RESUMO
CONTEXT AND OBJECTIVE: Heparanase-1 degrades heparan sulfate and has been correlated with tumor progression. Although the isoform heparanase-2 has no catalytic activity, it seems to be important for modulating heparanase-1 activity. Cathepsin B is a proteinase involved in tumor metastasis. The aim of this study was to analyze heparanase isoform expression and cathepsin B activity in plasma samples from patients with gastrointestinal carcinomas, compared with healthy individuals (control group). DESIGN AND SETTING: This was an analytical cross-sectional study. Peripheral blood samples were collected at a Brazilian public hospital, from 21 patients with histopathological diagnoses of gastrointestinal carcinomas and from 43 healthy individuals. The analyses were performed in two Brazilian medical schools. METHODS: Heparanase isoforms were identified and quantified in plasma samples by means of Western blot. The enzymatic activities of heparanase-1 and cathepsin B were also measured. RESULTS: The results demonstrated that the expression of both heparanase isoforms was significantly greater in plasma samples from gastrointestinal carcinoma patients, compared with the control group. Logistic regression analysis showed that increased heparanase-1 and heparanase-2 expression was exclusively dependent on the ...
CONTEXTO E OBJETIVO: A heparanase-1 degrada heparam sulfato e está relacionada à progressão de tumor. Apesar de a isoforma heparanase-2 não possuir atividade catalítica, parece ser importante para modular a atividade da heparanase-1. A catepsina B é uma proteinase envolvida na metástase de tumores. O objetivo deste estudo foi analisar a expressão das isoformas de heparanase e atividade da catepsina B em amostras de plasma de pacientes com carcinomas gastrointestinais, comparando-se com indivíduos saudáveis (grupo controle). TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Este é um estudo transversal analítico. Foram coletadas amostras de sangue periférico, em hospital público brasileiro, de 21 pacientes com diagnóstico histopatológico de carcinoma gastrointestinal e 43 indivíduos saudáveis. As análises foram realizadas em duas faculdades de medicina brasileiras. MÉTODOS: As isoformas da heparanase foram identificadas e quantificadas em amostras de plasma por Western blot. As atividades enzimáticas de heparanase-1 e catepsina B foram também mensuradas. RESULTADOS: Os resultados demonstraram que as expressões das isoformas de heparanase foram significativamente maiores nas amostras de plasma de pacientes com carcinoma gastrointestinal em comparação com ...
Assuntos
Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Biomarcadores Tumorais/sangue , Carcinoma/enzimologia , Catepsina B/sangue , Neoplasias Gastrointestinais/enzimologia , Glucuronidase/sangue , Western Blotting/métodos , Estudos de Casos e Controles , Estudos Transversais , Técnicas Imunoenzimáticas , Isoenzimas/sangueRESUMO
O dogma central da biologia molecular é formado por três processos, a síntese de DNA (replicação) síntese de RNA (transcrição) e síntese de proteínas (tradução). Tais processos podem ocorrer in vitro por mecanismos que ?mimetizam? os mecanismos de replicação e transcrição por reação de amplificação em cadeia da DNA polimerase (PCR) e por RT-PCR, que corresponde à reação de transcrição reversa, seguida da amplificação por PCR. Howard Temin, em 1961, foi pioneiro em juntar evidências que comprovaram certa inconsistência com o dogma central da biologia molecular para provar a existência da transcriptase reversa. Temin focava seus estudos em retrovírus, o Rous sarcoma vírus (RSV), capaz de transformar células normais em células tumorais. Temin propôs que o mecanismo de transformação do RSV seria a conversão do seu material genético RNA em DNA e comprovou que o mecanismo de transformação de células normais em tumorais era bloqueado por inibidores da síntese de DNA. Tal hipótese foi confirmada por outro pesquisador, David Baltimore, na mesma época que conseguiu isolar a enzima transcriptase reversa do vírus de leucemia murina Rauscher (R-MLV). Temin e Baltimore receberam o Prêmio Nobel de Fisiologia e Medicina, em 1975, pela descoberta da transcriptase reversa1. Tal descoberta promove continuamente o desenvolvimento de inúmeras técnicas para pesquisas em saúde e avanço nas áreas de investigação clínica e precisão no diagnóstico e tratamento de doenças. Este artigo tem como objetivo revisar os princípios e atualidades da tecnologia de amplificação por tempo real e suas importantes aplicações em medicina.