal aspect. RESULTS: The intragroup analyses showed that presence of ligatures induced periodontitis (p<0.05). Unligated groups did not show significant differences among the percentages of PBS (p=0.1969). However, in ligated groups the rats that received alcohol (G2:48.71 percent±3.88; G4:47.66 percent±2.54; G6:47.32 percent±3.24) and the nutritional control group associated with a high concentration of ethanol (G7:47.40 percent±3.24) presented a significantly lower percentage of PBS than the other groups (G1:52.40 percent±2.75; G3:52.83 percent±2.41; G5:50.85 percent±4.14). CONCLUSIONS: These results demonstrated that alcohol consumption in rats may result in a direct effect on alveolar bone loss and increased development of periodontitis. In addition, they suggest that heavy caloric consumption of ethanol may also present an indirect effect on periodontal tissue as a consequence of malnutrition.

OBJETIVO: O propósito deste estudo foi avaliar o efeito do consumo de álcool sobre o suporte ósseo periodontal (SOP) em periodontite induzida por ligaduras em ratos. MATERIAIS E MÉTODOS: Sessenta e três ratos machos foram divididos em sete grupos: G1 (controle); G2 (álcool a 10 por cento); G3 (controle nutricional de G2); G4 (álcool a 20 por cento); G5 (controle nutricional de G4); G6 (álcool a 30 por cento); G7 (controle nutricional de G6). Os grupos G3, G5 e G7 receberam dietas controladas com a mesma quantidade de calorias consumidas por G2, G4 e G6, respectivamente, com o etanol substituído por sacarose. Após anestesia foram instaladas ligaduras no primeiro molar inferior direito, permanecendo o dente contralateral sem ligadura. Após oito semanas, os ratos foram sacrificados e as mandíbulas radiografadas para medição do SOP na proximal distal. RESULTADOS: A análise intragrupo mostrou que a presença da ligadura foi capaz de induzir periodontite (p<0,05). Os grupos sem ligadura não demonstraram diferenças significativas (p=0,1969) no SOP. Contudo, nos grupos com ligadura os ratos que receberam álcool (G2:48,71 por cento±3,88; G4:47,66 por cento±2,54; G6:47,32 por cento±3,24) e o controle nutricional associado a alta concentração de etanol (G7:47,40 por cento±3,24) apresentaram percentual de SOP estatisticamente inferior aos outros grupos (G1:52,40 por cento±2,75; G3:52,83 por cento±2,41; G5:50,85 por cento±4,14). CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que o consumo de álcool em ratos pode resultar em efeito direto na perda óssea alveolar, aumentando o desenvolvimento da periodontite. Além disso, sugere-se que o consumo calórico pesado de etanol também pode apresentar efeito indireto nos tecidos periodontais, como conseqüência da má nutrição.

Defeitos ósseos em tíbias de ratos: padronização do modelo experimental / Bone defect in rat tibia: standardization of experimental model

Introdução: Dada a semelhança do reparo ósseo em tíbia com o reparo mandibular e a relativa simplicidade do modelo experimental no qual se realizam defeitos ósseos em tíbias de ratos, este trabalho foi proposto com o objetivo de determinar o tamanho de defeito exeqüível na tíbia para adequada utilização em estudos de regeneração óssea, padronizando assim o modelo. Métodos: Defeitos monocorticais de 2, 3 ou 3,5mm de diâmetro foram confeccionados nas tíbias de 54 ratos adultos. Após o sacrifício, que ocorreu depois de períodos de observação de 15, 30 ou 45 dias, as tíbias foram fixadas, descalcificadas e preparadas como de rotina. A porcentagem de área óssea no centro do defeito foi avaliada através de planimetria por contagem de pontos e, para avaliação estatística, utilizou-se ANOVA (α=5%). Resultados: Verificou-se fechamento linear do defeito ósseo em todos os grupos. Comparando-se os tamanhos de defeitos em cada período, não foi encontrada diferença estatística com relação à porcentagem de área óssea. Conclusão: Como não houve fechamento da área total, pode-se utilizar, com ressalvas, o modelo experimental de defeito em tíbias de ratos para estudo de regeneração óssea. Dadas as semelhanças com relação ao reparo dos defeitos, a escolha do melhor tamanho relaciona-se a questões de ordem prática, sendo o tamanho intermediário e os menores períodos o modelo recomendado.

Introduction: Due to the similarity of the bone tissue healing process in tibia with mandibular repair and the relative simplicity of the experimental model where bone tissue defects in rat tibiae are made, the aim of the present study was to determine the feasible tibia defect size for an adequate application in bone tissue healing process studies, standardizing thus this model. Methods: Monocortical defects of 2, 3 ou 3.5 mm of diameter were made in fifty-four adult rats tibiae. Following the rats sacrifice, which occurred after 15, 30 or 45 days of observation, the tibiae were fixed, decalcified and prepared according to the laboratorial processing routine. The bone area percentage at the center of the defect was evaluated through the point counting planimetry, and the ANOVA statistical test (α=5%) was used. Results: The bone defect linear closure was verified in all the groups. No statistical significant difference regarding the bone area percentage values was found comparing the defects sizes in each period. Conclusion: Since the total area closure was not observed, the rat tibia defect experimental model for the bone tissue healing process study may be applied in further studies with reservation. Because of the similarities regarding the defects healing process, the choice of the best size is related to practical questions, being the intermediate size and the shorter periods the recommended model.