Evaluation of the interference of platelets in reticulocyte counting by flow cytometry using thiazole orange / Avaliação da interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por citometria de fluxo, utilizando laranja de tiazol

ABSTRACT Introduction: The reticulocyte count by flow cytometry (FC) - an automated counting method - can present errors due to the presence of interfering factors, contributing to a slight increase in results. However, automated methods have large advantages over the manual method, taken as reference, what justifies efforts to improve their quality. Objective: Evaluate platelet interference with the reticulocyte count by FC, using thiazole orange (TO) (FC/TO). Materials and methods: The method of reticulocyte count by FC/TO and a modified automated equivalent method, which excluded CD61-positive cells (platelets) from analysis (FC/TO/MOD), were compared to the manual method. Conclusion: Results were analyzed according to the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) to assess interchangeability between the methods, by linear regression analysis and paired t-test. The exclusion of interfering fragments from result analysis by the modified method produced results in closer proximity to those of the reference method.

RESUMO Introdução: A contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) - um método de contagem automatizada - pode apresentar erros devido à presença de interferentes, contribuindo para uma ligeira elevação dos resultados. No entanto, os métodos automatizados possuem grandes vantagens em relação ao manual, tido como referência, o que justifica esforços para a melhoria de sua qualidade. Objetivo: Avaliar a interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por CF, utilizando laranja de tiazol (thiazole orange [TO]) (CF/TO). Materiais e métodos: O método de contagem de reticulócitos por CF/TO e um método equivalente automatizado modificado, no qual se excluíram células CD61-positivas (plaquetas) da análise (CF/TO/MOD), foram comparados com o método manual. Conclusão: Os resultados foram analisados de acordo com as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e do teste t pareado. A exclusão de interferentes da análise dos resultados pelo método modificado demonstrou maior proximidade dos resultados com aqueles do método de referência.

Reticulocyte count: comparison among methods / Contagem de reticulócitos: comparação entre métodos

Introduction: The automated counting of reticulocytes has some advantages over the manual method routinely used in clinical laboratories. Technological innovations provide more statistically reliable results, while optimizing the time to perform this test. However, the cost for implementing the automated procedure in laboratory routines still constitutes a barrier to its use in small- and medium-size Brazilian laboratories. Objective: This study evaluated the performance of a new laboratory protocol for reticulocyte counting by flow cytometry using acridine orange (FC/AO), compared with the manual method and with another automated one by flow cytometry using the commercial kit BD Retic-Count (FC/RC) Conclusion: The results showed that, besides being comparable to the manual method, still considered standard, the evaluated new protocol is economically more advantageous than the automated methods currently available, and its cost is comparable to that of the manual method for laboratories that already have appropriate equipment and infrastructure. .

Introdução: A contagem automatizada de reticulócitos apresenta vantagens em relação ao método manual, rotineiramente utilizado em laboratórios clínicos. Inovações tecnológicas permitem resultados estatisticamente mais confiáveis, além de otimizarem o tempo para realização desse exame. No entanto, o custo para aplicação do procedimento automatizado em rotinas laboratoriais ainda constitui uma barreira para sua implementação em laboratórios brasileiros de pequeno e médio porte. Objetivo: O presente estudo avaliou o desempenho de um protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange (CF/AO), comparando-o com o método manual e o automatizado por citometria de fluxo utilizando o kit comercial BD Retic-Count (CF/RC). Conclusão: Os resultados mostraram que, além de ser comparável com o método manual, ainda considerado padrão, o protocolo avaliado é economicamente mais vantajoso do que os métodos automatizados atualmente disponíveis, sendo o seu custo comparável com o do método manual para laboratórios que já apresentam aparelhagem e infraestrutura adequadas. .

Contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange: validação de um novo protocolo / Flow cytometry reticulocyte counting using acridine orange: validation of a new protocol

Introduction: Currently, the reticulocyte counting is a challenge for clinical laboratories in Brazil, mainly for the ordinary ones, which still use the manual method. This method has some limitations, since it consists of a laborious method, time consuming, with low accuracy. Objectives: This study has developed and evaluated the performance of a New Laboratory Protocol for flow cytometry (FC) reticulocytes counting using acridine orange (AO) as dye, aiming to standardize a more precise, easy, fast implementation, and low cost protocol. After standardization of the New Protocol (FC/AO), it was compared with the manual method. The results were analyzed according to the recommendations of the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), now known as Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), to evaluate the interchangeability of methods in linear regression analysis and paired t test, besides other quality control tests. Conclusion: Based on these results concerning to the correlation between the methods and the tests related to quality control, we can admit that FC/AO for reticulocyte counting shows undeniable advantages when compared to the preexisting manual method...

Introdução: Atualmente, a contagem de reticulócitos representa um desafio para os laboratórios clínicos no Brasil, principalmente os de pequeno e médio porte, nos quais ainda se utiliza o método manual. Este método apresenta algumas limitações, classificando-se como tedioso, demorado e de baixa precisão. Objetivos: O presente estudo desenvolveu e avaliou o desempenho de um novo protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) utilizando acridine orange (AO) como corante, visando padronizar um protocolo preciso, de fácil e rápida execução e custo acessível. Após a padronização do novo protocolo desenvolvido (CF/AO), fez-se a comparação com o método manual. Os resultados foram analisados de acordo com recomendações do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), atualmente Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e teste t pareado, além de outros testes de controle de qualidade. Conclusão: Diante dos resultados obtidos referentes à correlação entre os métodos e os testes voltados ao controle de qualidade, pode-se admitir que o CF/AO estabelecido para contagem de reticulócitos possui vantagens inegáveis quando comparado com o método manual...

Prevalência de anemia nas gestantes atendidas no sistema único de saúde: Secretaria Municipal de saúde: Prefeitura de Belo Horizonte / Prevalence of anemia in pregnant women assisted by the sistema único de saúde: Secretaria Municipal de Saúde: Prefeitura de Belo Horizonte

O presente estudo teve como objetivo investigar as alterações nos eritrogramas de mulheres gestantes atendidas pelo Sistema Único de Saúde da Prefeitura Municipal de Belo Horizonte. Foram avaliados de outubro de 2007 a agosto de 2008 os eritrogramas de 1448 mulheres gestantes distribuídas em três grupos de acordo com a idade: até 18 anos, mulheres entre 19-35 anos e mulheres acima de 35 anos. Os dados foram coletados nos cinco laboratórios distritais que atendem aos 147 centros de saúde distribuídos nos nove distritos sanitários da Prefeitura de Belo Horizonte. Dentre as mulheres grávidas estudadas na rede pública municipal de Belo Horizonte, 8,29%, apresentaram-se com anemia, com maior incidência dessa condição nos distritos sanitários Leste e Noreste. A maior incidência de anemia ocorreu entre as adolescentes menores de 18 anos, enquanto a anemia normocítica e normocrômica foi a mais prevalente em todos os distritos sanitários. A maior ocorrência de anemia em gestantes adolescentes pode ser explicada não só pelos aspectos sócio-econômicos e culturais como também pela maior necessidade de ferro para atender as demandas do crescimento próprias da idade. Após análise dos dados, torna-se pertinente considerar a necessidade de reforçar programas educacionais enfatizando riscos e problemas que podem ocorrer durante a gravidez, principalmente na adolescência, já que as gestantes nessa faixa etária são mais susceptível à anemia.