Characterization of inflammatory markers associated with systemic lupus erythematosus patients undergoing treatment / Caracterização de marcadores inflamatórios associados a pacientes com lúpus eritematoso sistêmico em tratamento

ABSTRACT Objective: To characterize the inflammatory profiles of patients with systemic lupus erythematosus receiving standard treatment compared to healthy controls. Patients and methods: Peripheral venous blood was collected from systemic lupus erythematosus patients (n = 14) and controls (n = 18) at enrollment. Blood samples were used for quantification, by flow cytometry, of CD11b (integrin) and Chemokine receptor CXCR2 expression surface antigen in neutrophils and lymphocytes, while cytokines were assayed in serum samples. Purified neutrophils were assayed by their ability to phagocytize human plasma-opsonized zymosan. Results: Patients had a median (interquartile range) disease activity index of 1.0 (0-2.0) characteristic of patients in remission. Interleukin-6 and interleukin-10 serum concentrations were significantly higher in the patient group compared to controls and the phagocytic index of circulating neutrophils was significantly reduced in patients compared to controls. The levels of interleukin-2, interleukin-5, interleukin-8 and tumor necrosis factor alpha did not significantly differ between patients and controls. Flow cytometric analysis revealed that the integrin expression levels were reduced in lymphocytes (but not in neutrophils) obtained from systemic lupus erythematosus patients, while surface expression of the chemokine receptor 2 was similar in both neutrophils and lymphocytes. Conclusion: Systemic lupus erythematosus patients receiving standard treatment presented with elevated systemic levels of interleukin-6 and interleukin-10, reduced neutrophil phagocytic capacity, and reduced lymphocyte expression of integrin even when symptoms were in remission. These alterations to innate immune components may put these individuals at a greater risk for acquiring infections.

RESUMO Objetivo: Caracterizar os perfis inflamatórios de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) que recebiam o tratamento padrão em comparação com controles saudáveis. Pacientes e métodos: Coletou-se o sangue venoso periférico de pacientes com LES (n = 14) e controles (n = 18) no momento da entrada no estudo. As amostras de sangue foram usadas para quantificação, por citometria de fluxo, da expressão dos antígenos de superfície CD11b (integrina) e CXCR2 em neutrófilos e linfócitos, enquanto as citocinas foram avaliadas em amostras de soro. Avaliou-se a capacidade dos neutrófilos purificados de fagocitar zimosan opsonizado com plasma humano. Resultados: Os pacientes apresentavam uma pontuação mediana (intervalo interquartil) no Sledai de 1 (0-2), característica de pacientes em remissão. As concentrações séricas de IL-6 e IL-10 foram significativamente maiores no grupo de pacientes em comparação com os controles; o índice de fagocitose de neutrófilos circulantes estava significativamente reduzido nos pacientes em comparação com os controles. Os níveis de IL-2, IL-5, IL-8 e TNF-α não diferiram significativamente entre pacientes e controles. A análise da citometria de fluxo revelou que os níveis de expressão de CD11b estavam reduzidos nos linfócitos (mas não nos neutrófilos) obtidos de pacientes com LES, enquanto a expressão do receptor de superfície CXCR2 foi semelhante em neutrófilos e linfócitos. Conclusão: Os pacientes com LES que recebiam tratamento padrão apresentaram níveis sistêmicos elevados de IL-6 e IL-10, redução na capacidade fagocítica dos neutrófilos e redução da expressão de CD11b em linfócitos, mesmo quando os sintomas estavam em remissão. Essas alterações nos componentes da imunidade inata podem colocar esses indivíduos em maior risco de adquirir infecções.

Association of metabolic alterations with prognostic factors in malignant breast neoplasms. / Associação de alterações metabólicas com fatores prognósticos em neoplasias malignas de mama

Objectives: There are few studies in the literature correlating metabolic alterations with prognostic factors in breast cancer. The aims of this study were to evaluate serum levels of total cholesterol, HDL, LDL, triglycerides and fasting glucose, weight, body mass index and blood pressure, and relate them to prognostic factors (stage, lymph node involvement, histological grade, estrogen and progesterone receptors, ki-67 and Her2/neu) in patients with breast cancer. Methods: A retrospective study was conducted in Mastology Service of the Discipline of Gynecology and Obstetrics/Oncologycal Research Institute (IPON) of the Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM). We evaluated 100 patients with breast cancer treated at Mastology Clinic (surgical and/or clinical treatment). Serum levels of total cholesterol, HDL, LDL, triglycerides and fasting glucose, weight, body mass index, blood pressure, staging, lymph node involvement,histological grade and immunohistochemical panel (estrogen and progesterone receptors, ki-67 and HER-2/neu) were recorded. Data were expressed as the mean ± standard deviation, and the values were compared by using Student's t-test. P-values less than 0.05 were considered statisticallysignificant. Results: Histological grades 1 and 2 were significantly correlated with higher HDL serum levels (p=0.02). Higher levels of triglycerides were found more frequently in grade 3, and highest weight was related to Ki-67 positive, but only with a trend towards significance (p=0.07). Conclusion: HDL can be related to prognosis in breast cancer.

Objetivos: Há poucos estudos na literatura relacionando alterações metabólicas com fatores prognósticos em câncer de mama. Os objetivos desse estudo foram avaliar os níveis séricos de colesterol total, HDL, LDL, triglicérides e glicemia de jejum, peso, índice de massa corporal e pressão arterial, e relacioná-los com fatores prognósticos (estadiamento, envolvimento linfonodal, grau histológico, receptores de estrógeno e progesterona, ki-67 e Her2/neu) em pacientes com câncer de mama. Métodos: Um estudo retrospectivo foi realizado no Serviço de Mastologia da Disciplina de Ginecologia e Obstetrícia e Instituto de Pesquisa em Oncologia (IPON) da Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM). Nós avaliamos 100 pacientes com câncer de mama tratadas no Serviço de Mastologia (tratamento clínico e/ou cirúrgico). Níveis séricos de colesterol total, HDL, LDL, triglicérides e glicemia de jejum, peso, índice de massa corporal, pressão arterial, estadiamento, envolvimento linfonodal, grau histológico e painel imuno-histoquímico (receptores de estrógeno e progesterona, ki-67 e Her2/neu) foram registrados. Dados foram expressos em média ± desvio padrão, e os valores foram comparados utilizando-se o test t de Student. Valores de p menores que 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Resultados: Graus histológicos 1 e 2 foram relacionados significativamente com níveis séricos mais altos de HDL (p=0,02). Níveis mais elevados de triglicérides foram encontrados maisfrequentemente em tumores grau 3, e peso mais alto foi relacionado com positividade de Ki-67, mas apenas com tendência à significância (p=0,07). Conclusão: Níveis séricos de HDL podem estar relacionados ao prognóstico em neoplasia maligna de mama.

Comparative study of survivor and nonsurvivor sepsis patients in a university hospital

To determine parameters associated with the evolution of sepsis, a five-year retrospective study was conducted in a university hospital. One hundred and four consecutive sepsis patients were evaluated, of whom 55.8 percent were men. The mortality was 68.3 percent and was associated with older age (p<0.05). Chronic comorbidities and infection site were not associated with prognosis. Gram-positive bacteria were more frequently identified in survivors (p<0.05), while non-detection of the germ was associated with mortality (p<0.01). Appropriate use of antibiotics (germ sensitive to at least one drug administered) was associated with survival (p<0.0001) while inappropriate use (p<0.05) or empirical use (p<0.01) were more frequent in nonsurvivors. Leukocytosis was the main abnormality (54.8 percent) detected on diagnosis, from the leukocyte count. During the evolution, normal leukocyte count was associated with survival (p<0.01) and leukocytosis with mortality (p<0.05). In conclusion, mortality was associated with nondetection of the pathogen, leukocytosis during the evolution of the sepsis and inappropriate or empirical use of antimicrobials. Evidence-based treatment that is directed towards modifiable risk factors might improve the prognosis for sepsis patients.

Para determinar parâmetros associados à evolução da sepse, foi realizado estudo retrospectivo de 5 anos em um hospital universitário. Foram avaliados 104 pacientes consecutivos com sepse, sendo 55,8 por cento homens. A mortalidade foi de 68,3 por cento, associada à idade elevada (p<0,05). Doenças crônicas associadas e sítio de infecção não relacionados ao prognóstico. Identificação de bactérias gram-positivos foi mais frequente em sobreviventes (p<0,05) e não detecção do germe foi associada à mortalidade (p<0,01). O uso apropriado de antibióticos (germe sensível a pelo menos uma droga administrada) foi associado à sobrevida (p<0,0001) enquanto uso inapropriado (p<0,05) ou empírico (p<0,01) foi mais freqüente em não sobreviventes. No diagnóstico, leucocitose foi a principal (54,8 por cento) alteração no leucograma. Na evolução, leucograma normal foi associado à sobrevida (p<0,01) e leucocitose à mortalidade (p<0,05). Em conclusão, a mortalidade foi associada à ausência de detecção do germe, leucocitose na evolução da sepse e uso inapropriado ou empírico de antibióticos. O tratamento baseado em evidências e direcionado para fatores de risco que podem ser modificados deve melhorar o prognóstico do paciente com sepse.

Effect of myocardial protection and perfusion temperature on production of cytokines and nitric oxide during cardiopulmonary bypass / Efeito da proteção miocárdica e temperatura de perfusão sobre a produção de citocinas e óxido nítrico durante bypass cardiopulmonar

PURPOSE: To investigate the effects of different conditions used during cardiopulmonary bypass (CPB) surgery on accompanying production of cytokine and nitric oxide (NO). METHODS: Patients undergoing CPB for the first time were prospectively enrolled and divided into two groups according to CPB parameters performed: i) normothermia (36.5-37°C) with blood cardioplegia (NB group, n=10) and ii) hypothermia (29-31°C) with crystalloid cardioplegia (HC group, n=10). Plasma samples obtained following intubation (baseline), during (5 and 30 min) and after (4 and 24 h) CPB were assayed for cytokines (ELISA) and NO metabolites (Griess reaction). RESULTS: Peak concentrations of interleukin (IL)-6 and IL-8 were reached at 4 h post CPB in both groups, but in the HC group those levels increased earlier and persisted for longer (24 h) compared to baseline (P < 0.05). IL-10 levels also increased at 4 h compared to baseline, but only significantly so in the HC group. NO metabolites were reduced in HC group at all time points compared to baseline (P < 0.05), while no significant differences were detected in the NB group. CONCLUSION: The association between increased systemic levels of cytokines and reduced NO production in the HC group suggests that different myocardial protection and/or perfusion temperature used during CPB may contribute to the extent of inflammatory response.

OBJETIVO: Investigar a hipótese de que diferentes procedimentos durante o bypass cardiopulmonary (BCP) causa diferentes níveis de citocinas (IL) e óxido nítrico (NO). MÉTODOS: Pacientes submetidas a BCP foram prospectivamente estudadas de acordo com bypass realizado sobre normotermia (36.5-37°C) com cardioplegia sanguínea (NB group, n=10) or hipotermia (29-31°C) com cardioplegia cristalóide (HC group, n=10). Amostras de Plasma foram obtidas após a intubação (linha de base), durante (5, 30 min) e após (4, 24 h) o BCP. Os ensaios foram realizados através de ELISA (IL) e metabólitos do NO (reação de Griess). RESULTADOS: Os picos de concentrações de IL-6 and IL-8 estavam aumentados em 4 h pós BCP em ambos os grupos, mas no grupo HC estes níveis aumentaram precocemente e persistiram aumentadas por 24 h, comparado a linha de base (P<0.05). O nível de IL-10 também teve o pico em 4 h, mas estatisticamente significante somente no grupo HC, comparado a linha de base. Os metabólitos do NO estavam reduzidos no grupo HC, em todo o tempo, comparado a linha de base (P<0.05), enquanto nenhuma diferença estatisticamente significante foi detectada no grupo NB. CONCLUSÃO: A associação entre o aumento sistêmico dos níveis de citocina e a redução da produção de NO no grupo HC sugere que o tipo de proteção miocárdica e/ou temperatura de perfusão no BCP pode ser um fator determinante na extensão da resposta inflamatória.

Failure of neutrophil migration toward infectious focus in severe sepsis: a critical event for the outcome of this syndrome

Sepsis is a systemic inflammatory response commonly caused by bacterial infection. We demonstrated that the outcome of sepsis induced by cecal ligation and puncture (CLP) correlates with the severity of the neutrophil migration failure towards infectious focus. Failure appears to be due to a decrease in the rolling and adhesion of neutrophil to endothelium cells. It seems that neutrophil migration impairment is mediated by the circulating inflammatory cytokines, such as TNF-alpha and IL-8, which induce the nitric oxide (NO) production systemically. It is supported by the fact that intravenous administration of these cytokines reduces the neutrophil migration induced by different inflammatory stimuli, and in severe sepsis the circulating concentrations of the cytokines and chemokines are significantly increased. Moreover, the neutrophil migration failure and the reduction in the rolling/adhesion were not observed in iNOS-/- mice and, aminoguanidine prevented this event. We also demonstrated that the failure of neutrophil migration is a Toll-4 receptor (TLR4) dependent mechanism, since it was not observed in TLR4 deficient mice. Furthermore, it was also observed that circulating neutrophils obtained from septic patients present failure of neutrophil chemotaxis toward fMLP, IL-8, and LTB4 and an increased in sera concentrations of NO3 and cytokines. In conclusion, we demonstrated that, in sepsis, failure of neutrophil migration is critical for the outcome and that NO is involved in the process.