Is the colon mucosa affected by ten days of gastric restriction in an animal model?

Abstract Purpose To identify whether the colon mucosa is affected by ten days of gastric restriction in an animal model. Methods An experimental model of gastric restriction was devised using rats. The animals were submitted to surgical gastrostomy, and a cylindrical loofah was inserted into the stomach. We studied 30 adult male Wistar rats divided into three groups: the stomach restriction group (R10); the sham group (S10), which underwent the same procedure except for the loofah insertion; and the control group (C10). The expression of neutral and acid mucins was evaluated using histochemical techniques. Goblet cells and protein content were compared between groups using generalized estimation equations (GEEs). Bonferroni's multiple comparison was applied to identify differences between the groups. All tests considered a 5% significance level. Results There was an increased expression of neutral mucins, acid mucins and goblet cells in the R10 group. Collagen was also enhanced in the R10 group. Conclusion The colon mucosa is affected by ten days of gastric restriction in an animal model, increasing neutral mucins, acid mucins and collagen content with trophic maintenance.

Unusual remodeling of the hyalinization band in vulval lichen sclerosus by type V collagen and ECM 1 protein

OBJECTIVES: The vulva is the primary site affected in lichen sclerosus, a chronic dermatosis in women that is histologically characterized by a zone of collagen remodeling in the superior dermis. The normal physiological properties of the vulva depend on the assembly of collagen types I (COLI), III (COLIII) and V (COLV), which form heterotypic fibers, and extracellular matrix protein interactions. COLV regulates the heterotypic fiber diameter, and the preservation of its properties is important for maintaining normal tissue architecture and function. In the current work, we analyzed the expression of COLV and its relationship with COLI, COLIII, elastic fibers and extracellular matrix protein 1 in vulvar biopsies from patients with lichen sclerosus. METHODS: Skin biopsies from 21 patients with lichen sclerosus, classified according to Hewitt histological criteria, were studied and compared to clinically normal vulvar tissue (N=21). Morphology, immunohistochemistry, immunofluorescence, 3D reconstruction and morphometric analysis of COLI, COLIII, COLV deposition, elastic fibers and extracellular matrix 1 expression in a zone of collagen remodeling in the superior dermis were performed. RESULTS: A significant decrease of elastic fibers and extracellular matrix 1 protein was present in the hyalinization zone of lichen sclerosus compared to healthy controls. The non-homogeneous distribution of collagen fibers visualized under immunofluorescence in the hyalinization zone of lichen sclerosus and control skin was confirmed by histomorphometry. Lichen sclerosus dermis shows a significant increase of COLI, COLIII and COLV expression compared to the healthy controls. Significant inverse associations were found between elastic fibers and COLV and between COLV and extracellular matrix 1 expression. A direct association was found between elastic fiber content and extracellular matrix 1 expression. Tridimensional reconstruction of the heterotypic fibers ...

Experimental model of Achilles tendon injury in rats

PURPOSE: To describe an effective experimental model to study the Achilles tendon healing. METHODS: Forty male Rattus norvegicus albinus, Wistar lineage adult male weighing 250 to 300g were used for this experiment and thirty were surgically submitted to bilateral partial transverse section of the Achilles tendon. The right tendon was treated with radio waves (RF) whereas the left tendon served as control. On the third postoperative day, the rats were divided into four experimental groups consisting of ten rats each which were treated with monopolar RF adjusted to 650 kHz and 2w, for two minutes twice a week and a group of normal animals without any intervention, until they were sacrificed on the 7th, 14th and 28th days, respectively. Tendons were weighed and collagen quantification was evaluated by hydroxyprolin content. RESULTS: Significant reduction in collagen content on day 7, 14 and 28 was related to control experiment to normal tendon (7 days, p<0.01; 14 e 28 days, p<0.05). CONCLUSION: The experimental model has been effective and available to be used to study Achilles tendon healing. .

Trombose em artérias pulmonares pequenas e médias em granulomatose de Wegener: um estudo com microscopia confocal por varredura a laser / Thrombosis in small and medium-sized pulmonary arteries in Wegener's granulomatosis: a confocal laser scanning microscopy study

OBJETIVO: A granulomatose de Wegener (GW) pode causar dano nas células endoteliais e fenômenos tromboembólicos. Entretanto, poucos estudos analisaram a microcirculação pulmonar - artérias pulmonares de pequeno/médio calibre (APPMC) - em pacientes com GW. O objetivo deste estudo foi quantificar trombos de fibrina em amostras de APPMC de pacientes com GW. MÉTODOS: Analisamos 24 APPMC de seis pacientes com GW e 16 APPMC de quatro pacientes controles sem WG. Utilizamos CD34 para a marcação do endotélio em todas as amostras e microscopia confocal a laser para detectar trombos de fibrina intravasculares. Calculamos a área total do vaso, a área livre do lúmen e a área trombótica. RESULTADOS: A média da área total do vaso foi similar no grupo GW e no grupo controle (32.604 µm² vs. 32.970 µm², p = 0,8793). Trombos foram identificados em 22 das 24 APPMC (91,67 por cento) no grupo GW, e em nenhuma do grupo controle (p < 0,0001; OR = 297 (IC95 por cento: 13,34-6.612). A média da área trombótica foi maior no grupo GW do que no grupo controle (10.068 µm² vs. 0.000 µm², p < 0,0001). Em contraste, a média da área livre do lúmen foi menor no grupo GW que no grupo controle (6.116 µm² vs. 24.707 µm², p < 0,0001). CONCLUSÕES: A microscopia confocal a laser mostrou uma associação significante entre trombose microvascular pulmonar e GW. Isso sugere um possível papel da trombose microvascular na fisiopatologia da GW pulmonar, evocando o potencial benefício da anticoagulação na GW pulmonar. Entretanto, novos estudos são necessários para confirmar nossos achados, assim como um ensaio clínico randomizado a fim de testar o papel da anticoagulação no tratamento de pacientes com GW pulmonar.

OBJECTIVE: Wegener's granulomatosis (WG) can cause endothelial cell damage and thromboembolic events. Nevertheless, there have been few studies on the pulmonary microcirculation-small and medium-sized pulmonary arteries (SMSPA)-in patients with WG. The objective of this study was to quantify fibrin thrombi in the SMSPA of patients with WG. METHODS: We analyzed 24 SMSPA samples collected from six patients with WG and 16 SMSPA samples collected from four patients without WG. In all samples, we used the endothelial cell marker CD34 and confocal laser scanning microscopy in order to detect intravascular fibrin thrombi. We calculated the total vessel area, the free lumen area, and the thrombotic area. RESULTS: The mean total vessel area was similar in the WG and control groups (32,604 µm² vs. 32,970 µm², p = 0.8793). Thrombi were present in 22 (91.67 percent) of the 24 WG group samples and in none of the control group samples (p < 0.0001; OR = 297; 95 percent CI: 13.34-6,612). The mean thrombotic area was greater in the WG group samples than in the control group samples (10,068 µm² vs. 0.000 µm²; p < 0.0001). In contrast, the mean free lumen area was smaller in the WG group samples than in the control group samples (6,116 µm² vs. 24,707 µm²; p < 0.0001). CONCLUSIONS: Confocal laser scanning microscopy revealed a significant association between pulmonary microvascular thrombosis and WG. This suggests a possible role of microvascular thrombosis in the pathophysiology of pulmonary WG, evoking the potential benefits of anticoagulation therapy in pulmonary WG. However, further studies are needed in order to confirm our findings, and randomized clinical trials should be conducted in order to test the role of anticoagulation therapy in the treatment of patients with pulmonary WG.

Association between decreases in type V collagen and apoptosis in mouse lung chemical carcinogenesis: a preliminary model to study cancer cell behavior

OBJECTIVE: The importance of type V collagen and its relationships with other types of collagen and with vascular and epithelial apoptosis were studied in a model of chemical carcinogenesis in the mouse lung. METHODS: Two groups of male Balb/c mice were studied: a) animals that received two intraperitoneal doses of 3 g/kg urethane carcinogen (urethane group = 24); and b) animals submitted to a sham procedure, comparable to the test group (control group = 7). Both groups were sacrificed after 120 days. In situ detection of apoptosis, immunohistochemistry, immunofluorescence and histomorphometry were used to evaluate the fraction occupied by the tumor, vascular and epithelial apoptosis, and type V, III and I collagen fibers in the lung parenchyma from both groups. RESULTS: The lung parenchyma from the urethane group showed low fractions of vascular and epithelial apoptosis as well as reduced type V collagen fibers when compared to the control group. A significant direct association was found between type V and III collagen fibers and epithelial apoptosis, type V collagen fibers and vascular apoptosis, and type V and type I collagen fibers. CONCLUSION: The results show that a direct link between low amounts of type V collagen and decreased cell apoptosis may favor cancer cell growth in the mouse lung after chemical carcinogenesis, suggesting that strategies aimed at preventing decreased type V collagen synthesis or local responses to reduced apoptosis may have a greater impact in lung cancer control.

Histomorphometric analysis of cutaneous remodeling in the early stage of the scleroderma model

INTRODUCTION/OBJECTIVES: Systemic sclerosis, or scleroderma, is a rheumatic disease characterized by autoimmunity, vasculopathy, and fibrosis of the skin and several internal organs. In the present study, our aim was to assess the skin alterations in animals with scleroderma during the first stages of disease induction. METHODS: To induce scleroderma, female New Zealand rabbits (n = 12) were subcutaneously immunized with 1 mg/ml of collagen V (Col V) in complete Freund's adjuvant, twice with a thirty-day interval. Fifteen days later, the animals received an intramuscular booster with type V collagen in incomplete Freund's adjuvant, twice with a fifteen-day interval. The control group was inoculated with 1 ml of 10 mM acetic acid solution diluted with an equal amount of Freund's adjuvant. Serial dorsal skin biopsies were performed at 7, 15, and 30 days and stained with H&E, Masson's trichrome and Picrosírius for morphological and morphometric analyses. RESULTS: Immunized rabbits presented a significant increase in collagen in skin collected seven days after the first immunization (p=0.05). CONCLUSION: The results from this experimental model may be very important to a better understanding of the pathogenic mechanisms involved in the beginning of human SSc. Therapeutic protocols to avoid early remodeling of the skin may lead to promising treatments for SSc in the future.

Changes in histoanatomical distribution of types I, III and V collagen promote adaptative remodeling in posterior tibial tendon rupture

INTRODUCTION: Posterior tibial tendon dysfunction is a common cause of adult flat foot deformity, and its etiology is unknown. PURPOSE: In this study, we characterized the morphologic pattern and distribution of types I, III and V collagen in posterior tibial tendon dysfunction. METHOD: Tendon samples from patients with and without posterior tibial tendon dysfunction were stained by immunofluorescence using antibodies against types I, III and V collagen. RESULTS: Control samples showed that type V deposited near the vessels only, while surgically obtained specimens displayed type V collagen surrounding other types of collagen fibers in thicker adventitial layers. Type III collagen levels were also increased in pathological specimens. On the other hand, amounts of collagen type I, which represents 95 percent of the total collagen amount in normal tendon, were decreased in pathological specimens. CONCLUSION: Fibrillogenesis in posterior tibial tendon dysfunction is altered due to higher expression of types III and V collagen and a decreased amount of collagen type I, which renders the originating fibrils structurally less resistant to mechanical forces.

Meniscectomia parcial como modelo experimental de osteoartrite em coelhos e efeito protetor do difosfato de cloroquina / Partial meniscectomy as an experimental model of osteoarthritis in rabbits and protector effect of chloroquine diphosphate

OBJETIVO: Estabelecer as alterações morfológicas e o remodelamento do tecido cartilaginoso na progressão da osteoartrite (OA) experimental para estudar o efeito do difosfato de cloroquina na cartilagem osteoartrítica. MÉTODOS: A osteoartrite experimental foi induzida em coelhos por meio de meniscectomia parcial. Para analisar a evolução da doença experimental foram estudados três grupos de dez animais, sacrificados a 3, 14 e 22 semanas de indução da doença. Para avaliar o efeito do difosfato de cloroquina um grupo de animais (n = 6) foi tratado preventivamente com 3 mg/kg ao dia, iniciados um mês antes da indução da osteoartrite, e mantidos até o sacrifício (22 semanas). Realizou-se análise histológica das articulações (H&E, tricrômico de Masson) e imunofluorescência para colágeno dos tipos I, II e XI. A intensidade da agressão articular foi quantificada pelo escore de Mankin. RESULTADOS: O modelo experimental reproduziu todas as alterações morfológicas observadas na osteoartrite humana. Animais que receberam difosfato de cloroquina não desenvolveram lesões histológicas observadas na OA. Neste grupo houve significante preservação da estrutura da cartilagem articular (p < 0,0001), conservação da celularidade (p < 0,0001), proteoglicanas, demonstrados pela coloração de azul de anilina (p < 0,005) e integridade da linha de crescimento (p < 0,001), além da inibição da formação de osteófitos, do bloqueio da neoformação óssea e do não-aparecimento de colágeno tipo I (tecido osteocartilaginoso). CONCLUSÃO: O modelo experimental de meniscectomia parcial reproduz de forma gradativa as alterações morfológicas encontradas na osteoartrite, e estudos preliminares com o difosfato de cloroquina sugerem tratar-se de medicamento barato e com grande potencial de emprego como droga condroprotetora.

OBJECTIVE: The aim of this study was to develop an experimental model of osteoarthritis (OA) that could reproduce morphologic alterations viewed in this disease and to study the effect of chloroquine diphosphate on cartilage remodeling. METHODS: osteoarthritis was induced in rabbits by performing partial meniscectomy. To establish the experimental disease evolution, three groups of ten animals were sacrificed at 3, 14, 22 weeks after disease induction. To evaluate the effect of chloroquine diphosfate in OA progression, a group of six animals was treated preventively with 3 mg/kg/day, started one month prior to osteoarthritis induction and kept until the day of sacrifice (22 weeks). Histopathological (Masson trychrome, H&E), biochemical and immunofluorescence analyses to types I, II and XI collagens were made in all animals. Mankin's score was employed to quantify the severity of articular damage. RESULTS: The experimental model reproduced all of the alterations observed in osteoarthritis. Animals treated with chloroquine diphosfate did not develop morphological changes found in OA. There was significant preservation of articular cartilage tissue (p < 0,0001), maintenance of cellular morphology (p < 0,0001), proteoglicans, as demonstrated by aniline blue coloration (p < 0,005) and tidemark protection (p < 0,001), besides inhibition of osteophytes formation and absence of type I collagen expression. CONCLUSION: The experimental model of partial meniscectomy reproduces gradually, all the cartilage morphologic changes found in human osteoarthritis. Preliminary study done with choroquine diphosfate indicates that it is a cheap and effective drug to act as condroprotective agent in OA.

Alterações esofágicas em modelo de esclerodermia induzido por colágeno V em coelhos / Manifestations in the esophagus in the sclerodermia model induced by type V collagen in rabbits

Introdução: a esclerose sistêmica progressiva acomete diversas vísceras, das quais o esôfago é uma das frequentemente lesadas. No entanto, o mecanismo de autoimunidade nesta enfermidade é ainda desconhecida...

Backgrounds: Sclerosis systemic that usually affects the esophagus. However its patologic mechanism is still unknown. Objective: Evaluate the manifestation of the esophagus in a experimental model of scleroderma induced by type V collagen in rabbits. Matherial and Methods: 39 rabbits submited to the model immunization were morfologicaly analised. Results: A progressive deposit of collagen fibers was observed in H&E and Tricomico of Masson. Which was confirmed by the imunofluorescence. Conclusion: We concluded that the characteristics observeds are similar to what happens in the esophagus of human, but in an earlier period...

Nasal tolerance with collagen v protein reverts bronchovascular axis remodeling in experimental bronchiolitis obliterans

INTRODUCTION: The precise role of the remodeling process and possible therapies for bronchiolitis obliterans remain to be established. OBJETIVE: In the present study, we sought to validate the importance of nasal collagen V tolerance to verify whether bronchovascular axis remodeling could be reverted by this therapeutic approach when compared to steroid treatment. METHODS: Mice were randomly divided into 4 groups: control, bronchiolitis obliterans, collagen V tolerance, and prednisone groups. Morphometry was employed to evaluate bronchovascular axis dimensions, collagen density, and immune cell response. Collagen V nasal tolerance and steroid-treated mice showed significantly lower values of terminal bronchiole wall thickness and reduction in peribronchovascular cells; bronchioalveolar lymphoid tissue; and CD3+, CD4+, CD8+, and CD20+ lymphocytes. A significant decrease in CD68+ macrophage density was found in prednisone-treated mice. In addition, a strong quantitative relationship was found between collagen V tolerance, and reduction in density of immune cells and collagen. RESULTS: Our results indicate that bronchovascular axis remodeling in bronchiolitis obliterans can be reverted by collagen V nasal tolerance, possibly as the result of T-cell suppression. CONCLUSION: We concluded that the tolerance effects in this model were strongly related to the improvement in bronchovascular remodeling, and these may be an appropriate targets for further prospective studies on nasal collagen V tolerance.

INTRODUÇÃO: A participação precisa do processo de remodelamento e possíveis implicações no tratamento da bronquiolite obliterante ainda não está estabelecida. OBJETIVOS: Estabelecer a importância da tolerância nasal induzida pelo colágeno do tipo V e verificar se o processo de remodelamento do eixo broncovascular pode ser revertido com esta estratégia terapêutica comparada ao efeito do tratamento com esteróides. MATERIAL E MÉTODO: Camundongos foram divididos em quatro grupos: controle, bronquiolite obliterante, tolerância nasal com colágeno do tipo V e prednisona. Morfometria foi realizada para avaliar as dimensões do eixo broncovascular, densidade de colágeno e resposta imunocelular. Camundongos submetidos à tolerância nasal com colágeno do tipo V e tratados com prednisona exibiram significativas reduções da espessura da parede de bronquíolos terminais, da densidade de células inflamatórias ao redor do eixo peribroncovascular e da resposta imunocelular às custas de linfócitos CD3, CD4, CD8 e CD20. Houve também significativa redução da densidade de macrófagos CD68 nos camundongos tratados com prednisona. Adicionalmente, houve uma forte associação entre tolerância nasal induzida pelo colágeno do tipo V, resposta imunocelular e redução do conteúdo de colágeno peribroncovascular. RESULTADOS: O remodelamento do eixo broncovascular na bronquiolite obliterante pode ser revertido pela indução de tolerância nasal com o colágeno do tipo V, possivelmente como resultado de supressão de linfócitos T. CONCLUSÃO: Os efeitos da tolerância nasal no presente modelo estiveram fortemente relacionados à melhora no remodelamento do eixo broncovascular, despontando como um alvo promissor para estudos prospectivos.

Auto-imunidade e colágeno V / Autoimmunity and collagen V

As proteínas da matriz extracelular (MEC) e seus componentes estão sendo amplamente estudados na literatura médica, assim como sua relação com o remodelamento tecidual presente nas doenças reumáticas. Neste artigo, mostramos a importância do estudo do colágeno do tipo V no entendimento da etiologia da esclerodermia, no que se refere ao desencadeamento da auto-imunidade nesta enfermidade. Estudos em nosso laboratório demonstram que a sensibilização com colágeno do tipo V em coelhos pode resultar em um modelo animal de esclerodermia. Diante destes fatos, sugerimos que pesquisas neste campo podem ser de grande valia no desenvolvimento de novas condutas terapêuticas.

The extracellular matrix (ECM) proteins and their components have been widely studied in medical literature, as well its relationship with the tecidual remodeling present in the rheumatic disease. In this paper we show the importance of understanding the role of type V collagen as an important trigger of rheumatic autoimmune diseases. Studies in our laboratory demonstrate that type V collagen sensibilization in rabbits, could result in an animal scleroderma model. In this way we suggested that researches in this field can be worthy in development of new therapeutic procedures.

Modelo experimental de doenças difusas do tecido conjuntivo (DDTC) induzido por colágeno do tipo V / Experimental model of diffuse connective tissue disease (DCTD) induced by type V collagen

Objetivos: As doenças difusas do tecido conjuntivo (DDTC) são enfermidades de etiologia e patogênese desconhecidas, responsáveis pelo desenvolvimento de manifestações clínicas multissistêmicas, e do ponto de vista laboratorial caracterizadas pela presença de auto-anticorpos dirigidos contra diferentes componentes celulares. Modelos experimentais que reproduzem manifestações clínicas, histológicas e laboratoriais similares às observadas em humanos são extremamente importantes no estudo da patogênese e abordagem terapêutica destas enfermidades. Métodos: Descrevemos um modelo inédito de autoimunidade desenvolvido em coelhos pela imunização com colágeno tipo V, fibrila com características peculiares em sua síntese, que confere grande antigenicidade à sua molécula e participa de processos de reparação, diferenciação e proliferação celular. Analisamos as alterações morfológicas promovidas em diferentes órgãos de coelhos sensibilizados com o colágeno tipo V e sacrificados após 75 e 120 dias do início da imunização. Resultados: Verificou-se presença de vasculite em pulmões, especialmente nos lobos basais, caracterizados pelo espessamento da íntima vascular, infiltrado celular por eosinófilos e linfócitos, além de depósito de colágeno na região subendotelial, perivascular, peribrônquica e interstício pulmonar. No coração observou-se depósito de colágeno entre as fibras cardíacas e vasculite. No esôfago notou-se diminuição do lúmen, depósito de colágeno em nível submucoso e perivascular. Alterações nos glomérulos renais, como discreta proliferação mesangial e espessamento da membrana basal, e moderado depósito de colágeno intersticial, foram aspectos morfológicos observados nos rins. Na sinóvia houve proliferação de células epiteliais e depósito de colágeno subepitelial. Estudo histológico da cartilagem articular revelou aumento da celularidade e remodelamento da matriz extracelular. Conclusões: Neste trabalho descrevemos um novo modelo experimental no qual um fator exógeno promoveu lesão patológica em múltiplos órgãos de um animal sadio. As alterações morfológicas observadas nos levam a propor que este seja um modelo experimental que reproduz achados clínicos e laboratoriais semelhantes aos da esclerodermia.

Caracterização bioquímica do colágeno do tipo VI na osteoartrose experimental / Biochemical characterization of type VI collagen in experimental osteoarthritis

Objetivo - A razão deste estudo foi avaliar o conteúdo de colágeno do tipo VI presente na cartilagem normal e osteoartrósica em coelhos submetidos a meniscectomia parcial. Metodologia - Avaliação histológica da cartilagem através do tricômico de Mallory e isolamento do colágeno do tipo VI com cloreto de guanidina 4M, assim como a caracterização de suas cadeias por eletroforese em gel de poliacrilamida e cromatografia líquida. Resultados - Na fase inicial da indução, equivalente a três semanas, e na fase mais tardia da doença, 14 semanas, foi encontrado aumento gradativo nos níveis de colágeno do tipo VI extraídos em relação às cartilagens normais e aumento dos aminoácidos 4-hidroxiprolina e cisteína. Conclusão - Os resultados sugerem que existe maior produção de colágeno do tipo VI nas cartilagens osteoartrósicas e que este fato parece ter relação direta com o tempo de doença e grau de degeneração cartilaginosa

Análise morfológica da cartilagem articular de coelhos submetidos a meniscectomia parcial / Morphologic analysis of the articular cartilage of rabbits submitted to partial meniscectomy

A osteoartrose é uma doença degenerativa da cartilagem articular que provoca rigidez e dor nas articulações acometidas. Vários fatores podem ser responsáveis por seu desenvolvimento. Os principais elementos desencadeadores são os mecânicos e os bioquímicos, que provocam um turnover acelerado da cartilagem, ou seja, um desbalanceamento entre produção e degradação do colágeno da matriz extracelular. Nesta doença, os colágenos próprios da cartilagem são degradados, causando alterações relevantes na estrutura do tecido. Pelo método da meniscectomia parcial em coelhos foram obtidas alterações semelhantes às encontradas na osteoartrose humana, facilitando o estudo dos mecanismos iniciais da doença. Após 14 semanas de indução foi realizado estudo morfológico nas amostras de cartilagem articular, através da hematoxilina-eosina e do tricrômico de Mallory. Observou-se, através da hematoxilina-eosina, degradação das células da camada superficial, além de mudanças na organização celular da área profunda do tecido. Pelo tricrômico de Mallory, modificações importantes no colágeno da matriz extracelular, principalmente da camada superficial, puderam ser evidenciadas. Esses achados reforçam a idéia de que a meniscectomia parcial em coelhos é um excelente modo de indução da osteoartrose, reproduzindo os padrões encontrados na osteoartrose humana

Colágenos II e XI e 4-hydroxiprolina na cartilagem da cabeça do fêmur de portadores de osteoartrose nodal / Collagens Type II and XI and 4-hydroxyproline in the femoral head cartilage of patients with nodal osteoarthritis

Objetivo: Evidências clínico-radiográficas apontam para o caráter generalizado da osteoartrose nodal (OAN). Neste estudo, pesquisou-se a solubilidade e quantificacão dos colágenos II e XI na cartilagem articular histologicamente normal dos portadores de OAN. Método: Foram utilizadas cartilagens da cabeça do fêmur de necrópsias de 8 mulheres com OAN e 8 mulheres sem OAN (controle), pareadas para idade e índice de massa corpórea. Nas cartilagens de cada fêmur foram identificadas regiões normais e regiões osteoartrósicas. O colágeno de cada região foi extraído através da digestão com pepsina e quantificado pelo conteúdo de 4-hidroxiprolina. A solubilidade foi definida como a quantidade de colágeno extraída pela pepsina. A purificação e a identificação dos colágenos tipo II e XI foram realizadas através de precipitação sequencial salina seletiva e eletroforese em gel de poliacrilamida e sua quantificação foi feia por densitometria. Resultados: Todos os indivíduos com OAN e os controles apresentaram regiões osteoartrósicas na cabeça femoral. Nos portadores de OAN o colágeno está mais solúvel que no grupo controle, tanto em relação à cartilagem sã (p=0,02), como na osteoartrósica (p=0,01). Os portadores de OAN apresentaram maior quantidade de colágeno II que os controles, tanto nas regiões normais (p=0,0001) como nas osteoartrósicas (p=0,03). O colágeno XI da cartilagem artrósica foi maior no grupo controle (p=0,03); na cartilagem sã, nesses dois grupos, a extração do colágeno XI foi mínima, não permitindo comparação. Conclusão: Esses achados demonstram que na osteoartrose nodal existem alterações no colágeno da cartilagem articular, que estão presentes antes da eclosão da doença. Além disso, verificou-se que, na cartilagem já lesada, o colágeno também se mostra diferente na OAN comparado com controles. Infere-se que a composição peculiar do colágeno na osteoartrose nodal poderia tornar a cartilagem mais suscetível ao desenvolvimento da doença

Quantificação do colágeno XI em cartilagem articular de coelhos com osteoartrose / Quantification of collagen type XI in articular cartilage of rabbits with osteoarthritis

A osteoartrose é uma doença degenerativa que atinge principalmente a cartilagem, osso subcondral e outras estruturas articulares. Esta cartilagem é formada por tecido conectivo altamente diferenciado constituído por uma densa matriz, avascular e hipocelular. A porção fibrosa da cartilagem articular é constituída principalmente por colágeno, sendo este um dos componentes de maior importância da matriz cartilaginosa. Entre os colágenos fibrilares da cartilagem articular pode-se ressaltar o tipo XI que, apesar de sua localização e função na fibra colágena não serem bem conhecidas, parece exercer função importante na organização da arquitetura das fibras. Neste estudo, o colágeno XI foi isolado a partir da cartilagem articular de coelhos normais e de coelhos submetidos a meniscectomia parcial, com período de indução equivalente a 14 semanas. A cartilagem foi tratada com pepsina e o colágeno foi fracionado através de gradiente sequencial salino com cloreto de sódio, analisado por SDS-PAGE e densitometria. Os resultados indicaram mudança no perfil eletroforético das cadeias do colágeno do tipo XI, na cartilagem dos animais após 14 semanas de indução, quando comparadas com os controles normais, sugerindo participação ativa desse tipo de colágeno na evolução do processo degenerativo articular