Inmunidad inducida por proteinas aisladas de Trypanosoma cruzi / Induced immunity by Trypanosoma cruzi isolated proteins / Annual reports 1994

Con el propósito de evaluar la protección biológica contra la infección experimental de T. cruzi, se inocularon ratones "Pearl bright" con la proteina recombinante inmunoprotectora JL7 (Frasch, 1991). La proteina JL7 fué aislada originalmente por Levín y colaboradores (Levin et al. 1989) y cedida al IICS para su desarrollo y evaluación en éste estudio. En el protocolo experimental se utilizaron 5 lotes de ratones: 3 sometidos a infección a Trypanosoma cruzi (controles, inoculados con soponina e inoculados con JL7 + saponina) y 2 lotes donde se testaron la saponina y la proteína JL7. Los parámetros que se utilizaron para la evaluación fueron parasitemia, mortalidad, respuesta inmunológica e invasión tisular. Se utilizó la técnica del Dot blot para determinar anticuerpos JL7, evaluándose los grupos de JL7 en 3 oportunidades. Las inmunizaciones se realizaron cada 15 días por via i.p. con 80 ug de JL7 ug de saponina. Los ratones se infectaron con 50.000 parásitos de la cepa Y, 30 días después de la última inmunización. Los animales que murieron en el transcurso de la infección fueron remitidos para estudios anatomopatológicos y los sobrevivientes se sacrificaron un mes después de la infección, para ser sometidos a la misma inspección. Los ratones inmunizados alcanzaron una respuesta inmunitaria en ambos grupos del 67 por ciento 30 días después de la primera inmunización, llegando a un 100 por ciento después de 30 días de la infección. La parasitemia fué similar en todos los grupos, al igual que la mortalidad (4 ratones en los grupos Control y saponina, 3 el de JL7). Todos los ratones que murieron durante el ensayo presentaron nidos de T. cruzi en el corazón, colon, esófago, estómago y peritoneo, y reacción inflamatoria mononuclear en corazón y colon. En los animales sagrificados inoculados con JL7 no se encontraron parásitos en el corazón, a diferencia de los otros grupos. Los datos obtenidos nos muestran que la proteina JL7 a la dosis utilizada provocó una respuesta inmunológica pero que los anticuerpos no protegieron a los ratones de la infección experimental. Sin embargo, el hecho de no encontrar parásitos en el corazón de los ratones inoculados con JL7 nos induce a pensar que aumento la cantidad de proteina inoculada, modificando el esquema de inmunización y el número de parásitos inoculados, se obtendría un grado de protección más significativo

Construcción de una codificación de ADN complementario para proteínas recombinates de Trypanosima cruzi / Annual Reports 1992 / Construction of a complementary DNA coding for Trypanosoma cruzi recombinant proteins

In an attempt to clone some specific parasite antigen genes, a Trypanosoma cruzi cDNA library was constructed in lambda gt11. Efficient isolation of undegraded mRNA from total RNA was obtained which is a critical step for the construction of representative cDNA libraries. Lambda gtll recombinant phages were detected using isopropylthiogalactoside (IPTG) and 5-bromo-4-chloro-3-indoly1-b-d-galactopiranoside (X-gal) detection system

Organización molecular del complejo II y su rol en la anaerobiosis. Revision / Annual Reports 1991 / Molecular organization of complex II and its role in anaerobiosis. Review

Complex II (Succinate-ubiquinone oxidoreductase) is an importnat enzyme complex for the tricarboxylic acid cycle and the aerobic respiratory chain of motochondria and procaryotic organisms (12, 24). Complex II catalyzes the oxidation of succinate to fumarate (Succinate dehydrogenase: sdh) and transfers its reducing equivalent to ubiquinone in the aerobic respiration