Immunofluorescent distribution of SIRT1, SIRT2, SIRT6 protein in the skin of SKH1 mouse after ultraviolet B irradiation for 10 Weeks / Distribución inmunofluorescente de la proteína SIRT1, SIRT2, SIRT6 en la piel del ratón SKH1 después de la irradiación ultravioleta B durante 10 semanas

SUMMARY: The skin, located on the outermost part of the body, is always exposed to external stimuli such as sunlight. The exposure of skin to ultraviolet B (UVB) radiation from sunlight is known to be a major environmental factor in inducing photoaging. After exposure to UVB, an increase in reactive oxygen species can affect the expression and activity of many critical proteins depending on the duration and dose of the UVB radiation. Mammalian sirtuins (SIRTs), which are nicotinamide dinucleotide-dependent protein deacetylases, are well known for playing a role in cellular longevity. However, little is known about SIRT protein alterations in keratinocytes upon UVB irradiation according to SIRT subtypes. Therefore, in this study, the distribution of non-mitochondrial SIRT1, SIRT2, and SIRT6 proteins was investigated by immunofluorescence (IF) staining of the skin of SKH-1 mice (n=12) after UVB irradiation for 10 weeks. After UVB irradiation for 10 weeks, the IF of both SIRT1 and SIRT6 was significantly increased in the UVB-irradiated mice group (UG), but the difference in SIRT2 IF was not statistically significant between the control group (CG) and the UG. The translocation of both SIRT1 and SIRT6 IF from the nucleus to the cytoplasm of keratinocytes was observed in the upper epidermis of the UG, whereas SIRT2 IF was localized in the cytoplasm of keratinocytes in the epidermis in both the CG and the UG. The translocation of SIRT1 and SIRT6 IF from the nucleus to the cytoplasm of keratinocytes may account for the physiologically protective action of keratinocytes against UVB irradiation. However, the exact role of SIRT1 and SIRT6 translocation in keratinocytes, where SIRT1 and SIRT6 shuttle from the nucleus to the cytoplasm, is not well known. Therefore, further studies are needed to understand the molecular mechanisms of SIRT1 and SIRT6 translocation in keratinocytes upon UVB irradiation.

La piel, situada en la parte más externa del cuerpo, está siempre expuesta a estímulos externos como la luz solar. Se sabe que la exposición de la piel a la radiación ultravioleta B (UVB) de la luz solar es un factor ambiental importante en la inducción del fotoenvejecimiento. Después de la exposición a los rayos UVB, un aumento en las especies reactivas de oxígeno puede afectar la expresión y la actividad de muchas proteínas críticas según la duración y la dosis de la radiación UVB. Las sirtuinas de mamíferos (SIRT), que son proteínas desacetilasas dependientes de dinucleótidos de nicotinamida, son bien conocidas por desempeñar un papel en la longevidad celular. Sin embargo, se sabe poco sobre las alteraciones de la proteína SIRT en los queratinocitos tras la irradiación UVB según los subtipos de SIRT. Por lo tanto, en este estudio, se investigó la distribución de las proteínas SIRT1, SIRT2 y SIRT6 no mitocondriales mediante tinción de inmunofluorescencia (IF) de la piel de ratones SKH-1 (n = 12), después de la irradiación con UVB durante 10 semanas. Posterior a la irradiación, el IF de SIRT1 y SIRT6 aumentaron significativamente en el grupo de ratones irradiados con UVB (UG), pero la diferencia en SIRT2 IF no fue estadísticamente significativa entre el grupo control (CG) y el UG. La translocación de SIRT1 y SIRT6 IF desde el núcleo al citoplasma de los queratinocitos se observó en la epidermis superior de la UG, mientras que SIRT2 IF se localizó en el citoplasma de los queratinocitos en la epidermis, tanto en el GC, como en la UG. La translocación de SIRT1 y SIRT6 IF del núcleo al citoplasma de los queratinocitos puede explicar la acción protectora fisiológica de estos contra la radiación UVB. Sin embargo, el papel exacto de la translocación de SIRT1 y SIRT6 en los queratinocitos, donde SIRT1 y SIRT6 se trasladan desde el núcleo al citoplasma, no se conoce bien. Por lo tanto, se necesitan más estudios para comprender los mecanismos moleculares de la translocación SIRT1 y SIRT6 en los queratinocitos tras la irradiación UVB.

Immunohistochemical distribution of calcium binding proteins in the cochlear nuclear complex of circling mice / Distribución inmunohistoquímica de proteínas de unión a calcio en el complejo nuclear coclear de ratones circulantes

SUMMARY: The term "circling mouse" refers to an animal model of deafness, in which the mouse exhibits circling, head tossing, and hyperactivity, with pathological features including degenerated spiral ganglion cells in the cochlea, and the loss of the organ of Corti. The cochlear nuclear (CN) complex, a part of the auditory brain circuit, is essential to process both ascending and descending auditory information. Considering calcium's (Ca2+) importance in homeostasis of numerous biological processes, hearing loss by cochlear damage, either by ablation or genetic defect, could cause changes in the Ca2+ concentration that might trigger functional and structural alterations in the auditory circuit. However, little is known about the correlation of the central nervous system (CNS) pathology in circling mice, especially of the auditory pathway circuit and Ca2+ changes. This present study investigates the distribution of Ca2+- binding proteins (CaBPs), calbindin D-28k (CB), parvalbumin (PV), and calretinin (CR) by using a free floating immunohistochemical method inthe CN of the wild-type mouse (+/+), the heterozygous mouse (+/cir), and the homozygous (cir/cir) mouse. CaBPs are well known to be an important factor that regulates Ca2+ concentrations. Compared with the dorsal and ventral cochlear nuclei of +/+ and +/ cirmice, prominent decreases of CaBPs' immunoreactivity (IR) in cir/cirmice were observed in the somas, as well as in the neuropil. The present study reportson the overall distribution and changes in the immunoreactivity of CaBPs in the CN of cir/cirmice because ofa hearing defect. This data might be helpful to morphologically elucidate CNS disorders and their relation to CaBPs immunoreactivity related to hearing defects.

RESUMEN: El término "ratón circulante" se refiere a un modelo animal con sordera, en el que el ratón exhibe hiperactividad, movimientos circulares y movimientos de la cabeza, con características patológicas que incluyen células ganglionares espirales degeneradas en la cóclea, un canal de Rosenthal vacío y la pérdida del órgano de Corti. El complejo nuclear coclear (CN), una parte del circuito cerebral auditivo, es esencial para procesar la información auditiva tanto ascendente como descendente. Considerando la importancia del calcio (Ca2+) en la homeostasis de numerosos procesos biológicos, la hipoacusia por daño coclear, por ablación o por defecto genético, podría provocar cambios en la concentración de Ca2+que pueden desencadenar alteraciones funcionales y estructurales en el circuitoauditivo. Sin embargo, existe poca información de la correlación de la patología del sistema nervioso central (SNC) en ratones circulantes, especialmente del circuito de la víaauditiva y los cambios de Ca2+. Este estudio nvestiga la distribución de proteínas de unión a Ca2+ (CaBP), calbindina D-28k (CB), parvalbúmina (PV) y calretinina (CR) mediante el uso de un método inmunohistoquímico de flotaciónlibre en el CN del ratón de tiposalvaje (+/+), el ratón heterocigoto (+/cir) y el ratón homocigoto (cir/cir). Se sabe que los CaBP son un factor importante que regula las concentraciones de Ca2+. En comparación con los núcleos cocleares dorsal y ventral de los ratones +/+ y +/ cir, se observaron disminuciones prominentes de la inmunorreactividad (IR) de CaBPs en los ratonescir/cir en los somas, asícomo en el neuropilo. El presente estudio informa sobre la distribución general y los cambios en la inmunorreactividad de CaBP en el CN de ratones cir/cir debido a un defecto auditivo. Estos datos podrían ser útiles para dilucidar morfológicamente los trastornos del SNC y su relación con la inmunorreactividad de CaBP relacionada con los defectosauditivos.