Caracterização molecular de cepas de rotavírus e norovírus: um estudo de 6 anos (2004-2009) / Characterization of rotavirus and norovirus strains: a 6-year study (2004-2009)

OBJETIVO: Monitorar infecções causadas por rotavírus (RV) e norovírus (NoV) em crianças hospitalizadas < 5 anos com gastroenterite aguda provenientes do estado de São Paulo durante um período de 6 anos (2004-2009). MÉTODOS: Este estudo retrospectivo foi realizado em 61 centros médicos, utilizando amostras fecais coletadas por conveniência, analisadas por ensaio imunoenzimático, eletroforese em gel de poliacrilamida, transcrição reversa seguida de reação em cadeia pela polimerase e sequenciamento para caracterização dos genótipos. RESULTADOS: Infecções por RV e NoV foram detectadas em 29,6 por cento (144/487) e 29,2 por cento (26/89) das amostras, respectivamente. Os genótipos de RV detectados com maior frequência foram: G9P[8] em 2004; G1P[8] em 2005; G9P[8] em 2006; e G2P[4] durante os anos de 2007, 2008 e 2009. A taxa de detecção diminuiu de 36,3 por cento (33/91) em 2004 para 4,2 por cento (4/95) em 2009. NoV pertencente ao genogrupo GII foi encontrado em 61,6 por cento (16/26) das amostras, e GI em 11,5 por cento (3/26). Infecções mistas por NoV e RV foram observadas em 2,2 por cento (2/89) das amostras, envolvendo as cepas GI+G9P[8] e GI+G2P[4]. CONCLUSÕES: A distribuição dos genótipos de RV variou com os anos, acompanhada pela redução no número de casos detectados. Ė necessário intensificar a vigilância pós-implantação da vacina contra RV, visando monitorar as cepas circulantes e sua eficácia contra possíveis genótipos emergentes. Os NoVs têm sido cada vez mais identificados como agentes etiológicos relevantes entre crianças hospitalizadas e exercem um papel importante na etiologia viral da gastroenterite pediátrica aguda no estado de São Paulo.

OBJECTIVE: To monitor rotavirus (RV) and norovirus (NoV) infections in hospitalized children < 5 years with acute gastroenteritis in the state of São Paulo, Brazil, during a 6-year period (2004- 2009). METHODS: This retrospective study was conducted with 61 medical centers with convenient surveillance fecal specimens, investigated by enzyme-linked immunosorbent assay, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, reverse polymerase chain reaction and sequencing to genotype characterization. RESULTS: RV and NoV infections were detected in 29.6 percent (144∕487) and 29.2 percent (26/89) of the samples, respectively. The most frequent RV genotypes detected were G9P[8] in 2004; G1P[8] in 2005; G9P[8] in 2006; and G2P[4] during 2007, 2008, and 2009. Detection rate declined from 36.3 percent (33∕91) in 2004 to 4.2 percent (4/95) in 2009. NoV genogroup GII was found in 61.6 percent (16/26) of the samples, and GI in 11.5 percent (3/26). Mixed NoV-RV infections were observed in 2.2 percent (2/89) of the samples, involving GI+G9P[8] and GI+G2P[4] strains. CONCLUSIONS: Genotype distribution varied according to collection year, accompanied by a reduction in detection rate. Use of RV vaccine requires implementation of post-marketing surveillance to monitor RV strain diversity and its efficacy against possible new emerging genotypes. NoVs have been increasingly identified as relevant etiological agents among hospitalized children and play an important role in the viral etiology of pediatric acute gastroenteritis in the state of São Paulo.

Evaluation of enterovirus 71 immune status in São Paulo state, Brazil / Avaliação da situação imunitária contra enterovírus 71 no estado de São Paulo, Brasil

Antibodies to Enterovirus 71 (EV71) were evaluated in São Paulo State during 1999-2005. The titer of neutralizing antibodies against EV71 was determined by microneutralization assay, and a titer of > 1:8 was defined as indicative of protected immunity. Neutralizing antibodies to EV71 were observed in 12.4 percent (55/442) of sera samples, a low protective rate, suggesting that EV71 infection is uncommon in this region, but that there is a relatively high susceptibility to EV71 related diseases, which is worrying considering the recent Asian outbreaks. Also, a significant location-specific difference in seropositivity was observed. Neutralizing antibodies to EV71 were observed in 8.7 percent (21/241) of São Paulo metropolitan area sera samples, and 16.9 percent (34/201) of the sera samples from other municipalities. A high number of Brazilian residents live in country and coastal areas without adequate access to piped water or sanitation. This situation may contribute to the EV71 dissemination in these zones. The analysis of environmental samples could possibly make a valuable contribution to studies on the epidemiology of EV71.

Anticorpos para Enterovírus 71 (EV71) foram avaliados no Estado de São Paulo durante 1999-2005. O título de anticorpos neutralizantes contra EV71 foi determinado pelo ensaio microneutralização, e um título de > 1:8 foi definido como indicador de imunidade protetora. Anticorpos neutralizantes para EV71 foram observados em 12,4 por cento (55/442) das amostras de soro, uma baixa taxa de proteção, sugerindo que a infecção pelo EV71 é incomum nesta região e que existe alta susceptibilidade a doenças relacionadas ao EV71, o que é preocupante considerando os recentes surtos asiáticos. Ainda, foi observada diferença significativa na soropositividade em relação à localização, onde 8,7 por cento (21/241) e 16,9 por cento (34/201) das amostras provenientes da região metropolitana de São Paulo, e demais municípios, respectivamente, apresentaram anticorpos neutralizantes para EV71. Um grande número de brasileiros vive em áreas rurais e à beira-mar, sem acesso adequado à água encanada ou saneamento. Essa situação pode contribuir para a disseminação de EV71 nessas regiões. A análise de amostras ambientais poderia gerar contribuição valiosa para estudos sobre a epidemiologia da EV71.

Caracterização de genótipos de rotavírus em creches: era pré e pós-vacinação contra o rotavírus / Characterization of rotavirus strains from day care centers: pre-and post-rotavirus vaccine era

OBJETIVOS: Em 2006, a vacina contra rotavírus foi incluída no Programa Nacional de Imunização. Este estudo teve como objetivo analisar os resultados da vigilância de genótipos de rotavírus em crianças < 5 anos com gastrenterites agudas provenientes de creches no estado de São Paulo por um período de 5 anos. MÉTODOS: Este estudo retrospectivo foi realizado em 30 creches no período de 2004 a 2008, com amostras fecais convenientes da vigilância das diarreias agudas, analisadas por ELISA, SDS-PAGE, RT-PCR e sequenciamento genético para caracterização do genótipo. RESULTADOS: Infecções por rotavírus foram detectadas em 28,3 por cento de amostras (38/134). Os genótipos mais frequentes detectados foram: G9P[8] e G1P[8] em 2004; G1P[8] em 2005; GNTP[NT] em 2006; G2P[4] em 2007; e nenhum caso foi relatado em 2008. Infecções mistas não foram observadas. A taxa de detecção diminuiu de 65,7 por cento (23/35) em 2004 para 50 por cento (9/18) em 2007. CONCLUSÕES: A distribuição do genótipo variou de acordo com os anos, acompanhada pela redução no número de casos detectados. É necessário intensificar a vigilância pós-implantação da vacina contra rotavírus, visando monitorar as linhagens circulantes e sua eficácia contra possíveis genótipos emergentes.

OBJECTIVES: In 2006 the rotavirus vaccine was included in the Brazilian Immunization Program. The aim of this study was to report the results of a 5-year surveillance study of rotavirus strains in children < 5 years with acute gastroenteritis from day care centers in the state of São Paulo, Brazil. METHODS: This retrospective study was conducted with 30 day care centers from 2004 to 2008 with convenient surveillance fecal specimens, investigated by ELISA, SDS-PAGE, RT-PCR and gene sequencing to genotype characterization. RESULTS: Rotavirus infection was detected in 28.3 percent of samples (38/134). The most frequent genotypes detected were G9P[8] and G1P[8] in 2004; G1P[8] in 2005; GNTP[NT] in 2006; G2P[4] in 2007; and there were no cases in 2008. Mixed infections were not observed. Detection rate declined from 65.7 percent (23/35) in 2004 to 50 percent (9/18) in 2007. CONCLUSIONS: Genotype distribution varied according to collection year, accompanied by a reduction in detection rate. Use of rotavirus vaccine requires implementation of post-marketing surveillance to monitor rotavirus strain diversity and its efficacy against possible new emerging genotypes.

Gatroenterites e infecçöes respiratórias agudas em crianças menores de 5 anos, em área da regiäo Sudeste do Brasil, 1986-1987. II- Diarréias / Gastroenteritis and acute respiratory infections among children up to 5 years old in an area of Southeastern Brazil, 1986-1987. II- Diarrhea

O declínio da morbi-mortalidade pelas gastroenterites é, em boa parte, responsável pela queda da mortalidade infantil por doenças infecciosas nos países do terceiro mundo. Esse agravo ainda se destaca, nesses países, como importante problema de saúde pública, especialmente, entre os menores de 5 anos. Descrever aspectos do comportamento das gastroenterites entre crianças menores de 5 anos, residentes em 5 bairros do Município de Säo Paulo. Estudou-se uma amostra probabilística (N=468) de crianças menores de 5 anos, residentes em 5 áreas do Município de Säo Paulo, SP (Brasil), acompanhada durante um ano, por meio de entrevistas mensais. Durante o acompanhamento foram identificados 139 episódios de diarréia com uma duraçäo média de 5,5 dias, 10 por cento dos casos prolongaram-se por 15 dias ou mais. Em 20 por cento dos episódios havia ao menos outra pessoa na família com diarréia. A incidência foi de 2,78 casos por 100 crianças/mês, sendo mais elevada nos menores de 2 anos. Em 46,1 por cento dos episódios de gastroenterite as crianças näo demandaram assistência médica tendo sido tratadas pelas próprias mäes, ou näo receberam qualquer tratamento; em 51,8 por cento dos episódios o atendimento foi feito em serviços de assistência primária à saúde e somente 2,1 por cento dos casos necessitaram tratamento hospitalar. Nenhuma criança evoluiu para óbito. Entre as medidas terapêuticas mais utilizadas estäo a reidrataçäo oral 25,2 por cento) e a antibioticoterapia associada à reidrataçäo oral (11,5 por cento); em somente 2 casos foi feita reidrataçäo endovenosa. Alguns fatores socioeconômicos e antecedentes pessoais mostraram-se associados à ocorrência de diarréias, entre eles, as condiçöes da habitaçäo, saneamento básico e renda familiar "per capita" e história pregressa de diarréias freqüentes. Os resultados obtidos parecem refletir a tendência de diminuiçäo da morbi-mortalidade por diarréias no Município de Säo Paulo, durante a década de 80, período em que houve acentuada queda nas internaçöes hospitalares por essa causa. Tal tendência deve ser acompanhada atentamente, pois influenciará modificaçöes nas características da demanda de assistência à saúde infantil.

Detecção de roteiros e adenovírus na Grande São Paulo no período 1984-1986: estudo eletroforético do genoma dos rotavírus / Rotavirus and adenovirus detection in the Greater Säo Paulo in 1984-1986: eletrophoretic study of the rotavirus genome

No período de 1984 a 1986, 285 amostras de fezes de crianças com sintomatologia diarreica foram submetidas às provas diagnósticas de ensaio imunoenzimático, eletroforese em gel de poliacrilamida e microscopia eletrônica. Destas amostras, 15,4% foram positivas para rotavírus e 3,2% para adenovírus. Das 44 (15,4%) amostras positivas para rotavírus pelo método imunoenzimático, 37 apresentaram perfil eletroforético do RNA característico dos rotavírus. Destas últimas, 27 foram analisadas segundo o esquema de Lourenço et alii, 1981, tendo sido verificada grande heterogeneidade de perfis e predominância dos rota vírus do subgrupo 1 foi detectada (AU).