Prevalencia de infección por Trypanosoma cruzi en escolares de Salta y Chaco, Argentina / Seroprevalencia of Trypanosoma cruzi infection in school-age children from localities in Salta and Chaco, Argentina / Prevalência de infecção por Trypanosoma cruzi em crianças em idade escolar de Salta e Chaco, na Argentina

El objetivo del trabajo consistió en identificar la seroprevalencia de la infección por Trypanosoma cruzi en niños en edad escolar en localidades de las provincias de Salta y Chaco. Se trabajó en 44 escuelas de la ciudad de Salta, en parajes de San Carlos; en 10 escuelas de La Unión y en 7 escuelas de Taco Pozo. El trabajo tiene un diseño de corte transversal. La toma de muestra se realizó por punción capilar con equipos Serokit, y la confirmación de los casos seropositivos o dudosos por punción venosa, y obtención de suero, para realizar HAI y ELISA. Los casos seropositivos confirmados fueron tratados con Benznidazol® durante 60 días en dosis de 5-7mg/kg/ día. Para el análisis estadístico se elaboraron tablas con frecuencias absolutas y relativas. Se analizaron 17.884 escolares y se detectaron159 seropositivos, siendo la mayor seroprevalencia en la localidad de La Unión y la menor en la ciudad de Salta. Se aplicó tratamiento a 93 niños (71,54 %) de la ciudad y en el ámbito rural se trataron todos los casos. La vía de infección vectorial fue la de mayor predominio en las madres (64,47%). Se concluye que aunque la seroprevalencia fue menor en la ciudad de Salta que en las zonas rurales, es necesario continuar con la vigilancia.

The aim of this work was to identify seroprevalence of Trypanosoma cruzi infection in school-age children who live in localities from Salta and Chaco. This work was conducted in the following schools: 44 located in Salta city, 10 in La Unión, 7 in Taco Pozo, and several in rural spots around San Carlos town. The design was cross-sectional and the samples were taken by capillary punction with Serokit equipment. Seropositive cases were confirmed by HAI and ELISA performed on serum obtained by venous punction. Confirmed seropositive cases were treated with Benznidazol® for 60 days in doses of 5-7 mg/kg/day. Tables with absolute and relative frequencies were made for statistical analysis. It resulted that the number of school-aged children analyzed was 17,884, 159 being seropositive. The highest seroprevalence was detected in La Unión and the lowest in Salta city. Treatment was given to 93 children (71.54%) from Salta city, while every child was treated in rural areas. Infections in mothers was vector-borne mainly (64.47%). It can be concluded that even though seroprevalence was lower in the city of Salta than in rural areas, it is important to continue monitoring for Chagas disease.

O objetivo do trabalho consistiu em identificar a soroprevalência da infecção por Trypanosoma cruzi em crianças em idade escolar em localidades das províncias de Salta e de Chaco. O trabalho foi realizado em 44 escolas da cidade de Salta, em paragens de San Carlos; em 10 escolas de La Unión e em 7 escolas de Taco Pozo. O mesmo tem um desenho de corte transversal. Tomada de amostra: foi realizada por punção capilar com equipamentos Serokit e a confirmação dos casos soropositivos ou duvidoso por punção venosa e obtenção de soro, para realizar HAI e ELISA. Os casos soropositivos confirmados foram tratados com Benznidazole® durante 60 dias em doses de 5-7 mg/kg/dia. Para a análise estatística foram preparadas tabelas com frequências absolutas e relativas. Analisaram-se 17.884 crianças detectando 159 soropositivos, sendo a maior soroprevalência na cidade de La Unión e a menor na cidade de Salta. Aplicou-se o tratamento a 93 crianças, (71,54%) da cidade e na área rural se trataram todos os casos. A via de infecção vetorial foi a de maior predominância nas mães (64,47%). Conclui-se que embora a soroprevalência tenha sido menor na cidade de Salta do que nas áreas rurais, é necessário continuar com a vigilância.

Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para el control terapéutico de la infección crónica por trypanosoma cruzi / Use of the polymerase chain reaction (pcr) for the therapeutic control of chronic trypanosoma cruzi infection

En las normas actuales de tratamiento etiológico de la fase crónica tardía de la enfermedad de Chagasen Argentina, Brasil y la Organización Mundial de la Salud, se recomienda controlar la eficaciaterapéutica con pruebas serológicas y parasitológicas convencionales. Sin embargo las primerassuelen continuar positivas 10 años o más luego del tratamiento, y las segundas son, en general, debaja sensibilidad en esta etapa de la enfermedad. La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)al ser más sensible que los exámenes parasitológicos convencionales, podría informar con unacobertura mayor si hubo falla terapéutica. Hemos ofrecido tratamiento con benznidazol (5 mg/kg/día, por 60 días) a 138 pacientes de 16 a 35 años de edad, infectados crónicamente con Trypanosomacruzi. La eficacia terapéutica se controló con PCR periódicas, hemocultivo y serología convencionalen dos grupos de pacientes: uno (GT, 57 pacientes) que aceptó y cumplió el tratamiento y otro(GNT, 37 pacientes) que lo rechazó. Antes de la administración de benznidazol la PCR mostró unasensibilidad diagnóstica de 41 por ciento (57/138 pacientes) y el hemocultivo 7,2 por ciento (10/138). Sesenta mesespostratamiento el grupo GT mostró una positividad de PCR acumulada de 28,1 por ciento (16/57) y el grupoGNT 54,1 por ciento (20/37; p=0.0016). A pesar de que la sensibilidad diagnóstica de PCR es limitada, lanegatividad de pruebas repetidas con método normatizado podría evidenciar disminución de laparasitemia o probable curación en 71,9 por ciento de los pacientes tratados, lo que habría que confirmar conel seguimiento serológico...

Current norms for the etiological treatment of chronic Chagas disease, recommended by WHOor currently in force for Argentina and Brazil, advise the control of therapeutic efficacy usingconventional serological and parasitological tests. However, serology usually remains positive 10 ormore years after treatment and parasitological tests are insensitive in the chronic stage. PolymeraseChain Reaction (PCR) is more sensitive than parasitological tests and could provide earlier evidenceof therapeutic failure. We offered benznidazole treatment (5 mg/kg/day, 60 days) to 138 patients(age=16 to 35 years old), chronically infected with Trypanosoma cruzi. Therapeutic efficacy waschecked with periodic PCR, haemoculture and conventional serology in two groups of patients: One(TG) accepting and complying with treatment and the other (NTG) rejecting it. Before benznidazoleadministration, PCR displayed a diagnostic sensitivity of 41.3 percent (57/138) and haemoculture 7.2 percent(10/138). Sixty months after treatment, TG displayed a cumulated PCR positivity of 28.1 percent (16/57)and NTG 54.1 percent (20/37; p=0.0166). Even though the sensitivity of PCR is limited, repeated negativeresults of a standardized method may reveal lower parasitaemia or probable cure, in 71.9 percent of treatedpatients, to be confirmed with serological follow up...

Diagnóstico de infección por Trypanosoma cruzi en Centros de Atención Primaria de Salta, Argentina / Diagnosis of Trypanosoma cruzi infection in Primary Public Health Centers of Salta, Argentina / Diagnóstico de infecção por Trypanosoma cruzi nos Postos de Saúde de Salta, Argentina

La Enfermedad de Chagas causada por el parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi, constituye un grave problema de Salud Pública. En Argentina, se controla sistemáticamente la sangre a transfundir, la donación de órganos y se ha disminuido notablemente la transmisión vectorial. El objetivo de este proyecto fue implementar el uso del equipo para recolección de sangre capilar y conservación en glicerina (Serokit) en los servicios de enfermería de los Centros de Atención Primaria de la Salud en la ciudad de Salta a fin de conocer la seroprevalencia de infección por Trypanosoma cruzi en pacientes que concurren a los mismos. Para ello se realizó el par serológico HAI y ELISA en las muestras conservadas en Serokit y luego en muestras de sangre tomadas por punción venosa para confirmación. Durante dos años de trabajo se analizaron 1647 pacientes que concurrieron a 28 Centros de Salud, resultando 1,7% (29/1647) seropositivos. El Valor Predictivo Positivo fue 93,50% y el Valor Predictivo Negativo fue 99,8%. Todos los niños seropositivos fueron tratados con Benznidazol. Se concluye que el uso de Serokit para la toma y conservación de muestras para posterior diagnóstico de infección por Trypanosoma cruzi es recomendable en Centros de Atención Primaria de la Salud que no cuentan con laboratorio.

Chagas disease is caused by the hemoflagelate parasite Trypanosoma cruzi, and represents a main concern in public health. In Argentina, blood transfusion and organ donation are systematically controlled for T. cruzi infection, and vectorial transmission has dropped significantly. The aim of this project was to implement the use of the equipment for collecting capillary blood and conservation in glycerine (Serokit) in the nursery service of Primary Health Care Centers (PHCC) in the city of Salta, and to know the seroprevalence of T. cruzi infection in PHCC patients. To that aim, the serological pair HAI and ELISA was carried out in samples preserved in Serokit, followed by analysis of blood samples taken by venous punction to confirm the results. During a two-year period, 1647 patients that were assisted at 28 PCHC were analyzed, resulting in 1.7% (29/1647) seropositive samples. Positive Predictive Value was 93.5% and Negative Predictive Value was 99.8%. Every seropositive child was given Benznidazole treatment. It can be concluded that use of Serokit for taking and preserving samples to diagnose serologically T. cruzi infection is recommended in PHCC that lack their own biochemistry laboratory.

A doença de Chagas produzida pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi constitui um grave problema para a Saúde Pública. Na Argentina, o controle sistemático do sangue para transfusão e o do órgão para transplantar, fez com que diminuísse notavelmente a transmissão vetorial. O objetivo deste projeto foi implementar o uso do equipamento para coleta de sangue capilar e conservação em glicerina (Serokit) nos serviços de enfermagem dos Postos de Atenção Primaria da Saúde da cidade de Salta a fim de conhecer a soroprevalência de infecção com Trypanosoma cruzi em pacientes que são atendidos nos mesmos. Foi realizado o par sorológico HAI e ELISA nas amostras conservadas em Serokit e depois nas amostras de sangue retiradas através de uma punção venosa para a confirmação. Durante dois anos de trabalho, foram analisados 1647 pacientes que foram atendidos nos 28 Postos de Saúde, resultando 1.7% (29/1647) soropositivos. O Valor Preditivo Positivo foi Tripae 93.50% e o Valor Preditivo Negativo foi de 99.8%. Todas as crianças soropositivas foram medicadas com Benznidazol. A conclusão é que o uso de Serokit para a tomada e conservação de amostras para posterior diagnóstico de infecção por Trypanosoma cruzi é recomendável nos Postos de Atenção Primária da Saúde onde não existe a disponibilidade de laboratórios.

Histologic and histomorphometric study of bone repair under acute Trypanosoma cruzi infection in rats

Trypanosoma cruzi (T. cruzi) is an intracellular protozoan pathogen that causes American trypanosomiasis (Chagas disease). The aim of this study was to evaluate the histopathological effects of acute infection by T. cruzi on bone repair. Wistar rats were used throughout. The animals were assigned to two groups: Control Group (CG n =20) and Experimental Group (EG n =20). All the animals were anesthetized, at t0 the first lower right molar was extracted. The EG animals were inoculated subcutaneously at t0 with 0.1 mL of 105 trypomastigotes of the virulent strain Tulahuen of T. cruzi. The CG animals were administered an equivalent volume of saline solution subcutaneously. The animals in both groups were euthanized at 15 days post-infection and tooth extraction. The mandibles were resected, fixed in formalin solution, radiographed, decalcified and embedded in paraffin. Bucco-lingually oriented sections were obtained at the level of the mesial tooth socket of the first lower molar, and stained with hematoxylin-eosin. Total alveolar volume (TV) and bone volume (TBV/TV) in the apical third of the tooth socket were evaluated histomorphometrically. The histological analysis revealed an alteration in post-extraction bone tissue repair in animals infected by T. cruzi. A reduction in osteogenic activity was observed concomitant with a rise in quiescent and eroded bone surfaces. Histomorphometric evaluation revealed a significant reduction (19%) in total alveolar volume (TV) and bone volume (TBV/TV) (24%) in the apical third of the tooth socket in animals infected with T. cruzi in comparison to non-infected animals (p<0.05). The results obtained using this experimental model showed decreased osteogenesis in bone tissue repair under acute Trypanosoma cruzi infection in rats.

El Trypanosoma cruzi (T. cruzi) es un protozoario intracelular que causa Trypanosomoniasis Americana (Enfermedad de Chagas). El objetivo del presente trabajo fue el estudio histopatologico del efecto de la infeccion aguda por Trypanosoma cruzi sobre la reparacion del tejido oseo. Se utilizaron ratas Wistar macho que fueron asignadas a dos grupos: Grupo Control (GC n =20) y Grupo Experimental (GE n =20). Los animales de ambos grupos, bajo anestesia general intraperitoneal, fueron sometidos a t0, a exodoncia del primer molar inferior derecho, en el GE fueron inoculados,a t0 por via subcutanea en la region inguinal izquierda con 0.1 mL de 105 tripomastigotes de la cepa virulenta Tulahuen de Trypanosoma cruzi. A los animales del GC se les administro el volumen equivalente de solucion salina por via subcutanea. A los animales de ambos grupos se les practico la eutanasia a los 15 dias. Se resecaron las mandibulas, se fijaron en solucion de formol al 10%, se radiografiaron, se descalcificaron y se incluyeron en parafina. Se obtuvieron cortes orientados en sentido vestibulo-lingual a nivel del alveolo mesial del primer molar inferior derecho y se colorearon con hematoxilina-eosina para su posterior estudio histologico e histomorfometrico. Histologicamente se observo una menor actividad osteogenica a expensas de un incremento de las superficies quiescentes y de las superficies erosivas en el GE. En la evaluacion histomorfometrica se detecto disminucion estadiasticamente significativa del volumen oseo total (19%) y del volumen trabecular en el tercio apical del alveolo (24%) en el GE con respecto al GC (p<0.05). Los resultados obtenidos en este modelo experimental evidencian una disminucion de la osteogenesis en la reparacion osea en ratas con infeccion aguda por Trypanosoma cruzi.

Aporte de las técnicas de biología molecular al diagnóstico de la enfermedad de Chagas / Contribution of the molecular biology technics at Chaga's disease

El diagnóstico parasitológico en la Enfermedad de Chagas se ve dificultado por la escasez de parásitos en el material diagnóstico y por los inconvenientes que surgen al emplear las técnicas serológicas para descubrir casos agudos, casos de enfermedad congénita o bolsas de transfusión contaminadas. La Reacción en Cadena de Polimerasas (PCR) ha superado la sensibilidad de las técnicas convencionales de diagnóstico parasitológico porque no sólo es capaz de detectar indirectamente a los parásitos como unidad, sino también a segmentos específicos de ADN que están representados centenares de veces en cada parásito. Presentamos aquí las experiencias que hemos podido realizar hasta ahora para detectar al Trypanosoma cruzi en bolsas de transfusión y en sangre de neonatos de madres chagásicas. En 52 bolsas de transfusión analizadas por 2 métodos serológicos y por PCR encontramos que esta técnica (como así también el hemocultivo y el xerodiagnóstico) tiene poca concordancia (52 por ciento) con la serología. La técnica PCR confirmó 12 de 14 muestras seronegativas (85,7 por ciento es especificidad), pero sólo 15 de 38 seropositivas (39,5 por ciento), lo que indicaría que las pruebas serológicas no señalan, necesariamente, aquellas bolsas que contienen parásitos. La detección precoz del Trypanosoma cruzi en la sangre del recién nacido de madre chagásica es esencial para diagnosticar y tratar la Enfermedad de Chagas congénita, pero con frecuencia los métodos empleados fallan por falta de sensibilidad. Hemos aplicado la técnica PCR y el hemocultivo en forma sistemática a 34 hijos de madres chagásicas, detectando hasta ahora 2 casos congénitos que no habían sido diagnosticados por el método usual de microstrout. El alto costo del método PCR lo hace muy poco recomendable para el tamizaje de los bancos de sangre. Sin embargo, para el diagnóstico de Chagas congénito, esta técnica sería económicamente rentable si se usa como complemento de otros métodos en los centros de diagnóstico perinatal de las zonas endémicas.