Purification and partial characterization of phospholipases A2 from Bothrops asper (barba amarilla) snake venom from Chiriguaná (Cesar, Colombia)

Components with phospholipase A2 activity were isolated by gel filtration and cationic exchange chromatography from the venom of Bothrops asper snakes from Chiriguaná, Colombia (9°22´N; 73°37´W). Five fractions were obtained by the gel filtration, and PLA2 activity was found in fraction 3 (F3). In the cationic exchange chromatography, F3 showed eight components with PLA2 activity. Six of these components appeared as one band in polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Fractions II and VII exhibited an optimal activity at pH 9 and 52ºC. The optimum calcium concentration for fraction II was 48 mM and for fraction VII, 384 mM. Both fractions showed thermal stability. Fraction II was stable at pH values between 2.5 and 9, and fraction VII, between 2.5 and 8. The Michaelis Menten constant (K M) was 3.5x10-3 M for fraction II and 1.6x10-3 M for fraction VII. The molecular weight was 16,000 Dalton for fraction II and 17,000 Dalton for fraction VII. Both isoenzymes did not show any toxic activity (DL50) at 5.3 and 4 µg/g. The two fractions showed different kinetic constant (K M), calcium requirement, and substrate specificity for haemolytic activity.

Estabilidad de la actividad neutralizante del antiveneno ofídico conservado a 4ºC y 16ºC contra el veneno de tayas (complejo Bothrops atrox-asper) de Colombia / Stability of the neutralizing activity of ophidic antivenom kept at 4ºC and 16ºC against the venom of tayas (complex Bothrops atrox-asper) of Colombia

En este trabajo se informa acerca de la determinación de la actividad neutralizante de la letalidad de varios lotes de antiveneno ofídico en forma líquida, producidos en el Instituto Nacional de Salud y almacenados en completa oscuridad a 4ºC y a 16ºC. El veneno usado para retar el antiveneno fue una mezcla de venenos de tayas (complejo Bothrops atrox-asper), procedentes de diferentes regiones de Colombia. Se estableció el porcentaje de la potencia remanente de los lotes para cada año y para cada temperatura de almacenamiento, para así corroborar la fecha de expiración del producto en forma líquida. Los resultados de este estudio muestran que el antiveneno conservado en las condiciones de oscuridad a 4ºC, luego de 3 años de almacenamiento mantiene casi la totalidad de la capacidad neutralizante (95 por ciento), mientras que el antiveneno almacenado bajo condiciones de oscuridad a 16ºC, luego de 2 años mantiene el 87 por ciento de su capacidad neutralizante. Así, recomendamos desechar el producto mantenido bajo estas condiciones a los dos años de fabricación