Estudos imunohistoquímicos dos macrófagos na mucosa colônica em crianças na doença de Crohn e na retocolite ulcerativa inespecífica / Immunohistochemical study of macrophages in the colonic mucosa of children with Crohn's disease and ulcerative colitis

Sao quantificadas e analisadas as características histológicas dos macrófagos na mucosa colônica na doença de Crohn e na retocolite ulcerativa inespecífica. Foram estudados 12 pacientes com doença de Crohn 19 com retocolite ulcerativa inespecífica e 10 espécimes de mucosa retal representando o grupo controle, de acordo com o seguinte modelo: período I (PI) = pré-tratamento; período II (PII)= até dois anos de evoluçao e período III (PIII)= mais de dois anos de evoluçao. Os macrófagos foram identificados em mucosa colônica pelo monoclonal CD68 através do método de imunoperoxidase. A quantificaçao dos macrófagos foi feita através de análise de imagem computadorizada cromática, que expressa em porcentagem a área (mm2) ocupada pelas células CD68 positivas. A porcentagem da área ocupada pelos macrófagos se apresentava aumentada em ambas as doenças, em todos os períodos estudados, quando comparada com o grupo controle, porém sem diferença estatisticamente significante. A distribuiçao dos macrófagos dentro da mucosa do grupo controle foi subepitelial, enquanto na dos doentes atingiu toda a altura da mucosa, concentrando-se nas bases das úlceras e ao longo das fissuras. Na doença de Crohn as células CD68 positivas facilitaram a identificaçao dos microgranulomas, eventualmente despercebidos na coloraçao de hematoxilina-eosina. Embora nao houvesse diferença entre pacientes e controles quanto à área ocupada pelos macrófagos, a distribuiçao diferente pode sugerir a participaçao dos macrófagos na lesao destas duas doenças, embora nao permitam diagnóstico diferencial, possivelmente pela variabilidade dos valores. O CD68 nao identificou os diferentes estados funcionais dos macrófagos, mas a sua posiçao na mucosa sugere que com as fissuras e úlceras, sua funçao principal seria a fagocitose, e nos demais sítios a de célula apresentadora de antígenos e recrutadora de outras células inflamatórias.

Estudo imunohistológico do linfócito T (total e auxiliador) e do linfócito B da mucosa colónica de crianças portadoras de doença de Crohn e retocolite ulcerativa inespecífica / Immunohistological study of the T-lymphocyte (total and helper) and the B-lymphocyte of the colonic mucous in children with Crohn's disease and unspecific ulcerative colitis

Para melhor compreensao dos mecanismos imunológicos envolvidos na mucosa colônica da retocolite ulcerativa inespecífica e da doença de Crohn, foram estudadas as mucosas colônicas de 19 crianças com retocolite ulcerativa inespecífica, 12 crianças com doença de Crohn e um grupo controle representado por 10 espécimes de mucosa retal de pacientes com obstipaçao intestinal crônica inespecífica. As mucosas foram coradas com a técnica de imunoperoxidase, e os linfócitos T (total e auxiliador) e B foram identificados com marcadores específicos - para os linfócitos T total, CD3, linfócitos T auxiliador, CD4 e para o B, CD20 - e quantificadas na lâmina própria através de análise de imagem computadorizada cromática em diferentes períodos evolutivos da doença: PI (antes do tratamento), PH (até dois anos de evoluçao) e PIII (com mais de dois anos de evoluçao). No epitélio superficial foi quantificado apenas o linfócito T total, através de contagem linear. O marcador CD3, do linfócito T total, esteve aumentado no epitélio (superficial e glandular) e na lâmina própria das mucosas doentes em relaçao às do controle. Na mucosa dos pacientes, esteve distribuído difusamente, concentrando-se ao redor dos microgranulomas, no interior dos nódulos linfóides e nas áreas lesadas em proximidade aos macrófagos. Na doença de Crohn, PI, sua média na lâmina própria diferiu significantememte em relaçao ao controle. Comportamento semelhante ocorreu com o marcador CD20 do linfócito B nas mucosas doentes, cujas médias foram superiores aos do controle, embora apenas no PI da doença de Crohn essa diferença tenha sido significativa. O marcador CD4 do linfócito T auxiliador também apresentou nas mucosas doentes médias elevadas em relaçao à mucosa controle, mas sem significaçao estatística. As células CD4+ distribuíram-se difusamente por toda altura da mucosa doente, concentrando-se ao redor dos nódulos linfóides e dos microgranulomas. De modo geral, todos os marcadores estudados neste trabalho apresentaram médias superiores aos do grupo controle com diferentes graus de significância nos diferentes períodos estudados. Esses resultados confirmam a participaçao desses elementos na patogênese da retocolite ulcerativa inespecífica e da doença de Crohn. Os achados de correlaçao positiva entre os marcadores CD4 e CD20 na retocolite ulcerativa inespecífica e CD3 e CD20...

Estudo imunohistoquímico da expressäo HLA-DR no epitélio superficial e na lâmina própria da mucosa colônica de crianças portadoras de doença de Crohn e retocolite ulcerativa inespecífica / Immunohistochemical study of the HLA-DR expression in the superficial epithelium and in the lamina propria of the colonic mucosa in children with Crohn's disease and nonspecific ulcerative colitis

Alguns estudos têm realçado a importância da expressao HLA-DR no epitélio superficial e na lâmina própria da mucosa dos pacientes portadores de retocolite ulcerativa inespecífica e doença de Crohn. Neste estudo foram quantificadas e analisadas as características histológicas da expressao HLA-DR na mucosa colônica nestas duas doenças. Foram estudados 12 pacientes em doença de Crohn, 19 com retocolite ulcerativa inespecífica e 10 espécimes de mucosa retal representando o grupo controle, de acordo com o seguinte modelo: período I = pé-tratamento; período II = até dois anos de evoluçao e período III = mais de dois anos de evoluçao. A expressao HLA-DR foi identificada pelo monoclonal HLA-DR (DAKO) em espécimes de mucosa colônica pelo método de imunoperoxidase. A quantificaçao da expressao HLA-DR na lâmina própria foi feita através de análise de imagem computadorizada cromática, que expressa em porcentagem a área (mum2) ocupada pelas células HLA-DR positivas e no epitélio superficial quantificada por uma avaliaçao semi-quantitativa. Na lâmina própria da mucosa dos doentes a expressao HLA-DR esteve aumentada em todos osperíodos estudados, quando comparada com o grupo controle, porém sem diferença estatística. A distribuiçao da expressao HLA-DR na lâmina própria foi em localizaçoes correspondentes aos macrófagos e aos linfócitos B. O epitélio colônico superficial dos pacientes com retocolite ulcerativa inespecífica e com retocolite ulcerativa inespecífica e com doença de Crohn foi HLA-DR positivo em 86,95 por cento e 80,96 por cento, respectivamente, nos três períodos estudados. O epitélio superficial de todas as mucosas retais do grupo controle nao mostraram a expressao HLA-DR. A presença da expressao HLA-DR no epitélio colônico superficial dos pacientes com retocolite ulcerativa inespecífica e doença de Crohn e sua ausência no epitélio do grupo controle foi um achado de grande importância neste estudo. É consenso entre os diversos autores que a expressao HLA-DR representa uma intensa açao local das citocinas indutoras desta expressao na mucosa colônica dos pacientes com retocolite ulcerativa inespecífica e donça de Crohn, representando a sua ativaçao em resposta ao antígeno invasor da mucosa intestinal. O estudo da expressao HLA-DR na lâmina própria nao foi conclusivo, pois o resultado nao representou diferença significativa em relaçao ao controle.