Emergence of multidrug-resistant bacteria isolated from surgical site infection in dogs and cats / [Emergência de bactérias multirresistentes isoladas da infecção no sítio cirúrgico em cães e gatos]

Surgical site infections (SSIs) and antimicrobial resistance among pathogens causing SSI are a growing concern in veterinary hospitals. One major reason, the widespread use of antimicrobials, has led to increased incidence of SSIs. This study identified bacteria and resistance profiles to antimicrobials in the SSI cases diagnosed at the Surgical Clinic of Small Animals in the Veterinary Hospital, Federal University of Viçosa, Brazil. The main genus identified was Staphylococcus, followed by Escherichia, Enterococcus, Bacillus, Shigella, Citrobacter, Proteus, Morganella, Serratia, Enterobacter, Pseudomonas and Klebsiella were also found, but in small number. The results indicated the predominance of Gram-negative bacteria among the collected samples. Most of isolates identified were resistant to more than one of the following antimicrobials: ampicillin, tetracycline, enrofloxacin, amoxicillin/clavulanic acid and cephalotin. Of the 17 Staphylococcus sp. isolates, two (11.8%) were methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and 11 (64.7%) of them were methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius (MRSP). There were bacterial genera identified with resistance to all tested antimicrobials in different proportions. This should alert veterinary hospitals to the emergence of multidrug-resistant bacteria and to the requirement for the revision of surgical protocols with regard to antimicrobial prophylaxis and therapy.(AU)

As infecções em sítio cirúrgico (ISCs) e a resistência bacteriana entre os patógenos relacionados constituem uma preocupação crescente nos hospitais veterinários. O aumento na incidência de ISCs possui forte relação com o uso amplo e disseminado de antibióticos. O presente estudo identificou bactérias e perfis de resistência a antibióticos nos casos de ISCs diagnosticados na Clínica Cirúrgica de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Viçosa, Brasil. O principal gênero identificado foi Staphylococcus, seguido pelos gêneros Escherichia, Enterococcus, Bacillus, Shigella, Citrobacter, Proteus, Morganella, Serratia, Enterobacter, Pseudomonas e Klebsiella, porém, em menor quantidade. Os resultados demonstraram a predominância de bactérias Gram-negativas entre as amostras coletadas. A maioria dos isolados identificados eram resistentes a um ou a mais de um dos seguintes antibióticos: ampicilina, tetraciclina, enrofloxacina, amoxicilina/ácido clavulânico e cefalotina. Entre os 17 isolados de Staphylococcus sp., dois (11,8%) eram Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (SARM) e 11 (64,7%) eram Staphylococcus pseudintermedius resistentes à meticilina (SPRM). Houve identificação de gêneros bacterianos com diferentes proporções de resistência para todos os antibióticos avaliados. Esses achados devem alertar os hospitais veterinários para a emergência de bactérias multirresistentes e para a necessidade de revisar a profilaxia e a terapia antimicrobiana referente aos protocolos cirúrgicos.(AU)

Isolation and genetic stability of an infectious bronchitis virus strain (IBV) / Isolamento e estabilidade genética de uma cepa do vírus da bronquite infecciosa (IBV)

O vírus da bronquite infecciosa (IBV) é um importante patógeno respiratório presente na avicultura comercial e tem provocado grandes perdas econômicas em todo o mundo. A vacinação é realizada pela indústria produtora de aves, mas continuam surgindo novos sorotipos e variações antigênicas, dificultando o controle de IBV. Nós realizamos uma caracterização molecular de uma cepa de IBV obtida diretamente de tecidos e comparamos com a mesma cepa que havia sido passada três vezes em ovo embrionado. Nós mostramos uma variação significante na sequência viral depois de ter sido isolada em ovo embrionado.(AU)

Antibody response between pigs of Piau and a commercial breed naturally infected with Porcine circovirus 2 / Resposta sorológica entre suínos da raça Piau e linhagem comercial em rebanho naturalmente infectado pelo Porcine circovirus 2

Brazilian pig population is made up of several naturalized breeds; among them the Piau breed is known for its rusticity and large fat stores. The naturalized breeds, in comparison with commercial ones, may have an increased resistance to diseases circulating in their territory. Thus, this study aimed to verify if there are differences between the serologic profile against Porcine circovirus 2 (PCV2) of Piau pigs and that of a commercial breed from a farm naturally infected by PCV2. The serum viral load was measured by qPCR, and levels of anti-PCV2 antibodies were measured by ELISA. The results showed that the serum viral load was similar across all animals. However, Piau piglets showed higher levels of antibodies compared to commercial piglets (P= 0.05), while sows of the commercial breed showed higher levels than the Piau breed (P< 0.01). There was not a statistical difference between pigs of different production stages in the seroprevalence of PCV2 or the blood viral load. This work demonstrates that, with regard to a natural PCV2 infection, the Piau breed has a different humoral immune response compared to the response developed by the commercial pigs. The results support the importance of conservation of native breeds.(AU)

O rebanho de suínos brasileiro é constituído por diversas raças naturalizadas, entre elas a raça Piau, que é conhecida por sua rusticidade e pela grande deposição de toucinho. As raças naturalizadas, em comparação com as linhagens comerciais, podem ter uma maior resistência a doenças que circulam em seu território. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo verificar se existem diferenças no perfil sorológico contra o Porcine circovirus 2 (PVC2) entre suínos da raça Piau e de uma linhagem comercial de uma granja naturalmente infectada pelo PCV2. Foram realizadas mensurações da carga viral sérica por qPCR e dos níveis de anticorpos anti-PCV2 por meio da técnica de ELISA. Os resultados mostraram que a carga viral sérica se manteve homogênea em todos os animais e que os leitões da raça Piau apresentaram níveis de anticorpos superiores em comparação com os leitões da linhagem comercial (P=0,05), enquanto as porcas de linhagem comercial apresentaram níveis superiores aos da raça Piau (P<0,01). Este trabalho fornece indícios de que a raça Piau apresenta uma resposta imune humoral distinta diante de uma infecção natural pelo PCV2, quando comparada com a resposta desenvolvida pela linhagem comercial. Os resultados obtidos reforçam a importância da conservação das raças nativas.(AU)

Validação de um método analítico rápido por CLAE-UV para determinação de cumarina em guaco (Mikania glomerata Sprengel) confirmado com espectrometria de massas / Validation of a rapid analytical method by HPLC for determining coumarin in guaco (Mikania glomerata Sprengel) confirmed with mass spectrometry

RESUMO A espécie Mikania glomerata Sprengel, popularmente conhecida no Brasil como guaco, é amplamente utilizada como expectorante para tratar doenças respiratórias e tem a sua atividade farmacológica atribuída principalmente a cumarina. Os resultados mostraram que o método apresenta linearidade de 0,05 a 0,8 mg mL-1. Ele foi considerado seletivo, exato e preciso. A proposta de um método rápido para determinação de cumarina em extratos de guaco torna-se interessante para a rotina de controle de qualidade industrial, visando à obtenção de medicamentos fitoterápicos padronizados.

ABSTRACT The species Mikania glomerata Sprengel, popularly known in Brazil as “guaco”, is widely used as an expectorant to treat respiratory diseases. Its pharmacological activity is mainly attributed to coumarin. The results showed that the method for determining coumarin presented linearity from 0.05 to 0.8 mg mL-1. It was considered selective, accurate, and precise according to the specific resolution from ANVISA, the Brazilian regulatory agency. The proposal of a rapid method for the determining coumarin in extracts of guaco is interesting for routine industrial quality control in order to obtain standardized, efficient, and safe phytotherapic medicines.

Potencial antiviral da quercetina sobre o parvovírus canino / Antiviral potencial of quercetin in canine parvovirus

Avaliou-se o efeito do flavonoide quercetina na replicação do parvovírus canino in vitro por meio do ensaio de determinação da atividade virucida (ensaio 1), ensaio de determinação da atividade sobre a célula (ensaio 2) e ensaio de tempo de adição das drogas em diferentes etapas do ciclo replicativo viral (ensaio 3). A quercetina apresentou significante atividade antiviral, com valores máximos de redução do título viral de 96,3% no ensaio 1, 90% no ensaio 2 e 90% no ensaio 3. Os efeitos mais expressivos ocorreram nas etapas de adsorção e penetração viral. Os resultados deste trabalho sugerem a importância da quercetina para a medicina veterinária.

The in vitro effect of the flavonoid quercetin against canine parvovirus was evaluated. The antiviral activity of quercetin was evaluated by determining the virucidal activity (assay 1), determining the activity on the cell (assay 2) and using the time of addition assay to test the inhibition of the viral replication cycle (assay 3). Quercetin showed a significant antiviral activity, with maximum viral titer reduction of 96.3% in assay 1, 90% in assay 2 and 90% in assay 3. The most expressive effects occurred in the stages of viral adsorption and penetration. The results show the importance of quercetin for veterinary medicine.

Identificação botânica e química de espécies vegetais de uso popular no Rio Grande do Norte, Brasil / Botanical and chemical identification of plant species of popular use in Rio Grande do Norte, Brazil

Plantas medicinais são utilizadas mundialmente como uma das principais formas de cuidado primário de saúde. No entanto, a literatura indica que muitas espécies podem apresentar composição química variável, toxicidade ou difícil identificação. O objetivo do presente estudo foi obter critérios úteis para o controle de qualidade farmacognóstico das principais espécies vegetais de uso popular no estado do Rio Grande do Norte, utilizando metodologias de análise botânica (morfodiagnose macro e microscópica) e química (triagem fitoquímica e cromatografia em camada delgada), evitando assim adulterações ou uso inadequado dessas plantas medicinais no estado. No total, sete espécies foram analisadas Acmella oleracea, Chenopodium ambrosioides, Lippia alba, Mentha piperita, Ocimum gratissimum, Peumus boldus e Rosmarinus officinalis. Diversos marcadores botânicos e fitoquímicos foram identificados, contribuindo dessa forma para a correta identificação destas espécies de plantas medicinais importantes no estado do Rio Grande do Norte.

Medicinal plants are worldwide used as one of the main forms of primary healthcare. However, the literature indicates that many species may have variable chemical composition, toxicity, or even difficult identification. The aim of this study was to obtain useful criteria for pharmacognostic quality control of the main plant species of popular use in the state of Rio Grande do Norte, using methods of botanical (macro and microscopic morphodiagnosis) and chemical (phytochemical screening and thin-layer chromatography) analysis, thus preventing adulteration or inappropriate use of these medicinal plants in the state. In total, seven species were analyzed Acmella oleracea, Chenopodium ambrosioides, Lippia alba, Mentha piperita, Ocimum gratissimum, Peumus boldus and Rosmarinus officinalis. Several botanical and phytochemical markers were identified, thereby contributing to the correct identification of these important medicinal plant species in the state of Rio Grande do Norte.

Estudos de pré-formulação de cápsulas gelatinosas duras contendo formulação de extrato de Gymnema sylvestre em pó / Preformulation studies of Gymnema sylvestre extract powder formulation for hard gelatin capsules

Gymnema sylvestre extract (GSE) is a plant product widely used as an adjuvant in the treatment of diabetes mellitus and commercially available as a powder. Owing to its low flowability, the manufacturing of hard gelatin capsules containing GSE faces specific problems. The purpose of this study was to investigate the best excipient (starch, lactose or microcrystalline cellulose) for hard gelatin capsules containing GSE. The technological properties such us bulk density (ñâ); tapped density (ñt); inter-particle porosity (Ie); Carr index (CI); Hausner ratio (HR); loss on drying (%LOD) and particle size distribution (%Pf) of the various GSE mixtures were investigated with the aim of identifying the best excipient. The need for lubricants (talc/magnesium stearate) was also assessed. GSE was characterized as a fine powder with more than 50% of its particles between 0.149mm to 0.250mm; furthermore, CI=25.6%; RH=1.3 and Ie = 25.6% and, as expected with such properties, it showed poor flowability. All the excipients investigated were able to change the technological properties of GSE and the powder mixture containing microcrystalline cellulose gave the best results.

O extrato seco de Gymnema sylvestre (EGS) é um produto fitoterápico amplamente utilizado como adjuvante no tratamento da diabetes, sendo comercializado na forma de pó. O objetivo do presente estudo foi investigar a influência da adição de adjuvantes (amido, lactose ou celulose microcristalina) à formulação para a preparação de cápsulas gelatinosas duras contendo o EGS. As propriedades tecnológicas como densidade aparente (Da), densidade aparente de compactação (Dc), porosidade interparticulas (Ie), Índice de Carr (IC), Fator de Hausner (FH), perda por dessecação (PD%) e análise do tamanho de partículas (%Pf) das diferentes misturas preparadas foram investigadas com o objetivo de escolher o melhor excipiente. A necessidade de agentes lubrificantes (talco/estearato de magnésio) também foi avaliada. O EGS foi caracterizado como um pó fino, com mais de 50% do material particulado compreendido entre 0,149-0,250mm; IC=25,6%; FH=1,3 and Ie = 25,6%, o que justifica seu fluxo pobre. Todos os excipientes testados foram capazes de modificar as propriedades tecnológicas do EGS, sendo a mistura de pós que apresentou melhores resultados aquela obtida com a adição de celulose microcristalina.

Validation of quantitative analysis method for triamcinolone in ternary complexes by UV-Vis spectrophotometry / Validação de método de análise quantitativa para a triancinolona a partir de complexo ternário por espectrofotometria de UV-Vis

Triamcinolone (TRI), a drug widely used in the treatment of ocular inflammatory diseases, is practically insoluble in water, which limits its use in eye drops. Cyclodextrins (CDs) have been used to increase the solubility or dissolution rate of drugs. The purpose of the present study was to validate a UV-Vis spectrophotometric method for quantitative analysis of TRI in inclusion complexes with beta-cyclodextrin (B-CD) associated with triethanolamine (TEA) (ternary complex). The proposed analytical method was validated with respect to the parameters established by the Brazilian regulatory National Agency of Sanitary Monitoring ANVISA). The analytical measurements of absorbance were made at 242nm, at room temperature, in a 1-cm path-length cuvette. The precision and accuracy studies were performed at five concentration levels (4, 8, 12, 18 and 20µg.mL-1. The B-CD associated with TEA did not provoke any alteration in the photochemical behavior of TRI. The results for the measured analytical parameters showed the success of the method. The standard curve was linear (r2 > 0.999) in the concentration range from 2 to 24 µg.mL-1. The method achieved good precision levels in the inter-day (relative standard deviation-RSD <3.4%) and reproducibility (RSD <3.8%) tests. The accuracy was about 80% and the pH changes introduced in the robustness study did not reveal any relevant interference at any of the studied concentrations. The experimental results demonstrate a simple, rapid and affordable UV-Vis spectrophotometric method that could be applied to the quantitation of TRI in this ternary complex.

A triancinolona (TRI) é um fármaco amplamente utilizado no tratamento de doenças inflamatórias do globo ocular e é praticamente insolúvel em água, o que limita sua utilização na forma de colírio. As ciclodextrinas (CDs) têm sido utilizadas com sucesso para aumentar a solubilidade ou velocidade de dissolução de fármacos. O presente estudo teve como objetivo a validação de uma metodologia analítica para a TRI a partir de complexos de inclusão com beta-ciclodextrina (B-CD) associada com a trietanolamina (TEA) (complexo ternário) por espectrofotometria de UV-Vis. A validação do método proposto foi realizada de acordo com os parâmetros analíticos estabelecidos pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). As análises quantitativas foram realizadas a 242nm a temperatura ambiente, utilizando cubeta de quartzo de 1cm. Os estudos de precisão e exatidão foram realizados para cinco níveis de concentração (4, 8, 12, 18 e 20µg.mL-1). A B-CD associada a TEA não alterou o comportamento fotoquímico da TRI. Os resultados da avaliação dos parâmetros analíticos demonstraram o sucesso da metodologia. A curva padrão apresentou linearidade (r2 > 0.999) na faixa de concentração de 2 a 24µg.mL-1. A metodologia apresentou bons níveis de precisão para o estudo inter dia (desvio padrão relativo-DPR <3.4%) e reprodutibilidade (DPR<3.8%). A exatidão ficou em torno de 80% e a variação de pH inserida no estudo de robustez não revelou uma interferência significativa em todas as concentrações estudadas. Os resultados experimentais demonstraram um simples, rápido e viável método de espectrofotometria de UV-Vis com aplicabilidade para a análise quantitativa da TRI a partir do complexo ternário.

Levantamento sorológico de Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis em bovinos leiteiros no estado do Espírito Santo / Serological survey of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in dairy cattle in Espírito Santo state

The occurrence of antibodies to Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) was verified in dairy cattle from Espírito Santo state. A total of 1,450 serum samples were analyzed for antibodies anti-MAP, using ELISA. Dairy cattle, males and females, from four regions of Espírito Santo state were used. One hundred sixty-five (11.4 percent) samples were positive for anti-MAP, 33 (2.3 percent) were considered suspicious, and 1,252 (86.3 percent) were negative. In all regions, seropositive animals were found, indicating that the agent is spread by the State, posing a threat to the local dairy farming and neighboring states, as well as public health, since MAP can be involved with Crohn's disease in humans. This result presents the first serologic anti-MAP survey in dairy cattle of Espírito Santo State.

Detection of Mycoplasma hyopneumoniae in lungs and nasal swabs of pigs by nested PCR / Detecção de Mycoplasma hyopneumoniae em pulmões e suabes nasais de suínos por nested PCR

Fifty-four samples were collected from growing and finishing pigs for the molecular diagnosis of enzootic porcine pneumonia. Nineteen lung fragments were obtained from pigs that showed signs of respiratory disease and 35 nasal swabs were obtained from clinically healthy pigs. For the detection of the bacterial genome in the samples, the nested PCR technique was used to amplify a fragment of 706bp. This fragment was subsequently cloned and sequenced. The sequence of obtained nucleotides was compared with six other sequences of Mycoplasma hyopneumoniae and 11 sequences of other bacteria available in the Genbank. To measure the sensitivity of the nested PCR, serial dilutions (10-1 to 10-15) of cloned fragments were conducted based on the concentration of 300ng. Ten lung fragments and eight nasal swabs showed positive for M. hyopneumoniae and the limit of detection was estimated to be 0.3fg DNA cloned. The sequence of nucleotides obtained showed 99.1 percent homology with the other sequences of M. hyopneumoniae, demonstrating that the nested PCR used in this study may provide an important diagnostic tool for the detection of this agent.

Foram coletadas 54 amostras de animais em fase de crescimento e terminação para o diagnóstico molecular da pneumonia enzoótica suína. Dezenove fragmentos de pulmão foram obtidos de suínos que apresentavam sinais de doença respiratória e 35 suabes nasais foram obtidas de suínos clinicamente saudáveis. Para a detecção do genoma bacteriano nas amostras, foi utilizada a técnica de nested PCR que originou um fragmento de 706pb, o qual foi, posteriormente, clonado e sequenciado. A sequência de nucleotídeos obtida foi comparada com outras seis sequências de Mycoplasma hyopneumoniae e 11 sequências de outras bactérias disponíveis no Genbank. Para medir a sensibilidade da nested PCR, foram realizadas diluições seriadas (10-1 a 10-15) do fragmento clonado, partindo da concentração de 300ng. Dez fragmentos de pulmões e oito suabes nasais apresentaram resultado positivo para M. hyopneumoniae e o limite de detecção foi estimado em 0,3fg de DNA clonado. A sequência de nucleotídeos obtida foi de 99.1 por cento de homologia com as outras sequências de M. hyopneumoniae, demonstrando que a nested PCR utilizada neste estudo pode ser uma importante ferramenta de diagnóstico para a detecção desse agente.

Molecular identification of Rickettsia felis in ticks and fleas from an endemic area for Brazilian Spotted Fever

Rickettsioses are arthropod-borne diseases caused by parasites from the Order Rickettsiales. The most prevalent rickettsial disease in Brazil is Brazilian Spotted Fever (BSF). This work intends the molecular detection of those agents in ectoparasites from an endemic area of BSF in the state of Espírito Santo. A total of 502 ectoparasites, among them Amblyomma cajennense, Amblyomma dubitatum (A. cooperi), Riphicephalus sanguineus, Anocentor nitens and Ctenocephalides felis, was collected from domestic animals and the environment and separated in 152 lots according to the origin. Rickettsia sp. was detected in pools of all collected species by amplification of 17kDa protein-encoding gene fragments. The products of PCR amplification of three samples were sequenced, and Rickettsia felis was identified in R. sanguineus and C. felis. These results confirm the presence of Rickettsia felis in areas previously known as endemic for BSF, disease caused by Rickettsia rickettsii. Moreover, they show the needing of further studies for deeper knowledge of R. felis-spotted fever epidemiology and differentiation of these diseases in Brazil.

Desenvolvimento e validação de método de análise quantitativa para triancinolona em micropartículasbiodegradáveis por CLAE / Development and validation of HPLC method for quantitative analysis of triamcinolone in biodegradable microparticles

Neste trabalho, foi desenvolvido um método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para a determinação quantitativa da triancinolona contida em micropartículas de ácido polilático-co-glicólico (PLGA). As condições cromatográficas utilizadas foram Colunade Fase Reversa C18, 250mm x 4,6mm com diâmetro partícula 5 m. O forno de coluna foi termostatizado a 35 mais ou menos 2ºC, a fase móvel usada foi metanol:água 45:55 (v:v), com fluxo isocrático de 1 mL.min-1 e volume de injeção de 10 ì L. Foi utilizado detector de UV-Vis selecionado em 239nm. A curva padrão obtida apresentou linearidade (r2 maior que 0,999) na faixa de concentração 100-2.500 ng.mL-1. O método proposto apresentou precisão adequada com desvio padrão relativo menor que 3 por cento. Os resultados mostraram que a exatidão do método apresentou valores de recuperação dentro dos limites recomendáveis em toda a faixa de concentração estudada. O método de CLAE mostrou especificidade e seletividade com linearidade dentro da faixa de concentração de trabalho utilizada e precisão e exatidão que permitem a quantificação da triancinolona em micropartículas de PLGA.

Transposition of great arteries: atrial inversion - the Senning versus the Mustard procedure

Num periodo de 6 anos, foram operados l75 pacientes com d-transposicao dos grandes arterias (TGA), simples e complexa. Na TGA simples, a mortalidade foi igual a 3%, depois da inversao atrial, ao passo que, na TGA complexa, foi igual a 14%. A comparacao de dois grupos de pacientes, depois da operacao de Mustard (n=l02) e do procedimento de Senning (n=73) nao revelou diferencas significantes nos resultados, assim como em relacao a mortalidade, aos disturbios de ritmo pos-operatorios ou a funcao ventricular direita