Absceso en dedo por Escherichia vulneris tras traumatismo con una rama

Introducción: Es importante considerar la posible implicación de microorganismos poco frecuentes en infecciones de piel y partes blandas si la muestra obtenida para cultivo es de buena calidad, y además se aísla en cultivo puro, como ocurre con Escherichia vulneris. Caso Clínico: Presentamos en caso de una mujer de 34 años, sin antecedentes mórbidos, quien desarrolló un absceso en el 4° dedo de la mano tras un traumatismo con una rama y que requirió drenaje quirúrgico y tratamiento antibiótico para su resolución. En el contenido del absceso, se aisló E. vulneris en cultivo puro, con un perfil antibiótico multisensible. Discusión y Conclusión: E. vulneris es una enterobacteria cuya patogenicidad ha estado clásicamente discutida, pero que se ha visto que puede tener participación en infección de heridas, especialmente aquellas relacionadas con material vegetal. Este microorganismo, muy relacionado con E. harmannii, presenta buena sensibilidad a los aminoglucósidos, con excepción a la penicilina y al cotrimoxazol. En las infecciones de piel y tejidos blandos causadas por E. vulneris y que cursen como un absceso, es importante realizar desbridamiento quirúrgico, si es necesario para la resolución completa del cuadro, además del tratamiento con amoxicilina/ácido clavulánico que parece adecuado.

Introduction: It is important to assess the possible involvement of rare microorganisms in skin and soft tissue infections if the sample obtained for culture is of good quality, and is isolated in pure culture, as occurs with Escherichia vulneris. Case Report: We present the case of a 34-year-old woman, with no history of morbidity, who developed an abscess in the 4th finger of the hand after trauma with a branch and which required surgical drainage and antibiotic treatment for its resolution. In the content of the abscess, E. vulneris was isolated in pure culture, with a multisensitive antibiotic profile. Discusion: E. vulneris is an Enterobacteriaceae whose pathogenicity has been classically discussed, but it has been seen that it may have participated in the infection of wounds, especially those related to plant material. This organism, closely related to E. harmannii, shows good sensitivity to aminoglycosides, with the exception of penicillin, and cotrimoxazole. In skin and soft tissue infections caused by E. vulneris and that present as an abscess, it is important to perform surgical debridement if necessary for complete resolution of the condition, in addition to treatment with amoxicillin/clavulanic acid, which seems appropriate.

Caracterización de Escherichia coli D7111 productora de ß-LACTAMASA TEM-176 / Characterization of Escherichia coli D7111 producing the ß-LACTAMASA TEM-176

RESUMEN El presente reporte es la descripción original de bla TEM-176. Se caracterizaron los mecanismos de resistencia a antimicrobianos de un aislamiento de Escherichia coli enterotoxigénica, determinándose la resistencia a 22 antimicrobianos categorizados en 15 grupos diferentes mediante difusión en agar, estableciéndose grupo filogenético, mecanismos de resistencia y presencia de integrones de Clase 1 y 2 mediante PCR. Integrones y genes de resistencia a β-lactámicos fueron secuenciados. El aislamiento del grupo filogenético A, mostró resistencia o sensibilidad disminuida a ampicilina, amoxicilina más ácido clavulánico, ácido nalidíxico, ciprofloxacino, estreptomicina, kanamicina, tetraciclina, trimetoprim, sulfisoxazol, cotrimoxazol, azitromicina y nitrofurantoina, detectándose la presencia de bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) y un integron de Clase 2 conteniendo un gen dfrA1. La resistencia a quinolonas se relacionó con la substitución Ser83Ala. La secuencia de TEM mostró la substitución Ala222Val, la cual a la fecha no había sido descrita, reportándose como una nueva β-lactamasa, con el nombre de bla TEM-176.

ABSTRACT The present report is the original description of bla TEM-176. The mechanisms of resistance to antimicrobial agents were determined in an enterotoxigenic Escherichia coli, determining the susceptibility to 22 antimicrobials classified in 15 different groups by agar diffusion and establishing the phylogenetic group, mechanisms of resistance and presence of Class 1 and 2 integrons. Integrons and β-lactam resistance genes were sequenced. The isolate, belonging to phylogenetic group A, showed the presence of resistance or diminished susceptibility to a ampicillin, amoxicillin plus clavulanic acid, nalidíxic acid, ciprofloxacin, streptomycin, kanamycin, tetracycline, trimethoprim, sulfisoxazole, cotrimoxazole, azithromycin and nitrofurantoin, carrying bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) and a Class 2 integron containing a dfrA1 gene. Quinolone resistance was related to the substitution Ser83Ala. The TEM sequencing showed the presence of the new substitution Ala222Val, which led to the description of the new β-lactamase bla TEM-176.

Caracterización de Escherichia coli D7111 productora de ß-LACTAMASA TEM-176 / Characterization of Escherichia coli D7111 producing the ß-LACTAMASE TEM-176

RESUMEN El presente reporte es la descripción original de bla TEM-176. Se caracterizaron los mecanismos de resistencia a antimicrobianos de un aislamiento de Escherichia coli enterotoxigénica, determinándose la resistencia a 22 antimicrobianos categorizados en 15 grupos diferentes mediante difusión en agar, estableciéndose grupo filogenético, mecanismos de resistencia y presencia de integrones de Clase 1 y 2 mediante PCR. Integrones y genes de resistencia a β-lactámicos fueron secuenciados. El aislamiento del grupo filogenético A, mostró resistencia o sensibilidad disminuida a ampicilina, amoxicilina más ácido clavulánico, ácido nalidíxico, ciprofloxacino, estreptomicina, kanamicina, tetraciclina, trimetoprim, sulfisoxazol, cotrimoxazol, azitromicina y nitrofurantoina, detectándose la presencia de bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) y un integron de Clase 2 conteniendo un gen dfrA1. La resistencia a quinolonas se relacionó con la substitución Ser83Ala. La secuencia de TEM mostró la substitución Ala222Val, la cual a la fecha no había sido descrita, reportándose como una nueva β-lactamasa, con el nombre de bla TEM-176.

ABSTRACT The present report is the original description of bla TEM-176. The mechanisms of resistance to antimicrobial agents were determined in an enterotoxigenic Escherichia coli, determining the susceptibility to 22 antimicrobials classified in 15 different groups by agar diffusion and establishing the phylogenetic group, mechanisms of resistance and presence of Class 1 and 2 integrons. Integrons and β-lactam resistance genes were sequenced. The isolate, belonging to phylogenetic group A, showed the presence of resistance or diminished susceptibility to a ampicillin, amoxicillin plus clavulanic acid, nalidíxic acid, ciprofloxacin, streptomycin, kanamycin, tetracycline, trimethoprim, sulfisoxazole, cotrimoxazole, azithromycin and nitrofurantoin, carrying bla TEM, aadA1/2, aphA1, sul3, tet(A) and a Class 2 integron containing a dfrA1 gene. Quinolone resistance was related to the substitution Ser83Ala. The TEM sequencing showed the presence of the new substitution Ala222Val, which led to the description of the new β-lactamase bla TEM-176.

Simultaneous determination of amoxicillin and clavulanic acid in pharmaceutical preparations by capillary zone electrophoresis

ABSTRACT Clavulanic acid enhances the antibacterial spectrum of amoxicillin by rendering most β-lactamase producing isolates susceptible to the drug. A fast, simple and efficient capillary electrophoresis method was developed for the simultaneous determination of amoxicillin and clavulanic acid from complex mixtures. Using a 25 mM sodium tetraborate as background electrolyte at a pH of 9.30, + 25 kV applied voltage, 25 °C system temperature, UV determination at 230 nm; we succeeded in simultaneous separation of amoxicillin and clavulanic acid in approximately 2 minutes. The analytical performance of the method was evaluated in terms of reproducibility, precision, accuracy, and linearity. The optimized analytical method was applied for the determination of the two analytes from combined commercial pharmaceutical preparations. This CE method is fast, inexpensive, efficient, and environmentally friendly when compared with the more frequently used high performance liquid chromatography methods described in the literature.

RESUMO O ácido clavulânico acentua o espectro antibacteriano de amoxicilina, tornando a maioria dos isolados produtores de β-lactamase sensíveis ao fármaco. Desenvolveu-se um método rápido, simples e eficiente de electroforese capilar (EC) para a determinação simultânea de amoxicilina e de ácido clavulânico a partir de misturas complexas. Usando tetraborato de sódio 25 mM como electrólito em pH de 9,30, voltagem aplicada de + 25 kV, em sistema a 25 ° C e determinação por UV a 230 nm, a foi bem-sucedida a separação simultânea de amoxicilina e ácido clavulânico em, aproximadamente, 2 minutos. O desempenho analítico do método foi avaliado em termos de reprodutibilidade, precisão, exatidão e linearidade. O método analítico otimizado foi aplicado para a determinação dos dois analitos em associação, a partir de preparações farmacêuticas comerciais. Este método de EC é rápido, barato, eficiente e ecologicamente correto, quando comparado aos métodos de cromatografia líquida de alta eficiência mais frequentemente descritos na literatura.

Studies on the formation and synthetic mechanism of related substance G in potassium clavulanate production

The objective of this study was to investigate the formation and synthetic mechanism of related substance G in potassium clavulanate production. The impurity in the potassium clavulanate final product, with a retention time of 13.5 min, was confirmed as related substance G by high performance liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry. Related substance G analysis during the production of clavulanic acid showed that this impurity could be synthesized during fermentation, and the amount increased with the fermentation time. Studies on its synthetic mechanism showed that L-tyrosine and succinic acid were the precursors for biosynthesis of related substance G in vivo. The reaction was deduced to be catalyzed by an enzyme. The enzyme was a type of extracellular enzyme present in the fermentation supernatant.

O objetivo deste estudo foi investigar a formação e o mecanismo sintético da substância G relacionada na produção de clavulanato de potássio. A impureza do produto final clavulanato de potássio, com tempo de retenção de 13,5 min, foi confirmada como substância G relacionada por cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massas/espectrometria de massas. A análise da substância G relacionada durante a produção do ácido clavulânico mostrou que essa impureza poderia ser sintetizada durante a fermentação e que a quantidade aumenta com o tempo de fermentação. Estudos do seu mecanismo sintético mostraram que a L-tirosina e o ácido succínico foram os precursores in vivo para a biossíntese da substância G relacionada. Deduziu-se que a reação foi catalisada por uma enzima. A enzima foi do tipo extracelular, presente no sobrenadante da fermentação.

ß-lactamases produced by amoxicillin-clavulanate-resistant enterobacteria isolated in Buenos Aires, Argentina: A new blaTEMgene / ß-lactamasas producidas por enterobacterias resistentes a amoxicilina-ácido clavulánico aisladas en Buenos Aires, Argentina: un nuevo gen blaTEM

La resistencia a la combinación de ß-lactámico/inhibidor de ß-lactamasa en enterobacterias es un problema creciente que no ha sido estudiado intensamente en Argentina. En el presente trabajo, 54/843 enterobacterias recolectadas en un hospital universitario de la ciudad de Buenos Aires fueron resistentes a ampicilina-sulbactama, pero se mantuvieron sensibles a las cefalosporinas de segunda y tercera generación. Se analizaron los mecanismos enzimáticos presentes en los aislamientos que también fueron resistentes a amoxicilina-ácido clavulánico (AMC) (18/54). La secuenciación reveló dos variantes diferentes de blaTEM-1, donde blaTEM-1b es el alelo más frecuentemente detectado (10 Escherichia coli, 3 Klebsiella pneumoniae, 2 Proteus mirabilis y 1 Raoultella terrigena), seguidos por blaTEM-1a(1 K. pneumoniae). La resistencia a AMC parece estar asociada principalmente con la hiperproducción de TEM-1 (sobre todo en E. coli) o con la coexpresión con ß-lactamasas tipo OXA-2 y/o SHV (K. pneumoniae y P. mirabilis). Se describió una nueva variante de blaTEM(TEM-163) en un aislamiento de E. coli que presentó una CIM frente a AMC de 16/8 µg/ml. La enzima TEM-163 contiene dos sustituciones de aminoácidos respecto de TEM-1, Arg275Gln y His289Leu. Teniendo en cuenta la alta actividad específica observada y la baja IC50 para el ácido clavulánico, el patrón de resistencia de este aislamiento parece obedecer a la hiperproducción de la nueva variante de la ß-lactamasa de amplio espectro, en lugar de vincularse con un comportamiento similar al de una TEM resistente a inhibidores (IRT).

Resistance to ß-lactam/ß-lactamase inhibitors in enterobacteria is a growing problem that has not been intensively studied in Argentina. In the present work, 54/843 enterobacteria collected in a teaching hospital of Buenos Aires city were ampicillin-sulbactam-resistant isolates remaining susceptible to second-and third-generation cephalosporins. The enzymatic mechanisms present in the isolates, which were also amoxicillin-clavulanic acid (AMC)-resistant (18/54) were herein analyzed. Sequencing revealed two different variants of blaTEM-1, being blaTEM-1b the most frequently detected allelle (10 Escherichia coli, 3 Klebsiella pneumoniae, 2 Proteus mirabilis and 1 Raoultella terrigena) followed by blaTEM-1a(1 K. pneumoniae). Amoxicillin-clavulanate resistance seems to be mainly associated with TEM-1 overproduction (mostly in E. coli) or co-expressed with OXA-2-like and/or SHV ß-lactamases (K. pneumoniae and P. mirabilis). A new blaTEMvariant (TEM-163) was described in an E. coli strain having an AMC MIC value of 16/8 µg/ml. TEM-163 contains Arg275Gln and His289Leu amino acid substitutions. On the basis of the high specific activity and low IC50 for clavulanic acid observed, the resistance pattern seems to be due to overproduction of the new variant of broad spectrumß-lactamase rather than to an inhibitor-resistant TEM (IRT)-like behavior.

Studies on the formation and forming mechanism of the related substance E in potassium clavulanate production by HPLC-MS/MS

The objective of this study was to investigate the formation and forming mechanism of the related substance E in potassium clavulanate production. The impurity with retention time of 11.1 min in potassium clavulanate final product was confirmed as the related substance E by high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection (HPLC-MS/MS).The related substance E analysis during the production of clavulanic acid showed that this impurity could be formed during both the fermentation and purification processes, especially in the later fermentation stage, filtration concentration and back-extraction procedure. Clavulanic acid was the precursor of the related substance E. Studies on its forming mechanism showed that the related substance E was formed by the combination of the imino group of one molecule of clavulanic acid with the carboxyl group of another molecule of clavulanic acid with the opening of β-lactam ring. Results of a multi-factor orthogonal test confirmed that the concentration of clavulanic acid was the dominant factor to accelerate the reaction, while the temperature was another contributing factor. The pH 5.0-6.5 had little impact on the generation of the related substance E.

O objetivo deste estudo foi investigar a formação da substância E e o respectivo mecanismo na produção de clavulanato de potássio. Confirmou-se a impureza com tempo de retenção de 11,1 min no produto final, clavulanato de potássio, como substância E, por meio de cromatografia líquida de alta eficiência, em conjunto com detecção por espectrometria de massas (CLAE-MS-MS). A análise da substância relacionada E durante a produção do ácido clavulânico mostrou que essa impureza pode ser formada tanto durante a fermentação quanto durante os processos de purificação, especialmente no estágio final de fermentação, filtração, concentração e procedimento de extração. O ácido clavulãnico foi o precursor da substância E. Estudos no mecanismo de sua formação mostraram que a substância E formou-se pela combinação do grupo imina da molécula do ácido clavulânico com o grupo carboxílico de outra molécula de ácido clavulânico, com a abertura do anel β-lactâmico. Resultados do teste ortogonal multifatorial confirmaram que a concentração do ácido clavulânico foi o fator dominante para acelerar a reação, enquanto a temperatura foi outro fator que contribuiu. O pH de 5,0 a 6,5 teve pouco impacto na geração da substância E.

Utilização de sistemas poliméricos de duas fases aquosas (SPDFA) compostos por polietileno glicol/ácido poliacrílico (PEG/APA) para extração de ácido clavulânico / Utilization of aqueous two phase systems (ATPS) composed of polyethylene glycol/polyacrylic acid (PEG/APA) in the extraction of clavulanic acid

A viabilidade da produção em escala industrial de produtos biotecnológicos de interesse comercial e terapêutico, como os fármacos, depende significativamente das técnicas de separação e purificação utilizadas. A aplicação do sistema de duas fases aquosas (SDFA) é proposta como alternativa para a purificação, pois permite a separação e análise de biomoléculas, de modo que estas não percam sua atividade ou propriedades desejadas. Esta técnica é interessante para a purificação em larga escala, pois permite partição seletiva, com potencial de obtenção de altos rendimentos, além de apresentar boa relação custo-benefício. O presente trabalho estudou a purificação por extração líquido-líquido do ácido clavulânico em SDFA utilizando um novo sistema polimérico aquoso, formado pelos polímeros polietileno glicol (PEG) e ácido poliacrílico (APA). Foram estudadas diferentes composições do sistema polimérico aquoso PEG/APA, empregando diferentes massas molares e concentrações para o PEG e utilizando a massa molar 8000g/mol para o APA. Com base nas informações obtidas o melhor ponto de extração para o ácido clavulânico na presença de Na2SO4 foi definido como MPEG=400 g/mol, CPEG=17,5% (m/m) e CNaPA=22,5% (m/m) com K= 19,14, ηT=91,21%, BM=101,69 e R=0,45. Enquanto que na presença de NaCl, o melhor ponto encontrado foi: MPEG=400 g/mol, CPEG=35% (m/m) e CNaPA=10% (m/m) com K=11,96 ηT=80,04%, BM=90,18 e R=0,66. No trabalho será avaliada, também, a influência da temperatura, pH e força iônica nesse sistema. Estabeleceram-se os melhores parâmetros de separação do ácido clavulânico presente em meio fermentado produzido por Streptomyces clavuligerus utilizando a metodologia de fermentação extrativa com SDFA PEG/APA. O efeito do ácido clavulânico no diagrama de fases do sistema PEG-APA, bem como sua partição na forma pura e na presença de homogeneizado celular, foi estudado principalmente através da determinação do coeficiente de partição e recuperação do respectivo fármaco

The viability of industrial scale production of commercial and therapeutical biotechnological products, such as drugs, is significantly dependent on the separation and purification techniques applied. The use of two-aqueous phase systems (ATPS) is proposed as an alternative to purification because it allows the separation and analysis of biomolecules, so that they do not lose their activities or desired properties. This technique is interesting for large scale purification because it allows selective partition with high potential yield and good cost/benefit ratio. The present work studied the purification of clavulanic acid (CA) by liquid-liquid extraction in ATPS applying a new aqueous polymeric system composed of two polymers, namely polyethylene-glicol (PEG) and sodium polyacrylate (NaPA). Different compositions of the aqueous polymeric system (PEG/PAA) were utilized, employing different PEG molar masses (MPEG) and concentrations (CPEG) and a molar mass of PAA of 8000 g/mol. In the light of the results obtained, the best conditions for clavulanic acid extraction, in the presence of Na2SO4, were MPEG = 400 g/mol, CPEG = 17.5% (m/m) and CNaPA = 22.5% (m/m), which allowed obtaining a partition coefficient (K) of 19.14, a yield in the top phase (ηT) of 91.21%, a mass balance (MB) of 101.69 and a volume ratio (R) of 0.45. On the other hand, in the presence of NaCl, the best results (K = 11.96, ηT = 80.04%, MB = 90.18 and R = 0.66) were found at: MPEG = 400 g/mol, CPEG = 35% m/m and CNaPA = 10% m/m. The effect of clavulanic acid in the PEG-PAA system phase diagram and its partition either in its pure form or in the cell homogenate were studied mainly through both the determination of the partition coefficient and the recovery of the drug selected for this study

Sensibilidad a la amoxicilina de bacterias anaerobias de pacientes con periodontitis agresiva / Susceptibility to amoxycillin of anaerobic bacteria in patientswith aggressive periodontitis

Introducción y ObjetivoSe han utilizado los antibióticos como terapia adjunta al tratamiento periodontal. La amoxicilina y la amoxicilina/ ácido clavulánico son algunos de los más utilizados. Establecer el tipo de bacterias y su sensibilidad a la amoxicilina y a la amoxicilina/ácido clavulánico en pacientes con periodontitis agresiva. Materiales y MétodosEste estudio in vitro estableció la sensibilidad a la amoxicilina y a la amoxicilina/ácido clavulánico de las bacterias aisladas de 19 pacientes con periodontitis agresiva. Se obtuvieron muestras de 6 sitios con bolsas iguales o mayores a 7 mm de profundidad, se realizó cultivo y aislamiento de colonias en condiciones anaeróbicas. Laidentificación de los microorganismos se realizó a través de la coloración de Gram y el Sistema Crystal paraanaerobios; para determinar la sensibilidad a los antibióticos se utilizó la técnica descrita por Wilkins y Thiel.ResultadosEn la periodontitis localizada los microorganismos que se presentaron con mayor frecuencia fueron Veillonellaspecies, Peptostreptococcus prevotii, Staphylococcus saccharoliticus, Bacteroides fragilis, Bacteroidesureolyticus. En la periodontitis generalizada se encontró Fusobacterium nucleatum, Veillonella species, Peptostreptococcus prevotii, Peptostreptococcus saccharolitucus, Staphylococcus saccharoliticus. De las 21 especies identificadas, en la periodontitis localizada 4 fueron resistentes a la amoxicilina y 1 resistente a la amoxicilina/Acido clavulánico. En la periodontitis generalizada se encontró 1 microorganismo resistente a laamoxicilina y 1 resistente a la amoxicilina/Acido clavulánico.ConclusiónSe encontraron bacterias resistentes a la amoxicilina y a la amoxicilina/ácido clavulánico.

Introduction and ObjectiveAntibiotics have been used as an adjunct to periodontal treatment. Amoxicillin and amoxicillin/clavulanicacid are some of the most used.To define the type of bacteria and their susceptibility to amoxycillin and to amoxicillin/clavulanic acid inpatients with aggressive periodontitis.Materials and MethodThis descriptive study stated susceptibility to amoxycillin and to amoxicillin/clavulanic acid of bacteriaisolated from 19 patients with aggressive periodontitis, selected by convenience. Samples from six(6) different sites with periodontal pockets equal or greater than 7 mm of depth were obtained. Thesamples were cultured anaerobically and the isolated colonies were identified by means of the Gramstaining procedure and the Crystal System for anaerobics. The Wilkins and Thiel test was used to assesssusceptibility.ResultsThe microorganisms with the highest presence in localized periodontitis were Veillonella species,Peptostreptococcus prevotii, Staphylococcus saccaharolyticus, Bacteroides fragilis and Bacteroidesureolyticus. Fusobacterium nucleatum, Veillonella species, Peptostreptococcus prevotii, Peptostreptococcussaccharolyticus and Staphylococcus saccharolyticus were found in generalized periodontitis. Four out ofthe 21 microorganisms species identified in localized periodontitis 4 were resistant to amoxycillin and oneto amoxicillin/clavulanic acid. One microorganism was identified as resistant to amoxycillin and one toamoxicillin/clavulanic acid in generalized periodontitis.ConclusionAmoxycillin-resistant and amoxycillin/clavulanic acid-resistant bacteria were found.

Bioequivalencia de dos formulaciones de amoxicilina-ácido clavulánico para uso oral en perros / Bioequivalence of two amoxicillin-potassium clavulanate oral preparations in dogs

The aim of this trial was to carry out a bioequivalence (BE) study in dogs using a generic preparation of amoxicillin-potassium clavulanate vs a commercially available reference preparation, both claiming to achieve plasma concentrations that allow a 12 h dosing interval after oral administration. The oral pharmacokinetic profiles of a single dose of each preparation were carried out in 12 adult mongrel dogs in a crossover model with a 10 day washout period at a dose of 12.5 mg/kg of trihydrate amoxicillin and potassium clavulanate as tablets. A composite determination of amoxicillin-potassium clavulanate concentration in each sample of plasma was carried out in triplicate, using a microbiological agar diffusion analysis. Pharmacokinetic analysis was carried out with a non-compartmental model. Statistical analysis of pharmacokinetic variables was carried out by ANOVA and Bonferroni t test, setting a P < 0.05. In accordance with international standards, it was found that the generic preparation failed to be bioequivalent, i.e: AUC0-∞ 9.08 ± 0.26 μg h/ml and Cmax 5.48 ± 0.19 μg/ml for the generic preparation vs AUC0-∞ 13.28 ± 0. 30 μg h/ml and Cmax 2.9 ± 0.17 μg/ml for the reference one. A 0.25 μg/ml breakpoint can be set as minimum effective plasma concentration for amoxicillin; hence the generic preparation requires a dose interval of eight h.

El objetivo de este trabajo fue determinar la bioequivalencia entre dos preparados comerciales de amoxicilina-ácido clavulánico disponibles en forma de tableta para uso oral en perros, y cuyo intervalo de dosificación indicado por los fabricantes es de 12 horas. Se calculó el perfil farmacocinético de cada preparado, a una dosis oral de 12.5 mg/kg de amoxicilina y ácido clavulánico en doce perros adultos mediante un modelo cruzado. Se determinó la concentración activa de la combinación de ambos fármacos en cada muestra de plasma, utilizando un método de análisis microbiológico por difusión en agar. El cálculo farmacocinético se llevó a cabo con un modelo no compartamental y los valores obtenidos se analizaron mediante un ANDEVA y prueba T de Bonferroni, con una P < 0.05. Tomando en cuenta las pautas internacionales, la formulación genérica resultó no ser bioequivalente a la de referencia. Esto es, se obtuvieron valores de AUC0-∞ 9.08 ± 0.26 μg h/ml y Cmax 5.48 ± 0.19 μg/ml para el genérico vs AUC0-∞ 13.28 ± 0. 30 μg h/ml y Cmax 2.9 ± 0.17 μg/ml para el de referencia. Si se considera un punto de inflexión para bacterias susceptibles, de 0.25 μg/ml, el preparado genérico requiere un intervalo de dosificación de ocho horas.

Antibiotic treatment schemes for very severe community-acquired pneumonia in children: a randomized clinical study / Esquemas de tratamiento antibiótico para la neumonía extrahospitalaria muy grave en niños: estudio clínico aleatorizado

OBJECTIVE: To compare clinical response to initial empiric treatment with oxacillin plus ceftriaxone and amoxicillin plus clavulanic acid in hospitalized children diagnosed with very severe community-acquired pneumonia (CAP). METHODS: A prospective randomized clinical study was conducted among children 2 months to 5 years old with a diagnosis of very severe CAP in the pediatric ward of São Paulo State University Hospital in Botucatu, São Paulo, Brazil, from April 2007 to May 2008. Patients were randomly divided into two groups by type of treatment: an oxacillin/ceftriaxone group (OCG, n = 48) and an amoxicillin/clavulanic acid group (ACG, n = 56). Analyzed outcomes were: time to clinical improvement (fever and tachypnea), time on oxygen therapy, length of stay in hospital, need to widen antimicrobial spectrum, and complications (including pleural effusion). RESULTS: The two groups did not differ statistically for age, sex, symptom duration before admission, or previous antibiotic treatment. Time to improve tachypnea was less among ACG patients than OCG patients (4.8 ± 2.2 versus 5.8 ± 2.4 days respectively; P = 0.028), as was length of hospital stay (11.0 ± 6.2 versus 14.4 ± 4.5 days respectively; P = 0.002). There were no statistically significant differences between the two groups for fever improvement time, time on oxygen therapy, need to widen antimicrobial spectrum, or frequency of pleural effusion. CONCLUSIONS: Both treatment plans are effective in treating very severe CAP in 2-month-to 5-year-old hospitalized children. The only analyzed outcome that favored amoxicillin/clavulanic acid treatment was time required to improve tachypnea.

OBJETIVO: Comparar la respuesta clínica al tratamiento empírico inicial con oxacilina más ceftriaxona frente a amoxicilina más ácido clavulánico en niños hospitalizados con diagnóstico de neumonía extrahospitalaria muy grave. MÉTODOS: Se llevó a cabo un estudio clínico prospectivo aleatorizado en niños de 2 meses a 5 años de edad con diagnóstico de neumonía extrahospitalaria muy grave en la sala de pediatría del Hospital Universitario del Estado de São Paulo en Botucatu, São Paulo, Brasil, entre abril del 2007 y mayo del 2008. Los pacientes se dividieron aleatoriamente en dos grupos según el tratamiento administrado: un grupo recibió oxacilina/ceftriaxona (n = 48) y otro amoxicilina/ácido clavulánico (n = 56). Los criterios de valoración analizados fueron el tiempo hasta la mejoría clínica (de la fiebre y la taquipnea), el tiempo de administración de oxigenoterapia, la duración de la internación, la necesidad de ampliar el espectro antibiótico y las complicaciones (como el derrame pleural). RESULTADOS: Los dos grupos no presentaban diferencias estadísticas con respecto a la edad, el sexo, la duración de los síntomas antes de la internación o el tratamiento previo con antibióticos. El tiempo hasta la mejoría de la taquipnea fue menor en los pacientes tratados con amoxicilina/ácido clavulánico que en los que recibieron oxacilina/ceftriaxona (4,8 ± 2,2 días frente a 5,8 ±2,4 días, respectivamente; P = 0,028), y también fue menor la duración de la internación (11,0 ± 6,2 días frente a 14,4 ± 4,5 días, respectivamente; P = 0,002). No hubo diferencias estadísticamente significativas entre los dos grupos en relación con el tiempo hasta la mejoría de la fiebre, el tiempo de administración de oxigenoterapia, la necesidad de ampliar el espectro antibiótico ni la frecuencia de derrame pleural. CONCLUSIONES: Ambos esquemas de tratamiento son eficaces para tratar la neumonía extrahospitalaria muy grave en niños de 2 meses a 5 años de edad hospitalizados. El único criterio de valoración analizado que favoreció el tratamiento con amoxicilina/ ácido clavulánico fue el tiempo hasta la mejoría de la taquipnea.

Estudio comparativo sobre la bioequivalencia de amoxicilina clavulánico 875/125 mg de laboratorios Leti SAV administrados en dosis única frente a amoxicilina clavulánico 875/125 mg de laboratorios Glaxo Smith Kline (Augmentin®) en una población de voluntarios sanos / Comparative study on the bioequivalence of amoxicillin clavulante 875/125 mg administered SAV Leti laboratory single dose verus amoxicillin clavulanate 875/125 mg of laboratories Glaxo Smith Klein (Augmentin®) in a population of healthy volunteers

Se realizó un estudio de bioequivalencia farmacocinética entredos formulaciones de liberación inmediata amoxicilina/ácidoclavulánico comprimidos de 875/125 mg de Laboratorios LETI, S.A.V (Genven®) frente al producto de referencia amoxicilina/ácido clavulánico (Augmentin®) tabletas de 875/125 mg de Laboratorios Glaxo Smith Kline, administrados en dosis única a la misma población de voluntarios sanos. Se determinaron los niveles de amoxicilina y ácido clavulánico a los tiempos: 0-20-40-60-80-100-120-150-180-240-300 y 360 minutos. Realizado en 12 voluntarios sanos. La determinación de los niveles de la droga alcanzados por ambos comprimidos se realizó por un método de HPLC, acoplado a espectrometría de luz ultravioleta, específico sensitivoy validado. Amoxicilina: Amoxicilina/ácido clavulánico comprimidos de 875/125 mg de Laboratorios LETI, S.A.V; Cmax: 9.861,68+/-3.728,62 μg/mL; AUC 0-6: 1.270.953,97+/-1.733.542,30 μg/mL/h y el AUC0-∞: 1.270.971,12:+/-488.046,50 μg/mL/h y el Augmentin® tabletas de 875/125 mg; Cmax: 10.111,80+/-4.588,30; AUC0-6: 1.391.135,91+/-714.494,91 μg/mL/h; AUC0-∞:1.391.160,27+/-633.946,84 μg/mL/h. Al comparar los mencionados valores, la media y los intervalos de confianza al 90% logarítmicamente transformados con el rango de referencia de 0.80 a 1.25% aceptado, se comprueba que los intervalos de confianza están incluidos en el mencionado rango de referencia, el cual se ha establecido como criterio de bioequivalencia para productos farmacéuticos, por lo que puede concluirse que ambos productos son bioequivalentes de acuerdo con las normas nacionales e internacionales. Ambas formulaciones tienen concentraciones plasmáticas encima de la CIM en más del 60% del intervalo de dosis

A study of bioequivalence between two formulations of immediate release: amoxicillin/clavulanic acid tablets 875/125 mg, LETI SAV, Laboratories (Genven®) compared to the reference product Augmentin® tablets 875/125 mg to Glaxo Smith Kline Laboratories, single dose administered in the same population of healthy volunteers. The levels of amoxicillin and clavulanate were eralued at time: 0-20-40-60-80-100-120-150-180-240-300 y 360 minutes. Done in 12 healthy volunteers. The determination of drug levels achieved by both tablets was performed by a HPLC method coupled with ultraviolet spectrometry, specific, sensitive and validated. Amoxicillin: Amoxicillin/clavulanic acid tablets 875/125 mg, LETI SAV, Laboratories: Cmax: 9861.68+/-3728.62 μg/mL AUC 0-6:1.270.953,97+/-1.733.542,30 and AUC0-∞: 1.270.971,12+/-488.046,50. Augmentin® tablets 875/125; Cmax: 10.111,80+/-4.588,30 μg/mL; AUC0-6: 1.391.135,91+/-714.494,91μg/mL/h andAUC0-∞ 1.391.160,27+/ -633.946,84 μg/mL/h. By comparing the above values, the mean and confidence intervals 90% log transformed with the reference range of 0.80 to 1.25% accepted, it is found that the confidence intervals are included in the above reference range, which has established as a criterion for bioequivalence, so it can be concluded that both products are bioequivalent in accordance with national and international standards. Both formulations have plasma concentrations above the MIC over 60% of the dosing interval

Produção e extração de ácido clavulânico de Streptomyces spp. por fermentação extrativa utilizando sistemas de duas fases aquo / Production and extraction of clavulanic acid from Streptomyces spp. by extractive fermentation using aqueous two-phase system

O ácido clavulânico (AC) é um potente inibidor de β-lactamases utilizado na área médica. Métodos alternativos, econômicos e simples para sua purificação são de grande interesse. Este trabalho objetivou produzir e extrair AC de Streptomyces spp. por fermentação extrativa utilizando sistema de duas fases aquosas (SDFA) - polietileno glicol (PEG)/sais fosfato. Foi selecionado o melhor produtor de AC entre sete linhagens de Streptomyces spp. Avaliou-se a influência de cinco fatores no cultivo do melhor produtor em frascos agitados (pH, temperatura, velocidade de agitação, concentrações das fontes de nitrogênio e de carbono), utilizando planejamento experimental estatístico. Definidas as melhores condições de cultivo, foram estudadas a produção e a extração do AC em fermentação extrativa utilizando SDFA em frascos agitados e em sistema descontínuo utilizando biorreator. Em biorreator também foram realizados o estudo termodinâmico do processo de fermentação nas condições ótimas obtidas nas etapas anteriores e a determinação do coeficiente volumétrico de transferência de massa (kLa), comparando os sistemas de fermentação no meio de cultivo simples (SF) e fermentação extrativa utilizando sistema SDFA PEG/sais fosfato (SFE) sem e com crescimento microbiano. A linhagem de Streptomyces selecionada como a melhor produtora de AC foi a DAUFPE 3060, a qual apresentou a maior produção desse inibidor, 494 mg/L em 48h, em frascos agitados nas condições: pH 6,0, 32ºC, 150 rpm, 5 g/L de glicerol e 20 g/L de farinha de soja. Após a etapa de otimização realizada para o estudo da temperatura e da concentração de farinha de soja, variáveis mais significativas no estudo de seleção, a temperatura e a concentração de farinha de soja ótimas, foram 32ºC e 40 g/L, respectivamente, com produção de 629 mg/L de AC em 48h. O estudo termodinâmico confirmou que a temperatura de 32ºC é a máxima de produção do AC; após esse valor, inicia-se, gradualmente, a degradação do AC...

Clavulanic acid (CA) is a potent inhibitor of β-lactamases used in the medical field. Alternative methods, economic and simple purification are of great interest. This PhD project aims to produce and extract clavulanic acid of Streptomyces spp. By extractive fermentation using aqueous two-phase system (ATPS) - Polyethylene glycol (PEG)/phosphate salts. The best producer of clavulanic acid among seven strains of Streptomyces spp was selected. The influence of five factors in the cultivation of the best producer in flasks (pH, temperature, agitation velocity, concentrations of nitrogen and carbon sources) using statistical experimental design was evaluated. Defined the best cultivation conditions, the production and extraction of clavulanic acid by extractive fermentation using ATPS in flasks and in a batch system using a bioreactor was analyzed. In batch system using a bioreactor were also carried out the thermodynamic study of the fermentation process in optimum conditions determined in previous steps and also determined the volumetric mass transfer coefficient (kLa) comparing the fermentation systems in simple culture medium (SF) and in a extractive fermentation using aqueous two-phase system (ATPS) PEG/phosphate salts (SEF) medium with and without microbial growth. A strain of Streptomyces spp. selected as the best producer of AC was DAUFPE 3060, which showed the highest production of this inhibitor, 494 mg/L at 48h, in flasks under the conditions of pH 6.0, 32 ºC, 150 rpm, 5 g/L of glycerol and 20 g/L of soybean flour. After the optimization step, the most significant variables in the study selection, temperature and concentration of soybean flour, were studied. The optimal values were 32 ºC and 40 g/L of temperature and soybean flour concentration, respectively, with production of 629 mg/L of CA after 48h of cultivation. The thermodynamic study confirmed that 32 ºC is the maximum temperature production of CA, after this value, starts…