Estudio preliminar de la miocarditis chagásica aguda experimental y su relación con la administración de esteroides sexuales / Preliminary study of experimental acute Chagasic cardiomyopathy and its relation to sex steroid administration / Estudo preliminar de miocardite chagásica aguda experimental e sua relação com a administração de esteróides sexuais

Introducción. En nuestro modelo experimental, la infección aguda por Trypanosoma cruzi (T. cruzi) en ratas adultas cursa con una parasitemia poco evidente, mientras que en los animales prepúberes (PP) se registran parasitemias más elevadas. Estas discrepancias podrían asociarse a la inmadurez inmunológica que exhiben los animales más jóvenes, pero asimismo, a la diferente madurez sexual del huésped al momento de la infección. Siendo la testosterona (T) una hormona capaz de influir sobre las células del sistema inmune y en consecuencia modificar el curso de las infecciones parasitarias, nos propusimos evaluar el efecto de dosis fisiológicas de T sobre la miocarditis aguda en fase temprana en ratas PP. Material y métodos. Se inocularon 1 millón de T. cruzi al destete y dos dosis de T de 1 mg/kg de peso, previo al T. cruzi. Se realizaron los controles respectivos, incluido un grupo experimental que recibió bicalutamida, antagonista de la T (5 mg/kg/día) +T+T. cruzi. Se evaluó parasitemia a los 7, 10 y 14 días post infección (pi) y se realizó el estudio anátomo-patológico de corazón, timo y bazo a los 4, 7 y 14 días pi. Resultados. A los 14 días pi, los animales que recibieron dosis fisiológicas de T presentaron un incremento significativo en la parasitemia y desarrollaron una mayor esplenomegalia que el resto de los grupos infectados. El estudio histológico de esos grupos reveló una miocarditis de intensidad similar -moderada a intensa- y nidos de amastigotes, mientras que en los animales sacrificados al día 4 y 7, se observó nidos de amastigotes sin reacción inflamatoria. Los controles no presentaron alteraciones histológicas. Conclusiones. La administración de T en los animales PP, previo a la infección con T. cruzi, propició la replicación temprana del parásito, evidenciada por el aumento en la parasitemia; sin embargo, no fue capaz de modificar la lesión cardíaca aguda en fase temprana ni tardía.

Background. According to our experimental model, along the acute phase of Chagas illness, adult rats infected with Trypanosome cruzi (T. cruzi) presents very low and almost undetectable parasitemias, whereas in prepubertal animals (PP) parasitemias reported were higher than in the adult ones. These differences could be associated with the immunological immaturity exhibited by younger animals, but also owing to the different sexual maturity of the host at the time of infection. As testosterone (T) is a hormone that can influence immune system cells and thus modify the course of parasitic infections, we have evaluated the effect of physiological doses of T on early acute stage of myocarditis in rats PP. Methods and material. Two doses of T (1 mg/kg) were inoculated to weaning rats (prior infection) followed by the inoculation of 1 million of T. cruzi trypomastigotes. The proper controls were performed, including an experimental group which received a concomitant therapy of bicalutamide, an antagonist of T (5 mg/kg/day), plus T and T. cruzi inoculation. Parasitemia was assessed at 7, 10 and 14 days post infection (pi) and the anatomopathological studies of heart, thymus and spleen were also performed at 4, 7 and 14 days pi. Results. At 14 day pi, those animals receiving physiological doses of T showed a significant increase in parasitemia and developed a higher splenomegaly compare to the rest of the infected groups. The histological examination of these groups presented a myocarditis of similar intensity -moderate to intense-, and amastigotes nests, while at days 4 and 7, amastigotes nests were observed without inflammatory reaction. Controls did not present histological alterations. Conclusions. Administration of T in the PP animals prior to T. cruzi infection led to an early parasite replication, as evidenced by the increase in parasitemia, however, it was not able to modify the acute cardiac injury during the early or late stage.

Introdução. Em nosso modelo experimental, a infecção aguda pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) em ratos adultos cursos com parasitemia evidente pouco, enquanto que em animais pré-púberes (PP) são registrados parasitemias mais elevadas. Estas discrepâncias podem estar associadas à imaturidade imunológica exibidos por animais mais jovens, mas também para a diferente maturidade sexual do parasitado no momento da infecção. Como o hormônio testosterona (T) que pode influenciar as células do sistema imunológico e, assim, modificar o curso das infecções parasitárias, nós avaliamos o efeito de doses fisiológicas de T em estágio inicial miocardite aguda em ratos PP. Material e métodos. Um milhão de T. cruzi foram inoculados a desmame e duas doses de T de 1 mg / kg, antes a T. cruzi. Respectivos controles foram realizados, incluindo um grupo experimental que receberam bicalutamida, um antagonista da T (5 mg/kg/dia) + T + T. cruzi. Parasitemia foi avaliada aos 7, 10 e 14 dias após a infecção (ai) e realizado o estudo patológico do coração, timo e baço a 4, 7 e 14 dias ai. Resultados. Aos 14 dias ai, os animais que receberam doses fisiológicas de T mostraram um aumento significativo na parasitemia e desenvolveram uma maior esplenomegalia que outros grupos infectados. Exame histológico desses grupos revelou uma intensidade similar de miocardite -moderada a intensa-, e ninhos de amastigotas, enquanto em animais sacrificados nos dias 4 e 7, ninhos de amastigotas foram observados sem reação inflamatória. Os controles não apresentaram alterações histológicas. Conclusões. A administração de T nos animais PP antes da infecção com T. cruzi, levou à replicação inicial do parasita, como evidenciado pelo aumento da parasitemia, entretanto, não foi capaz de modificar a lesão cardíaca aguda na fase precoce ou tardia.

A high corticosterone/DHEA-s ratio in young rats infected with Trypanosoma cruzi is associated with increased susceptibility

We have previously established that young male rats are more susceptible to the effects of Trypanosoma cruzi infection than adult rats. To explore underlying age-associated differences in disease outcome, we simultaneously assessed hormone levels and cytokine release throughout the acute infection period in young and adult rats infected with T. cruzi. Young rats were inoculated with 1 x 10(6) and adult rats with 7 x 10(6) blood trypomastigotes, according to their relative body weight. At zero, seven, 14, 21 and 28 days after infection, blood was collected for the determination of gonadal and adrenal hormones, tumor necrosis factor α (TNF-α), interleukin (IL)-10 and specific IgM and IgG subtypes. Young animals displayed significantly higher parasitaemia values and an endocrine pattern that was characterised by elevated values in corticosterone (CT) and the CT/dehydroepiandrosterone-sulfate ratio, which favours immunosuppression and susceptibility. In contrast, adult male rats were able to restrict the parasite burden, which likely resulted from increased IgG antibody synthesis and oestradiol levels. Adult rats also showed a reduced TNF-α/IL-10 ratio and less tissue damage. We conclude that young animals exhibited increased vulnerability to T. cruzi infection compared with adults and this is associated with an unsuitable immunoendocrine milieu.

Evaluation of an attenuated Trypanosoma cruzi strain in rats: analysis of survival, parasitemia and tissue damage

El objetivo de este trabajo fue detectar infección y daño tisular en una línea endocriada de ratas, inducidos por formas vivas de una cepa de T. cruzi cultivada in vitro (TCC). Se inocularon: a) ratas cultivadas in vitro (TCC). Se inocularon: a) ratas lactantes (S), de 3-5 días de edad por vía i.p. con 10**6 TCC (S1), 10**7 TCC (S2) y 10**8 TCC (S3); b) ratas al destete, de 21-25 días de edad por vía s.c. con 10**6 TCC (W1), 10**7 TCC (W2) y 10**8 TCC (W3). Los cultivos tenían como máximo un 2// de trypomastigotes; c) testigos por vía i.p. o s.c. con 10**6 trypomastigotes sanguiíneos de la cepa Tulahuén (SC y WC); se incluyeron testigos normales. La sobrevida fue del 100// en S1, S2 y S3 y 0// en SC en el día 13 post-infección (p.i.). Estos animales murieron con signos de enfermedad de Chagas aguda. La sobrevida fue del 100// en el grupo W. En los primeros 30 días p.i. los parásitos fueron detectados en los grupos S1, S2, S3 y W1, W2 y W3 por búsqueda exhaustiva. Los parásitos se encontraron rápidamente en los testigos SC y WC hasta el día 13. Los xenodiagnósticos fueron positivos (5/5) a los 2 meses p.i. y negativos a los 6 meses p.i. (W1, W2, W3, 0/23; WC, 0/5) Tabla 1). Se observó un leve aumento de la frecuencia de miocarditis crónica focal en algunos animales infectados, independientemente a la dosis (S1, S2, S3, 26//; W1, W2, W3, 46//) que no fue significativo en comparación con la de los testigos y no alcanza el porcentaje de lesión obtenida habitualmente en WC (61,3//). La menor virulencia y patogenicidad observadas en las ratas, especie no estudiada hasta ahora, sugieren que la cepa TCC tiene una importante atenuación después de largo tiempo de cultivo in vitro

Influencia de la edad de la rata en la evolución de la infección com trypanosoma cruzi / Influence of the age of the rat on the course of infection with trypanosoma cruzi

En la primera parte de este trabajo se estudió en la fase aguda, la parasitemia y respuesta inmune humoral específica, en ratas de línea "1", inoculadas al destete con 1x10**6 T. cruzi vivos de la cepa Tulahuén (GD), y adultos jóvenes con 1x10**6 T. cruzi (GA) y con 7x10**6 T. cruzi, cantidad equivalente a la inoculada en los destetes según peso (GA-1). La parasitemia fue significativamente mayor en el GD que en los GA y GA-1. Por otro lado, el GD presentó bajos títulos de anticuerpos, en relación a los adultos con ambas concentraciones de T. cruzi, que tuvieron un comportamiento similar. En el período crónico se evaluaron, a los 180 días post-infección, los ECG y la histolatología de corazón en animales al destete y adultos, con sólo 1x10**6 T. cruzi. La frecuencia cardíaca en los animales infectados fue mayor que la de los testigos. La proporción de lesión cardíaca (miocarditis, pericarditis y/o fibrosis) fue superior en el GD y en el GA, con respecto al GT, y el GA presentó un 35,6% de fibrosis, significativamente diferente de los otros grupos. La lesión fue sobre todo leve, ventricular y no se visualizaron parásitos in situ. En síntesis, en la rata, en la fase aguda de la infección, se encontraron diferencias marcadas en serología y parasitemia según la edad del huésped; sin embargo, la patología miocárdica crónica fue similar, con la excepción de que 1/3 de las ratas adultas inoculadas presentaron fibrosis

La enfermedad del adyuvante en ratas infectadas experimentalmente con Trypanosoma cruzi / Adjuvant disease in rats experimentally infected with Trypanosoma cruzi

Se estudió la evolución de la artritis por adyuvante en ratas que habían sido infectadas previamente con Trypanosoma cruzi, con el objeto de evaluar su competencia inmunológica a través de la respuesta artrítica. La artritis por adyuvante se indujo en ratas adultas, endocriadas de ambos sexos, con 0.1 ml de adyuvante completo de Freund en la almohadilla plantar, en 2 lotes: a) inyectadas 90 días antes con 1 x 10***6 T. cruzi y b) testigos normales simultáneos. Se midieron, la lesión artrítica macroscópicamente con una escala semicuantitativa, y con microscopía óptica la histopatología de la lesión local y la del corazón, a los 180 días post-infección. La magnitud de las lesiones artríticas en las ratas con T. cruzi fue significativamente menor (p < 0.001) que la de los testigos, en todo el período. El infiltrado inflamatorio local, formado por linfocitos, plasmocitos y macrófagos fue significativamente menor (p < 0.001) en las ratas chagásicas, con respecto al de los testigos. Se postula que en las ratas que recibieron T. cruzi la respuesta artrítica menor podría deberse a una competición antigénica con los determinantes del parásito o a mecanismos inmunosupresores que interfieren en la producción de la entidad experimental

Efecto de extractos ricos en ARN inmune sobre algunos parámetros inmunopatológicos de ratas infectadas con Trypanosoma cruzi / Effect of extracts rich in immune RNA on some immunopathological parameters of rats infected with Trypanosoma cruzi

Se estudió el efecto de una inyección única de un extracto rico en ARN inmune (Ext-ARNi) (4 mg/100 g peso), en ratas inoculadas con T. cruzi viables, realizada 5 días antes que el desafío con los parásitos. Se midieron parasitemia en la fase aguda, nivel y cinética de anticuerpos en forma crónica; ECG y estudio histopatológico de corazón por microscopía óptica &P, a los 6 meses de evolución. No se visualizaron cambios en la parasitemia, el nivel de anticuerpos específicos mostró diferenciass puntuales y el ECG no se modificó con la presencia del Ext-ARNi. Sólo el porcentaje de lesión cardíaca (miocarditis, pericarditis y/o fibrosis) se redujo significativamente en las ratas que recibieron Ext-ARNi y T. cruzi (17,6%), en comparación con el grupo desafiado con T. cruzi (66,7%), y sin diferencias con los controles de Ext-ARNi (34,4%), y testigos (15,6%). Se postula que el extracto rico en ARN inmune podría modificar la "calidad" de los anticuerpos que se forman, los que protegerían al parásito haciéndolo menos inmunogénico provocando, consecuentemente, menos lesión cardíaca. No se descarta la participación de componentes celulares u otros efectos en la fisiopatología de este mecanismo