Hacia un mayor desarrollo de la investigación para el futuro del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) de la Universidad Nacional de Asunción / Towards further development of research for the future of the Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) de la Universidad Nacional de Asunción

Estas son mis opiniones respecto a lo que considero son características deseables de las ciencias naturales en países en desarrollo con la esperanza de mostrar un camino posible hacia el desarrollo de la investigación para el futuro del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) de la Universidad Nacional de Asunción en el cual me encuentro trabajando como asesor científico enviado por la Agencia de Cooperación Internacional del Japón (JICA) como voluntario senior. Considero que los requerimientos para las ciencias naturales en países en desarrollo son de alguna manera diferentes a los de los países avanzados. Los investigadores de los países en desarrollo, especialmente aquellos que se dedican a las ciencias aplicadas, pueden realizar investigación que no sea completamente nueva en el mundo pero nueva para sus países con la condición de que esas investigaciones contribuyan a una mejor calidad de vida de sus pueblos. En este sentido, los investigadores de países en desarrollo dedicados a las ciencias aplicadas siempre deberían estar conscientes de cual es el propósito real de sus investigaciones. Aunque es solo una impresión que tengo del IICS, los investigadores con los que me reuní no discuten libremente unos con otros sobre los temas científicos que están desarrollando. Pienso, sin embargo, que la libre discusión es un prerrequisito para el establecimiento de una ciencia progresiva, como se puede ver en Estados Unidos y Europa. Otro punto que deseo enfatizar es la necesidad real de fortalecer la capacidad de las instituciones de solicitar y obtener financiaciones nacionales e internacionales para el mantenimiento de las actividades científicas progresivas y para estímulo de los jóvenes que en el futuro llevarán sobre sus hombros las ciencias naturales en los países en desarrollo.

Estas son mis opiniones respecto a lo que considero son características deseables de las ciencias naturales en países en desarrollo con la esperanza de mostrar un camino posible hacia el desarrollo de la investigación para el futuro del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) de la Universidad Nacional de Asunción en el cual me encuentro trabajando como asesor científico enviado por la Agencia de Cooperación Internacional del Japón (JICA) como voluntario senior. Considero que los requerimientos para las ciencias naturales en países en desarrollo son de alguna manera diferentes a los de los países avanzados. Los investigadores de los países en desarrollo, especialmente aquellos que se dedican a las ciencias aplicadas, pueden realizar investigación que no sea completamente nueva en el mundo pero nueva para sus países con la condición de que esas investigaciones contribuyan a una mejor calidad de vida de sus pueblos. En este sentido, los investigadores de países en desarrollo dedicados a las ciencias aplicadas siempre deberían estar conscientes de cual es el propósito real de sus investigaciones. Aunque es solo una impresión que tengo del IICS, los investigadores con los que me reuní no discuten libremente unos con otros sobre los temas científicos que están desarrollando. Pienso, sin embargo, que la libre discusión es un prerrequisito para el establecimiento de una ciencia progresiva, como se puede ver en Estados Unidos y Europa. Otro punto que deseo enfatizar es la necesidad real de fortalecer la capacidad de las instituciones de solicitar y obtener financiaciones nacionales e internacionales para el mantenimiento de las actividades científicas progresivas y para estímulo de los jóvenes que en el futuro llevarán sobre sus hombros las ciencias naturales en los países en desarrollo.

Immunohistochemical localization of Gnathostoma spinigerum larval antigens by monoclonal antibodies: II. Electron microscopy.

Immunocytochemical localization of antigens in advanced third-stage larvae of Gnathostoma spinigerum (GsAL3) was studied by immunogold labeling method using seven G. spinigerum specific monoclonal antibodies (MAbs), FS-3D11, SS-5H5, SK-6C4, SK-4E1, SK-7G6, SK-8D4 and SA-9B5. All these MAbs belong to the IgG1 subclass and only FS-3D11 and SS-5H5 recognize carbohydrate epitopes. The paraformaldehyde-fixed GsAL3 were embedded in Lowicryl K4M medium, and the gold colloidal particles used were 15 nm in size. When the worm sections were probed with FS-3D11, the gold particles appeared to concentrate specifically on the intestinal brush border. When SS-5H5 was applied, the particles were scattered densely over the brush border and in the cytoplasm of epithelial cells. The rest of the MAbs which recognize protein determinants exhibited a lack of labeling. The results suggested that the carbohydrate antigenic determinants recognized by the two MAbs are the most stable and most abundant particularly in the intestine of GsAL3. These results also confirmed the previous finding that the most antigenic site of GsAL3 is the intestine.

Purification of Gnathostoma spinigerum larval antigens by monoclonal antibody affinity chromatography.

An immunoaffinity column was prepared by coupling a partially purified Gnathostoma spinigerum-specific IgG1, MAb SK-6C4 (5 mg/ml) to CNBr-activated Sepharose 4B. Ten milliliters of approximately 0.3 mg/ml of crude soluble G. spinigerum larval antigens (GsAL3) were loaded onto the affinity column at a flow rate of about 5 ml/hour. Elution of the bound antigens was accomplished using 50 mM diethylamine-HCI containing 0.15 M NaCL, pH 11.5. The average amount of eluted antigens obtained by one passage of crude GsAL3 (1-4 mg) through 4 to 8 ml of column matrix was 143 micrograms (range, 67 - 414 micrograms). The minimal amount of purified GsAL3 detectable by ELISA using MAb SK - 6C4 (100 micrograms/ml) was 50 ng/ml. The SK - 6C4 affinity-purified GsAL3 was found to be relatively pure and immunologically specific as determined by SDS-PAGE and Western blotting, respectively.

Immunohistochemical localization of Gnathostoma spinigerum larval antigens by monoclonal antibodies: I. Light microscopy.

Immunohistochemical localization of antigens in advanced third-stage larvae of Gnathostoma spinigerum (GsAL3) was studied by indirect enzyme immunostaining using 7 G. spinigerum specific monoclonal antibodies, FS-3D11, SS-5H5, SK-6C4, SK-4E1, SK-7G6, SD-8D4 and SA-9B5. All these MAb belong to the IgG1 subclass and only FS-3D11 and SS-5H5 recognize carbohydrate determinants. Each MAb exhibited a different reaction pattern and staining intensity in sectioned GsAL3. FS-3D11 bound primarily to the intestinal brush border whereas SS-5H5 reacted with various tissues of the parasite including intestinal epithelium and brush border, lateral cords, muscle, pseudocoel, and cuticle. SK-6C4 predominantly stained muscle, however, SK-4E1 and SK-7G6 exhibited a lack of labeling. SD-8D4 bound to the cuticle and the lateral cords whereas SA-9B5 reacted primarily with the pseudocoel. These results suggest that antigens sharing common epitopes are present in various structures of the larvae with the intestine being the most antigenic site. The present data also suggest that certain GsAL3 antigens recognized by the MAb obtained in this study are sensitive to formalin fixation and/or paraffin embedding since for 2 out of the 7 MAb staining was negative.