Heparin modulates the expression of genes encoding pro and anti-apoptotic proteins in endothelial cells exposed to intestinal ischemia and reperfusion in rats

PURPOSE: To investigate if expression of genes encoding pro and anti-apoptotic proteins in the rat enteric endothelial cells stimulated by intestinal ischemia followed by reperfusion (IR) can be modified by treatment with heparin (HP). METHODS: Eighteen adult Wistar rats were divided in three groups: sham group submitted to laparotomy only (SG), ischemia followed by reperfusion group (IRG); ischemia followed by reperfusion plus pretreatment with HP 100 mg.kg-1 (IRG+HP). Ischemia was performed by clamping of the superior mesenteric artery. After 60 min of ischemia, metal clamps were removed for reperfusion for 120 min. Gene expression of encoding pro (Casp1, Casp6, Casp3, Cflar, Fas and Pgl) and anti-apoptotic (Bcl2, Bcl2l1 and Naip2) proteins in rat enteric endothelial cells was evaluated by PCR microarray method. RESULTS: Compared to rat endothelial cells of SG, the expression of pro-apoptotic genes was up-regulated in IRG while anti-apoptotic genes were down-regulated. In contrast, the expression of anti-apoptotic genes in IRG+HP was up-regulated while pro-apoptotic genes was down-regulated compared to SG. CONCLUSION: The attenuation by heparin of intestinal ischemia-reperfusion previously demonstrated in rodents could be related with ability of this drug to stimulate and reduce gene expression of encoding anti and pro-apoptotic proteins, respectively. .

Ischemic preconditioning and the gene expression of enteric endothelial cell biology of rats submitted to intestinal ischemia and reperfusion

PURPOSE: To investigate the effects of ischemic preconditioning (IPC) on the expression of pro and anti-apoptotic genes in rat endothelial cells undergoing enteric ischemia (I) and reperfusion (R). METHODS: Thirty rats underwent clamping of the superior mesenteric vessels. Sham group (GS) laparotomy only; Ischemia (GI): intestinal ischemia (60 min); Ischemia and Reperfusion (GIR): ischemia (60 min) and reperfusion (120 min); Ischemia and intestinal ischemic preconditioning (GI + IPC) : 5 minutes of ischemia followed by 10 min of reperfusion before sustained ischemia (60 min) ischemia and reperfusion and IPC (GIR + IPC): 5 min ischemia followed by 10 min of reperfusion before sustained ischemia (60min) and reperfusion (120 min). Rat Endothelial Cell Biology (PCR array) to determine the expression of genes related to endothelial cell biology. RESULTS: Gene expression of pro-apoptotic markers (Casp1, Casp6, Cflar, Fas, and Pgl) was down regulated in GI+IPC and in GIR + IPC. In contrast, the expression of anti-apoptotic genes (Bcl2 and Naip2), was up-regulated in GI + IPC and in GIR + IPC. CONCLUSION: Ischemic preconditioning may protect against cell death caused by ischemia and reperfusion.

Number of fragments, margin status and thermal artifacts of conized specimens from LLETZ surgery to treat cervical intraepithelial neoplasia / Número de fragmentos, status das margens e artefatos térmicos de peças conizadas de cirurgia com alças de ondas de alta frequência no tratamento da neoplasia intraepitelial cervical

CONTEXT AND OBJECTIVE: Large loop excision of the transformation zone (LLETZ) is a nontraumatic cut and coagulation method with several advantages, but it induces thermal artifacts in the cut region. The aim here was to assess the correlations of age, number of fragments, lesion grade and degree of thermal artifacts with margin quality in conized specimens from LLETZ for cervical intraepithelial neoplasia (CIN). DESIGN AND SETTING: Cross-sectional study at Universidade Federal de São Paulo (Unifesp). METHODS: The records and histopathology findings of 118 women who underwent LLETZ between 1999 and 2007 were reviewed. Age, number of fragments, lesion grade, degree of thermal artifacts and margin quality were assessed. RESULTS: The patients' mean age was 27.14 years; 63.6% had been diagnosed with CIN II and 36.4% with CIN III. The lesion was removed as a single fragment in 79.6% of the cases. The margins were free from intraepithelial neoplasia in 85.6% and compromised in the endocervical margin in 6.8%. Fragment damage due to artifacts occurred in 2.5%. Severe artifacts occurred in 22.8%. Women aged 30 years or over presented more cases of CIN III (P < 0.0004). Neoplastic compromising of surgical margins and severe artifacts occurred more often in cases in which two or more fragments were removed, and in patients aged 30 years or over. CONCLUSION: CIN III in women aged 30 or over, when removed in two or more fragments during LLETZ, presented a greater number of compromised margins and greater severity of thermal artifacts.

CONTEXTO E OBJETIVO: Cirurgia de alta frequência (CAF) é um método não traumático de corte e coagulação com muitas vantagens, porém induz a artefatos térmicos na região do corte. O objetivo foi avaliar a relação entre idade, número de fragmentos, grau da lesão e grau de artefatos térmicos e a qualidade das margens das peças cirúrgicas resultantes da CAF para neoplasia intraepitelial cervical (NIC). TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal na Universidade Federal de São Paulo (Unifesp). MÉTODOS: Foram revisados prontuários e laudos histopatológicos de 118 mulheres que foram submetidas a conização por cirurgia de alta frequência no período de 1999 a 2007. Idade, número de fragmentos, grau da lesão, grau de artefatos térmicos e qualidade das margens foram avaliados. RESULTADOS: A idade média das pacientes foi de 27,14 anos; 63,6% tinham diagnóstico de NIC II e 36,4% de NIC III. A lesão foi retirada com um fragmento em 79,6%. As margens estavam livres de neoplasia em 85,6% e comprometidas na margem endocervical em 6,8%. Fragmentos prejudicados por artefatos ocorreram em 2,5%. Artefatos de grau severo ocorreram em 22,8%. Mulheres com idade igual ou superior a 30 anos apresentaram mais casos de NIC III (P < 0,0004). O comprometimento neoplásico de margens cirúrgicas e artefatos de grau severo ocorreram mais vezes nos casos em que foram retirados dois ou mais fragmentos e em pacientes com idade igual ou superior a 30 anos. CONCLUSÃO: NIC III em mulheres com idade superior a 30 anos, quando retiradas em dois ou mais fragmentos na CAF, apresentaram maior número de margens comprometidas e grau severo de artefatos térmicos.

Resultado da cirurgia com alça de alta freqüência e localização colposcópica da área com atipia ectocervical / Loop electrosurgical excision procedure and colposcopic localization of the atypical cervical epithelium

Objetivo: avaliar os resultados anatomopatológicos das peças operatórias de pacientes submetidas a cirurgia com alça de alta freqüência e sua relação com a localização colposcópica da atipia. Métodos: estudo retrospectivo de 134 pacientes que apresentavam neoplasia intra-epitelial ao exame citológico e/ou anatomopatológico e que foram submetidas a cirurgia com alça de alta freqüência. As pacientes foram separadas em três grupos, de acordo com a localização das atipias: Grupo I (n=36): pacientes com atipia localizada na ectocérvice e junção escamo-colunar visível; Grupo II (n=50): pacientes com atipia ecto-endocervical, e Grupo III (n=48): pacientes com colposcopia insatisfatória. Resultados: o Grupo I apresentou média de idade de 33, o Grupo II média de 39 e o Grupo Ill, 48 anos. O comprometimento das margens cirúrgicas por neoplasia ocorreu respectivamente em 8,3, 36 e 29,2 por cento dos casos quando avaliados por grupo. No acompanhamento das pacientes verificou-se que a porcentagem de doença residual foi de 4,2 por cento no Grupo I, 31,6 por cento no Grupo II e 35,5 por cento no Grupo III. Conclusão: pacientes com lesões localizadas no canal endocervical apresentaram maior taxa de margens comprometidas. Pacientes com neoplasia intra-epitelial de alto grau localizadas no canal endocervical e idade superior a 40 anos têm maior chance de apresentar margens comprometidas e doença residual, necessitando de controles citológicos e colposcópicos rigorosos.