Avaliação de diferentes procedimentos para extração de DNA a partir de esfregaços corados pelo método de Ziehl-Neelsen / Evaluation of different methods of DNA extraction from baciloscopic tests of Ziehl-Neelsen stainig

O Pará é o estado com maior taxa de incidência de tuberculose (TB) na região Norte, com 36,3 casos por 100 mil habitantes em 2004. A obtenção de DNA de qualidade a partir de material fixado em lâminas coradas pelo método de Ziehl-Neelsen (ZN) supriria a falta de amostras representativas para estudos de genotipagem, contribuindo para melhor entendimento da dinâmica de transmissão da TB. O presente estudo avaliou quatro diferentes procedimentos para obtenção de DNA de M. tuberculosis a partir de 196 esfregaços corados pelo método de ZN, que utilizaram xilol e N-acetil-L-cisteína (NALC) em conjunto, de forma isolada ou nenhuma destas substâncias, e ainda dois protocolos de amplificação distintos, um com o adjuvante de PCR glicerol e outro com betaína. O percentual de amplificação foi superior para as amostras que foram submetidas ao procedimento que utilizou somente o xilol e ao que não utilizou nenhuma substância, sendo 77 por cento e 67 por cento, respectivamente, para o protocolo com glicerol, e de 98 por cento e de 96 por cento para o protocolo com betaína. A partir dos resultados obtidos, não é recomendado o uso de xilol ou NALC nos procedimentos de remoção das amostras e sugere-se a inclusão do adjuvante betaína nas reações, assim como o uso do DNA extraído de lâminas coradas pelo método de ZN em análises baseadas em PCR.

Qualidade das baciloscopias de escarro realizadas em oito unidades de saúde no estado do Pará / Quality of the sputum bacilloscopy held in eight health units in the state of Pará

A baciloscopia pelo método de Ziehl-Neelsen (ZN) é um exame simples, rápido, econômico e é a técnica mais difundida para o diagnóstico da tuberculose (TB), pois permite detectar as fontes mais importantes de infecção. O presente trabalho avaliou a qualidade das baciloscopias para tuberculose em oito Unidades Básicas de Saúde (UBS) e encaminhadas ao LACEN-PA, no Estado do Pará. Os itens avaliados foram identificação das lâminas, distensão, coloração dos esfregaços e índice baciloscópico. Dentre as 189 lâminas avaliadas, 36 por cento (69 por 189) foram caracterizadas como inadequadas. Falhas relacionadas ao item distensão foram as mais frequentes (31 por cento), seguidas de problemas na coloração (28 por cento). No item identificação das lâminas, apenas a UBS B apresentou falhas, e estas ocorreram em 100 por cento (4) das lâminas enviadas ao LACEN no período do estudo. A avaliação dos índices bacterioscópicos determinou 10 discordâncias em número de cruzes, um falso-negativo e um falso-positivo. Tais resultados sugerem falta de obediência aos parâmetros de qualidade preconizados pelo Ministério da Saúde. No entanto, recomenda-se a realização de estudo com ampliação do número de amostras e atenção especial as principais causas de erro no desenvolvimento das baciloscopias.