Efecto del montelukast sobre la concentración de mediadores inflamatorios en el modelo de artritis gotosa múrida / Effect of montelukast on the concentration of inflammatory mediators in the murine gouty arthritis model

El tratamiento de la artritis gotosa controla parcialmente la enfermedad con efectos secundarios importantes. El montelukast es un antagonista selectivo de los receptores de leucotrienos LTD4, útil en el tratamiento de rinitis alérgica y asma bronquial. Investigaciones previas han reportado un potente efecto antiinflamatorio de montelukast en el modelo de artritis gotosa múrida. Este estudio investigó el efecto de montelukast sobre la concentración de leucotrienos cisteinil y LTB4, interleucina 6 (IL-6) e interleucina 12 (IL-12) en el exudado inflamatorio inducido por monourato sódico (MUS) en el modelo de la bolsa de aire. Veintiún ratones BALB/c fueron distribuidos en tres grupos (n: 7), control negativo de inflamación (A), control positivo de inflamación (B) y experimental (C). Antes de la inyección de MUS (5 mg/mL), en la bolsa de aire, los grupos C y B recibieron por vía oral 1mg/kg de montelukast y solución fisiológica respectivamente, el grupo A fue tratado con solución fisiológica por vía oral y en la bolsa de aire. A las 12 horas de haber inducido el proceso inflamatorio se determinó, por ELISA, la concentración de CistLT, LTB4, IL-6 e IL-12 en el exudado obtenido de las bolsas de aire. Los resultados muestran que el montelukast disminuye significativamente (p < 0,05) las concentraciones de LTB4, IL-6 e IL-12 en el exudado inflamatorio inducido por MUS, y aumenta significativamente (p < 0,05) las concentraciones de CistLT. Esto sugiere que la dosis empleada de montelukast posee un poderoso efecto antiinflamatorio con potencial beneficio en el tratamiento de la artritis gotosa.

Treatment of gouty arthritis partially controls the disease with significant side effects. Montelukast is a selective leukotriene receptor antagonist LTD4, useful in the treatment of allergic rhinitis and bronchial asthma. Previous studies have reported a potent anti-inflammatory effect in the murine gouty arthritis model. This study investigated the effect of MK on the concentration of cysteinylleukotrienes and leukotriene B4, interleukin 6 (IL-6) and interleukin 12 (IL-12) on inflammatory exudate induced by sodium monourate (SMU) in the air pouch model. Twenty one BALB/c mice were divided into three groups (n: 7), negative control of inflammation (A), positive control of inflammation (B), and experimental group (C). Before injection of MUS (5 mg / mL) into the air pouch, the C and B group received 1 mg / kg of oral montelukast and saline solution, respectively. The A group was treated with saline solution orally and in the air bag. At 12 hours after induction of the inflammatory process, the concentration of CistLT, LTB4, IL-6 and IL-12 in the exudate obtained from the air pouch was determined by ELISA. Results showed that montelukast significantly (p <0.05) decreased concentrations of LTB4, IL-6 and IL-12 in MUS-induced inflammatory exudation, and significantly increased (p <0.05) concentrations of CistLT. This suggests that the MK dose used has a powerful anti-inflammatory effect, and is potentially beneficial in the treatment of gouty arthritis.

Efecto de la Leishmania mexicana, RANTES y TNF alfa en el fenotipo y propiedades migratorias in vitro de células dendríticas esplénicas de ratones BALB/c neonatos y adultos / Dendritic cells of BALB/c mice: phenotypic characteristics and migratory properties

Las células dendríticas (CDs) son esenciales en el desarrollo y regulación la respuesta inmunitaria (RI). Existen controversias en cuanto al potencial de inducción de la RI por las CDs en el período neonatal. Se ha propuesto que la RI específica de un neonato depende de la relación cuantitativa CD/linfocito T, y del momento, etapa neonatal o adulta, del encuentro con el antígeno, lo que parece influir sobre las propiedades fenotípicas y biológicas de las CDs, modificando su comportamiento. Por tal motivo, nos planteamos evaluar el efecto de un antígeno, Leishmania mexicana (L. mexicana) y de las citoquinas TNFa y RANTES sobre las características fenotípicas y propiedades migratorias, in vitro, de las CDs esplénicas provenientes de ratones BALB/c neonatos y adultos, usando citometría de flujo y la cámara de Boyden. Las CDs de ratones neonatos y adultos, en condiciones basales, expresan de manera similar, las moléculas CD40, CD86, CMHII y CD54. Este mismo fenómeno se observó al incubar dichas células con el Ag (L. mexicana) a excepción de la molécula CD40 cuya intensidad de expresión se elevó significativamente (P<0,05) en ambos grupos de estudio. El índice de migración de las CDs en presencia de medio de cultivo condicionado de L. mexicana, RANTES y TNFa fue mayor en adultos que en neonatos. Estos resultados muestran que las CDs neonatales son fenotípicamente similares a las adultas. Ante los mismos estímulos se comportan de manera diferente, sugiriendo la existencia de otros factores, que pudieran explicar la mayor susceptibilidad a infecciones en la etapa neonatal.

Dendritic cells (DCs) are essential in the development and regulation of the immune response (IR). The inherent potential of DCs to induce a specific immune response in the neonatal period is controversial. It has been suggested that the specific IR in neonates depends on the quantitative relation of DC/T lymphocytes, as well as on the neonatal or adult age at which the interaction antigen/DC/T lymphocytes occurs. This suggests that this contact has an influence on the phenotypic and/or biological properties of DCs, which modifies its behavior. Therefore, the effects of Leishmania mexicana (L. mexicana) and of TNFa and RANTES cytokines on immunophenotypical characteristics were evaluated on spleen DCs, from neonate and adult BALB/c mice, by using flow cytometry and in vitro migratory properties with a Boyden Chamber. In basal conditions, neonate and adult DCs express the same molecules (CD40, CD86, MHCII and CD54). When the DCs interact with the antigen L. mexicana, the expression of these molecules are similar in adults and in neonates, with the exception of CD40 whose intensity of expression was raised (P<0,05) in both groups. The rate of migration of the DCs in a culture medium conditioned of L. mexicana, RANTES and TNFa was higher in adults than in newborn mice. These observations suggest that neonatal and adult mice DCs have similar phenotypic characteristics. Under the effect of the same stimulus they respond differently; suggesting that other factors are involved in the higher susceptibility that newborns have to infections.

The effect of montelukast in a model of gouty arthritis induced by sodium monourate crystals / Efecto de montelukast en un modelo de artritis gotosa inducido por cristales de monourato de sodio

Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDS) are the first line of therapy in acute gouty arthritis. NSAIDs inhibit the cyclooxygenase pathway, but not the lipooxygenase activity and can have many adverse effects and thus have a limited effect on the control of inflammation in this disease. In this work we studied the effect of montelukast on the cellular inflammatory infiltrate in a model of murine arthritis induced by sodium monourate crystals (SMU), using a subcutaneous air cavity (air pouch) in BALB/c mice. Seven groups of BALB/c mice (n = 4) were distributed into five experimental groups and two inflammatory control groups, a positive and a negative one. Previous to SMU exposure, the experimental groups received montelukast (1 and 0.01 mg/Kg/w) and/or indomethacine (2.5 mg/Kg/w), followed by administration of SMU in the air pouch. The total and differential counts of inflammatory cells were analyzed after 2, 6, 12 and 24 hours. Montelukast, significantly reduced the total number of cells (p<0.05), with a predominant impact on polymorphonuclear over mononuclear cells, especially after 12 hours of the medication. The montelukast/indometacine combination showed an additive effect. Our data show that montelukast has an anti-inflammatory effect in the model of gouty arthritis. Consequently, anti-leukotrienes could represent a new and effective therapy, either isolated or combined with conventional therapy of gouty arthritis.

En artritis gotosa aguda las drogas antiinflamatorias no esteroideas son la primera línea terapéutica. Este tratamiento no es satisfactorio porque inhibe la ciclooxigenasa sin modificar la actividad de la lipooxigenasa, y puede acompañarse de numerosos efectos adversos. Investigamos el efecto de montelukast sobre el infiltrado celular inflamatorio en un modelo de artritis múrida inducida por cristales de monourato de sodio (MUS) en el modelo experimental de la bolsa de aire (air pouch). Siete grupos de ratones BALB/c (n = 4) fueron distribuidos en cinco grupos experimentales y dos grupos controles inflamatorios: positivo y negativo. Los grupos experimentales recibieron, montelukast (1 y 0,01 mg/Kg/p) y/o indometacina (2,5 mg/Kg/p) por vía oral, previo a la administración de MUS en la bolsa del aire. El conteo absoluto y diferencial de las células inflamatorias fue analizado después de 2, 6, 12 y 24 horas de tratamiento. El tratamiento con montelukast redujo significativamente el número total de células presentes en el infiltrado inflamatorio (p < 0,05), con un efecto mayor sobre polimorfonucleares que sobre las células mononucleares, y con un máximo efecto a las 12 horas después de la administración del medicamento. La combinación montelukast/indometacina mostró un efecto aditivo. Los resultados demuestran que montelukast tiene un efecto antiinflamatorio en el modelo de la artritis gotosa. Por lo tanto, los anti-leucotrienos podrían representar una nueva y eficaz terapia, aislada o en combinación con la terapéutica convencional, para la artritis gotosa.

Expresión de receptores de quimiocinas (CXCR-4 y CCR-5) en placenta humana normal a término / CXCR-4 AND CCR-5 expression in normal term human placenta

La interfase materno-fetal posee un Sistema Inmunitario (SI) activo cuyos mediadores -células, citocinas y quimiocinas-, intervienen coordinadamente para favorecer el desarrollo normal del embarazo. No se conoce con exactitud cuales de esos mediadores están presentes en cada estrato celular de la placenta y cuales pueden ser las consecuencias fisiológicas o potencialmente patológicas derivadas de su presencia. Se sabe que las quimiocinas reclutan hacia la decidua células con actividad reguladora y algunos de sus receptores son correceptores para agentes infecciosos como el VIH, por lo que en los últimos años ha cobrado gran interés investigar la expresión de quimiocinas y sus receptores en la interfase materno-fetal. En el presente trabajo se investigó la expresión de los receptores de quimiocinas (CXCR-4 y CCR-5) en 8 muestras de placenta humana normal obtenidas de embarazos a término, de bajo riesgo obstétrico, utilizando técnicas de Inmunocitoquímica (Biotina-Avidina-Peroxidasa). El hallazgo más relevante de este estudio es la demostración de la expresión diferencial de CXCR-4 y de CCR-5 en trofoblasto, estroma y endotelio, y representa, hasta donde conocemos, el primer reporte de la presencia de estos receptores en todas las capas del tejido placentario. Estos resultados contribuyen a ampliar el conocimiento sobre la expresión de receptores de quimiocinas -que actúan como correceptores fundamentales en la infección por VIH-, en la interfase materno-fetal, y puede ser un aporte a ser tomado en cuenta en el estudio de la transmisión vertical de ese agente infeccioso