Molecular detection of bovine immunodeficiency virus (BIV) in bovines from the state of Minas Gerais, Brazil / Detecção molecular do vírus da imunodeficiência bovina (BIV) em bovinos do estado de Minas Gerais, Brasil

O vírus da imunodeficiência bovina é o agente causador da imunodeficiência viral bovina que é conhecido por infectar bovinos em todo o mundo. Como em outras infecções por retrovírus, os hospedeiros desenvolvem uma infecção de longo prazo e a maioria dos animais infectados permanece assintomática. O objetivo deste estudo foi detectar DNA proviral BIV em amostras de sangue de bovinos e estimar a ocorrência de infecção no estado de Minas Gerais, Brasil. Amostras de sangue de 391 bovinos foram coletadas de duas regiões do estado, Zona da Mata e Central. O DNA proviral foi detectado por reação em cadeia da polimerase semi-nested (SN-PCR). Os resultados de SN-PCR indicaram uma ocorrência de BIV de 12,5% no estado. Os produtos amplificados foram confirmados como BIV por sequenciamento e a similaridade da sequência de nucleotídeos com a estirpe de referência (R-29) foi de 99%. Este é o primeiro estudo que relata a presença do BIV em Minas Gerais, Brasil. Os resultados indicam a necessidade de realizar um estudo detalhado sobre a prevalência da infecção por BIV no Brasil.(AU)

Equilíbrio acidobásico, parâmetros urinários e sanguíneos de gatos induzidos ao estresse e suplementados com composto antioxidante / Acid-base balance, urinary and blood parameters of cats stress-induced cats and supplemented with antioxidant compound

Este estudo teve como objetivo avaliar a suplementação do composto antioxidante comercial EconomasE (Alltech, Brasil ( AOX) sobre o equilíbrio acidobásico, os parâmetros urinários, o hemograma completo e a fragilidade osmótica de eritrócitos (FOE) de gatos estressados. Foram utilizados 24 gatos adultos (3,49±0,87kg), distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, com quatro níveis (0, 250, 500, 750mg de AOX/kg de alimento na matéria seca) e seis repetições, durante o período de 80 dias. Os gatos foram induzidos ao estresse por meio da presença de cães próximo ao recinto experimental (agente estressor; AE), do 61º dia até o final do experimento. A pressão parcial de dióxido de carbono (pCO2) e o bicarbonato (HCO3 -) aumentaram linearmente (P<0,05) conforme o aumento da ingestão de AOX. Os maiores valores de dióxido de carbono total (tCO2) (P<0,05) foram observados nos gatos alimentados com 500 e 750mg de AOX/kg de dieta. As concentrações de hemoglobina foram maiores nos animais alimentados com 250 e 500mg de AOX/kg de dieta. Os parâmetros urinários e da FOE foram semelhantes nos gatos em todas as dietas. Esses dados indicam que a suplementação com AOX apresenta efeitos benéficos no equilíbrio acidobásico e na concentração de hemoglobina de gatos induzidos ao estresse.(AU)

This study aimed to evaluate the supplementation of a commercial antioxidant EconomasE (Alltech, Brazil - AOX) on the acid-base balance, urinary parameters, red blood count (RBC) and erythrocyte osmotic fragility (EOF) of stressed cats. Twenty-four adult cats (3.49±0.87kg) were distributed in a completely randomized design with four levels (0, 250, 500, 750mg AOX/kg feed dry matter) and six replicates for a period of 80 days. Cats were induced to stress through the presence of dogs in the experimental environment (stressor agent; AE) from the 61th day to the end. Partial pressure of carbon dioxide (pCO2) and bicarbonate (HCO3) increased linearly (P<0.05) with increased intake of AOX. The highest values of total carbon dioxide (tCO2) (P<0.05) were observed in cats fed the 500 and 750mg AOX/kg diet. Hemoglobin concentration was higher (P<0.05) in animals fed the 250 and 500mg AOX/kg diet. The urinary parameters and EOF were similar among all diets. These data indicate that AOX supplementation has beneficial effects in acid-base balance and hemoglobin concentration of stress-induced cats.(AU)

Morfometria intestinal em codornas de corte alimentadas com treonina digestível / Intestinal morphometry in meat quails fed with digestible threonine

O objetivo deste estudo foi avaliar a morfometria intestinal por meio da inclusão de níveis de treonina digestível na dieta de codornas para corte em crescimento. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente ao acaso, em esquema fatorial: quatro níveis nutricionais e três segmentos do intestino com dez repetições. Foram coletadas amostras dos três segmentos do intestino delgado. As variáveis estudadas foram área e altura das vilosidades intestinais, profundidade de cripta e relação vilo e cripta. No estudo da altura da vilosidade, foi obtida interação significativa para todas as idades estudadas. A profundidade da cripta em codornas de corte aos 21 dias de idade mostrou-se significativa para as variáveis inclusão de treonina na dieta e para a porção do intestino estudada. Na profundidade da cripta aos 42 dias, ficou evidenciada uma interação significativa entre níveis de inclusão de treonina na dieta e porção do intestino delgado. No estudo da relação altura de vilosidade e profundidade de cripta em codornas aos 21 dias de idade, foram encontrados resultados significativos para a interação tratamento e porção do intestino. Aos 21 e aos 42 dias de idade, a suplementação de 1,04 e 0,78%, respectivamente, de treonina digestível na dieta promove melhores resultados para morfometria intestinal.(AU)

The aim of the study was to evaluate intestinal morphology data by including different levels of threonine in the diet of meat quails in the growing phase. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement: four nutritional levels and three intestinal segments with ten repetitions. Samples were collected to obtain morphometry data (villi and crypt) of the three segments of the small intestine (duodenum, jejunum, and ileum). In the study of the intestinal villus height a highly significant interaction was obtained for all ages studied. A crypt depth was evidenced at 42 days with a significant interaction between levels of inclusion of threonine in the diet and small intestine. In the study of the relationship villus height and depth crypt quails at 21 days of age, the results were significant for the interaction treatment (T) and part of the intestine. At 21 and 42 days of age, supplementation of 1.04 and 0.78% respectively of threonine in the diet promotes better outcomes for intestinal morphology.(AU)

Perfil sérico proteico de vacas Holandesas no período de transição / Serum protein profile of Holstein cows during the transition period

O objetivo deste trabalho foi avaliar, de forma longitudinal, o perfil sérico proteico de 13 vacas Holandesas durante o período de transição. Amostras de sangue (n=78) foram coletadas semanalmente, da segunda semana pré-parto (M-2) até a terceira semana pós-parto (M3), para determinação do perfil sérico proteico, por meio de teste bioquímico (proteínas séricas totais - PT) e eletroforese em gel de poliacrilamida SDS-PAGE, para as outras proteínas analisadas. Os valores de PT diminuíram de forma gradativa (P=0,000) de M-2 (6,4g/dL) a M0 (6,2g/dL), aumentando nos momentos subsequentes (M3=7,3g/dL). As concentrações da IgG de cadeia pesada (M-2=919,4; M-1=1074,5mg/dL) e de cadeia leve (M-2=393,9; M-1=466,7mg/dL) foram menores no pré-parto em relação ao pós-parto (M1=1283,3; M2=1374,2 e M3=1630,3 mg/dL para IgG pesada e M1=463,4; M2=573,7; M3=651,8mg/dL para IgG leve). Para a IgA, houve diminuição nos valores (P=0,001), de M-2 (51,9mg/dL) a M1 (34,0mg/dL), e aumento em M2 (45,4g/dL) e M3 (62,6g/dL). Os valores de haptoglobina (Hp) e ceruloplasmina (Cp) aumentaram (P=0,000) de M-2 (Hp=16,6mg/dL; Cp=8,6mg/dL) a M3 (Hp=60,9mg/dL; Cp=127,1mg/dL). A albumina apresentou ligeiras variações durante o período de transição (P=0,000), enquanto a transferrina sérica (P=0,101) e a glicoproteína ácida (P=0,105) foram estáveis. O escore de condição corporal (ECC) também foi analisado durante o período de transição, verificando-se diferença (P=0,003) entre M-2 (ECC=4,0) e M1 (ECC=3,0). Foi relatada ainda a ocorrência de distocias (4/13), retenção de placenta (1/13) e hipocalcemia (1/13) no dia da parição (M0) e infecções uterinas (5/13) e cetose (1/13) ocorridas no pós-parto. Concluiu-se, portanto, que houve aumento nas concentrações séricas de Hp e Cp e diminuição nos valores de imunoglobulina e transferrina em vacas Holandesas no período de transição, relacionados às doenças ocorridas nesse período e ao elevado ECC, promovendo modificações metabólicas e imunossupressão.(AU)

The aim of this study was to evaluate longitudinally the serum protein profile of 13 Holstein cows during the transition period. Blood samples (n=78) were taken weekly, from the second week before parturition (M-2) to the third week after parturition (M3) for determination of serum protein profile by biochemical tests (total serum protein - PT) and SDS-PAGE electrophoresis, for the other proteins analyzed. PT values decreased gradually (P = 0.000) from M-2 (6.4g/dL) to M0 (6.2g/dL), increasing in subsequent moments (M3 = 7.3g/dL). The concentrations of the heavy chain (M-2=919.4; M-1=1074.5mg/dL) and the light chain of IgG (M-2=393.9; M-1=466.7mg/dL) were lower in pre-calving compared to post calving (M1= 1,283.3; M2=1,374.2 and M3=1,630.3 mg/dL for the heavy chain, and M1=463.4; M2=573.7 and M3=651,8 mg/dL for the light chain of IgG). For IgA there was a decrease in the values (P=0.001), from M-2 (51.9mg/dL) to M1 (34.0mg/dL), and increase in M2 (45,4g/dL) and M3 (62,6g/dL). The values of haptoglobin (Hp) and ceruloplasmin (Cp) increased (P=0,000) from M-2 (Hp=16.6mg/dL; Cp=8.6 mg/dL) to M3 (Hp=60.9mg/dL; Cp=127.1mg/dl). Albumin showed slight variations during the transition period (P=0.000), while the serum transferrin (P=0.101) and acid glycoprotein (P=0.105) were stable. Body condition score (BCS) was also analyzed during the transition period, checking the difference (P=0.003) between M-2 (ECC= 4.0) and M1 (ECC=3.0). It was also reported the occurrence of dystocia (4/13), retained placenta (1/13) and hypocalcemia (1/13) on the day of calving (M0) and uterine infections (5/13) and ketosis (1/13) occurring in the post calving. In conclusion, there was an increase in serum Hp and Cp, and a decrease in the immunoglobulins and transferrin amounts in Holstein cows during the transition period, related to diseases occurring during this period and the high BCS, promoting metabolic changes and immunosuppression.(AU)

Indirect ELISA for diagnosis of Brucella ovis infection in rams / ELISA indireto para diagnóstico da infecção por Brucella ovis em carneiros

Brucella ovis is a major cause of epididymitis in sexually mature rams, resulting in subfertility, infertility, and economic losses for the sheep industry worldwide. The aim of this study was to develop an indirect ELISA (iELISA) using recombinant proteins, namely rBoP59 and rBP26, as antigens for serological diagnosis of B. ovis infection. The BoP59 and BP26 recombinant proteins were expressed in E. coli and purified by affinity chromatography. Antigenicity was tested by Western blot and iELISA. Standardization of iELISA was performed with 500ng and 1µg BoP59 and rBP26 per well, testing serum from uninfected and experimentally infected rams. rBP26 was effective in distinguishing positive from negative rams. The rBP26 iELISA developed in this study is the first to use a completely purified rBP26 as antigen resulting in high sensitivity (100%) and specificity (90.2%), and an overall accuracy equal to 1.0...

Brucella ovis é uma das principais causas de epididimite em carneiros sexualmente maduros, resultando em subfertilidade e infertilidade e consequentes perdas econômicas para a ovinocultura em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi desenvolver ELISA indireto (ELISAi), utilizando como antígeno proteínas recombinantes BoP59r e BP26r para diagnóstico da infecção por B. ovis. BoP59r e BP26r foram expressas em E. coli e purificadas por cromatografia de afinidade e a antigenicidade testada por Western blot e ELISAi. A padronização do ELISAi foi realizada testando 500 ng e 1 µg de BoP59r e BP26r por poço e soros de carneiros infectados e não infectados. A BP26r foi eficiente em diferenciar ovinos negativos de positivos. O ELISAi com BP26 desenvolvido neste estudo foi o primeiro a utilizar BP26 completamente purificada como antígeno, resultando em elevada sensibilidade (100%) e sensibilidade (90,2%), com acurácia igual a 1,0...

Morphometry and histomorphometry of the testis in crossbred pigs fed diets with different protein levels / Morfometria e histomorfometria do testículo em suínos híbridos recebendo dietas com diferentes níveis de proteína

Aiming to evaluate the effect of the diet protein content on testicular parameters in pigs, 21 non-gelded male Dalland pigs were used and randomly divided into three groups. Males belonging to groups G2 and G3 received a diet with crude protein levels of 15% below and above, respectively, in relation to G1 (control). At 210 days of age, animals were castrated, and testis and epididymis were collected for morphometric and histomorphometry analyses. No difference was observed in relation to the total length of seminiferous tubules (G1=3239.9±333,3m; G2=2989.4±171,7m and G3=3059.5±254.9m), population of Sertoli cell (G1=4.7±0.5x10(9); G2=4.3±0.3x10(9) and G3=4.7±0.5x10(9)), population (G1=31.6±5.58x10(9); G2=27.3±4.0x10(9) and G3=26.4±3.9x10(9)) and volume of Leydig cells (G1=1289.3±182.6µm³; G2=1179.1±85.4µm³ and G3=1133.3±37.8µm³) and sperm production (G1=5.9±0.9x10(9); G2=5.6±0.6x10(9) and G3=5.1±0.3x10(9)). Protein levels were sufficient to maintain spermatogenesis in different experimental groups. It can be concluded that the magnitude of variation in levels of protein used in different stages of development was not sufficient to promote significant changes in testicular development and spermatogenesis process in adult animals.

Avaliou-se o efeito do teor de proteína da dieta sobre características testiculares em suínos, utilizando-se 21 suínos da raça Dalland, distribuídos aleatoriamente em três grupos. Os animais do G2 e G3 receberam dieta com porcentagens de proteína bruta de 15% para mais e para menos, respectivamente, em relação ao G1 (controle). Aos 210 dias de idade, os animais foram orquiectomizados e os testículos e epidídimos foram coletados para análises morfométricas e histomorfométricas. Observou-se efeito significativo da porcentagem de proteína sobre o comprimento e a largura dos testículos, e nenhuma diferença foi identificada em relação ao comprimento total dos túbulos seminíferos (G1=3239,9±333,3m; G2=2989,4±171,7m e G3=3059,5±254,9m), à população de células de Sertoli (G1=4,7±0,5x10(9); G2=4,3±0,3 x10(9) e G3=4,7±0,5x10(9)), à população (G1=31,6±5,58x10(9); G2=27,3±4,0x10(9) e G3=26,4±3,9x10(9)) e ao volume das células de Leydig (G1=1289,3±182,6µm³; G2=1179,1±85,4µm³ e G3=1133,3±37,8µm³) e à produção espermática (G1=5,9±0,9 x10(9); G2=5,6±0,6x10(9) e G3=5,1±0,3x10(9)). Os percentuais de proteína foram suficientes para a manutenção da espermatogênese nos diferentes grupos. Pode-se concluir que a magnitude da variação dos níveis de proteína usada em diferentes fases do desenvolvimento não foi suficiente para promover alterações significativas no desenvolvimento testicular e no processo espermatogênico em animais adultos.

PCR em tempo real para detecção do vírus da doença de Aujeszky / Real time PCR for detection of Aujeszky's disease virus

O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma PCR em tempo real (qPCR) para o diagnóstico rápido e sensível da doença de Aujeszky. Os iniciadores amplificaram um fragmento de 123 pares de base do gene codificante da glicoproteína D. A qPCR foi testada em 25 amostras de cérebro de suíno positivas e 85 amostras negativas para DA no isolamento viral e na soroneutralização. A sensibilidade analítica foi calculada com acréscimo de um isolado brasileiro do SuHV-1 titulado em amostras de cérebro de suíno negativas na soroneutralização e na PCR. A técnica apresentou sensibilidade analítica de 10-0,5 TCID50/50µL. A qPCR foi capaz de distinguir reações inespecíficas devido a dímero de oligonucleotídeos iniciadores ou amplificações, além do alvo designado (evitando, assim, os falso-positivos), e de obter resultados rápidos.

The aim of this study was to validate a low-cost real-time PCR for a quick and sensitive diagnosis of the disease. The fluorofore used was a DNA intercalating agent, one of the cheaper detection systems. Primers amplified a 123 base pairs fragment of the gene coding for glycoprotein D. PCR was tested on 25 samples of pig brain positive for AD and 85 samples negative in viral isolation and serum neutralization. The detection limit was calculated on samples of pig brain contaminated with a Brazilian isolate of SuHV-1. The technique had a detection limit of 10-0,5 TCID50/50µL. PCR was able to distinguish nonspecific reactions due to primer dimers (thus avoiding false positives) and get faster results.

Inclusion of Yucca schidigera and zeolite in dog feed: influence on mineral excretion / Inclusão de Yucca schidigera e zeólita em alimentos para cães: influência sobre a excreção de minerais

This study aimed to evaluate the effects of adding Yucca schidigera and zeolite (Clinoptilolite) to feed (super premium and standard) for adult dogs on the apparent indigestibility coefficient of minerals. In the first assessment, 21 dogs were used, with average weight of 12.5kg±1.46 in seven treatments in two periods (super premium diet referred to as control and control with the addition of 125, 250, 375ppm Yucca schidigera and 0.5%, 0.75% and 1.0% zeolite). The second assessment was conducted with standard feed, using 21 experimental plots distributed in three treatments (standard diet referred to as control and control with the addition of 375ppm of Yucca schidigera and 1.0% zeolite). The additives did not affect the acceptability of feed and fecal characteristics in both assessments (P>0.05). With the exception of calcium, no minerals were affected by the inclusion of additives (P>0.05) in the experiment with super premium feed. In the assessment with standard feed, calcium as phosphorus and magnesium presented decreased excretion (P<0.05) with the inclusion of additives. It is possible to conclude that the inclusion of additives in the tested concentrations may interfere with the excretion of some minerals in the diet.

Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da inclusão de Yucca schidigera e zeólita (Clinoptilolita) em alimentos (super premium e standard) para cães adultos sobre o coeficiente de indigestibilidade aparente de minerais. No primeiro ensaio, foram utilizados 21 cães, com peso médio de 12,5kg±1,46, distribuídos em sete tratamentos em dois períodos (dieta super premium denominada controle e controle com adição de 125, 250, 375ppm de Yucca schidigera e 0,5%, 0,75% e 1,0% de zeólita). O segundo foi realizado com um alimento standard, utilizando-se 21 parcelas experimentais distribuídas em três tratamentos (dieta standard denominada controle e controle com adição de 375ppm de Yucca schidigera e 1,0% de zeólita). Os aditivos não afetaram a aceitabilidade do alimento e as características fecais nos dois ensaios (P>0,05). Com exceção do cálcio, nenhum mineral sofreu interferência da inclusão dos aditivos (P>0,05) no experimento com alimento super premium. No ensaio com alimento standard, tanto cálcio quanto fósforo e magnésio apresentaram redução na excreção (P<0,05) com a inclusão dos aditivos. Pôde-se concluir que a inclusão dos aditivos nas concentrações testadas pode interferir na excreção de alguns minerais da dieta.

Pseudorabies virus can be classified into five genotypes using partial sequences of UL44

Suid herpesvirus 1 (SuHV-1) is the causative agent of pseudorabies (PR), a disease of great importance due to the huge losses it causes in the swine industry. The aim of this study was to determine a method for genotyping SuHV-1 based on partial sequences of the gene coding for glycoprotein C (gC) and to elucidate the possible reasons for the variability of this region. A total of 109 gCsequences collected from GenBank were divided into five major groups after reconstruction of a phylogenetic tree by Bayesian inference. The analysis showed that a portion of gC (approximately 671 bp) is under selective pressure at various points that coincide with regions of protein disorder. It was also possible to divide SuHV-1 into five genotypes that evolved under different selective pressures. These genotypes are not specific to countries or continents, perhaps due to multiple introduction events related to the importation of swine.

PCR Multiplex para detecção dos principais herpesvírus neurológicos de ruminantes / Multiplex PCR for detection of Suid herpesvirus 1, Bovine herpesvirus 1, Bovine herpesvirus 5, Ovine herpesvirus 2

Desenvolveu-se uma PCR multiplex (mPCR) para diagnóstico diferencial de encefalite bovina causada por herpesvírus suíno 1 (SuHV-1), herpesvírus bovino 1 (BoHV-1), herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) e herpesvírus ovino 2 (OvHV-2). Os iniciadores foram projetados após alinhamento de sequências disponíveis no banco de genomas (GenBank) e a reação foi padronizada levando-se em consideração a concentração dos reagentes e os tipos diferentes de DNA polimerase. Após determinação da especificidade e sensibilidade, 65 amostras de encéfalo de bovinos com síndrome neurológica foram submetidas à análise. A sensibilidade analítica para detecção de BoHV-1, BoHV-5 e SuHV-1 foi, respectivamente, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL na reação multiplex. Das 65 amostras analisadas, 10 foram positivas para BoHV-5, uma para BoHV-1 e cinco para OvHV-2. A mPCR descrita neste trabalho mostrou-se uma técnica útil para o diagnóstico diferencial de enfermidades relacionadas ao sistema nervoso central de bovinos.

The aim of this study was to develop a multiplex PCR (mPCR) for the differential diagnosis of bovine encephalitis caused by the suid herpesvirus 1 (SuHV-1), bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) and ovine herpesvirus 2 (OvHV -2). The primers were designed after alignment of sequences available in GenBank and the reaction was developed by taking into account the concentration of reagents and different types of DNA polymerase. After determining the specificity and sensitivity to PCR, 65 brain samples from cattle with neurological syndrome were submitted to the reaction. The analytical sensitivity for detection of BoHV-1, BoHV-5 and SuHV-1 was, respectively, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL. Ten samples were positive for BoHV-5, one for BoHV-1, one for SuHV-1 and five for OvHV-2. The mPCR described here is a useful technique for the differential diagnosis of diseases related to the central nervous system of cattle.

Avaliação da nested PCR em comparação aos testes sorológicos IDGA e ELISA para o diagnóstico da anemia infecciosa equina / Evaluation of nested PCR compared with AGID and ELISA serological tests for equine infectious anemia diagnosis

Comparou-se a técnica nested PCR (nPCR) com os testes sorológicos IDGA e ELISA para o diagnóstico da anemia infecciosa equina. Amostras do DNA provenientes das células mononucleares do sangue periférico foram submetidas à amplificação do gene gag pela nPCR, que apresentou valores de sensibilidade e especificidade relativas de 90 por cento e 52,9 por cento, respectivamente, em relação à IDGA, e valores de 85,7 por cento e 49 por cento, respectivamente, em relação ao ELISA. Considerando-se os fatores referentes às limitações de cada técnica, pode ser sugerido o uso da nPCR como teste de diagnóstico complementar para AIE em amostras brasileiras.

The nested polymerase chain reaction (nPCR) technique was compared to AGID and ELISA serological tests for the diagnosis of Equine Infectious Anemia. DNA samples from the peripheral blood mononuclear cells were subjected to the amplification of the gag gene by nPCR, which showed relative sensibility and specificity values of 90.0 percent and 52.9 percent respectively, compared to the AGID and values of 85.7 percent and 49.0 percent, respectively, as compared to ELISA. Considering the factors concerning the limitations of each technique, the use of nPCR can be suggested as a complementary diagnostic test for EIA in Brazilian samples.

PCR duplex para diferenciação de amostras vacinais e selvagens do vírus da doença de Aujeszky / A duplex PCR for differentiation of wild and vaccine virus of Aujeszkyïs disease

A duplex PCR was developed to differentiate the wild-type virus from the attenuated virus used in vaccinations. The PCR was able to amplify fragments of 493bp for glycoprotein E (gE) gene and 207bp for glycoprotein B (gB) gene. The analytical sensitivity was determined by addition of a virus field sample titled in the brain samples of pigs. The standard virus strain Shope, the vaccine strain Bartha, and ten other field isolates were subjected to PCR. The PCR was able to amplify fragments of gE and gB in all field samples and only fragments of gB were amplified in the attenuated virus, as expected. The technique was able to detect up to 100.5 TCID50/50mL virus in samples of brain. Duplex PCR proved to be an important tool for differentiation of naturally-infected animals and animals vaccinated with the virus deleted for gE.

Gênero Pimenta: aspectos botânicos, composição química e potencial farmacológico / Pimenta genus: botanical aspects, chemical composition and pharmacological potential

A família Myrtaceae possui representantes de grande interesse medicinal e o gênero Pimenta é um dos que merecem destaque. A maioria das espécies desse gênero é nativa da América Central, com exceção da Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) L. R. Landrum, nativa nas regiões centro-oeste e sudeste do Brasil. O presente estudo teve como objetivo revisar aspectos botânicos, químicos e farmacológicos descritos na literatura sobre o gênero Pimenta. Os dados foram obtidos de artigos originais e revisões indexadas nas bases Periódicos Capes, ISI Web of Knowledge, Bireme e SciELO. As espécies desse gênero podem ser arbustivas ou arbóreas, possuem pelos unicelulares, folhas usualmente coriáceas, inflorescência em dicásio ou panícula e são distinguidas, principalmente, pela estrutura do ovário. As propriedades farmacológicas são conferidas, principalmente, pelos óleos essenciais que são constituídos, na maioria, por derivados fenilpropanóides, monoterpenos, aldeídos monoterpênicos e alcoóis monoterpênicos. Dentre as propriedades farmacológicas apresentadas por espécies desse gênero destacam-se as anti-hipertensivas, anti-inflamatórias, analgésicas, antimicrobianas e antioxidantes. Das quinze espécies de Pimenta conhecidas, a Pimenta dioica (L.) Merrill e a Pimenta racemosa (Miller) J. Moore são as espécies de maior importância econômica e, por esse motivo são as mais estudadas do ponto de vista químico e farmacológico.

The family Myrtaceae has representatives of great medical interest, and the genus Pimenta deserves attention. Most species of this genus are native to the Central America, except Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) L. R. Landrum, which is native to the Central-West and Southeast Brazilian Regions. This study aimed to review botanical, chemical and pharmacological aspects described in the literature for Pimenta genus. Information was obtained from original papers and reviews indexed in the databases "Periódicos Capes", ISI Web of Knowledge, "Bireme" and SciELO. This genus can present shrubs or trees, which have unicellular hairs, usually coriaceous leaves and dichasium or panicle inflorescence, and are mainly distinguished by the ovary structure. The pharmacological properties are mostly due to essential oils, mainly consisted of phenylpropanoid, monoterpene, monoterpenic aldehyde and alcohol derivatives. Among these properties, antihypertensive, anti-inflammatory, analgesic, antimicrobial and antioxidant ones are highlighted. Of the fifteen known Pimenta species, Pimenta dioica (L.) Merrill and Pimenta racemosa (Miller) J. Moore have the greatest economic importance and consequently have been the most chemically and pharmacologically studied.

In vitro studies of multiwalled carbon nanotube/ultrahigh molecular weight polyethylene nanocomposites with osteoblast-like MG63 cells

Carbon nanotubes are highly versatile materials; new applications using them are continuously being developed. Special attention is being dedicated to the possible use of multiwalled carbon nanotubes in biomaterials contacting with bone. However, carbon nanotubes are also controversial in regards to effects exerted on living organisms. Carbon nanotubes can be used to improve the tribological properties of polymer/composite materials. Ultrahigh molecular weight polyethylene (UHMWPE) is a polymer widely used in orthopedic applications that imply wear and particle generation. We describe here the response of human osteoblast-like MG63 cells after 6 days of culture in contact with artificially generated particles from both UHMWPE polymer and multiwalled carbon nanotubes (MWCNT)/UHMWPE nanocomposites. This novel composite has superior wear behavior, having thus the potential to reduce the number of revision hip arthroplasty surgeries required by wear failure of acetabular cups and diminish particle-induced osteolysis. The results of an in vitro study of viability and proliferation and interleukin-6 (IL-6) production suggest good cytocompatibility, similar to that of conventional UHMWPE (WST-1 assay results are reported as percentage of control ± SD: UHMWPE = 96.19 ± 7.92, MWCNT/UHMWPE = 97.92 ± 8.29 percent; total protein: control = 139.73 ± 10.78, UHMWPE = 137.07 ± 6.17, MWCNT/UHMWPE = 163.29 ± 11.81 µg/mL; IL-6: control = 90.93 ± 10.30, UHMWPE = 92.52 ± 11.02, MWCNT/UHMWPE = 108.99 ± 9.90 pg/mL). Standard cell culture conditions were considered as control. These results, especially the absence of significant elevation in the osteolysis inductor IL-6 values, reinforce the potential of this superior wear-resistant composite for future orthopedic applications, when compared to traditional UHMWPE.

Expressão da caderina na discondroplasia tibial / Cadherin expression in the tibial dyschondroplasia

By immunohistochemistry the expression of a pan-cadherin antibody that recognizes a wide variety of cadherins in chondrocytes from normal and tibial dyschondroplasia (TD) growth plates was compared. Surprisingly, an upregulated expression that was not expected in TD lesion chondrocytes was observed. The reason for this apparent upregulation is not clear. The increased expression may simply be due to the particular phenotype of lesion chondrocytes, and cadherin may be involved in apoptosis of chondrocytes of TD lesion. Another possibility, is that a low level of calcium in the lesion may be responsible for the observed upregulation. The results of the present study suggest that the formation of the dyschondroplastic lesion is not merely due to the impaired terminal differentiation of lesion chondrocytes and that other mechanisms are probably involved in TD etiology. Further studies will be necessary to provide insight into the precise nature of the condition.

Ocorrência do vírus da imunodeficiência felina e do vírus da leucemia felina em gatos domésticos mantidos em abrigos no município de Belo Horizonte / Occurrence of feline immunodeficiency virus and feline leukemia virus in Sheltered domestic cats of Belo Horizonte

Investigou-se a ocorrência da infecção pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV) e pelo vírus da leucemia felina (FeLV) em gatos domésticos, provenientes de dois abrigos, no município de Belo Horizonte. Amostras de sangue de 145 animais foram coletadas e testadas para detecção do FIV pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Destas amostras, 40 foram testadas para o antígeno p26 de FeLV por meio de ELISA. Observaram-se duas fêmeas (1,4 por cento) e quatro machos (2,8 por cento) positivos para FIV e nove fêmeas (22,5 por cento) e quatro machos (10,0 por cento) positivos para FeLV

The occurrence of the feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV) was investigated in domestic cats from two shelters of Belo Horizonte. Samples from 145 cats were collected and tested for FIV by the polymerase chain reaction (PCR). Forty out of 145 samples were tested for FeLV p27 antigen by a commercial ELISA kit. Two females (1.4 percent) and four males (2.8 percent) were positive for FIV. For FeLV tests, 13 cats (32.5 percent) were positive, being nine females (22.5 percent) and four males (10.0 percent)

Frequency of equine viral arteritis in Minas Gerais State, Brazil

Verificou-se a freqüência e a distribuição de eqüídeos soropositivos para arterite viral eqüina (AVE) em 10 Delegacias Regionais do IMA no estado de Minas Gerais, por meio da técnica soroneutralização. A taxa de animais reagentes foi 0,85 por cento (7/826) e em cada Delegacia Regional: Almenara (0,77 por cento), Montes Claros (1,09 por cento), Oliveira (2,12 por cento), São Gonçalo do Sapucaí (2,22 por cento), Teófilo Otoni (1,36 por cento) e Viçosa (1,72 por cento). O presente estudo indica a presença de animais soropositivos para AVE em diferentes regiões do estado de Minas Gerais

Anemia infecciosa eqüina: prevalência em eqüídeos de serviço em Minas Gerais / Equine infectious anemia: prevalence in working equids of livestock herds, in Minas Gerais, Brazil

Estimaram-se, no estado de Minas Gerais, a prevalência e a distribuição espacial da anemia infecciosa eqüina (AIE) em propriedades com eqüídeos de serviço. As amostras de sangue, de 6540 eqüídeos de 1940 rebanhos foram coletadas no período de setembro de 2003 a março de 2004, nos 853 municípios do estado. Utilizaram-se dois testes de laboratório em seqüência: ELISA, usando-se antígeno recombinante gp90, e imunodifusão em gel de ágar (IDGA). As prevalências foram de 5,3 por cento [IC=4,3 a 6,3 por cento] para rebanhos e de 3,1 por cento [IC=2,2 a 3,9 por cento] para animais. O estado de Minas Gerais foi considerado área endêmica para AIE. As mais altas prevalências para rebanhos e para animais foram encontradas na região Norte/Noroeste, seguida pela região Vale do Mucuri/Jequitinhonha.

Changes in cell shape and desmin intermediate filament distribution are associated with down-regulation of desmin expression in C2C12 myoblasts grown in the absence of extracellular Ca2+

Desmin is the main intermediate filament (IF) protein of muscle cells. In skeletal muscle, desmin IFs form a scaffold that interconnects the entire contractile apparatus with the subsarcolemmal cytoskeleton and cytoplasmic organelles. The interaction between desmin and the sarcolemma is mediated by a number of membrane proteins, many of which are Ca2+-sensitive. In the present study, we analyzed the effects of the Ca2+ chelator EGTA (1.75 mM) on the expression and distribution of desmin in C2C12 myoblasts grown in culture. We used indirect immunofluorescence microscopy and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) to analyze desmin distribution and expression in C2C12 cells grown in the presence or absence of EGTA. Control C2C12 myoblasts showed a well-spread morphology after a few hours in culture and became bipolar when grown for 24 h in the presence of EGTA. Control C2C12 cells showed a dense network of desmin from the perinuclear region to the cell periphery, whereas EGTA-treated cells showed desmin aggregates in the cytoplasm. RT-PCR analysis revealed a down-regulation of desmin expression in EGTA-treated C2C12 cells compared to untreated cells. The present results suggest that extracellular Ca2+ availability plays a role in the regulation of desmin expression and in the spatial distribution of desmin IFs in myoblasts, and is involved in the generation and maintenance of myoblast cell shape.