Domestication strategies for the endangered catfish species Pseudopimelodus mangurus Valenciennes, 1835 (Siluriformes: Pseudopimelodidae) / Estratégias de domesticação das espécies ameaçadas de peixe-gato Pseudopimelodus mangurus Valenciennes, 1835 (Siluriformes: Pseudopimelodidae)

Wild fish domestication can be considered a strategic approach to endangered species conservation, supporting studies and reducing economic and environmental costs. Three of the most important strategies in the domestication processes of fish are the adaptation of wild fish to captivity, the reproduction of the adapted fish and the production and maintenance of the young individuals. That being said, the present study is divided in three experiments: the 1st aimed to adapt wild Pseudopimelodus mangurus to captivity environment using different feeding approaches and a prophylactic strategie; the 2nd aimed to reproduce the adapted individuals from the 1st experiment; and the 3rd aimed to train the P. mangurus juveniles to accept commercial diets. The 1st and 2nd experiments were successful at the maintenance and artificial reproduction of P. mangurus kept in tanks between the reproductive seasons. The results suggest that the reproductive performance of animals kept in captivity (initial relative fertility-IRF = 609.25 ± 36.6 eggs/g) was similar (p > 0,05) to the performance found in wild individuals (IRF = 679.21 ± 45.66 eggs/g). Feed training of P. mangurus juveniles (3rd experiment) was also conducted, evaluating three feeding treatments with different concentrations of bovine heart and ration. At the end of the experiment, the treatment containing half bovine heart and half commercial feeding resulted in the highest values of weight gain (0.10 ± 0.16 g), specific growth rate (0.37 ± 0.11 mm), length (47.78 ± 2.35 mm) and growth (2.15 ± 2.27 mm), suggesting reasonable acceptability to artificial diets in the cultivation of this species. As conclusion, the present study contributes with the development of techniques for the domestication of fresh water fish species with commercial value or andangered of extinction, showing the domestication and reproduction of wild P. mangurus in captivity. However, more studies have to be conducted in order to improve the acceptance of artificial feeding by juveniles and to increase their survival rate.

A domesticação de peixes selvagens pode ser considerada uma abordagem estratégica para a conservação de espécies ameaçadas, apoiando estudos e reduzindo custos econômicos e ambientais. Três das estratégias mais importantes para o processo de domesticação de peixes são a adaptação dos peixes ao cativeiro, a reprodução dos peixes adaptados e a produção e manutenção dos indivíduos jovens. O presente estudo está dividido em três partes: a 1ª objetivou adaptar Pseudopimelodus mangurus selvagens ao ambiente de cativeiro usando diferentes abordagens alimentares e uma estratégia profilática; o 2º objetivou reproduzir os indivíduos adaptados do 1º experimento; e o 3º teve como objetivo treinar os juvenis de P. mangurus para aceitar dietas comerciais. O 1o e 2o experimento obteveram sucesso na manutenção e reprodução artificial de P. mangurus mantidos em tanques entre as estações reprodutivas. Os resultados sugerem que o desempenho reprodutivo dos animais mantidos em cativeiro (fertilidade inicial relativa-FIR = 609,25 ± 36,6 ovos / g) foi similar (p> 0,05) ao dos indivíduos selvagens (FIR = 679,21 ± 45,66 ovos / g). O treinamento alimentar de P. mangurus juvenis (3º experimento) também foi realizado avaliando-se 3 tratamentos alimentares com diferentes concentrações de coração bovino e ração. Ao final do experimento, o tratamento contendo metade coração bovino e metade ração gerou os maiores valores de ganho de peso (0,10 ± 0,16 g), taxa de crescimento específico (0,37 ± 0,11 mm), comprimento (47,78 ± 2,35 mm) e crescimento (2,15 ± 2,27 mm), sugerindo razoável aceitabilidade para dietas artificiais no cultivo desta espécie. Como conclusão, o presente estudo contribui com o desenvolvimento de técnicas para a domesticação espécies de peixes de água doce, de interesse comercial ou ameaçados de extinção, mostrando a domesticação e reproduçao de em cativeiro P. Mangurus selvagens. No entanto, mais estudos devem ser conduzidos no intuito de aumentar a aceitação de dietas comerciais pelos juvenis e melhorar sua taxa sobrevivência.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology / Fagocitose in vivo e hematologia em Astyanax altiparanae, um potencial modelo para tecnologia de propagação mediada

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

Domestication strategies for the endangered catfish species Pseudopimelodus mangurus Valenciennes, 1835 (Siluriformes: Pseudopimelodidae)

Abstract Wild fish domestication can be considered a strategic approach to endangered species conservation, supporting studies and reducing economic and environmental costs. Three of the most important strategies in the domestication processes of fish are the adaptation of wild fish to captivity, the reproduction of the adapted fish and the production and maintenance of the young individuals. That being said, the present study is divided in three experiments: the 1st aimed to adapt wild Pseudopimelodus mangurus to captivity environment using different feeding approaches and a prophylactic strategie; the 2nd aimed to reproduce the adapted individuals from the 1st experiment; and the 3rd aimed to train the P. mangurus juveniles to accept commercial diets. The 1st and 2nd experiments were successful at the maintenance and artificial reproduction of P. mangurus kept in tanks between the reproductive seasons. The results suggest that the reproductive performance of animals kept in captivity (initial relative fertility-IRF = 609.25 ± 36.6 eggs/g) was similar (p > 0,05) to the performance found in wild individuals (IRF = 679.21 ± 45.66 eggs/g). Feed training of P. mangurus juveniles (3rd experiment) was also conducted, evaluating three feeding treatments with different concentrations of bovine heart and ration. At the end of the experiment, the treatment containing half bovine heart and half commercial feeding resulted in the highest values of weight gain (0.10 ± 0.16 g), specific growth rate (0.37 ± 0.11 mm), length (47.78 ± 2.35 mm) and growth (2.15 ± 2.27 mm), suggesting reasonable acceptability to artificial diets in the cultivation of this species. As conclusion, the present study contributes with the development of techniques for the domestication of fresh water fish species with commercial value or andangered of extinction, showing the domestication and reproduction of wild P. mangurus in captivity. However, more studies have to be conducted in order to improve the acceptance of artificial feeding by juveniles and to increase their survival rate.

Resumo A domesticação de peixes selvagens pode ser considerada uma abordagem estratégica para a conservação de espécies ameaçadas, apoiando estudos e reduzindo custos econômicos e ambientais. Três das estratégias mais importantes para o processo de domesticação de peixes são a adaptação dos peixes ao cativeiro, a reprodução dos peixes adaptados e a produção e manutenção dos indivíduos jovens. O presente estudo está dividido em três partes: a 1ª objetivou adaptar Pseudopimelodus mangurus selvagens ao ambiente de cativeiro usando diferentes abordagens alimentares e uma estratégia profilática; o 2º objetivou reproduzir os indivíduos adaptados do 1º experimento; e o 3º teve como objetivo treinar os juvenis de P. mangurus para aceitar dietas comerciais. O 1o e 2o experimento obteveram sucesso na manutenção e reprodução artificial de P. mangurus mantidos em tanques entre as estações reprodutivas. Os resultados sugerem que o desempenho reprodutivo dos animais mantidos em cativeiro (fertilidade inicial relativa-FIR = 609,25 ± 36,6 ovos / g) foi similar (p> 0,05) ao dos indivíduos selvagens (FIR = 679,21 ± 45,66 ovos / g). O treinamento alimentar de P. mangurus juvenis (3º experimento) também foi realizado avaliando-se 3 tratamentos alimentares com diferentes concentrações de coração bovino e ração. Ao final do experimento, o tratamento contendo metade coração bovino e metade ração gerou os maiores valores de ganho de peso (0,10 ± 0,16 g), taxa de crescimento específico (0,37 ± 0,11 mm), comprimento (47,78 ± 2,35 mm) e crescimento (2,15 ± 2,27 mm), sugerindo razoável aceitabilidade para dietas artificiais no cultivo desta espécie. Como conclusão, o presente estudo contribui com o desenvolvimento de técnicas para a domesticação espécies de peixes de água doce, de interesse comercial ou ameaçados de extinção, mostrando a domesticação e reproduçao de em cativeiro P. Mangurus selvagens. No entanto, mais estudos devem ser conduzidos no intuito de aumentar a aceitação de dietas comerciais pelos juvenis e melhorar sua taxa sobrevivência.

Determinação da razão ótima de espermatozóides por ovócitos de piabanha Brycon insignis (pisces - characidae) / Determination of the optimum ratio of spermatozoa per oocyte of the piabanha Brycon insignis

Determinou-se a razão ótima de espermatozóides por ovócitos da piabanha Brycon insignis, utilizando-se dois machos e duas fêmeas da espécie, submetidos ao procedimento de desova induzida. Os gametas foram extrusados manualmente 200 horas-grau após a aplicação do extrato bruto de hipófise. Os ovócitos foram misturados e deste pool retiraram-se amostras com 2g de ovócitos (701 ovócitos/g). O sêmen do pool foi diluído em solução de NaCL 1,2 por cento de tal forma que, após a adição de 1ml do sêmen diluído aos ovócitos, fossem obtidas as seguintes razões espermatozóides por ovócitos em cada tratamento: T1=86.662, T2=173.324, T3=259.986, T4=346.648 e T5=433.310. A taxa de fertilização do sêmen não diluído usado como controle foi de 65,3 por cento. Após ativação espermática com NaHCO3 1 por cento e fecundação, os ovos foram transferidos para as incubadoras e nelas foram observadas as seguintes percentagens de fertilização em relação à do grupo-controle: T1=35,7 por cento, T2=53,1 por cento, T3=79,1 por cento, T4=93,4 por cento e T5=87,8 por cento. A percentagem de fertilização (em relação ao controle) aumentou de forma linear, segundo a equação de regressão: Y=15,55+0,0002297X (P<0,01; R²=0,98), até a proporção de 314.481 espermatozóides por ovócitos, após o que a taxa de fertilização se estabilizou no limite de 88 por cento

The optimum spermatozoa:oocyte ratio of piabanha Brycon insignis was studied. Two males and two females were induced to spawn, and the gametes were stripped after 200 hourgrades starting from the application of carp pituitary gland. Oocytes from two females were mixed, and samples of 2g (701 oocytes/g) were collected from the obtained pool and placed into plastic cups. The semen from the two males, after mixed to compose a pool, was diluted in NaCl solution (1.2 percent) so that, after the addition of 1ml of diluted sperm into the oocytes, the following spermatozoa:oocyte ratios (tri-replicated) were obtained: T1=86,662, T2=173,324, T3=259,986, T4=346,648 and T5=433,310. After the activation using 1 percent NaHCO3 and fertilization, the eggs were transferred to incubators, and observed the percentages of fertilization relative to the control. T1=35.7 percent, T2=53.1 percent, T3=79.1 percent, T4=93.4 percent and T5=87.8 percent. Undiluted semen was used as "control", which showed 65 percent of fertilization. The percentage of fertilization (relative to the control) increased linearly according to the regression Y= 15.55 + 0.0002297X (P<0.01; R²=0.98), until the proportion of 314,481 spermatozoa per oocyte, and, from this point, the fertilization rate maintained at 88 percent