Blood-cerebrospinal fluid (CSF) barrier dysfunction means reduced CSF flow not barrier leakage - conclusions from CSF protein data / Disfunção da barreira hemato-liquórica significa redução do fluxo de líquido cefalorraquidiano, e não quebra de barreira - conclusões a partir de estudos sobre as proteínas do LCR

ABSTRACT Background: Increased concentrations of serum proteins in cerebrospinal fluid (CSF) are interpreted as blood-CSF barrier dysfunction. Frequently used interpretations such as barrier leakage, disruption or breakdown contradict CSF protein data, which suggest a reduced CSF flow rate as the cause. Results: Even the severest barrier dysfunctions do not change the molecular size-dependent selectivity or the interindividual variation of the protein transfer across barriers. Serum protein concentrations in lumbar CSF increase with hyperbolic functions, but the levels of proteins that do not pass the barrier remain constant (brain proteins) or increase linearly (leptomeningal proteins). All CSF protein dynamics above and below a lumbar blockade can also be explained, independent of their barrier passage, by a reduced caudally directed flow. Local accumulation of gadolinium in multiple sclerosis (MS) is now understood as due to reduced bulk flow elimination by interstitial fluid (ISF). Nonlinear change of the steady state in barrier dysfunction and along normal rostro-caudal gradients supports the diffusion/flow model and contradicts obstructions of diffusion pathways. Regardless of the cause of the disease, pathophysiological flow blockages are found in bacterial meningitis, leukemia, meningeal carcinomatosis, Guillain-Barré syndrome, MS and experimental allergic encephalomyelitis. In humans, the fortyfold higher albumin concentrations in early fetal development decrease later with maturation of the arachnoid villi, i.e., with beginning CSF outflow, which contradicts a relevant outflow to the lymphatic system. Respiration- and heartbeat-dependent oscillations do not disturb net direction of CSF flow. Conclusion: Blood-CSF and blood-brain barrier dysfunctions are an expression of reduced CSF or ISF flow rate.

RESUMO Introdução: Concentrações aumentadas de proteínas séricas no líquido cefalorraquidiano são interpretadas como disfunção da barreira (hemato-liquórica) sanguínea do LCR. Interpretações frequentemente usadas, como vazamento de barreira (quebra ou rompimento de barreira), rompimento ou quebra, contradiz os dados de proteína do LCR, que sugerem uma taxa de fluxo reduzida do LCR como a causa. Resultados: Mesmo as disfunções de barreira mais graves não alteram a seletividade dependente do tamanho molecular nem a variação interindividual da transferência de proteína através de barreiras. As concentrações de proteínas séricas no LCR lombar aumentam com as funções hiperbólicas, mas as proteínas que não passam a barreira permanecem constantes (proteínas do cérebro) ou aumentam linearmente (proteínas leptomeningeais). Toda a dinâmica das proteínas do LCR acima e abaixo de um bloqueio lombar também pode ser explicada, independente de sua passagem pela barreira, por um fluxo caudal reduzido. O acúmulo local de gadolínio na esclerose múltipla (EM) é agora entendido como decorrente da redução da eliminação do bulk flow pelo fluido intersticial (FIS). A mudança não linear do estado estacionário na disfunção da barreira e ao longo dos gradientes rostro-caudais normais apoia o modelo de difusão/fluxo e contradiz as obstruções das vias de difusão. Independentemente da causa da doença, os bloqueios fisiopatológicos do fluxo são encontrados na meningite bacteriana, leucemia, carcinomatose meníngea, síndrome de Guillain-Barré, EM e encefalomielite alérgica experimental. Em humanos, as concentrações de albumina quarenta vezes mais altas no desenvolvimento fetal inicial diminuem tarde com a maturação das vilosidades aracnoides, isto é, com o início do fluxo de LCR, o que contradiz um fluxo relevante para o sistema linfático. As oscilações dependentes da respiração e do batimento cardíaco não perturbam a direção do fluxo do LCR. Conclusão: As disfunções das barreiras hemato-liquórica e hemato-encefálica são uma expressão da redução da taxa de fluxo do LCR ou FIS.

Software for cerebrospinal fluid diagnostics and statistics / Software para el diagnóstico y estadísticas del líquido cefalorraquídeo

Background: In CSF analysis for diagnostics we have knowledge-based software for numerical and graphical data interpretation, but software programs for statistics are scarce. Free, stand-alone software programs that calculate all individual functions of CSF protein analysis and allow the statistical treatment of groups of diseases numerically and graphically are presented for relevant examples. Methods: Diagnosis of an intrathecal synthesis refers to the upper limit of the reference range, Qlim = Qmean +3SD, but statistical evaluation of its frequency is referred to Qmean+2SD. When quantifying intrathecal synthesis for statistics, either the absolute amount (IgGloc) or the relative intrathecal fraction (IgGIF) can be reported with reference to the mean reference curve, Qmean. The free software CSF research Tool for immunoglobulins allows diagnostic and statistic evaluations with Reibergrams and calculation of mean values and standard deviations from disease groups. The software FLC-K statistics for free light chains Kappa offers for diagnostics and statistics the numerical and graphical interpretation basis for statistical processing in exported Excel tables. A free "CSF-App" for Smartphones provides data calculation for diagnostics of single patients with examples of disease-related data patterns. Results: Patients with clinically isolated syndrome (CIS) who were later diagnosed as MS showed no immunological differences to patients initially diagnosed as MS (same mean quantity of intrathecal synthesis in CIS and MS detectable for IgG and FLC-K). The frequently claimed diagnostically higher sensitivity of the FLCK analysis compared to IgG, can be explained by the up to 3-fold higher mean intrathecal fraction of FLC-K, corresponding to a higher frequency in the detection of intrathecal synthesis with FLCK analysis. Conclusions: With a knowledge-based quantification in CSF analysis, supported by knowledge-based software programs, scientifically and diagnostically important results can be obtained(AU)

Introducción: Los programas de software gratuitos y autónomos que calculan todas las funciones individuales del análisis de proteínas del líquido cefalorraquídeo (LCR) y permiten el tratamiento estadístico de grupos de enfermedades de forma numérica y gráfica se presentan como ejemplos relevantes. Métodos: Cuando se cuantifica la síntesis intratecal para la estadística, se puede informar la cantidad absoluta (IgGloc) o la fracción intratecal relativa (IgGIF) con referencia a la curva de referencia media, Qmean. El software gratuito "CSF research Tool" para inmunoglobulinas permite realizar evaluaciones diagnósticas y estadísticas con Reibergrams y calcular los valores medios y las desviaciones estándar de los grupos de enfermedades. El software FLC-K statistics para Free light chains Kappa ofrece para el diagnóstico y la estadística la base de interpretación numérica y gráfica para el procesamiento estadístico en tablas exportadas de Excel. El programa CSF-App para teléfonos inteligentes es gratuito y ofrece el cálculo de datos para el diagnóstico de pacientes individuales con ejemplos de patrones de datos relacionados con enfermedades. Resultados: Los pacientes con síndrome clínico aislado (SCA) que posteriormente fueron diagnosticados como EM no mostraron diferencias inmunológicas con respecto a los pacientes inicialmente diagnosticados como EM (la misma cantidad media de síntesis intratecal en el síndrome clínico aislado y EM detectable para IgG y FLC-K). La sensibilidad más elevada que se afirma con frecuencia en el diagnóstico del análisis de FLC-K en comparación con la IgG, puede explicarse por la fracción intratecal media hasta tres veces mayor de FLC-K, que corresponde a una mayor frecuencia en la detección de la síntesis intratecal con el análisis de FLC-K. Conclusiones: Con la cuantificación en el análisis del LCR se pueden obtener resultados importantes desde el punto de vista científico y diagnóstico(AU)

Polyspecific antibodies without persisting antigen in multiple sclerosis, neurolupus and Guillain-Barré syndrome: immune network connectivity in chronic diseases / Anticorpos poliespecíficos sem antígeno persistente em esclerose múltipla, neurolupus e síndrome de Guillain-Barré: conectividade imunológica em doenças crônicas

ABSTRACT The polyspecific antibody synthesis in multiple sclerosis (MS) gained diagnostic relevance with the frequent combination of measles-, rubella- and varicella zoster antibodies (MRZ-antibody reaction) but their pathophysiological role remains unknown. This review connects the data for intrathecal polyspecific antibody synthesis in MS and neurolupus with observations in the blood of patients with Guillain-Barré syndrome (GBS). Simultaneously increased antibody and autoantibody titers in GBS blood samples indicate that the polyspecific antibodies are based on a general property of an immune network, supported by the deterministic day-to-day concentration variation of antibodies in normal blood. Strongly correlated measles- and rubella- antibody variations point to a particular connectivity between the MRZ antibodies. The immune network, which provides serological memory in the absence of an antigen, implements the continuous change of the MRZ pattern in blood, not followed by the earlier immigrated B cells without corresponding connectivity in the brain. This may explain the different antibody patterns in cerebrospinal fluid, aqueous humor and blood of the individual MS patient. A complexity approach must implement a different view on causation in chronic diseases and causal therapies.

RESUMO A síntese de anticorpos poliespecíficos em esclerose múltipla (EM) ganhou relevância diagnóstica com a combinação frequente de anticorpos contra sarampo, rubéola e varicela-zoster (reação de anticorpos MRZ), mas seu papel fisiopatológico permanece desconhecido. Esta revisão relaciona os dados da síntese intratecal de anticorpos poliespecíficos em EM e Neurolupus com observações no sangue de pacientes com síndrome de Guillain Barré (SGB). Simultaneamente, os títulos aumentados de anticorpos e autoanticorpos em amostras de sangue de SGB indicam que os anticorpos poliespecíficos se baseiam numa propriedade geral de uma rede imunitária, suportada pela variação determinística da concentração diária de anticorpos no sangue normal. As variações fortemente correlacionadas de anticorpos contra sarampo e rubéola apontam para uma conectividade particular entre os anticorpos MRZ. A rede imunitária, que fornece memória sorológica na ausência de um antígeno, implementa a mudança contínua do padrão MRZ no sangue, não seguida pelas células B que imigraram anteriormente sem conectividade no cérebro. Isto pode explicar os diferentes padrões de anticorpos no LCR, humor aquoso e sangue do paciente individual de EM. Uma abordagem complexa deve implementar uma visão diferente sobre a causalidade em doenças crônicas e terapias causais.

Knowledge-base for interpretation of cerebrospinal fluid data patterns. Essentials in neurology and psychiatry / Bases do conhecimento para interpretação de padrões de dados em líquido cefalorraquidiano. Essenciais em neurologia e psiquiatria

ABSTRACT The physiological and biophysical knowledge base for interpretations of cerebrospinal fluid (CSF) data and reference ranges are essential for the clinical pathologist and neurochemist. With the popular description of the CSF flow dependent barrier function, the dynamics and concentration gradients of blood-derived, brain-derived and leptomeningeal proteins in CSF or the specificity-independent functions of B-lymphocytes in brain also the neurologist, psychiatrist, neurosurgeon as well as the neuropharmacologist may find essentials for diagnosis, research or development of therapies. This review may help to replace the outdated ideas like “leakage” models of the barriers, linear immunoglobulin Index Interpretations or CSF electrophoresis. Calculations, Interpretations and analytical pitfalls are described for albumin quotients, quantitation of immunoglobulin synthesis in Reibergrams, oligoclonal IgG, IgM analysis, the polyspecific ( MRZ- ) antibody reaction, the statistical treatment of CSF data and general quality assessment in the CSF laboratory. The diagnostic relevance is documented in an accompaning review.

RESUMO As bases do conhecimento biológico e biofísico para interpretação de dados do líquido cefalorraquidiano (LCR), assim como das faixas de referência, são essenciais para o patologista clínico e para o neuroquímico. Com a descrição popular da função de barreira dependente do fluxo LCR, a dinâmica e os gradientes de concentração das proteínas derivadas do sangue, do cérebro e da leptomeninge no LCR, bem como as funções específico-independentes dos linfócitos B no cérebro também podem ser essenciais para o diagnóstico ou o desenvolvimento de terapias pelo neurologista, psiquiatra, neurocirurgião e neurofarmacologista. Essa revisão pode auxiliar na substituição de conceitos ultrapassados como os dos modelos de “ruptura” das barreiras, das interpretações lineares do índice de imunoglobulina ou da eletroforese do LCR. Cálculos, interpretações e armadilhas analíticas são descritos para quocientes de albumina, quantificação da síntese de imunoglobulinas em Reibergramas, IgG oligoclonal, análise de IgM, reação MRZ (anticorpo poliespecífico), tratamento estatístico de dados do LCR e qualidade geral das análises no laboratório de LCR. A relevância do diagnóstico está documentada em uma revisão anexa a este documento.

Cerebrospinal fluid data compilation and knowledge-based interpretation of bacterial, viral, parasitic, oncological, chronic inflammatory and demyelinating diseases. Diagnostic patterns not to be missed in neurology and psychiatry / Liquido cefalorraquidiano: compilação dos dados e interpretação avançada de doenças bacterianas, virais, parasitarias, oncológicas, inflamatórias cronicas e desmielinizantes. Padrões diagnósticos que não devem faltar em neurologia e psiquiatria

ABSTRACT The analysis of intrathecal IgG, IgA and IgM synthesis in cerebrospinal fluid (CSF) and evaluation in combined quotient diagrams provides disease-related patterns. The compilation with complementary parameters (barrier function, i.e., CSF flow rate, cytology, lactate, antibodies) in a cumulative CSF data report allows a knowledge-based interpretation and provides analytical and medical plausibility for the quality assessment in CSF laboratories. The diagnostic relevance is described for neurological and psychiatric diseases, for which CSF analysis can’t be replaced by other diagnostic methods without loss of information. Dominance of intrathecal IgM, IgA or three class immune responses give a systematic approach for Facial nerve palsy, Neurotrypanosomiasis, Opportunistic diseases, lymphoma, Neurotuberculosis, Adrenoleucodystrophy or tumor metastases. Particular applications consider the diagnostic power of the polyspecific antibody response (MRZ-antibodies) in multiple sclerosis, a CSF-related systematic view on differential diagnostic of psychiatric diseases and the dynamics of brain- derived compared to blood-derived molecules in CSF for localization of paracytes.

RESUMO A análise da síntese intratecal de IgG, IgA e IgM no liquido cefalorraquidiano (LCR) e a avaliação destas em diagramas com quocientes sugere padrões de diversas doenças. Estes dados, juntamente com outros parâmetros como a função de barreira, o fluxo liquórico, a citologia, o lactato e a pesquisa de anticorpos, integrados em uma ficha de paciente, permite uma interpretação baseada em conhecimento e permite também uma aferição da qualidade em laboratórios de LCR. A relevância diagnóstica é descrita para doenças neurológicas e psiquiátricas pois a análise do LCR não pode ser substituída por outros metódos diagnósticos sem perda de informação para o diagnóstico do paciente. O aumento da síntese intratecal de IgM, IgA ou das 3 classes de imunoglobulinas sugerem um diagnóstico sistemático de paralisia facial periférica, neurotripanosomiase, doenças oportunísticas, linfoma, neurotuberculose, adrenoleucodistrofia ou metástases de tumores cerebrais. A resposta poliespecífica de anticorpos contra sarampo, rubéola e varicela zoster (MRZ reação) é sugestiva de esclerose múltipla. Uma visão sistemática considera o diagnóstico diferencial de doenças psiquiátricas e doenças chrônicas. A dinâmica de moléculas derivadas do cérebro comparadas com aqueles derivadas do sangue é importante para a localização de parasitos em doenças parasitárias do sistema nervoso.

Reibergrama para evaluar la síntesis intratecal de Lectina de unión a Manosa / Reibergram to evaluate the Mannan binding Lectin intrathecal synthesis

INTRODUCCIÓN: la dinámica particular de las proteínas derivadas del cerebro en el líquido cefalorraquídeo es diferente a la dinámica de las proteínas derivadas de la sangre. OBJETIVO: describir los datos empíricos de la lectina de unión a manosa y brindar una interpretación teórica de la dinámica de esta proteína a través de la confección un nuevo reibergrama. MÉTODOS: la lectina de unión a manosa en suero y líquido cfalorraquídeo, fue medida en 40 adultos normales a través de un ensayo inmunofluorométrico. El criterio diagnóstico estuvo basado en; muestras controles (pacientes normales) y muestras de pacientes con enfermedades que cursaron con disfunción de barrera sangre-líquido cefalorraquídeo. RESULTADOS: el coeficiente de correlación entre la lectina de unión a manosa en el líquido cefalorraquídeo y en el suero, fue muy bajo. El reibergrama de la lectina de unión a manosa se diseñó de acuerdo con procedimientos previos. CONCLUSIONES: bajo cualquier condición de barrera sangre-líquido cefalorraquídeo, el reibergrama puede identificar la ocurrencia de síntesis intratecal de lectina de unión a manosa.

BACKGROUND: The dynamics of brain derived proteins in cerebrospinal fluid is different from the dynamics of blood-derived proteins. Aim: To describe the empirical data for mannan binding lectin and gives a theoretical interpretation of the dynamics of this protein in cerebrospinal fluid through a new reibergram. METHODS: Serum and cerebrospinal fluid mannan binding lectin were measured in 40 normal adults by immunofluorometric assays. The diagnostic criteria were based in; normal control samples defined clinically and diseases with blood-cerebrospinal fluid barrier dysfunction. RESULTS: Correlation coefficient between cerebrospinal fluid MBL and serum MBL was very low. Mannan binding lectin reibergram was designed according with previous procedures. CONCLUSION: Under all conditions of the blood-cerebrospinal fluid barrier, the reibergram can identify the occurrence of intrathecal mannan binding lectin synthesis.

Non increased neuron-specific enolase concentration in cerebrospinal fluid during first febrile seizures and year follow-up in pediatric patients

Febrile seizures are the commonest acute neurological disorder of early childhood. Studies suggested that febrile seizures are previous acute events from a more serious neurological problem. Due to neuron-specific enolase is generally accepted as a marker for neuropathological processes in the brain, 16 pediatric patients were studied during their first seizures and a year after it. Neuron-specific enolase in cerebrospinal fluid and blood were analysed by an immune enzyme assay. Non pathological neuron-specific enolase values were obtained in both periods in the group of patients. There no significative differences when paired series statistics test was performed with 95 per cent of confidence. Neuron-specific enolase appears not to be a marker for febrile seizures because its concentration not be increased in cerebrospinal fluid in this group of patients.

The value of csf analysis for the differential diagnosis of HTLV-I associated myelopathy and multiple sclerosis

Amostras do líquido cefalorraquidiano (LCR) e soro de 17 pacientes brasileiros com HAM/TSP, seis com esclerose múltipla e seis com epilepsia idiopática (controle nao-inflamatório) foram analisadas para a presença de anticorpos para o vírus de sarampo, rubéola, varicela zoster e herpes simples pelo método de ELISA. Todos os casos de HAM/TSP e esclerose múltipla tinham resposta imune poliespecífica intratecal para sarampo e rubéola. Anticorpos específicos para sarampo e rubéola (resposta MRZ) foram observados em todos os pacientes com esclerose múltipla, mas nao nos controles com epilepsia idiopática. A relevância das respostas poliespecífica e monoespecífica é discutida para essas doenças neurológicas crônicas.