Marcado con 99m de liposomas convencionales y su evaluación biológica / 99mTc-labeling and biological evaluation of conventional liposomes

Introducción. Los liposomas son sistemas supramoleculares autoensamblables preparados ad hoc, compuestos de fosfolípidos y colesterol, diseñados para transporte de fármacos o radionucleidos. El 99mTc es el radionucleido más empleado por sus propiedades físicas apropiadas para la adquisición de imágenes y estudios en pacientes en el área de medicina nuclear (emisor gamma puro con E = 140 KeV , t1/2 = 6 horas). Objetivo. Evaluar la potencialidad de liposomas convencionales marcados con 99mTc como agente de diagnóstico de procesos tumorales. Método. La composición estudiada es: fosfatidilcolina, dioleilfosfatidiletanolamina y colesterol (1.1:0.4:1 relación molar). Se utilizó como agente reductor SnF2, en diferentes cantidades para optimizar el marcado. La pureza radioquímica y eficiencia de marcado se evaluaron con sistemas cromatográficos ITLC-SG FM NaCl 0,9 por ciento, ITLC-SG FM Piridina:ácido acético:agua (3:5:1.5 v/v). Se adquirieron imágenes a 1 h post inyección de los liposomas en ratones sanos y portadores de tumor mamario espontáneo. Resultados. El liposoma marcado mostró estabilidad durante 24 h, siendo la cantidad óptima de reductor 138 ug. La mejor captación en tumor fue a 1 h post administración del radiofármaco en los estudios centellográficos. Conclusiones. El método optimizado permite obtener liposomas marcados con 99mTc en forma sencilla, eficiente y estable. Estos radiofármacos mostraron un comportamiento fiscoquímico y biológico adecuado como agentes de diagnóstico tumoral requiriéndose estudios posteriores para su confirmación.

Background. Liposomes are self-assembled supramolecular systems, composed by phospholipids and cholesterol, designed for the transportation of drugs or radionuclides. Physical properties of 99mTc (pure gamma emitter with E = 140 KeV, t1/2= 6 hours) makes it useful for scintigraphic imaging. Purpose. The goal of this study was to evaluate 99mTc labeled conventional liposomes as potential diagnostic agents for malignant lesions. Methods. The studied liposome composition was hosphatidylcholine: dioleilphosphatidylcholine: cholesterol (1.1:0.4:1molar rate). In order to optimize the labeling, SnF2 was used as reducing agent. Radiochemical purity and labeling efficiency were evaluated using ascending thin layer chromatography. Scintigraphy images were obtained at 1 hour post-injection of labeled liposomes to healthy mice and with spontaneous breast tumors. Results. Labeled liposomes showed stability during 24 hours, being 138 ug the optimal amount of reducing agent for the technique used. Conclusions. The described method allows the production of 99mTc labeled liposomes in a simple, efficient and stable way. The radiopharmaceutical showed a physicochemical and biological behavior that allows its potential use as a tumor imaging agent, although further studies are required to confirm this issue.

Benznidazole vs benznidazole in multilamellar liposomes: how different they interact with blood components?

In spite of its widespread use, benznidazole's (BNZ) toxicity and low efficacy remains as major drawbacks that impair successful treatments against Chagas disease. Previously, attempting to increase the selectivity and reduce its toxicity on infected tissues, multilamellar liposomes (MLV) composed of hydrogenated soybean phosphatidylcholine (HSPC): distearoyl-phosphatidylglycerol (DSPG): cholesterol (CHOL) 2:1:2 mol:mol loaded with BNZ (MLV-BNZ) were designed. In this work we compared different properties of MLV-BNZ with those of BNZ. Opposite to other hydrophobic drugs, the results indicated that slight changes of BNZÎs association degree to proteins and lipoproteins should not modify the percentage of unbound drug available to exert pharmacological action. On the other hand, when loaded in MLV, BNZ reduced its association to plasma proteins in 45 percent and became refractory to the sinking effect of blood, dropping 4.5 folds. Additionally, when loaded in MLV, BNZ had higher volume distribution (160 ± 20 vs 102 ± 15 ml/kg) and total clearance (35.23 ± 2.3 vs 21.9 ± 1.4 ml/h.kg), and lower concentration-time curve (7.23 ± 0.2 vs 9.16 ± 0.5 æg.h/ml) than BNZ. Hence, these studies showed that for MLV-BNZ, the amount of BNZ can be substantially increased, from 25 to 70 percent, being this formulation more rapidly cleared from circulation than free drug; also due to the lower interaction with blood components, lower side effects can be expected.

In vitro activity of Etanidazole against the protozoan parasite Trypanosoma cruzi

We investigated the in vitro action of an hydrosoluble 2-nitroimidazole, Etanidazole (EZL), against Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas disease. EZL displayed lethal activity against isolated trypomastigotes as well as amastigotes of T. cruzi (RA strain) growing in Vero cells or J774 macrophages, without affecting host cell viability. Although not completely equivalent to Benznidazole (BZL), the reference drug for Chagas chemotherapy, EZL takes advantage in exertingits anti-T. cruzi activity for longer periods without serious toxic side effects, as those recorded in BZL-treated patients. Our present results encourage further experiments to study in depth the trypanocidal properties of this drug already licensed for use in human cancers.

Vectores lipidicos. Nuevas estrategias aplicadas a la terapia génica / Lipid vectors. New strategies for gene therapy

A diferencia del resto de las moléculas biológicas, los fosfolípidos son capaces de autoensamblarse espontáneamente. Con ellos es relativamente simples generar estructuras selladas extremadamente estables, de tamaño, forma y empaquetamiento controlables, llamadas liposomas. En este artículo revisaremos el uso de liposomas para generar vectores que mejoren los procesos de transfección en células eucarioticas, tanto in vivo como in vitro. Empleando vectores lipídicos, es potencialmente posible enviar selectivamente un segmento de AND a cualquier sitio del cuerpo, forzarlo a ingresar al interior celular y aun controlar el destino intracelular de la carga transportada. La clave del éxito de la transfección por medio de vectores lipídicos radica en que protegen mecánicamente al AND de la degradación plasmática, ofreciendo a la vez la oportunidad de controlar su biodistribuición, independientemente del tamaño del segmento de AND que se quiera expresar. Asimismo, son no carcinogénicos y pobremente inmunogénicos. Los avances en la química de sintésis de lípidos permitirán construir vectores cada vez más eficientes, que capitan con los altos niveles de transfección de los vectores virales, sumado a las ventajas de extrema versatilidad, facilidad de preparación y bioseguridad propias de la moléculas autoensamblables.