Birth of normal kids after microinjection of pronuclear embryos in a transgenic goat (Capra hircus) production program in Brazil

This pilot project was designed to determine if normal kids could be produced after microinjection in pronuclear embryos and subsequent transfer to recipients in a transgenic goat program in Brazil. Twelve donors of the Saanen breed and 17 recipients of an undefined breed were used. The estrus of both donors and recipients was synchronized by a standard progestagen treatment and superovulation obtained by six pFSH injections. Donors in estrus were mated with fertile Saanen bucks. Zygotes were recovered surgically by flushing oviducts. The recovered zygotes with visible pronuclei were microinjected with 500 to 1000 copies of the human G-CSF gene. Two or four embryos were surgically transferred into the oviducts of recipients. One recipient became pregnant and two kids were born. No transgenic goat was identified after PCR analysis. Even though transgenic goats were not obtained, this experiment establishes the basis of a synchronization and superovulation regimen for use in goats raised in Brazil, for the purpose of collecting and manipulating the pronuclear embryos. This project also showed that microinjected one-cell goat embryos can survive to produce live young following surgical transfer

Sincronizaçäo do estro, induçäo da ovulaçäo e fertilidade de ovelhas deslanadas após tratamento hormonal com gonadotrofina coriônica eqüina / Estrus synchronization, ovulation induction and fertility in hairless ewes treated with equine chorionic gonadotrophin

Utilizou-se a sincronizaçäo do estro com esponjas vaginais de 30mg de acetato de fluorogestona durante 12 dias para avaliar o efeito de diferentes doses de eCG sobre o desempenho reprodutivo de ovelhas. Na retirada das esponjas as ovelhas foram divididas em três grupos para receberem 0 (n=26), 200 (n=30) ou 400UI (n=30) de eCG. O estro foi detectado a cada 12h utilizando-se um rufiäo. As fêmeas foram inseminadas por laparoscopia 60h após a retirada das esponjas. Realizaram-se colheitas de sangue aos 5 e 18 dias pós-inseminaçäo para dosagem de progesterona e determinaçäo do número de ovulaçöes e prenhezes, respectivamente. A fertilidade foi verificada por ecografia aos 60 dias e ao parto. Das 86 ovelhas 70,9 por cento apresentaram estro. Essa porcentagem foi maior (P<0,05) nas fêmeas tratadas com eCG: 96,7 por cento (400UI) e 76,7 por cento (200UI) versus 34,6 por cento (0 UI). O intervalo entre o final do tratamento e o início do estro foi maior (P<0,05) no grupo sem eCG, 54,7 +/- 6,3h versus 45,9 +/- 7,8h para 200UI e 40,4 +/- 10,3h para 400UI. Verificou-se menor (P<0,05) número de ovulaçöes e prenhezes no grupo sem eCG. A näo aplicaçäo de eCG influiu negativamente no desempenho reprodutivo de ovelhas deslanadas