RESUMO
Introducción Las células madre son motivo de intensa investigación debido a la posibilidad de su utilización en el tratamiento de numerosas enfermedades, en particular las cardiovasculares. La diferenciación de células madre embrionarias humanas en cardiomiocitos se ha realizado exitosamente in vitro. Se han establecido métodos de cultivo y diferenciación, señales involucradas en la cardiogénesis y los cardiomiocitos generados se han utilizado en modelos de regeneración miocárdica. Sin embargo, aún quedan muchos interrogantes que se están investigando activamente. Objetivo Desarrollar una metodología que permita el cultivo de células embrionarias y su diferenciación en cardiomiocitos. Material y métodos Se utilizaron cuatro líneas de células madre embrionarias humanas. Se cultivaron y diferenciaron a través de los métodos publicados previamente en la bibliografía. El estado indiferenciado y la diferenciación en cardiomiocitos se verificaron por medio de inmunomarcación fluorescente y RT-PCR. Resultados La metodología utilizada permitió cultivar las células y mantenerlas en estado indiferenciado. Aunque con eficacia dispar, se logró la diferenciación en cardiomiocitos de las cuatro líneas celulares utilizadas. La confirmación se realizó por medio de la expresión de factores de transcripción miocárdicos y proteínas estructurales cardíacas. Conclusiones El cultivo y la diferenciación de células madre embrionarias humanas fue posible en nuestro sistema. Estos resultados preliminares nos impulsan a continuar y a desarrollar nuestros métodos con células pluripotentes inducidas.
Background The role of stem cells in the treatment of several conditions, especially heart diseases, is under permanent investigation. Human embryonic stem cells have been successfully differentiated in vitro into cardiomyocytes. Methods of cell culture and cardiomyocyte differentiation are well established; signals regulating cardiogenesis have been identified and the cardiomyocytes generated have been used in models of myocardial regeneration. However, several questions still remain and are currently under active investigation. Objective To develop a culture system that is suitable for the induction of embryonic stem cells to cardiomyocyte differentiation. Material and Methods Four human embryonic stem cell lines were used. The cells were cultured and differentiation was induced using methods previously described. The presence of cells in an undifferentiated state and cardiomyocyte differentiation was detected by immunohistochemical studies (fluorescent staining) and RT-PCR. Results The methodology used allowed stem cells growth in the culture, and maintained them in an undifferentiated state. Cardiomyocyte differentiation was achieved in the four cell lines used, yet with uneven efficacy. This was confirmed by the expression of myocardial transcription factors and heart structural proteins. Conclusions Our system allowed human embryonic stem cell growth and differentiation in the culture. These preliminary results encourage us to continue developing our methods with induced pluripotent stem cells.
RESUMO
El presente trabajo de investigacion de tipo descriptivo, de corte longitudinal y retrospectivo, tuvo comno objetivo primordial detectar alteraciones de incumbencia fonoaudiologica relacionadas con el lenguaje expresivo, lenguaje comprensivo, audicion y las alteraciones que pueden traer posibles dificultades en el proceso de adquisicion de la lectoescritura. Se trata de un trabajo llevado a cabo en la escuela privada, Nuestra Señora del Calvario, de la ciudad de Galvez (provincia de Santa Fe), en la seccion "A" turno mañana, jardin de cinco. Para obtener estos datos fue necesario recolectar las fichas de entrevista inicial y de seguimiento individual, de cada niño/a y seleccionar los indicadoes que brindaban informacion sobre las area involucradas. Entre los 22 niños estudiados, que asistieron a jardin entre 1998 y el año 2000, los resultados a los que se arribo fueron: 7 ninos (31,8 por ciento) presentaron alteraciones fonoaudiologicas; de audicion, de lenguaje expresivo, de lenguaje cmprensivo y/o en el proceso de adquisicion de lectoescritura solas o combinadas. Algunos de ellos (4) contaban con antecedentes de riesgo prenatal, natal o postnatal. A lo largo de este trabajo se intento demostrar la importancia que tienen los datos aportados por los padres, los resultados y observaciones obtenidos por los docentes, en el analisis que podra hacer el fonoaudiologo para descartar alteraciones fonoaudiologica que interfieran el desarrollo pedagogico, ya que con solo revisar las fichas de los ninos el profesional podra visualizar si existen problemas. En caso de que los hubiere, de que tipo, permitiendo facilitar con rapidez la derivacion y consulta al profesional adecuado y el posterior tratamiento y recuperacion