Indeterminate RIBA results were associated with the absence of hepatitis C virus RNA (HCV-RNA) in blood donors

Introduction: Hepatitis C virus (HCV) infection is diagnosed by the presence of antibodies and is supplemented by confirmatory testing methods, such as recombinant immunoblot assay (RIBA) and HCV-RNA detection. This study aimed to evaluate the efficacy of RIBA testing to diagnose HCV infection in blood donors positive for anti-HCV antibodies. Methods: A total of 102 subjects positive for anti-HCV determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) at the Hematology and Hemotherapy Foundation of Bahia (HEMOBA) were later assessed with new samples using the Abbott Architect anti-HCV test (Abbott Diagnostics, Wiesbaden, Germany), the RIBA III test (Chiron RIBA HCV 3.0 SIA, Chiron Corp., Emeryville, CA, USA), the polymerase chain reaction (PCR; COBAS® AMPLICOR HCV Roche Diagnostics Corp., Indianapolis, IN, USA) and line probe assay (LiPA - Siemens, Tarrytown, NY, USA) genotyping for HCV diagnosis. Results: Of these new samples, 38.2% (39/102) were positive, 57.8% (59/102) were negative and 3.9% (4/102) were indeterminate for anti-HCV; HCV-RNA was detected in 22.5% (23/102) of the samples. RIBA results were positive in 58.1% (25/43), negative in 9.3% (4/43) and indeterminate in 32.6% (14/43) of the samples. The prevailing genotypes were 1 (78.3%, 18/23), 3 (17.4%, 4/23) and 2 (4.3%, 1/23). All 14 samples with indeterminate RIBA results had undetectable viral loads (detection limit ≤50 IU/mL). Of these samples, 71.4% (10/14) were reevaluated six months later. Eighty percent (8/10) of these samples remained indeterminate by RIBA, and 20% (2/10) were negative. Conclusions: In this study, individuals with indeterminate RIBA results had no detectable HCV-RNA. .

Hepatitis C virus quantification in serum and saliva of HCV-infected patients

The hepatitis C virus (HCV) can be detected in blood and other bodily fluids, such as saliva, semen and gastric juices. The aim of this study was to compare the HCV viral loads in the serum and saliva of infected patients. Twenty-nine patients with detectable HCV RNA in their serum and saliva were included in this study. The HCV viral loads were determined through quantitative real-time polymerase chain reactions. The median viral RNA levels were 5.78 log10 copies in the serum and 3.32 log10 copies in the saliva. We observed that the salivary HCV viral load was significantly lower than the viral load in the serum. Further studies are required to understand the role of saliva in the diagnosis, management and potential transmission of HCV.

The dynamics of dengue virus serotype 3 introduction and dispersion in the state of Bahia, Brazil

By 2002, dengue virus serotype 1 (DENV-1) and DENV-2 had circulated for more than a decade in Brazil. In 2002, the introduction of DENV-3 in the state of Bahia produced a massive epidemic and the first cases of dengue hemorrhagic fever. Based on the standardized frequency, timing and location of viral isolations by the state's Central Laboratory, DENV-3 probably entered Bahia through its capital, Salvador, and then rapidly disseminated to other cities, following the main roads. A linear regression model that included traffic flow, distance from the capital and DENV-1 circulation (r² = 0.24, p = 0.001) supported this hypothesis. This pattern was not seen for serotypes already in circulation and was not seen for DENV-3 in the following year. Human population density was another important factor in the intensity of viral circulation. Neither DENV-1 nor DENV-2 fit this model for 2001 or 2003. Since the vector has limited flight range and vector densities fail to correlate with intensity of viral circulation, this distribution represents the movement of infected people and to some extent mosquitoes. This pattern may mimic person-to-person spread of a new infection.

Pesquisa de anticorpos antinucleossoma em lúpus eritematoso sistêmico / Detection of antinucleosome antibodies in systemic lupus erythematosus

OBJETIVOS: determinar a freqüência dos anticorpos antinucleossoma (AN) em lúpus eritematoso sistêmico (LES) e avaliar a associação desses anticorpos com a atividade de doença. MÉTODOS: estudo de corte transversal em que foram estudados pacientes com diagnóstico de LES baseado nos critérios do Colégio Americano de Reumatologia. Utilizou-se o SLEDAI como instrumento de avaliação de atividade de doença. A pesquisa de anticorpos AN foi realizada pela técnica de ELISA (INOVA Diagnostics Inc). Pacientes com diagnóstico de miosite e esclerose sistêmica (ES) foram também estudados para avaliação da performance do teste. RESULTADOS: foram estudados 82 pacientes com LES, sendo 81 do sexo feminino, com idade média de 35 ± 11,7 anos. Anticorpos AN foram detectados em 48 pacientes com LES (58,5 por cento), em três pacientes com miosite (21,4 por cento) e em dois pacientes com ES (14,2 por cento), o que determinou sensibilidade e especificidade de 58,5 por cento e 82,14 por cento, respectivamente. Considerando-se um ponto de corte em 40 U, os anticorpos AN foram detectados em 44 pacientes com LES (53,65 por cento), em dois pacientes com miosite (13,33 por cento) e em um paciente com ES (6,66 por cento), o que determinou sensibilidade e especificidade de 53,65 por cento e 90 por cento, respectivamente. Não se observou correlação dos títulos dos anticorpos AN e a atividade de doença (SLEDAI), embora tenha sido observada correlação entre anti-DNA e escore de SLEDAI nessa mesma população (r = 0,42; p < 0,005). CONCLUSÕES: No presente estudo, observaram-se moderada sensibilidade e alta especificidade dos anticorpos AN para o diagnóstico de LES. No entanto, não se verificou associação desses anticorpos com os parâmetros de atividade da doença, sugerindo que a pesquisa de tais anticorpos seria de valor limitado na prática reumatológica.

OBJECTIVE: to determine the frequency of antinucleosome (AN) antibodies in systemic lupus erythematosus (SLE) and their association with disease activity. METHODS: cross-sectional study to evaluate patients with diagnosis of SLE based on the American College of Rheumatology criteria. SLEDAI score was used as a disease activity index. AN antibodies were tested by ELISA (INOVA Diagnostics Inc). Systemic sclerosis (SSc) and myositis patients were also studied to determine the diagnostic performance of the ELISA system. RESULTS: a total of 82 SLE patients, 81 female, mean age 35 ± 11.7 years were included in the study. AN antibodies were positive in 48 SLE samples (58.5 percent), three with myositis (21.4 percent) and two with SSc (14.2 percent), determining a sensitivity and specificity of AN antibodies for the diagnosis of SLE of 58.5 percent and 82.14 percent, respectively. Utilizing a cut off of 40 U, test was positive in 45 SLE samples (53.65 percent), two with myositis (13.33 percent) and one with SSc (6.66 percent), determining a sensitivity and specificity of AN antibodies for the diagnosis of SLE of 53.65 percent and 90 percent, respectively. There were no correlation between AN antibodies and SLEDAI scores. On the other hand, it was observed a positive correlation between anti-DNA antibodies and disease activity (r = 0.42; p < 0.005). CONCLUSIONS: in the present study it was demonstrated a high specificity and moderate sensitivity of AN antibodies for the diagnosis of SLE. However, the lack of association with disease activity suggests that it has limited value in rheumatologic practice.

Serological and genetic diversity amongst Salmonella strains isolated in a salami processing line

Salmonella is one of the most important agents of foodborne disease in Brazil and in other countries, with meat and meat products being identified as important vehicles of salmonelosis. A total of 54 Salmonella strains isolated from a commercial salami processing line were first serotyped and then their antibiotic resistance and macro restriction profiles were determined. 11.1 percent of the strains showed resistance to 3 or more antibiotics with profile AmpCStxTe being the most frequent. PFGE generated 9 and 12 profiles with enzymes XbaI and SpeI, respectively. It was observed that different serotypes of Salmonella could be found in the different steps of the processing line. The genetic profile of the strains had low relationship indicating the genetic diversity of the tested strains.

Salmonella é um dos principais agentes de enfermidades transmitidas por alimentos (ETA) no Brasil e em outros países, sendo os derivados cárneos frequentemente associados como veículos de surtos de salmonelose. Um total de 54 cepas de Salmonella sp., isoladas a partir de amostras de salame coletadas nas diferentes etapas de uma linha de produção industrial, foram sorotipadas e posteriormente caracterizadas quanto a sua sensibilidade a antimicrobianos e perfil PFGE. Entre as cepas avaliadas, 11,1 por cento apresentaram resistência a três ou mais dos antimicrobianos, sendo o perfil AmpCStxTe mais freqüente. Foram obtidos 9 e 12 perfis PFGE, empregando-se as enzimas XbaI e SpeI, respectivamente. Os perfis de ambas as enzimas foram agrupados, obtendo-se 12 perfis PFGE combinados que puderam ser separados em dois grupos empregando-se a análise de UPGMA. A linha de produção industrial de salame avaliada apresentou etapas em que há contaminação por diferentes sorotipos de Salmonella sp. Os perfis genéticos encontrados indicam origens distintas para muitas cepas estudadas, uma vez que estes foram pouco relacionados entre si.

Células de doadores normais primadas in vitro respondem ao antígeno ovular solúvel e ao peptídeo sintético MAP4 derivado da triose fosfato isomerase do Schistosoma mansoni / Cells of normal primed givers in vitro answer to the antigen to ovular soluble and synthetic peptíde MAP4 derived from triose-phosphate isomerase of the Schistosoma mansoni

Dados da literatura demonstram que os antígenos do Schistosoma mansoni induzem uma resposta imune de células T auxiliadora (Th) CD4. Os eventos inciais da resposta imune na esquistossomose são bem caracterizados no modelo murino. Entretanto, ainda são poucos os estudos que avaliam a resposta imune inicial desenvolvida em humanos, especialmente aquelas contra os antígenos mais relevantes do parasito. Para estudar esses eventos iniciais que ocorrem na resposta imune humana após a oviposição na esquistossomose mansoni, foi realizado o priming a estimulação primaria in vitro (PIV), um sistema que simula as condições in vivo. Este sistema pode ser usado para estudar os eventos iniciais in vitro à semelhança de uma infecção natural. No estudo in vitro, foram utilizadas células dendríticas profissionais como células apresentadoras de antígeno. Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de doze doadores normais saudáveis sem historia prévia de contacto com S. mansoni ou com qualquer de seus antígenos, foram primadas com antígeno ovular solúvel (SEA) do S. mansoni ou múltiplos peptídeos antigênico (MAP4), contendo epitopos de células T e B derivado da triose fosfato isomerase. As células dendríticas foram previamente geradas, caracterizadas e em seguida incubadas na presença ou ausência de antígenos, posteriormente cultivadas na presença de PBMCs total por um período de sete dias para simular a infecção in vivo. As células primadas foram coletadas, lavadas e reestimuladas duas vezes. Em cada etapa do PIV foram determinadas as concentrações de citocinas nos sobrenadantes de culturas e a expressão dos marcadores de superfície das subpopulações de linfócitos, durante o prime e após as reestimulações da primeira e segunda chamada. As PBMCs primadas com antígenos SEA apresentaram um perfil de células semelhante do tipo Th2, exceto 2/12 doadores que apresentaram uma resposta semelhante do tipo Th1. Diferente do observado para PBMCs primadas com SEA...linfócitos.

Schizodeme analysis of Trypanosoma cruzi Colombian strain clones isolated from the acute phase of murine infection

Colombian strain of Trypanosoma cruzi, biodeme Type III (T. cruzi I), has been cloned by micromanipulation at two phases of the acute infection: early (10 days ) and advanced (30 days). Twelve clones were obtained therefrom. Characterization by their biological and biochemical behavior showed an identity among the several clones and their parental strain, albeit with different degrees of virulence. Molecular characterization of the kinetoplast DNA (kDNA) after amplification by polymerase chain reaction revealed identical profiles of the bands from the kDNA minicircle by the analysis of restriction fragment lenght polymorphism for the isolated clones, their parental strain, and to the clones isolated at two different phases of the infection. Results suggest the predominance of a "principal clone", in the composition of the Colombian strain, responsible for the biological and biochemical behavior. However, no relationship was detected between the molecular profile of kDNA and the degree of virulence presented by the several clones.

Uso do rituximabe para o tratamento da plaquetopenia do lúpus eritematoso sistêmico: eficácia clínica e efeito nas moléculas de co-estimulação / Use of rituximab for the treatment of systemic lupus erythematosus' thrombocytopenia: clinical efficacy and costimulatory molecules effect

Plaquetopenia é uma complicação não raramente vista no contexto do lúpus eritematoso sistêmico (LES). O seu tratamento inclui o uso de corticosteróide, imunossupressores, imunoglobulina humana e, eventualmente, esplenectomia. Descreve-se um caso de LES com plaquetopenia persistente a despeito do uso de prednisona e azatioprina, que respondeu satisfatoriamente ao uso de rituximabe (RTX). O estudo de citometria de fluxo mostrou depleção dos linfócitos B do sangue periférico, assim como uma queda das moléculas de co-estimulação após o uso da medicação. Não foi observado efeito colateral relacionado à infusão da substância. Dessa forma, o RTX parece estar indicado para casos selecionados de LES com plaquetopenia de difícil controle.

Frequency of antiphospholipid antibodies in patients with infectious diseases using three different ELISA methods

OBJETIVO: O ensaio de enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) para a pesquisa de anticorpos anticardiolipina (aCL) é o mais importante teste para o diagnóstico da síndrome antifosfolipídica (SAF). Entretanto esse teste também pode ser positivo em algumas doenças infecciosas. Tem sido sugerido que a detecção de anticorpos para uma mistura de fosfolípides ou para b2-glicoproteína I (b2-GP I) teria uma maior especificidade para a SAF que o teste de ELISA-padrão para aCL. O objetivo do presente estudo é comparar a especificidade de três testes para anticorpos antifosfolípides (aFL) em pacientes com doenças infecciosas. MÉTODOS: Anticorpos antifosfolípides foram pesquisados por três técnicas de ELISA, ou seja, o teste-padrão para aCL, o kit de ELISA APhL® e o teste para anti-b2-GP I em pacientes com doenças infecciosas, tais como sífilis (69), leptospirose (33) e Calazar (30). RESULTADOS: A freqüência de positividade de aFL da classe IgG em pacientes com sífilis, leptospirose e Calazar foi de 13/69 (19 por cento), 9/33 (27 por cento) e 2/30 (6 por cento), respectivamente, com o ELISA-padrão para aCL versus 1/69 (1,4 por cento), 0/33 (0 por cento) e 0/30 (0 por cento) com o kit de ELISA APhL®. A positividade do isotipo IgM foi de 10/69 (14 por cento), 4/33 (12 por cento) e 1/30 (3 por cento), respectivamente, com o ELISA-padrão para aCL, e 1/69 (1,4 por cento), 0/33 (0 por cento) e 0/30 (0 por cento) com o kit de ELISA APhL®. Anticorpos da classe IgG contra b2GPI foram detectados em 14/69 casos de sífilis (20 por cento), 6/33 casos de leptospirose (18 por cento) e 16/30 casos de Calazar (53 por cento). Assim, o kit de ELISA APhL® apresentou uma maior especificidade: 97 por cento (95 por cento CI: 92 por cento-99 por cento) comparado com 81 por cento (95 por cento CI: 74 por cento-87 por cento) para o teste de aCL-padrão e 72 por cento (95 por cento CI: 64 por cento-79 por cento) para o teste de anticorpos anti-b2 GPI. CONCLUSÕES: O kit de ELISA APhL® parece ser m...

Auto-erotismo: um vazio ativo na clínica contemporânea / Self-eroticism: an active vacuum in contemporary clinics

Explora-se a noção de auto-erotismo como virtualidade problemamática que se atualiza em diversos regimes de eroticidade sem jamais ser preenchido por eles, como um plano de experiência do qual emana a potência de agir e devir. Para contribuir com a discussão sobre os movimentos subjetivos presentes nos processos de cura na atualidade, utilizam-se as noções de afetos de vitalidade, sentir com, corpo sensível e pequenas percepções, com base nos trabalhos de Sandor Ferenczi, Daniel Stern e José Gil. Estas noções implicam na desestabilização dos estados conhecidos e reconhecíveis do mundo percebido e uma disposição para a dissolução do eu. Proponho pensar a experiência transferencial como espaço atravessado por fluxos de forças que poderão criar novos modos de ser erógeno

Trypanosoma cruzi: susceptibility to chemotherapy with benznidazole of clones isolated from the highly resistant Colombian strain

The present investigation was performed to evaluate the susceptibility of seven clones isolated from the highly resistant Colombian strains, prototype of Biodeme Type III. Seven clones previously obtained, showed a phenotypic homogeneity and high similarity with the parental strain. Eight groups of 30 mice were inoculated with one of seven clones or the parental strain; 20 were treated with benznidazole (100mg/kg/day) and 10 were untreated controls. Cure evaluations were done by parasitological and serological tests and PCR. Cure rates varied from 0 percent (null) to 16.7 percent. Correlation between positivity of parasitological and serological tests with positive PCR reached 37 percent. The results demonstrated the high resistance of the clones, suggesting the predominance of a highly resistant principal clone in this strain. The findings apparently indicate that the possibility of cure is minimal for patients infected with this biodeme; a fact that could affect the control of Chagas' disease through treatment of chronically infected people

Sensitivity of polymerase chain reaction for detection of known aliquots of Trypanosoma cruzi in the blood of mice: an in vitro study

To evaluate the sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) to reveal known number of trypomastigote in the blood of mice, three separate experiments were done. First: To eight samples of 500mul of normal mice blood, one aliquot of 1, 2, 3, 4, 5, 10, and 50 trypomastigotes respectively, were added. Second and third: 10 aliquots with 1 and 10 with 2 trypomastigotes were added to samples of 500mul of normal mice blood. Positive control: 500mul of blood containing 100,000 trypomastigotes. For kDNA minicircles amplification by PCR the primers:S35 and S36 were used. PCR revealed products of 330 b.p in the positive controls. When only one sample with the aliquots of 1 or 2 trypomastigotes was examined, results were negative; results were positive with aliquots of 3 to 50 trypomastigotes. In the 2nd and 3rd experiments, 9/10 aliquots with one parasite and 9/10 with 2 trypomastigotes were positive revealing a high sensitivity of this reaction. In conclusion, the presence of one single parasite in 500mul of blood, is enough for a positive PCR. This method could be used as a complement to the various parasitological cure tests in treated mice, when low volumes of blood are individually examined

Frequency of Infection of Lutzomyia Phlebotomines with Leishmania braziliensis in a Brazilian endemic area as assessed by pinpoint capture and polymerase chain reaction

Leishmania infected of Lutzomyia spp. are rare in endemic areas. We tested the hypothesis that there is clustering of infected vectors by combining pinpoint capture with sensitive L. braziliensis kDNA minicircle specific PCR/dot blot in an endemic area in the State of Bahia. Thirty out of 335 samples (10 to 20 sand flies/sample; total of 4,027 female sand flies) were positive by PCR analysis and dot blot leading to a underestimated overall rate of 0.4 percent positive phlebotomines. However, 83.3 percent of the positive samples were contributed by a single sector out of four sectors of the whole studied area. This resulted in a rate of 1.5 percent Leishmania positive phlebotomines for this sector, far above rates of other sectors. Incidence of American cutaneous leishmaniasis cases for this sector was about twice that for other sectors. Our results show that there is a non-homogeneous distribution of Leishmania-infected vectors. Such a clustering may have implications in control strategies against leishmaniasis, and reinforces the necessity of understanding the ecological and geographical factors involved in leishmanial transmission

Anticorpos anti-B2 glicoproteína I em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico / Anti-B2 glycoprotein I antibodies in patients with systemic lupus erythematosus

Objetivos: Estudar a frequência de anticorpos contra B2 glicoproteína I (B2 GP I) em soros de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) e pesquisar a sua associação com complicações trombóticas e obstétricas. Métodos: Foram estudados 152 pacientes com diagnóstico de LES, sendo 147 do sexo feminino e cinco do masculino e com idade média de 33 mais ou menos 12 anos. Especial ênfase foi dada à presença de tromboses e morbidade obstétrica. B2 GP I foi purificada por cromatografia de afinidade em coluna de heparina. Foi realizada pesquisa de anticorpos IgG anti-B2 GP I e anticardiolipina utilizando-se a técninca de ELISA. Resultados: Complicações trombóticas ou obstétricas foram observadas em 34/152 pacientes (22 por cento). Anticorpos anticardiolipina em níveis moderados ou altos foram detectados em 55/152 pacientes (36 por cento) e anti-B2 GP I em 36/152 pacientes (24 por cento). A presença desses anticorpos não foi associada a maior frequência de trombose arterial ou venosa ou complicações obstétricas. Conclusões: No presente estudo demonstrou-se que anticorpos anti-B2 GPI em LES não parecem ser marcadores de complicações trombóticas ou obstétricas

De corpos, atos, afetos e palavras / Of bodies, acts, affection and words

O tema central do trabalho e a transferência em toda experiência de cura, e de forma especial, na cura psicanalítica. Sua questäo é : como se transfere? Para delimitar esta questäo, expöe-se, brevemente, a constitutiçäo dos modelos de ciência e de medicina da modernidade, utilizando a leitura de Michel Foucault sobre o nascimento da clínica e o questionamento de Bruno Latour, levantando as redes que o projeto moderno oculta, ao se constituir. A psicanálise é abordada em sua inscriçäo histórica e social e, em sua filiaçäo original, no campo mais amplo da clínica médica. Para a discussäo sobre as modalidades da transferência e os diversos modos de pensá-la, na Psicanálise, utilizamos Sàndor Ferenczi, privilegiando, em sua obra, aspectos que dizem respeito à expressäo dos afetos no corpo, sua relaçäo com o trauma psíquico, e sua clínica. Os temas psicanalíticos säo articulados, igualmente, a outros elementos conceituais hauridos dos trabalhos de etologia humana de Daniel Stern e das pesquisas do filósofo José Gil sobre as formas de visibilidade e as pequenas percepçöes. Nosso interesse é assinalar alguns traços que permitam seguir os diferentes modos de perceber e agir no espaço terapêutico, na atualidade.

Comparative analysis by polymerase chain reaction amplified minicircles of kinetiplast DNA of a stable strain of Trypanosoma cruzi from Säo Felipe, Bahia, its clones and subclones: possibility of predominance of a principal clone in this area

Molecular characterization of one stable strain of Trypanosoma cruzi, the 21 SF, representative of the pattern of strains isolated from the endemic area of Säo Felipe, State of Bahia, Brazil, maintained for 15 years in laboratory by serial passages in mice and classified as biodeme Type II and zymodene 2 has been investigated. The kinetoplast DNA (kDNA) of parental strain, 5 clones and 14 subclones were analyzed. Schizodeme was established by comparative study of the fragments obtained from digestion of the 330-bp fragments amplified by polymerase chain reation (PCR) from the variable regions of the minicicles, and digested by restriction endonucleases Rsa I and Hinf I. Our results show a high percentual of similarity between the restriction fragment lenght plymorphism (RFLP) for the parental strain and its clones and among these individual clones and their subclones at a level of 80 to 100 per cent. This homology indicates a predominance of the same "principal clone" in the 21SF strain and confirms the homogeneity previously observed at biological and isozymic analysis. These results suggest the possibility that the T. cruzi strains with similar biological and isoenzymic patterns, circulating in this endemic area, are representative of one dominant clone.