Comparative evaluation of pyrogens tests in pharmaceutical products

Realizou-se a comparação de metodologia para avaliação de pirogênios em produtos farmacêuticos. Otimizou-se o teste da hipertermia em coelhos elaborando a curva dose-resposta com o 2º Padrão Internacional de endotoxinas bacterianas, com base na qual determinou-se a concentração de 13,81 UE/mL por kg de peso corporal, necessária para produzir aumento de temperatura de 0,5ºC. Observou-se que o limite de 0,5ºC forneceu resultados comparáveis com as doses pirogênicas para o homem. Padronizou-se o teste do lisado de amebócitos do Limulus (LAL) com determinação do ponto final cromogênico e por geleificação, que foram utilizados para a avaliação de produtos farmacêuticos obtendo-se resultados concordantes. Avaliaram-se as respostas de reagentes LAL reativos e não-reativos a b-glicanos, observando diferenças que poderiam reprovar amostras com base em resultados falso-positivos. Executou-se o teste de interferências, validou-se o procedimento e estabeleceu-se a máxima diluição válida para produtos farmacêuticos sem especificações farmacopéicas. Os resultados enfatizam a importância e as limitações dos ensaios preconizados para avaliação da pureza e controle da qualidade de produtos farmacêuticos parenterais, contribuindo para aprimorar as metodologias existentes no contexto da redução e substituição dos modelos animais.

Avaliaçäo da atividade e caracterizaçäo de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos / Activity evaluation and characterization of recombinant human erythropoietin in pharmaceutical products

Realizou-se a identificaçäo de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos comerciais por eletroforese em gel de poliacrilamida e detecçäo com anticorpos específicos, demonstrando-se típica banda larga, semelhante ao padräo de rhEPO da Farmacopéia Européia. Igualmente por focalizaçäo isoelétrica e imunodetecçäo, observaram-se 5-6 isoformas características de acordo com o laboratório produtor. A avaliaçäo de potência efetuada através de ensaio biológico em camundongos normocitêmicos forneceu valores entre 67,6 por cento e 119,4 por cento em relaçäo à declarada. A precisäo dos ensaios combinados, calculada pela ponderaçäo, variou de 200 a 389. Os testes de endotoxinas bacterianas, toxicidade e pH apresentaram valores variáveis conforme o lote. Concluiu-se destacando a importância dos testes e ensaios de controle para assegurar a qualidade lote a lote e garantir a eficácia terapêutica dos produtos farmacêuticos