Detection of Helicobacter pylori in oral yeasts from students of a Chilean university

SUMMARY INTRODUCTION: Nearly 73% of the Chilean population is infected with Helicobacter pylori (H. pylori), a factor predisposing for gastric cancer. Recent studies have demonstrated the presence of this pathogen within yeasts, suggesting that this fact can directly influence the failure of a treatment, transmission, and reinfection. AIM: To detect the presence of H. pylori inside oral yeasts isolated from students of the University of Concepción (Chile). METHODS: 72 samples, obtained from the oral cavity using cotton swabs were incubated in YPD broth for 48h at 37°C and posteriorly seeded in Sabouraud Dextrose agar plus chloramphenicol at the same temperature and for the same time. Yeasts isolated were observed microscopically (wet mounting and Gram-stained) and identified using microbiological techniques. Intracellular H. pylori detection was performed by the amplification of 16S rDNA by PCR. RESULTS: Oral yeasts were detected in 24 samples (33.3%), being C. albicans (79.2%) the most frequent species, followed by C. dubliniensis (12.4%), C. krusei (4.2%), and C. tropicalis (4.2%). When analyzed by PCR, 15 of the 24 oral yeasts 62.5 % were positive for H. pylori 16S rDNA. From the 15 individuals positive for yeast harboring H. pylori, 81% of them reported stomach discomfort, and the presence of the bacteria was diagnosed at some moment in 20% of them. CONCLUSION: The intracellular presence of the H. pylori in oral yeasts suggests an endosymbiotic relationship of these microorganisms, which could favor H. pylori transmission and reinfection in the gastrointestinal tract.

RESUMO INTRODUÇÃO: Quase 73% da população chilena estão infectadas pelo Helicobacter pylori (H. pylori), fator predisponente ao câncer gástrico. Estudos recentes demonstraram a presença desse patógeno em leveduras, sugerindo que esse fato pode influenciar diretamente a falha de um tratamento, transmissão e reinfecção. OBJETIVO: Detectar a presença de H. pylori em leveduras orais isoladas de estudantes da Universidade de Concepción (Chile). MÉTODOS: 72 amostras, obtidas da cavidade oral utilizando cotonetes, foram incubadas em caldo YPD por 48h a 37°C e posteriormente sementes em ágar Sabouraud Dextrose mais cloranfenicol na mesma temperatura e ao mesmo tempo. Leveduras isoladas foram observadas microscopicamente (montagem úmida e corada por Gram) e identificadas utilizando técnicas microbiológicas. A detecção intracelular de H. pylori foi realizada pela amplificação do 16S rDNA por PCR. RESULTADOS: Leveduras orais foram detectadas em 24 amostras (33,3%), sendo C. albicans (79,2%), a espécie mais frequente seguida por C. dubliniensis (12,4%), C. krusei (4,2%) e C. tropicalis (4,2 %) Quando analisadas por PCR, 15 das 24 leveduras orais 62,5% foram positivas para o H. pylori 16S rDNA. Dos 15 indivíduos positivos para leveduras que abrigam H. pylori, 81% deles relataram desconforto estomacal e a presença da bactéria foi diagnosticada em algum momento em 20% deles. CONCLUSÃO: A presença intracelular do H. pylori em leveduras orais sugere uma relação endossimbiótica desses microrganismos, o que poderia favorecer a transmissão e a reinfecção do H. pylori no trato gastrointestinal.

Detection of intracellular Helicobacter pylori in Candida. SPP from neonate oral swabs

SUMMARY BACKGROUND: There is evidence of detection of Helicobacter pylori (H. pylori) in the stool of newborns and in the yeast that colonizes the oral cavity of this age group. However, there is a lack of research to confirm it. This study proposes to determine the existence of the bacteria at an early age, specifically in newborns. OBJECTIVE: To identify intracellular H. pylori in oral yeasts and to detect antigens of the bacteria in newborn stools. METHODOLOGY: Cross-sectional and descriptive study. Samples were obtained from infants (oral swab and meconium). Identification of yeast species was performed using the following techniques: CHROMagar Candida, Germinal Tube Test and API Candida Identification System, then the yeasts were observed by light microscopy and fluorescence. Detection of H. pylori antigen in meconium and PCR were performed to amplify specific genes of the bacterium (rRNA16S, cagA, vacA s1a, vacA s1b, vacA s2, vacA m1, vacA m2 and dupA). RESULTS: Intracellular H. pylori was detected in yeast of the species Candida glabrata (C. glabrata) isolated from an oral swab of a newborn. CONCLUSION: The results of this study evidenced the existence of intracellular H. pylori in newborns.

RESUMO ANTECEDENTES: Há evidências de detecçâo de Helicobacter pylori (H. pylori) em fezes de recém-nascidos, como também dentro de leveduras que colonizam a cavidade oral dessa faixa etária. No entanto, faltam investigações que confirmem esses achados. OBJETIVO: Identificar H. pylori intracelular em leveduras de origem oral e detectar antígenos dessa bactéria em fezes neonatais. METODOLOGIA: Estudo transversal e descritivo. As amostras foram obtidas de bebês (zaragatoa oral e mecônio). As identificações das espécies de leveduras foram realizadas utilizando as seguintes técnicas: CHROMagar Candida, teste de tubo germinativo e sistema de identificação API Cândida. As leveduras foram observadas por microscopía óptica e fluorescência. Realizou-se a detecçâo de antígeno de H. pylori em mecônio e PCR para a amplificação de genes específicos desta bactéria (rRNA16S, cagA, vacA s1a, vacA s1b, vacA s2, vacA m1, vacA m2 e dupA). RESULTADOS: Foi detectado H. pylori intracelular em leveduras da espécie Candida glabrata (C. glabrata) isoladas a partir de zaragatoas oral de um recém-nascido. CONCLUSÃO: Os resultados deste estudo evidenciaram a existência interna de levedura de H. pylori em recém-nascidos.