Comparison of hemocytes of V-instar nymphs of Rhodniusprolixus (Stål) and Rhodnius robustus (Larousse 1927), before and after molting / Comparación de los hemocitos de las ninfas de V instar de Rhodnius prolixus (Stål) and Rhodnius robustus, antes y después de la muda (Larousse 1927)

Background. The immune response of insects involves humoral factors and cellular elements known as hemocytes. There are different reports that explore the response of hemocytes to infections, but the effect that molting has on this response has not been explored so far. We hypothesized that there would be a change in the percentage of hemocytes as a response to the molting process. Objective. The aim of this work was to compare the hemogram (CBC), the formula, and the differential count of hemocytes in IV instar before molting and in V instar nymphs 24 hours after molting in two species: Rhodnius prolixus and Rhodnius robustus. Materials and methods. We assayed different staining methodologies including Giemsa, Alcian Blue pH 2.0, Alcian Blue pH 2.6, Gomori substrate, PAS (Schiff), Sudan Black and Papanicolau with positive controls for each one. In the Gomori staining, we observed lysosomes in the granulocytes and plasmatocytes, but the differentiation was better detected using Giemsa staining. Results. There were no statistically significant differences between the two species studied in plasmatocytes (p=0,053) or even in granulocytes (p=0,5). However, differences were significant in the prohemocytes (p=0,001) during the molting process in both Rhodnius prolixus and Rhodnius robustus. Conclusions. Significant differences in prohemocytes between nymphs of IV and V instar were detected. No significant differences in the amount of cells were observed between the two species and the two stages. These findings may be explained due to their role as precursor cell of prohemocytes.

Antecedentes. La respuesta inmune de los insectos involucra factores humorales y elementos celulares llamados hemocitos. Existen varios trabajos explorando la respuesta de los hemocitos frente a infecciones, pero no como respuesta al proceso de muda. Objetivo. Comparar el hemograma: la fórmula y el recuento diferencial de hemocitos de Rhodnius prolixus y Rhodnius robustus en ninfas de IV estadio antes de la muda y ninfas de V estadio 24 horas después de la muda. Materiales y métodos. Se ensayaron las coloraciones Giemsa, Alcian Blue pH 2.0, Alcian Blue pH 2.6, sustrato Gomori, PAS (Schiff), Sudán Negro, Papanicolau, con controles positivos para cada una. Con la coloración de Gomori se observaron lisosomas en los granulocitos y en plasmatocitos, pero la diferenciación se logró mejor con la coloración de Giemsa. Resultados. Los plasmatocitos fueron más abundantes en las ninfas de IV estadio de Rhodnius robustus y en las de V estadio de las dos especies, pero en las ninfas de V estadio de R. prolixus, el recuento de prohemocitos fue mayor; para los oenocitoides, esferulocitos y adipohemocitos el recuento no alcanzó al 1 %. En las dos especies no se encontraron diferencias estadísticamente significativas en plasmatocitos (p=0,05319), ni en granulocitos (p=0,5), entre las ninfas de IV y V estadio, pero fue significativa en prohemocitos (p=0,001). Conclusiones. Se detectaron diferencias significativas en prohemocitos entre las ninfas de IV y V estadio. No hubo un aumento significativo en el conteo de células en los diferentes estadios.

Prevalencia de helmintos en la planta de aguas residuales del municipio El Rosal, Cundinamarca / Helminth prevalence in a waste-water plant at El Rosal, Cundinamarca

Objetivo Determinar la prevalencia de huevos de helmintos en lodos, agua residual cruda y tratada, provenientes de un sistema de tratamiento de aguas residuales del municipio el Rosal, Cundinamarca. Metodología Se tomaron 30 muestras de agua residual, y 10 de lodos en la Planta El Rosal, durante 10 semanas. Las muestras de aguas y lodos se procesaron siguiendo los métodos de BAILENGER, y el método de la Norma Oficial Mexicana, respectivamente. La viabilidad de los huevos se determinó por el método de Victórica & Galván y la Norma Oficial Mexicana. Resultados Los datos fueron analizados con estadística descriptiva. El 100 % de las muestras de agua residual sin tratar evidenció presencia de huevos, encontrándose al menos un huevo viable de helminto/litro en el 90 % de las mismas. El 90 % de las aguas residuales tratadas fueron positivas para la presencia de huevos, encontrándose que el 70 % presentaba al menos 1 huevo viable. Todas las muestras de agua residual cruda que se vierten directamente a la quebrada, fueron positivas a helmintos, igual situación se encontró al momento de realizar la prueba de viabilidad. Todos los lodos fueron positivos para helmintos, encontrándose que en el 100 % de estos, al menos un huevo fue viable. Conclusión El uso de estas aguas para riego de hortalizas, y el uso de estos lodos como abono, representa un riesgo potencial para la salud pública. Los lodos solo pueden ser usados en actividades forestales, siempre y cuando no estén en contacto con humanos.

Objective Assessing helminth egg prevalence in sludge and raw and treated wastewater from a wastewater treatment system located in the village of El Rosal, Cundinamarca. Methodology 30 wastewater and 10 sludge samples from the El Rosal plant were taken during a 10-week period. The sludge and water samples were processed according to the Bailinger and the official Mexican standard methodology, respectively. Egg viability was determined by the method described by Victórica & Galván and the Mexican official standard. Results Descriptive statistics were used for analysing data. 100 % of the untreated wastewater samples showed the presence of eggs and at least one viable helminth egg/litre was found in 90 % of them. 90 % of the treated wastewater samples were positive for the presence of eggs, finding that 70 % had at least one viable egg. All raw wastewater samples being dumped directly into the stream were positive for helminths; the same situation was found at the time of the viability test. All sludge samples were positive for helminths, finding that 100 % of these had at least one viable egg. Conclusion Using this water for crop irrigation and using the sludge as fertiliser is a potential risk for public health. The sludge can only be used in forestry activities, as long as it does not come into contact with humans.

Estudio comparativo de pruebas serológicas para el diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina: nota técnica / Comparative study of serological test for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis: technical note

El objetivo del presente estudio consistió en comparar la concordancia entre los resultados obtenidos por las técnicas IFI, ELISA y Western Blot en 72 sueros caninos procedentes de siete municipios de la zona endémica de leishmaniasis visceral zoonótica (LVZ) del departamento del Tolima (Colombia). Se utilizó como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum MHOM/CO/CL044B para IFI, ELISA y WB, y el antígeno rK39 para una prueba de ELISA disponible comercialmente. Se encontró que la concordancia entre las diferentes técnicas comparadas fue menor del 16 por ciento (k<16 por ciento), lo que sugiere que las pruebas no son consistentes y por lo tanto, no son aceptables como método de diagnóstico en el presente estudio. La baja asociación de las pruebas serológicas utilizadas en el diagnóstico de L. infantum sugiere que es necesario desarrollar estudios que permitan establecer un algoritmo de pruebas diagnósticas en el país para confirmar el estado real de la infección en los animales y de esta forma orientar eficientemente los recursos de salud pública destinados para el control de la enfermedad.

The goal of present study was to compare the agreement between the results obtained by ELISA, IFI and WB tests in 72 canine serums from the South of the Tolima Department (a visceral leishmaniasis endemic area). The Colombian Leishmania infantum MHOM/CO/CL044B strain was used as antigen for ELISA, IFI and WB test, and the rK39 antigen for the commercial ELISA test. The agreement among the compared techniques was smaller than 16 percent (k<16 percent), suggesting that the tests are not consistent and therefore not acceptable as a diagnostic tool in this study. The low association between the serological tests used in diagnosing Leishmania infantum suggested the need for further studies aimed at establishing an algorithm for diagnostic tests in Colombia for confirming the real state of the animals´ infection and thereby efficiently orientating public health resources allocated for controlling visceral leishmaniasis.

Leishmaniasis Visceral Canina: pruebas diagnósticas no identifican Estados Reales de la infección / Canine Visceral Leishmaniasis: diagnostic tests do not detect real state of the infection

Objetivos Establecer la capacidad de las pruebas serológicas de Inmunofluorescencia indirecta (IFAT) e Inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA), para detectar el estado real de la infección en leishmaniasis visceral canina (LVC). Métodos Un total de 211 perros criollos localizados en el sur del Departamento del Tolima, zona endémica para la leishmaniasis visceral, fueron evaluados por medio de examen clínico y serológico, usando como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B. Así mismo, con la finalidad de establecer reacciones cruzadas o coinfecciones, se evaluó la reactividad de los sueros ante antígenos específicos de Trypanosoma cruzi, por medio de la prueba Western Blot (WB). La frecuencia de LVC fue del 44,1 por ciento (93/211) y 50,2 por ciento (103/211) mediante IFAT y ELISA respectivamente. Resultados La seroreactividad ante antígenos específicos de T. cruzi fue del 1,42 por ciento (3/211). La concordancia de las técnicas serológicas fue baja (K=12,1 por ciento) y a pesar de la presencia de signos clínicos en los animales evaluados, las razones de prevalencia halladas, demostraron que no hay asociación entre la ocurrencia de las manifestaciones clínicas y la seropositividad a las pruebas diagnósticas. Conclusiones La baja asociación de las pruebas serológicas utilizadas en el diagnóstico de Leishmania infantum, sugiere que es necesario desarrollar estudios que permitan establecer un algoritmo de pruebas diagnósticas en el país para confirmar el estado real de la infección de los animales y de esta forma orientar eficientemente los recursos de Salud Pública destinados al control de la enfermedad.

Objectives Establishing indirect immunofluorescence (IFAT) and enzyme-inked immunoassay (ELISA) serological tests' ability to detect canine visceral leishmaniasis (CVL) infection. Methods 211 cross-bred dogs from the south of the Tolima department (a visceral leishmaniasis endemic area) were evaluated by clinical and serological exams, using the Colombian Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B strain as antigen. Sera reactivity to Trypanosoma cruzi- specífic antigens was evaluated by Western blot (WB) for establishing crossed-reactions or coinfections. CVL frequency was 44 ,1 percent (93/211) by IFAT and 50,2 percent (103/211) by ELISA. Results Seroreactivity to T. cruzi-specific antigens was 1 ,42 percent (3/211). Agreement between the serological techniques was low (K=12 ,1 percent) and, in spite of clinical signs being present in the animals being evaluated, the prevalence ratios found demonstrated the lack of association between the occurrence of the clinical manifestations and the diagnostic tests' seropositivity. Conclusions The low association between the serological tests used in diagnosing Leishmania infantum suggested the need for further studies aimed at establishing an algorithm for diagnostic tests in Colombia for confirming the real state of the animals' infection and thereby efficiently orientating public health resources allocated for controlling canine visceral leishmaniasis.