Validação de método de doseamento e aplicação em estudo de equivalência farmacêutica de solução injetável de metronidazol / Validation of metronidazole assay methods and application to study of pharmaceutical equivalence of injectable solutions of this drug

O presente trabalho tem por objetivos validar métodos por espectrofotometria de absorção no ultravioleta e cromatografia líquida de alta eficiência para o doseamento de metronidazol em solução injetável e aplicá-los em estudo de equivalência farmacêutica entre medicamento de referência, genérico e similar. Os métodos propostos para doseamento de metronidazol em solução injetável por espectrofotometria de absorção no ultravioleta e por cromatografia líquida de alta eficiência foram validados, mostrando especificidade / seletividade, linearidade e faixa linear, limite de detecção /quantificação, exatidão e precisão adequados para o uso pretendido. Os medicamentos foram avaliados quanto aos testes de determinação de pH, volume médio, identificação por espectrofotometria de absorção no infravermelho, identificação por cromatografia líquida de alta eficiência, esterilidade, endotoxinas bacterianas e doseamento por espectrofotometria de absorção no ultravioleta e por cromatografia líquida de alta eficiência. Os três medicamentos atenderam as especificações para os testes avaliados e, portanto, podem ser considerados apresentando equivalência farmacêutica.

The aim of this study was to validate analytical methods, based on UV absorption spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC), to assay metronidazole supplied in injectable solutions, and to employ these methods in a study of the pharmaceutical equivalence of the original brand name medicine (?reference?), generic and similar (brand) medicines. The methods proposed for the metronidazole assay were validated, showing adequate specificity/selectivity, linearity, linear range, detection and quantitation limits, accuracy and precision for the intended purpose. The injectable solutions were then tested to determine pH, volume and identity (by IR spectrophotometry), to verify sterility, detect bacterial endotoxins and assay the drug by the proposed UV spectrophotometric and HPLC methods. All three medicines met the requirements in all tests performed and, therefore, can be considered pharmaceutically equivalent.

Validação de método de doseamento para aciclovir eaplicação em estudo de equivalência farmacêutica decreme contendo aciclovir / Validation of acyclovir assay method and its use toverify pharmaceutical equivalence of creamscontaining acyclovir

O presente trabalho teve por objetivos validar método para o doseamento de aciclovir em creme por espectrofotometria de absorção no ultravioleta e aplicá-lo em estudo de equivalência farmacêutica entre medicamento de referência, genérico e similar. O método proposto para doseamento de aciclovir em creme por espectrofotometria de absorção no ultravioleta foi validado, mostrando especificidade/ seletividade, linearidade e faixa linear, limite de detecção /quantificação, exatidão e precisão adequados para o uso pretendido. Os medicamentos foram avaliados quanto aos testes de peso médio, limite de guanina por cromatografia em camada delgada, identificação por espectrofotometria de absorção no ultravioleta, contagem microbiana de bactérias e fungos, pesquisa de microrganismos patógenos e doseamento por espectrofotometria de absorção no ultravioleta. Os três medicamentos atenderam as especificações para os testes avaliados e, portanto, podem ser considerados equivalentes farmacêuticos.

The aim of this study was to validate a UV absorption spectrophotometric method to assay acyclovir in cream and to use it to verify the pharmaceutical equivalence of the original brand-name, generic and similar (brand) medicines. The method proposed for acyclovir cream was validated, showing adequate specificity/selectivity, linearity and linear range, detection and quantitation limits, accuracy and precision. The medicines were tested for average weight, guanine contents within limits (by thin-layer chromatography), drug identity (by UV spectrophotometry), bacterial and fungal counts and presence of pathogens, and were assayed by UV spectrophotometry. All medicines met the requirements in all these tests and can, therefore, be considered equivalent.

Effect of intestinal helminthiasis on nutritional status of schoolchildren.

This study was conducted in a rural agricultural area in Siniloan, Republic of the Philippines. The subjects were the school children. The nutritional status of 58 children infected with helminthiasis (Ascaris lumbricoides and Trichuris trichiura) was compared with that of 19 uninfected controls. Prevalence of Ascaris and Trichuris was 40.3% and 71.4% respectively, and 36.4% of infected children had both Ascaris and Trichuris infections. Statistically significant evidence of an adverse effect of helminthiasis on serum albumin levels was found, but no child had inadequate levels of other nutrients. Although helminthic infections increase the level of immunoglobulin E (IgE) in children endemically exposed to these parasites, there was no significant difference in the serum IgE among Ascaris or Trichuris infected groups in this study.

Effect of media and incubation periods on Mycoplasma gallisepticum strains differentiation by SDS-PAGE protein analysis

Duas estirpes de Mycoplasma gallisepticum (F-K810, S6 (208)) foram incubadas a 37C, em dois diferentes meios de cultivo: meio de Frey contendo soro de suíno (Frey-SS) e meio TP contendo soro de cavalo (TP-HS) e em três diferentes períodos de incubaçäo, quais sejam, 36, 72 e 144 horas. Os cultivos foram centrifugados e as proteínas analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Para padronizar as análises, contagem de unidades formadoras de colônias (CFU/ml) e a determinaçäo da concentraçäo de proteínas foram realizadas antes da resoluçäo das bandas de proteínas por eletroforese. Análises das proteínas por eletroforese foram realizadas em dois diferentes tamanhos de gels de poliacrilamida. Um tamanho padräo (5h de corrida) e um mini-gel (35min. de corrida) para se verificar a eficiência deste último. Independentemente do meio de cultivo (FREY-SS ou TP-HS), encontraram-se consistentes diferenças de padröes de proteínas para as duas estirpes cultivadas (F-K810) e S6 (208). Diferenciaçäo mais acurada entre as estirpes foi obtida quando elas foram cultivadas em meio de FREY-SS. Para cada estirpes cultivada, independentemente do meio de cultivo, observaram-se algumas diferenças nos diferentes períodos de incubaçäo. Entretanto, elas näo foram suficientemente expressivas para que se elegesse um dos períodos de incubaçäo. Após a obtençäo destes resultados, cultivaram-se mais quatro diferentes estirpes de Mycoplasma gallisepticum, quais sejam, as estirpes F-F2F10, V503, PG31 e A5969. Estas foram incubadas a 37C também nos meios Frey-SS e TP-HS por um período de 72 horas. Após a determinaçäo da concentraçäo de proteínas, estes cultivos foram analisados por eletroforese em gel (SDS-PAGE). As estirpes mostraram para ambos os meios bandas que facilmente as identificavam. Em cultivos crescidos em meio de TP-HS observou-se uma banda de proteína a altura de 75 Kd. O mesmo näo foi observado em cultivos crescidos em meio de Frey-SS. Assim, sabendo-se que a estirpe F-K810 usada em vacinas apresenta uma banda a esta mesma altura (75Kd), o meio de Frey-SS é recomendado para se evitar confusäo com aquela estirpe vacinal. Os resultados da eletroforese, obtidos com o mini-gel, foram os mesmos para o sistema de tamanho regular, porém apresentaram uma resoluçäo bem pior