Detección e identificación de complejos de leishmania a traves de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) e hibridación con sondas especificas de complejo / Valores hematologicos en recien nacidos sanos habitantes de altura: 3600 msnm

Pregutna de investigación. ¿Los iniciadores L1 y L2 serán útiles en la detección e identificación de complejos de Leishmania, logrando una alta sensibilidad y escificidade de la Reacción en Cadena de la Polimerasa? Objetivo. Evaluar los iniciadores L1 y L2 para la identifcación de complejos de Leishmania a trvés de técnicas moleculares: Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) e hibridación con osndas específicas de ADN de Kinetoplasto. Diseño. Básico experimental. Métodos.El presente estudio se realizó en 27 cepas de referencia caracterizadas previamente por electroforesis de isoenzimas. para la Reacción en Cadena de la Polimerasa se utilizo iniciadores L1 y L2, diseñados a partir de la secuenciación realizado por 1. Estos se alinean en la parte consevada y amplifican la arte variable de los minicírculos de ADN de kinetoplasto. Las sondas fuern elaboradas a partir de losproductos de PCR, seleccionado bandas mayores para tres complejos: brasiliensis (MHOM/BO90/CG); mexicana (MNYC/BZ/6"/M379); y denovani (MHOM/BR/74/PP75). La tecnica de hibridación fue realizada bajo condiciones de alta astringencia que nos da la seguridad de una alta homología entre las sondas y el ADN reconocido por ellas. Resultados. Se ha obtenido un perfil polimórfico para cada una de las cepas en estudio, con una alta selsibilidad de la técnica de PCR, amplificando varios Kinetoplastidae además de Leishmania, entre ellos Trypanisoma cruzi, Trypanisoma rangeli y Tripanisoma brucei. Las sondas presentan una alta especificidad logrando así racionalizar el amplio polimorfismo obtenido por PCR. Las sondas son una herramienta uútil para la detección e identificación directa de complejos de Leishmania. Conclusiones. Los idicadores L1 y L2 dan un perfil polimófico para cada cepa, presentando una sensibilidad muy alta, sin embargo no son específicos lde Leishmania, amplifican otros Kinetoplastidae. Este alto polimorfismo se racionaliza con la utilización de las osndas construidas a partir del polimorfismo obtenido, las que son especificas de complejo.

Immune response to Trypanosoma cruzi shed acute phase antigen in children from an endemic area for Chagas' disease in Bolivia

A field study of the immune response to the shed acute phase antigen (SAPA) of Trypanosoma cruzi was carried out in the locality of Mizque, Cochabamba department, Bolivia. Schoolchildren (266), with an average of 8.6ñ3.6 years, were surveyed for parasitological and serological diagnosis, as well as antibodies directed against SAPA using the corresponding recombinant protein in ELISA. The antibodies against SAPA were shown in 82 per cent of patients presenting positive serological diagnosis (IgG specific antibodies). The positive and negative predictive values were 0.88. Antibodies anti-SAPA were shown in 80.8 per cent of the chagasic patients in the initial stage of the infection (positive IgM serology and/or positive buffy coat (BC) test) and in 81.4 per cent of the patients in the indeterminate stage of the infection (positive IgG serology with negative BC and IgM tests). These results show that the anti-SAPA response is not only present during the initial stage of the infection (few months) but extends some years after infection.