Ability of Latin America laboratories to detect antimicrobial resistance patterns: experience of the SENTRY antimicrobial surveillance program (1997-2000)

The accuracy of antimicrobial susceptibility tests is a crucial step for the clinical management of patients with serious infections. They must be reliable and precise because they will guide antimicrobial therapy. Our main objective was to compare the results of susceptibility testing performed by the SENTRY coordinator laboratory with those reported by the participating Latin American medical centers. A total of 10,277 bacterial isolates were tested by the reference broth microdilution method at the coordinator laboratory in the United States. The tests were performed and interpreted following the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) recommendations. Ten antimicrobial agent-organism combinations were analyzed. The susceptibility methods utilized in each of the medical centers were also evaluated. Total agreement of the results was obtained in nearly 88 percent of the antimicrobial agent-organism combinations. "Very major" (false-susceptible results) and "major errors" (false-resistant results) were observed in 12 percent and 6 percent of the cases, respectively. The highest disagreements were observed for coagulase-negative Staphylococcus - oxacillin (20 percent - very major error) and Burkholderia cepacia - imipenem (21 percent - very major error). The susceptibility method with the highest agreement rate was Etest« (92 percent) > PASCO« (91 percent) > agar dilution (91 percent) > MicroScan« (90 percent) > Vitek« (87 percent). External quality assurance data obtained by surveillance programs such as the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program are not only helpful for detecting the emergence of patterns of antimicrobial resistance, but also to monitor the performance of the participating microbiology laboratories.

Avaliaçäo da qualidade dos discos com antimicrobianos para testes de disco-difusäo disponíveis comercialmente no Brasil / Evaluation of the quality of the antimicrobial agents disks used in disk-diffusion tests comercially available in Brazil

Introduçäo: O teste de suscetibilidade a antimicrobianos representa um dos testes de maior importância clínica realizados pelo laboratório de microbiologia. Devido ao grande número de antimicrobianos e à complexidade dos mecanismos de resistência desenvolvidos pelas bactérias, fica muito difícil hoje a detecçäo de problemas nos testes de suscetibilidade pela simples avaliaçäo dos resultados obtidos. Sendo assim, é extremamente importante que haja uma avaliaçäo constante da qualidade destes testes. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a qualidade dos discos de antimicrobianos comercializados no Brasil. Material e métodos: Foram avaliados discos de 18 antimicrobianos obtidos de cinco diferentes fontes comerciais, os quais foram testados frente a quatro cepas bacterianas oriundas da ATCC, pelo método de difusäo em ágar, seguindo as recomendações do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Cada teste foi repetido 20 vezes. Resultados: Nenhuma das marcas apresentou desempenho satisfatório para o uso na rotina de um laboratório de microbiologia. O melhor desempenho foi apresentado pela marca Cecon, com 89,6 por cento de concordância. A marca Sensifar apresentou taxa de concordância geral semelhante (90,8%). A marca com o pior desempenho foi a Pimenta Abreu, com apenas 58,6% de concordância. Conclusäo: Os resultados do presente estudo indicam que os discos de antimicrobianos comercializados no Brasil são de baixa qualidade, possivelmente refletindo a falta de controle de qualidade na produçäo e/ou estocagem dos produtos antes da sua distribuiçäo. Esses dados chamam a atençäo para a necessidade de implantaçäo de sistemas efetivos de fiscalizaçäo da comercializaçäo desses produtos e de programas criteriosos de controle de qualidade por parte dos laboratórios que os utilizam

In vitro antimicrobial activity of linezolid tested against vancomycin-resistant enterococci isolated in brazilian hospitals

The emergence of vancomycin-resistant enterococci (VRE) has been described recently in Brazil. This is in contrast to the USA and Europe, where the VRE appeared in the late 1980s. The progressive increase in VRE isolation poses important problems in the antimicrobial therapy of nosocomial infections. Treatment options and effective antimicrobial agents for VRE are often limited and the possibility of transfer of vancomycin genes to other Gram-psitive microorganisms continues. In the search for antimicrobial agents for multiresistant Gram-positive cocci, compounds such as linezolid and quinupristin/dalfopristin have been evaluated. The present study was conducted to evaluate the in vitro activity of the oxazolidinone linezolid and 10 other antimicrobial agents, including quinupristin-dalfopristin, against enterococci isolated in Brazilian hospitals. Thirty-three vancomycin resistant isolates (17 Enterococcus faecium and 16E.faecalis), were analyzed. Strains were isolated from patients at Säo Paulo Hospital, Oswaldo Cruz Hospital, Hospital do Servidor Público Estadual, Santa Marcelina Hospital, Santa Casa de Misericórdia de Säo Paulo, and hospital das Clínicas do Paraná. The samples were tested by a broth microdilution method following the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) recommendations. All isolates were molecular typed using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Linezolid was the most active compound against there multiresistant enterocci, showing 100 porcent inhibition at the susceptible breakpoints. Quinupristin and teicoplanin showed poor activy against both species. The molecular ryping results suggest that there has been interhospital spread of vacomycin resistant E. faecium and E. faecalis among Brazilian hospitals. The results of this study indicate that linezolid is an appropriate therapetic option for the treatment of vacomycin-resistant enterococci infections Brazil.

In vitro antimicrobial activity of the aminoglycoside arbekacin tested against oxacillin-resistant Staphylococcus aureus isolated in brasilian hospitals

Arbekacin is an aminoglycoside used in Japan for treating infections caused by gentamicin and oxacillin-resistant S.aureus (ORSA). The objective of this study was to determine the in vitro antimicrobial activity of arbekacin against 454 clinical isolates of ORSA. The isolates were consecutively collected between January and July, 2000, from patients hospitalized in8 Brazilian medical centers. The antimicrobial susceptibillity testing was performed by disk diffusion method according to NCCLS recommendations. The vast majority of the isolates, 453 strains (99.8 percent), were considered susceptible to arbekacin based on the criteria proposed by the Requirements for Antibiotic Products of Japan. Only 1 isolate (0.2 percent) was classified as resistant. On the other hand, high rates of resistance were demonstrated for other aminoglycosides, such as gentamicin (97.6 resistance) and amikacin (97.0 resistance). Resistance rate was also high for ciprofloxacin (98.0 percent). All isolates were considered susceptible to vancomycin. The excellent in vitro antimicrobial activity of arbekacin demonstrated in the study indicates that this antimicrobial agent may play an important role in the treatment of severe ORSA infections, especially those that show poor clinical response with vancomycin monotherapy. Since the aminoglycosides should not be used as monotherapy to treat Gram positive infections, further studies evaluating in vitro and in vivo synergistic activity of arbekacin combinations are necessary to clarify the clinical role of this aminoglycoside.

Detecçäo de B-lactamases de espectro ampliado (ESBL) pelo laboratório clínico: uma revisäo crítica / Laboratory detection of extended-spectrum B-lactamase (ESBL) producing bacteria: a critical review

A grande dificuldade na detecçäo de cepas produtoras de ß-lactamases de espectro ampliado (ESBL) é decorrente de de vários fatores, incluindo a grande variedade nos tipos de ESBL e alteraçöes de potência e afinidade destas aos diferentes ß-lactâmicos. Além disso, a quantidade de ß-lactamase produzida pode variar de cepa para cepa, variando, assim, o grau de resistência. Porém, a detecçäo laboratorial desse tipo de resistência apresenta grande importância, uma vez que há vários relatos de falência terapêutica devido ao uso de cefalosporinas de terceira geraçäo e penicilinas de amplo espectro no tratamento de infecçöes causadas por cepas produtoras de ESBL que apresentavam sensibilidade in vitro aos ß-lactâmicos utilizados no tratamento. Este trabalho avalia as vantagens e desvantagens de vários métodos disponíveis, como dupla-difusäo em disco, adiçäo de ácido clavulânico a discos de antimicrobianos, fitas de Etest ESBL Screen, disco difusäo e determinaçäo da CIM utilizando breakpoints indicativos da produçäo de ESBL padronizados pelo NCCLS, teste tridimensional e Vitek

Avaliaçäo da acurácia do teste de adiçäo de clavulanato em disco para a detecçäo de amostras de Klebsiella Pneumoniae produtoras de ß-lactamases de espectro ampliado (ESBL) / Accuracy of the clavulanate disk addition (CDA) test to detect extended-spectrum ß-lactamases (ESBL) producing Klebsiella Pneumoniae

As ß-lactamases de espectro ampliado (extended-spectrum ß-lactamases - ESBL) têm sido detectadas com frequencia crescente em enterobactérias, particularmente em Klebsiella pneumoniae. Essas enzimas säo capazes de hidrolisar cefalosporinas de amplo espectro, monobactâmicos e penicilinas de amplo espectro; porém, säo inibidas por inibidores de ß-lactamases, tais como clavulanato, sulbactam e tazobactam. A grande variaçäo tanto no espectro dessa ß-lactomases quanto na velocidade com que elas degradam os diferentes B-lactâmicos faz com que a padronizaçäo de um teste de sensibilidade para detecçäo de cepas produtoras de ESBL seja muito difícil. O objetivo deste estudo foi avaliar a acurácia de um teste de sensibilidade em detectar cepas produtoras dessa enzimas. Foram avalidos 100 isolados clínicos de K. penumoniae. As amostras foram classificadas em produtoras ou näo-produtoras de ESBL, utlizando-se a fita Etest ESBL (ABBiodisk, Solna, Suécia). Uma reduçäo >-2,5 diluiçöes logarítmicas foi itulizada como critério de positividade. Dez microgramas de clavulanato foram adicionados a discos de 30µg de ceftazidima, cefuroxima, cefotaxima, ceftriaxona e aztreonam. A produçäo de ESBL é indicada por um aumento no halo de inibiçäo dos discos contendo clavulanato, em comparaçäo com o halo do disco sem clavulanato. A sensibilidade e especificidade do teste foram calculadas para cada substrato (ß-lactâmico) e para diferentes valores de aumento do halo (4,5,6 e 7mm). Quarenta amostras foram consideradas produtoras de ESBL. A utilizaçäo do substrato ceftriaxona com o breakpoint de 6mm mostrou a melhor sensibilidade (97 por cento), enqunto que cefuroxina com o brakpoint de 7mm mostrou a melhor especificidade (93,3 por cento). Nossos resultados mostram que o teste de adiçäo de clavulanato é uma técnica útil e apresenta acurácia adequada para a detecçäo de amostras produtoras de ESBL em laboratórios de rotina

Avaliaçäo do sistema semi-automatizado microscan para identificaçäo de testes de sensibilidade de amostras de enterococos / Evaluation of the microscan semi-automated system for species identification and susceptibility testing of enterococci

O objetivo deste estudo foi avaliar a acurácia de um sistema semi-automatizados, os painéis convencionais MicroScan Positive Breakpoint Combo Type 6 (Dade MicroScan Inc., West Sacramento, CA), para identificaçäo de espécie, avaliaçäo da sensibilidade à vancomicina e à ampicilina e detecçäo de alto grau de resistência à gentamicina (HLRGN) e à estreptomicina (HLRST). Esse método foi comparado com a identificaçäo bioquímica convencional e com o método de diluiçäo em ágar (DA) para avaliaçäo de sensibilidade a antimicrobianos. Dentre as 211 amostras testadas (184 E.faecalis, 21 E.faecium e 6 näo-faecalis-näo-faecium), 95 por cento dos E.faecalis e 67 por cento dos E.faecium foram idetificados corretamente pelo MicroScan. O microScan apresentou 99,5 por cento de concordância com o método de DA para testes de sensibilidade à vancomicina e o HLRGN e o HLRST foi detectado em 92 por cento (33/36) e 84 por cento (31/37) das amostras, respectivamente. Os resultados do presente estudo mostram que este método semi-automatizado apresenta dificuldades na identificaçäo de espécies diferentes de E.faecalis, além de elevadas taxas de erros muito graves para ampicilina (11 por cento), gentamicina (8 por cento) e estreptomicina (16 por cento)