Effect of cell culture system on the production of human viral antigens

Foi realizado estudo comparativo na produção de diferentes antígenos virais usando sistema de microcarregador e sistema tradicional. Células Vero, BHK e MA-104 foram cultivadas em microcarregadores (2mg/ml) utilizando-se biorreatores com capacidade de 3,7 litros e, em paralelo, no sistema convencional com garrafas Roux. Após quatro dias de cultura para as células BHK e sete dias para as células Vero e MA-104, as células foram infectadas com 0,1 MOI (multiplicidade de infecção) de vírus da raiva, vírus do sarampo, poliovírus e rotavírus. Foi determinado o rendimento das células e dos vírus em microcarregadores e sistema convencional. Foi observado no sistema de microcarregador um aumento médio obtido de vinte vezes mais células/ml em relação à cultura convencional em monocamadas, usando garrafas Roux. Por outro lado, as células que cresceram em garrafas Roux apresentaram 1,6 a 6,7 mais vírus/ml em culturas do que no sistema de microcarregador. Contudo o total das amostras em termos de vírus por grupo foi estatisticamente similar para ambos os sistemas (p > 0,05). O rendimento na produção de antígeno viral pode depender não somente da concentração das células, mas também de outros fatores da cultura, como características do suporte no crescimento. Assim, o estudo deste parâmetro pode proporcionar uma linha de base para um futuro melhoramento e estratégias para se estabelecer um aumento em escala na produção de vírus, já que, dependendo do tipo de vírus, a ótima condição encontrada para uma produção de vírus em pequena escala pode não ser adequada para a produção em grande escala, requerendo novas padronização e avaliação.

Produçäo de um antígeno de sarampo por multiplicidade de infecçäo, com rendimento e reprodutibilidade / The role of m.o.i. in standardization of measles antigen preparation

Sarampo é uma doença potencialmente grave e comum, cuja vacinaçäo previne ou atenua as manifestaçöes clínicas. Métodos sorológicos utilizados na detecçäo de anticorpos para o vírus do sarampo têm sido empregados, como o teste de inibiçäo da hemaglutinaçäo e ELISA. Para produçäo de antígeno do sarampo com maior rendimento, e melhor reprodutibilidade, realizamos estudos com diferentes multiplicidades de infecçäo (M.I). Nossos resultados levam-nos a sugerir que a produçäo de antígenos de sarampo é mais eficiente com a utilizaçäo de multiplicidade de infecçäo (M.I) de 0,01 com boa reprodutibilidade, tanto na preparaçäo de ensaios de HA como de ELISA, devendo servir de parâmetro na preparaçäo de antígenos em larga escala para uso em ensaios diagnósticos