Condiciones ambientales que afectan la expresiín del gen suoM: un factor sigma de estrés en M. smegmatis / Environment conditions affect the expression of the suoM gene: an stress sigma factor in M. smegmatis

Los factores sigmas se asocian a la ARN polimerasa y le confieren especificidad de reconocimiento de regiones promotoras. Esto provee un nivel de regulación transcripcional, que determina que un grupo de genes sea expresado de acuerdo a las necesidades fisiológicas de la célula bacteriana. El análisis de secuencia de la región del origen de replicación de Mycobacterium smegmatis reveló la presencia de un marco de lectura con capacidad codificante para un sigma de la subfamilia ECF (extracytoplasmic function), los cuales se carcaterizan por dirigir la transcripción de genes en respuesta a cambios en las condiciones ambientales. Con el objeto de identificar las condiciones ambientales que estimulan la expresión del gen aislado, designado suoM (sigma unido al origen en microbacterias), se contruyeron fusiones transcripcionales PsuoM-lacZ' sobre el plásmido de fusión de operones pJEM15. Las construcciones se introdujeron por electroporación en M.smegmatis y las células transformadas se sometieron a varias condiciones de estrés ambiental a fin de estudiar la actividad promotora del gen suoM mediante ensayos ß-galactosidasa. Se observó un incremento de 2,0-3,5 veces en la actividad promotora, al transferir las células a 45°C y cuando el cultivo alcanza fase estacionaria de crecimiento. Los resultados sugieren que suoM podría estar involucrado en la regulación de la expresión de genes en condiciones de elevada temperatura y en fase estacionaria de crecimiento, condiciones inductoras que podrían tener algún significado en el potencial patogénico de micobacterias y en la habilidad de M.tuberculosis para causar infección latente.

Análisis de ARNm de un factor de supervivencia en micobacterias / mRNA analysis of a survival factor in mycobacterias

Las bacterias patógenas diseñan estrategias de regulación de genes para defender de microambientes adversos encontrados en tejidos del hospedador. Una de las estrategias exitosas de regulación se basa en la existencia de múltiples factores sigma alternativos de la subfamilia ECF ("extracytoplamic function") que dirigen a la ARN polimerasa bacteriana al reconocimiento de promotores de genes, cuya expresión promueve cambios adaptativos para defenderse de daño potenciales. En este trabajo se reportan datos preliminares del patrón de expresión del factor sigma ECF micobacteriano SuoM ("sigma unido al orígen de replicación en micobacterias") de M. tuberculosis y M. bovis BCG en respuesta a cambios en condiciones ambientales. A tal fin, se contruyeron fusiones transcripcionales reporteras de suoM-lacZ` de M. tuberculosis y se ensayó la actividad promotora de este gen a través ensayos de actividad ß-galactosidasa en células de M. bovis BCG sometidas a diversos tratamientos. Se observó un incremento en la expresión suoM en condiciones de choque térmico y en fase estacionaria de crecimiento, lo cual fué confirmado al analizar directamente los ARNm de suoM en M. bovis BCG por "northern blot" e hibridización. Los resultados obtenidos, así como la identidad de los genes entre M. bovis BCG y M. tuberculosis sugiere que SuoM pudiera regular procesos celulares equivalentes en ambos especies micobacterianas relacionadas con funciones de adaptación y supervivencia frente a condiciones de estrés térmico y cuando cesa el crecimiento exponencial. Los estudios de regulación de la expresión de genes de supervivencia pueden contribuir a dilucidar mecanismos de virulencia bacteriana