Endotoxin test by recombinant Factor C for 0.9% sodium chloride injection

Endotoxin contamination is a threat to the safety of pharmaceutical products, especially parenteral drugs. Any sterile and/or pyrogen-free pharmaceutical product requires regulatory specifications to ensure safe patient use. This study covers the performance evaluation study of an endotoxin quantitation commercial kit by recombinant Factor C (rFC), Endozyme II® Go, for 0.9% sodium chloride injection. The samples were spiked with endotoxin solutions between 0.0005 and 10 EU/mL and tested by the rFC kit to evaluate precision, accuracy, detection and quantification limits, linearity, and robustness. Each of the six points was assayed at least five times.The relative standard deviation for precision testing ranged from 1.9 to 8.3%. The recovery accuracy values of endotoxin were between 61% and 125% for the range from 0.005 to 10 EU/mL. The results demonstrated that the rFC method allows endotoxin quantification with accuracy, precision, specificity, and linearity for the range of 0.005 and 10 EU/mL for 0.9% sodium chloride injection. (AU)

A contaminação por endotoxinas é uma ameaça à segurança dos produtos farmacêuticos, especialmente dos medicamentos parenterais. Qualquer produto farmacêutico estéril e/ou livre de pirogênios requer especificações regulatórias para garantir a segurança de uso para o paciente. Este estudo abrange o estudo de avaliação de desempenho empregando o kit comercial Endozyme II® Go para quantificação de endotoxina, por Fator C recombinante (FCr), em amostras de cloreto de sódio 0,9% para uso parenteral. As amostras foram fortificadas com cinco concentrações distintas de soluções de endotoxina na faixa entre 0,0005 e 10 UE/mL. Cada um dos cinco níveis foi testado pelo menos cinco vezes para avaliação dos critérios de precisão, exatidão, limites de detecção e quantificação, linearidade e robustez. O desvio padrão relativo para os testes de precisão variou de 1,9 a 8,3%. Os valores de recuperação de endotoxina para o parâmetro exatidão estiveram compreendidos entre 61% e 125%. Os resultados demonstraram que o método por FCr permite a quantificação de endotoxinas com exatidão, precisão, especificidade e linearidade para a faixa de 0,005 e 10 UE/mL em amostras de cloreto de sódio 0,9% para uso parenteral. (AU)

Monocyte Activation Test (MAT) as a possibility of replacement for the rabbit pyrogen test in hyperimmune sera

ABSTRACT The use of a commercial kit for the monocyte-activation test (MAT) was evaluated for assessing pyrogenic contamination of hyperimmune sera . Three batches of sera, two pyrogen free and one pyrogenic, were tested. Endotoxin spike recover indicated that sample dilutions from 1/2 to 1/10 are suitable. Kit transport and storage conditions were also evaluated, proving that an adequate cold chain must be assured to achieve good results. Furthermore, the commercial MAT kit seemed suitable to replace the rabbit pyrogen test (RPT) for pyrogen testing of hyperimmune sera, although further tests are needed to a full validation.

Microbiological monitoring of clean rooms in development of vaccines

The aim of the present work was to evaluate an environmental monitoring program for clean rooms, or classified environments, involved in the filling and quality control of biological products produced by Butantan Institute, São Paulo, Brazil. This monitoring established the quantification, characterization and seasonality of the microorganisms in air and operators and, moreover, determined the alert and action limits. The total detectable microbial number showed some contrasts in installed air purification systems and in the operational impact on adopted procedures. The typical microbial population consisted of Staphylococcus sp, Micrococcus sp, Bacillus sp and Penicillium sp. The highest microorganism concentration occurred during summer and springtime. The established internal alert and action limits supported the operational procedures. Therefore, the environmental monitoring program is recommended for other laboratories involved in the production of vaccines, hyperimmune sera and biopharmaceuticals.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar um programa de monitoramento microbiológico ambiental para áreas limpas, ou ambientes classificados, envolvidas na produção, envasamento e controle dos imunobiológicos produzidos pelo Instituto Butantan. Este monitoramento permitiu a quantificação, a caracterização e a sazonalidade da população microbiana presente no ar e nos operadores, e a determinação dos limites de alerta e ação. O número total de bactérias detectáveis revelou diferenças nos sistemas de purificação de ar instalados e o impacto operacional ocasionado pelos procedimentos realizados. A população microbiana característica foi composta por bactérias dos gêneros Staphylococcus sp, Micrococcus sp, Bacillus sp e por fungos filamentosos do gênero Penicillium sp. A maior concentração de microrganismos ocorreu nos períodos de verão e primavera. Os limites internos de alerta e ação estabelecidos asseguram os procedimentos operacionais, recomendando o monitoramento microbiológico ambiental a outros laboratórios envolvidos na produção de vacinas, soros hiperimunes e imunobiológicos.