Antifungal potential of biosurfactants produced by strains of Bacillus spp. (Bacillales: Bacillaceae) selected by molecular screening / Potencial antifúngico de biosulfactantes producidos por cepas de Bacillus spp. (Bacillales: Bacillaceae) seleccionadas por tamizaje molecular

Introduction: Bacillus species are used as biological controllers for phytopathogenic fungi, and the mechanisms to produce controllers include biosynthesis of lipopeptide biosurfactants with antifungal activity. Objective: To evaluate the antifungal potential of the biosurfactants produced by Bacillus strains, selected by molecular screening, on Fusarium oxysporum. Methods: We selected four molecular markers, related to the biosynthesis of surfactin, fengicin, and lichenysin (srfA, spf, fenB, LichAA) in nine Bacillus strains. We used two mineral media with several culture conditions, for biosurfactant production, and a well diffusion test for antifungal potential. Results: Only the biosurfactant produced by UFAB25 inhibits the mycelial growth of F. oxysporum (44 % ± 13): this biosurfactant was positive for srfA, spf, and fenB genes involved in the synthesis of surfactin and fengicine. Antifungal activity depends on culture conditions and the strain. Conclusions: Genetic markers are useful to detect strains with antifungal potential, facilitating the selection of bio-controllers. The biosurfactant profile is influenced by the strain and by culture conditions.

Introducción: Especies de Bacillus han sido empleadas como controladores biológicos contra hongos fitopatógenos. Entre los mecanismos utilizados se destaca la biosíntesis de biosurfactantes lipopeptídicos con actividad antifúngica. Objetivo: Evaluar el potencial antifúngico de los biosurfactantes producidos por cepas Bacillus nativas, previamente seleccionadas mediante tamizaje molecular, sobre Fusarium oxysporum. Métodos: Se utilizaron cuatro marcadores moleculares, relacionados con la biosíntesis de surfactina, fengicina y liquenisina (srfA, spf, fenB, LichAA) sobre nueve cepas de Bacillus. Se utilizaron dos medios minerales con diferentes condiciones de cultivo para la producción del biosurfactante. Se evaluó el potencial antifúngico de los biosurfactantes mediante la prueba de difusión en pozos. Resultados: Se determinó que solo el biosurfactante producido por UFAB25 actúa como inhibidor del crecimiento micelial de Fusarium oxysporum (43.6 % ± 13), esta cepa es positiva para los genes srfA, spf y fenB, involucrados en la síntesis de surfactina y fengicina. La actividad antifúngica depende de las condiciones de cultivo y la cepa. Conclusiones: Los marcadores genéticos ayudan a detectar cepas con potencial antifúngico, facilitando la selección de biocontroladores. El perfil del biosurfactante está influenciado no solo por la cepa, sino también por las condiciones del cultivo.

O potencial antimicrobiano do carveol: uma revisão integrativa

Objetivo: realizar uma revisão bibliográfica sobre o potencial antimicrobiano do carveol. É uma revisão integrativa entre os anos de 2010-2020 nas bases de dados BVS, PubMed, SciELO, ScienceDirect e Web of Science. Metodologia: dos 2753 artigos recuperados nas bases de dados, apenas 5 foram selecionados para compor os resultados, sendo os gêneros mais estudados Candida, Staphylococcus e Escherichia. A técnica de microdiluição em caldo foi a metodologia mais utilizada para determinar sua ação. Em termos de MIC, para a maioria das espécies, foram excelentes. Em relação ao teste Time-kill, o carveol teve um excelente desempenho na concentração de 4 x MIC, que mostrou uma redução de UFC de 6 log em 2 horas. Não foram encontrados na literatura estudos sobre a utilização do método Checkboard. Além disso, este composto apresentou boa atividade antibiofilme contra bactérias Staphylococcus aureus. Resultados: o possível mecanismo de ação da atividade antimicrobiana do carveol ocorre por meio dos graves danos causados às membranas citoplasmáticas, o que favorecerá a lise celular. Dessa forma, existem poucos estudos na coleção científica disponível que abordem o assunto, sendo necessária a realização de mais estudos in vitro e in vivo para melhor elucidar sua ação.

SUMMARY Aim: to carry out a bibliographic review on the antimicrobial potential of carveol. It is an integrative review between the years 2010-2020 in the BVS, PubMed, SciELO, Science-Direct and Web of Science databases. Methodology: of the 2753 articles retrieved from the databases, only 5 were selected to compose the results, the most studied genera being Candida, Staphylococcus and Escherichia. The broth microdilution technique was the most widely used methodology to determine its action. In terms of MIC, for most species, they were excellent. Regarding the Time-kill test, carveol had an excellent performance at a concentration of 4 x MIC, which showed a reduction of CFU by 6 log in 2 hours. No studies have been found in the literature on the use of the Checkboard method. Further-more, this compound had good antibiofilm activity against Staphylococcus aureus bacteria. Results: the possible mechanism of action of the antimicrobial activity of carveol occurs through the severe damage caused to the cytoplasmic membranes, which will favor cell lysis. Thus, there are few studies in the available scientific collection that address the subject, so it is necessary to carry out more in vitro and in vivo studies to better elucidate its action.

Objetivo: realizar una revisión bibliográfica sobre el potencial antimicrobiano del carveol. Se trata de una revisión integradora entre los años 2010-2020 en las bases de datos de BVS, PubMed, SciELO, ScienceDirect y Web of Science. Metodología: de los 2753 artículos recuperados de las bases de datos, solo se seleccionaron 5 para componer los resultados, siendo los géneros más estudiados Candida, Staphylococcus y Escherichia. La técnica de microdilución en caldo fue la metodología más utilizada para determinar su acción. En cuanto a CIM, para la mayoría de las especies, fueron excelentes. En cuanto al ensayo Time-kill, el carveol tuvo un excelente desempeño a una concentración de 4 x MIC, que mostró una reducción de UFC en 6 log en 2 horas. No se ha encontrado ningún estudio en la literatura sobre el uso del método Checkboard. Además, este compuesto tenía una buena actividad antibiofilm contra la bacteria Staphylococcus aureus. Resultados: el posible mecanismo de acción de la actividad antimicrobiana del carveol se produce a través del severo daño causado en las membranas citoplasmáticas, lo que favorecerá la lisis celular. Así, son pocos los estudios en la colección científica disponible que abordan el tema, por lo que es necesario realizar más estudios in vitro e in vivo para dilucidar mejor su acción.

Chemical composition and antifungal properties of commercial essential oils against the maize phytopathogenic fungus Fusarium verticillioides / Composición química y propiedades antifúngicas de aceites esenciales comerciales contra el hongo fitopatógeno de maíz Fusarium verticillioides

ABSTRACT The aim of the present study was to analyze the chemical composition ofCurcuma longa,Pimenta dioica,Rosmarinus officinalis, andSyzygiumaromaticumessential oils (EOs) and their antifungal and anti-conidiogenic activity againstFusarium verticillioides. The chemical profile of the EOs was determined by GC/MS. The antifungal and anti-conidiogenic activities were evaluated by the agar dilution method. The tested concentrations were 1000ppm, 500ppm, 250ppm and 125ppm.S. aromaticumEO exhibited the highest antifungal effect, followed byP. dioicaand to a lesser extentC. longa. The major compounds of these EOs were eugenol (88.70% inS. aromaticumand 16.70% inP. dioica), methyl eugenol (53.09% inP. dioica), and α-turmerone (44.70%), β-turmerone (20.67%), and Ar-turmerone (17.27%) inC. longa.Rosmarinus officinalispoorly inhibited fungal growth; however, it was the only EO that inhibited conidial production, with its major components being 1,8-cineole (53.48%), α-pinene (15.65%), and (−)-camphor (9.57%). Our results showed that some compounds are capable of decreasing mycelial growth without affecting sporulation, and vice versa. However, not all the compounds of an EO are responsible for its bioactivity. In the present work, we were able to identify different major compounds or mixtures of major compounds that were responsible for antifungal and anti-conidiogenic effects. Further experiments combining these pure components are necessary in order to achieve a highly bioactive natural formulation against the phytopathogenic fungusF. verticillioides.

RESUMEN El objetivo del presente estudio fue analizar la composición química de los aceites esenciales (AE) deCurcuma longa,Pimenta dioica,RosmarinusofficinalisySyzygiumaromaticum, y su actividad antifúngica y anti-esporuladora contraFusarium verticillioides. La composición de los AE se analizó por CG-EM. La actividad antifúngica y anti-esporuladora se evaluó a través del método de dilución en agar usando las siguientes concentraciones: 1.000, 500, 250 y 125ppm. El AE deS. aromaticumdemostró el mayor efecto antifúngico, seguido del deP. dioicay, en menor medida, delC. longa. Los compuestos principales de estos AE fueron eugenol (88,70% enS. aromaticumy 16,70% enP. dioica), metileugenol (53,09% enP. dioica) y α-turmerona (44,70%), β-turmerona (20,67%) y Ar-turmerona (17,27%) enC. longa. El AE deR. officinalisfue el que menor efecto inhibitorio presentó sobre el crecimiento fúngico, pero fue el único que inhibió la producción de conidias; sus principales componentes fueron 1,8-cineol (53,48%), α-pineno (15,65%) y (−)-alcanfor (9,57%). Nuestros resultados demostraron que algunos compuestos son capaces de disminuir el crecimiento del micelio deF. verticillioidessin afectar la esporulación, y vice versa. Sin embargo, no todos los compuestos de un AE son responsables de su bioactividad. En el presente trabajo, pudimos identificar diferentes compuestos o mezclas de compuestos que fueron responsables de los efectos antifúngicos y anti-esporuladores. Se necesitan nuevos experimentos que evalúen la combinación de estos compuestos puros para lograr una formulación bioactiva y de origen natural para el control deF. verticillioides.

Antibacterial, antifungal, and antiviral activities of chalcone-bearing tetrahydropyranyl and 2,4-dihydroxyl moieties / Actividad antibacteriana, antifungica y antiviral de las chalconas que contienen los grupos tetrahidropiranilo y 2,4-dihidroxilo / Atividades antibacteriana, antifúngica e antiviral de chalconas funcionalizadas com os grupos tetrahidropiranil e 2,4-dihidroxil

SUMMARY Chalcones highlights as an important structure in medicinal chemistry and thus has been widely used as a template in the development of new drugs. In this study, we aim to determine the antibacterial, anti-Candida, and anti-Dengue potential of new chalcone-bearing 2,4-dihydroxyl and tetrahydropyranyl moieties. Antimicrobial activity assays showed that microorganism of the Staphylococcus genus (including methicillin-resistant strains) were susceptible to 2,4-dihydroxychalcones, with minimum inhibitory concentrations (MICs) ranging of 19.5 to 125 µg.mL-1. Compound 4e, which showed the highest bacteriostatic effect, also has bactericidal activity from of 80 µg.mL-1. The growth of oral isolates of Candida albicans was also efficiently inhibited with compound 4e (MIC: 15.6-32.3 µg.mL-1), which was fungicidal at 15.6 µg.mL-1. However, the presence of the tetrahydropyranyl moiety impaired both the antibacterial and antifungal effects. None of the chalcones tested were actives against Dengue virus serotype 2. In conclusion, the compound 4e showed good anti-Staphylococci and anti-Candida activity and may be a promising prototype for the development of new antimicrobial agents.

RESUMEN Las chalconas se destacan como una estructura importante en la química médica y, por lo tanto, se ha empleado como prototipo para el desarrollo de nuevos fármacos. En este estudio, nuestro objetivo fue determinar el potencial antibacteriano, anti Candida y anti-Dengue de las nuevas chalconas que poseen los grupos 2,4-dihidroxilo y tetrahidropiranilo. El ensayo de actividad antimicrobiana mostró que las bacterias del género Staphylococcus (incluidas las cepas resistentes a la meticilina) fueron sensibles a las 2,4-dihidroxicalconas estudiadas, con concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) que oscilan entre 19,5 y 125 µg.mL-1. El compuesto 4e, que tuvo el mejor efecto bacteriostático, también mostró un efecto bactericida a partir de la concentración de 80 µg.mL-1. El crecimiento de los aislamientos orales de Candida albicans también se inhibió eficientemente con el compuesto 4e (CIM: 15.6-32.3 µg.mL-1), que fue fungicida a una concentración de 15.6 µg.mL-1. Sin embargo, la presencia del grupo tetrahidropiranilo perjudicó la actividad antibacteriana y anti-fúngica de los análogos de la chalcona. Además, ninguno de los compuestos evaluados mostró un efecto contra el virus del dengue serotipo 2. En conclusión, el compuesto 4e muestra una buena actividad anti-estafilocócica y anti-Candida y puede ser un prototipo prometedor para el desarrollo de nuevos agentes antimicrobianos.

RESUMO As chalconas se destacam como uma importante estrutura na química medicinal e dessa forma tem sido empregada como um protótipo para o desenvolvimento de novos fármacos. Nesse estudo, nós objetivamos determinar o potencial antibacteriano, anti-Candida, e anti-Dengue de novas chalconas que possuem os grupos 2,4-dihidroxil e tetrahidropiranil. O ensaio de atividade antimicrobiana mostrou que bactérias do gênero Staphylococcus (incluindo linhagens resistentes a meticilina) foram sensíveis para as 2,4-dihidroxichalconas estudadas, com concentrações inibitórias mínimas (CIM) variando de 19,5 para 125 Dengue potential of new chalcone µg.mL-1. O composto 4e, o qual apresentou o melhor efeito bacteriostático, também mostrou efeito bactericida a partir da concentração de 80 µg.mL-1. O crescimento de isolados orais de Candida albicans foi também eficientemente inibido com o composto 4e (CIM: 15.6-32.3 µg.mL-1), o qual foi fungicida a concentração de 15,6 µg.mL-1. Entretanto, a presença do grupo tetrahidropiranil prejudicou a atividade antibacteriana e antifúngica dos análogos de chalcona. Adicionalmente, nenhum dos compostos avaliados mostrou efeito contra o vírus da dengue sorotipo 2. Em conclusão, o composto 4e apresenta boa atividade anti-estafilocóccica e anti-Candida, e pode ser um promissor protótipo para o desenvolvimento de novos agentes antimicrobianos.

Fungicidal activity of volatile organic compounds from Paenibacillus bacteria against Colletotrichum gloeosporioides / Actividad fungicida de compuestos orgánicos volátiles de la bacteria Paenibacillus contra Colletotri chum gloeosporio ides / Atividade fungicida de compostos orgânicos voláteis da bactéria Paenibacillus contra Colletotrichum gloeosporioides

Abstract Some bacteria release volatile organic compounds (VOCs) that can influence the growth of other microorganisms including some pathogens. Identifying bacteria with antifungal activity makes it possible to use such bacteria in the development of biocontrol agents. Thus, the present study focuses on screening VOCs released by eight isolates from Paenibacillus genus, collected at Old Providence and Santa Catalina coral reef (Colombian Caribbean Sea), with antifungal activity against phytopathogenic fungi Colletotrichum gloeosporioides 26B. The VOCs from Paenibacillus sp (PNM-50) showed inhibition rates higher than 50% in the mycelial fungi growth accompanied by macroscopic morphological changes and a reduction in conidiation. In order to identify the VOCs responsible for this antifungal bioactivity, Headspace-Solid Phase Microextraction (HS-SPME) from the bacterial culture was conducted, followed by Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC-MS). The chromatographic results revealed a high abundance of VOCs released just by culture media. Once, the difference between VOCs emitted by culture media and bacteria was established, it was possible to make a putative identification of 2-furanmethanol, phenylacetonitrile, and 2,4-dimethylpentanol as possible VOCs responsible for the antifungal activity.

Resumen Algunas bacterias liberan compuestos orgánicos volátiles (COVs) que pueden influir en el crecimiento de otros microorganismos incluyendo algunos patógenos. La identificación de bacterias con actividad antifúngica hace posible el uso de tales bacterias en el desarrollo de agentes de biocontrol. Así pues, en este estudio, se realizó un examen dirigido exclusivamente a los COVs emitidos por ocho aislamientos bacterianos del género Paenibacillus, recolectados en el arrecife de coral de Providencia y Santa Catalina (Mar Caribe colombiano), con actividad antifúngica contra el hongo fitopatógeno Colletotrichum gloeosporioides 26B. Los COVs del aislamiento Paenibacillus sp (PNM-50) mostraron tasas de inhibición superiores al 50% en el crecimiento micelial del hongo, acompañado de cambios morfológicos macroscópicos y una reducción en la conidiación. Para identificar los COVs responsables de esta bioactividad antifúngica, se realizó microextracción en fase sólida del espacio de cabeza (HS-SPME) del cultivo de las bacterias y posterior análisis por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS). Los resultados cromatográficos revelaron gran abundancia de COVs emitidos por los medios de cultivo. Una vez que se estableció la diferencia entre los COVs emitidos por el medio de cultivo y las bacterias, fue posible identificar tentativamente 2-furanmetanol, fenilacetonitrilo y 2,4-dimetilpentanol como COVs posiblemente responsables de la actividad antifúngica.

Resumo Algumas bactérias liberam compostos orgânicos voláteis (COV) que podem influenciar o crescimento de outros microorganismos, incluindo alguns patógenos. A identificação de bactérias com atividade antifúngica, possibilita seu uso no desenvolvimento de agentes de biocontrole. Neste estudo, foi realizada uma triagem focada nos COV liberados por oito isolados bacterianos do gênero Paenibacillus, coletados nos recifes de coral Old Providence e Santa Catalina (mar do Caribe colombiano), com atividade antifúngica contra fungos fitopatogênicos Colletotrichum gloeosporioides 26B. Os COV de Paenibacillus sp (PNM-50) apresentaram taxas de inibição superiores à 50% sobre o crescimento de fungos miceliais, acompanhadas de alterações morfológicas macroscópicas e redução da conidiação. Para identificar os COV responsáveis por essa bioatividade antifúngica, foi conduzida uma Microextração de Fase Sólida Headspace (HS-SPME) da cultura bacteriana e, em seguida, foi analisada por Cromatografia Gasosa associada à Espectrometria de Massa (GCMS). Os resultados cromatográficos revelaram uma alta abundância de COVs liberados apenas pelos meios de cultura. Uma vez estabelecida a diferença entre os COV emitidos pelos meios de cultura e bactérias, foi possível fazer uma identificação parcial de 2-furanmetanol, fenilacetonitrila e 2,4-dimetilpentanol como possíveis COV responsáveis pela atividade antifúngica.

Efecto antifúngico y antimicotoxigénico de Lactobacillus plantarum CRL 778 a diferentes valores de actividad de agua / Antifungal and antimycotoxigenic effect of Lactobacillus plantarum CRL 778 at different water activity values

Ochratoxin A (OTA) is a mycotoxin produced by filamentous fungi with high impact Lactic acid bacteria; in food safety due to its toxicity. In the last decade, the presence of OTA was widely reported in different foods. In this study, the ability of Lactobacillus (L.) plantarum CRL 778 to control growth and OTA production by Aspergillus (A.) niger 13D strain, at different water activity (a w) values (0.955, 0.964, 0.971, 0.982, and 0.995) was determined in vitro. Both parame ters were significantly (p<0.05) reduced by the lactobacilli and the effect depended on a w. Greatest growth rate inhibition (46.9%) was obtained at a w = 0.995, which is the most suitable value for growth and production of antifungal metabolites (lactic acid, acetic acid, phenyllac-tic and hydroxyl-phenyllactic acids) by L. plantarum CRL 778. Besides, morphological changes and inhibition of melanin synthesis were observed in colonies of A. niger 13D in presence of L. plantarum CRL 778 at a w ranged between 0.971 and 0.995. In addition, maximum reduction (90%) of OTA production took place at a w = 0.971, while inhibition of fungi growth was more evident at a w =0.995. These findings suggest that L. plantarum CRL 778 could be used for control of ochratoxigenic fungal growth and OTA contamination in different fermented foods with a w values between 0.971 and 0.995.

Ocratoxina A (OTA) es una micotoxina producida por hongos filamentosos con un alto impacto en la seguridad alimentaria debido a su toxicidad. En la última década se ha reportado ampliamente a nivel mundial, la presencia de OTA en diversos alimentos. En este estudio se evaluó in vitro, la capacidad de Lactobacillus (L.) plantarum CRL 778 de controlar el crecimiento y la producción de OTA por Aspergillus (A.) niger 13D, a diferentes valores de actividad de agua (a w): 0.955, 0.964, 0.971,0.982 y 0.995). La cepa láctica redujo significativamente (p <0.05) ambos parámetros, siendo el efecto dependiente del valor de a w. La mayor inhibición del crecimiento (46.9%) se obtuvo a a w =0.995, valor más adecuado para el crecimiento y producción de metabolitos antifúngicos (ácido láctico, ácido acético, ácidos fenil-láctico e hidroxi-fenil láctico) por la cepa láctica. Además, se observaron cambios morfológicos en las colonias de A. niger 13D, crecidas en presencia de L. plantarum CRL 778 a valores de a w de 0.971 y 0.995. El porcentaje máximo de reducción en la producción de OTA (90%) por la cepa láctica se observó a un valor de a w = 0.971, mientras la inhibición del crecimiento fúngico fue mayor cuando a w = 0.995. Estos hallazgos sugieren que L. plantarum CRL 778 podría emplearse para el control de la contaminación por hongos ocratoxigénicos en alimentos con valores de aw comprendidos entre 0.971-0.995.

Evaluación de la actividad antifúngica del extracto de Usnea laevis en hongos fitopatógenos / Evaluation of the antifungal activity of the lichenic extract of Usnea laevis in phytopathogenic fungi

Los líquenes son producto de una asociación simbiótica entre un hongo y alga y/o cianobacteria; esta simbiosis produce una serie de metabolitos secundarios o sustancias liquénicas únicas, las mismas que son aisladas a partir de sus extractos y que han presentado una marcada actividad antibiótica y antifúngica. Considerando que en el Ecuador no se tienen antecedentes acerca de este tipo de estudios, el objetivo planteado fue el evaluar la actividad antifúngica del extracto liquénico de Usnea laevis frente a hongos fitopatógenos. En el presente estudio las sustancias liquénicas almacenadas en el talo de Usnea laevis fueron extraídas con metanol y etanol. La actividad antifúngica in vitro de estos extractos fue probado frente a géneros de hongos fitopatógenos previamente aislados (Aspergillus, Penicillium y Rhizopus stolonifer); añadiéndolo al medio de cultivo Agar Papa Dextrosa (PDA) a una concentración de 0,5%; determinándose el porcentaje de inhibición. Los datos fueron analizados estadísticamente y se realizó la clasificación del extracto en base a su porcentaje de inhibición según la OILB. El extracto metanólico y etanólico de Usnea laevis mostró una mayor efectividad frente a Rhizopus stolonifer, inhibiendo más del 50% de su crecimiento, a diferencia de Penicillium y Aspergillus cuyo porcentaje de inhibición fue mucho menor y mostraron diferencias estadísticamente significativas. El extracto liquénico fue moderadamente tóxico para Rhizopus stolonifer, ligeramente tóxico para Aspergillus sp 1 y Penicillium sp e inocuo para Aspergillus sp 2.

A lichen is an organism product of a symbiotic association between a fungus and algae and / or cyanobacteria; this symbiosis produces many secondary metabolites or unique lichen substances, which are isolated from their extracts and show a marked antibiotic and antifungal activity. Considering there is no background on this type of studies in Ecuador, the aim of this study was to evaluate the antifungal in vitro activity of Usnea laevis extract on phytopathogenic fungi. The lichenic substances stored in the thallus of Usnea laevis were extracted with methanol and ethanol. The in vitro antifungal activity of these extracts was tested against phytopathogenic fungal genera previously isolated (Aspergillus, Penicillium and Rhizopus stolonifer) . They were adding to Potato Dextrose Agar (PDA) culture medium at a concentration of 0.5%, and the inhibition percentage was determined. Data were statistically analyzed and the extract was classified based on its inhibition percentage according to the OILB. Methanolic and ethanolic extracts of Usnea laevis showed greater effectiveness against Rhizopus stolonifer, inhibiting more than 50% of its growth, unlike Penicillium and Aspergillus, whose inhibition percentage was lower and showed significant differences. The liquid extract was also moderately toxic to Rhizopus stolonifer, slightly toxic to Aspergillus sp 1 and Penicillium sp and harmless to Aspergillus sp 2.

Effects of essential oils from two Lippia species on growth of phytopathogenic fungi / Efecto de los aceites esenciales de dos especies de Lippia sobre el crecimiento de hongos fitopatógenos

Chemical characterization of the essential oils of two Lippia species by GC-MS and NMR spectroscopy revealed that limonene (84.3%) and ß-caryophyllene (6.1%) were the most abundant components in Lippia turbinata while (6S,7S,10S)-trans-davanone (99.1%) predominated in Lippia integrifolia. Antifungal activity of the essential oils was determined by headspace volatile exposure assay against the fungal phytopathogenic Sclerotinia sclerotiorum, Sclerotium rolfsii and Rhizoctonia solani. The essential oil of L. turbinata showed potent antifungal activity against the panel of fungi tested while that the oil of L. integrifolia significantly inhibited the mycelial growth of S. rolfsii and R. solani.

La caracterización química de los aceites esenciales de dos especies de Lippia por cromatografía gaseosa-espectrometría de masas (CG-EM) y espectroscopia de RMN reveló que limoneno (84,3%) y ß-cariofileno (6,1%) fueron los componentes más abundantes de Lippia turbinata mientras que (6S,7S,10S)-trans-davanona (99,1%) predominó en Lippia integrifolia. La actividad antifúngica de los aceites esenciales se determinó por el ensayo de exposición a los vapores frente a los hongos fitopatógenos Sclerotinia sclerotiorum, Sclerotium rolfsii y Rhizoctonia solani. El aceite esencial de L. turbinata mostró una potente actividad antifúngica frente al panel de hongos ensayados, mientras que el aceite de L. integrifolia inhibió significativamente el crecimiento micelial de S. rolfsii y R. solani.

Synthesis and in vitro Evaluation of Antifungal Properties of Some 4-Aryl-3-Methyl-1,2,3,4-Tetrahydroquinolines Derivatives / Síntesis y evaluación in vitro de las propiedades antifungicas de algunos derivados de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolinas / Síntese e avaliação in vitro das propriedades antifungicas de alguns derivados de 4-Aryl-3-Methyl-1,2,3,4-Tetrahydroquinolines

Two series of 4-aryl-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline derivatives were efficiently synthesized according to a two-step synthesis and evaluated as potential antifungal agents. The key step was the formation of the corresponding N-benzyltetrahydroquinolines 5 via a three-component cationic imino Diels-Alder cycloaddition. The second step was a catalytic debenzylation to obtain the N-unprotected tetrahydroquinolines 6. The products were isolated and purified by column chromatography. Substances were characterized using nuclear magnetic resonance (NMR) mass spectrometry (MS) and infrared spectroscopy (IR). All compounds were tested in vitro against standardized, clinically important fungi, including yeasts, hialohyphomycetes, and dermatophytes. These studies showed that between the tetrahydroquinoline series tested, compounds 6f and 6g showed antifungal activity, specifically against dermatophytes. The compound 6-methoxy-4-(4-hydroxi-3-methoxyphenyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline 6g exhibited the best in vitro activity (MIC 32-65 μg/mL). The results indicated that the elimination of benzyl group from the N-benzyltetrahydroquinolines derivatives, as well as the introduction of a hydroxyl group in the 4-aryl substituent caused a significant improvement in the antifungal activity. These results were supplemented by the in silico prediction; most of the tetrahydroquinolines evaluated showed high bioavailability, high drugs score and low potential risk.

Dos series de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolinas fueron sintetizadas de acuerdo con una metodología sintética de dos pasos y evaluadas como potenciales agentes antifúngicos. El paso clave involucró la formación de las correspondientes N-bencil tetrahidroquinolinas 5 vía una cicloadición imino Diels-Alder catiónica. El segundo paso consistió en obtener las tetrahidroquinolinas N-desprotegidas 6 vía una desbencilación catalítica. Los productos fueron aislados y purificados usando cromatografía en columna (CC). Las sustancias fueron identificadas usando resonancia magnética nuclear (RMN), espectrometría de masas (EM) y espectroscopia infrarroja (IR). Los compuestos fueron evaluados in vitro frente a cepas estandarizadas de hongos clínicamente relevantes, incluyendo levaduras, hialohifomicetes y dermatofitos. Estos estudios mostraron que, de las tetrahidroquinolinas ensayadas, los compuestos 6f y 6g mostraron actividad antifúngica, específicamente frente a dermatofitos. El compuesto 6-metoxi-4-(4-hidroxi-3-metoxifenil)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolina 6g exhibió la mejor actividad (MIC 32-65 μg/mL). Los resultados indican que remover el grupo bencilo e introducir un grupo hidroxilo en el sustituyente arilo de las N-bencil tetrahidroquinolinas produce un mejoramiento de la actividad antifúngica. Predicciones in silico complementaron los resultados: la mayoría de las tetrahidroquinolinas ensayadas mostraron alta biodisponibilidad, altos "drug scores" y bajo riesgo potencial.

Duas séries de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolina foram sintetizadas de acordo com um método de síntese em duas etapas e avaliadas como potenciais agentes antifúngicos. O passo chave envolveu a formação dos correspondentes N-bencil tetrahidroquinolinas 5 via uma cicloadição de imino Diels-Alder catiónica. O segundo passo foi obter as N-tetrahidroquinolinas 6 através de uma desbenzilação catalítica. Os produtos foram purificados utilizando cromatografia em coluna. As substancias foram identificadas por ressonancia magnética nuclear (RMN), espectrometria de massa (EM) e espectroscopia de infravermelho (IR). Todos o compostos foram testados in vitro contra as estirpes padrao e os fungos clinicamente importantes, incluindo as leveduras, hialohifomicetes e dermatófitos. Estes estudos mostraram que entre a série de tetrahidroquinolinas (THQ) os compostos 6f e 6g mostraram atividade antifúngica, particularmente contra dermatófitos. O composto 6-metoxi-4-(4-hidroxi-3-metoxifenil)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinila 6g mostrou melhor atividade (MIC 32-65 μg/mL). Os resultados indicam que a remoção do grupo benzilo e a introdujo de um grupo hidroxilo no substituinte arilo do N-benzil-tetrahidroquinolina, resultou num aumento significativo da atividade antifúngica. Os resultados foram suplementados por previsöes in silico, que mostraram alta biodisponibilidade e pouco risco potencial da maioria dos tetrahidroquinolinas avaliados.

Antifungal activity of plant extracts against microsporum canis and candida spp. strains / Actividad antifúngica de extractos de plantas contra cepas de microsporum canis y candida spp

Aiming to find a phytotherapeutic compounds to treat animal fungal infections, plants commonly found in Northeastern Brazil were evaluated in vitro against Microsporum canis and Candida spp. strains isolated from dogs and cats. The leaf ethanol extracts of Momordica charantia, Calotropis procera, Peschiera affinis and Piper tuberculatum and decoction of Mangifera indica were initially evaluated by the agar-well diffusion method. Four extracts induced growth inhibition zones against M. canis: P. tuberculatum (20 mm), M. indica (14 mm), M. charantia (13 mm) and P. affinis (11 mm). None of them were active against Candida spp. Broth microdilution tests were performed for M. canis strains (n=5), to find the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum fungicidal concentration (MFC). The geometric means for the MIC values were 590, 370, 350, 170 ug/mL, and for the MFC values were 1190, 750, 700, 340 ug/mL for M. charantia, P. affinis, P. tuberculatum and M. indica, respectively. Therefore, extracts from M. charantia, P. affinis, P. tuberculatum and M. indica are good candidates to produce antifungal phytotherapics since these extracts demonstrated good activity against M. canis.

Con el objetivo de encontrar compuestos fitoterapéuticos para tratar las infecciones por hongos de los animales, plantas que se encuentran comúnmente en el noreste de Brasil se evaluaron in vitro frente a cepas de Microsporum canis y Candida spp. aisladas de perros y gatos. Los extractos etanólicos de hojas de Momordica charantia, Calotropis procera, Peschiera affinis y Piper tuberculatum y la decocción de Mangifera índica fueron evaluados inicialmente por el método de difusión en pocillos de agar. Cuatro extractos indujeron zonas de inhibición del crecimiento contra M. canis: P. tuberculatum (20 mm), M. índica (14 mm), M. charantia (13 mm) y P. affinis (11 mm). Ninguno de ellos fue activo contra Candida spp. Se realizaron pruebas de microdilución en caldo para las cepas de M. canis (n = 5), para encontrar la concentración mínima inhibitoria (CIM) y la concentración fungicida mínima (CFM). Las medias geométricas de los valores de CIM fueron 590, 370, 350, 170 mg/ml, y para los valores de CFM fueron 1.190, 750, 700, 340 mg/ml de M. charantia, P. affinis, P. tuberculatum y M. indica, respectivamente. Por lo tanto, los extractos de M. charantia, P. affinis, P. tuberculatum y M. indica son buenos candidatos para la producción de fitoterápicos antifúngicos ya que estos extractos demostraron una buena actividad contra M. canis.

Evaluacion de la Actividad antifúngica del extracto de las hojas de Jarilla frente a cepas de Tiña Capitis - juliaca noviembre 2014 a febrero 2015 / Evaluation of the antifungal activity of Jarilla leaves extract against Tiña Capitis strains - juliaca November 2014 to February 2015

Los hongos pueden causar enfermedades en humanos, especialmente en pacientes inmunosuprimidos por ellos las plantas medicinales y sus principios activos ayudan a la medicina complementaria. OBJETIVO: Esta investigación evalúa la actividad antifúngica del estracto acuoso de las hojas de Jarilla y el Clotrimazol frente a dos cepas fúngicas. MATERIALES Y METODOS: La evaluación de la actividad antifúngica por la Técnica de Dilución del extracto de agar y la actividad antifúngica por la formación de halos de inhibición. RESULTADOS: Identificación taxonómica de la jarilla(Larrea sp), características organolépticas del Extracto acuoso liofilizado (color pardo moderado, olor característico e higroscópico), el extracto acuoso es más soluble en agua destilada, y este contiene alcaloides, triterpenos, flavonoides, saponinas; y el índice de inhibición aumenta a mayores concentraciones del EA y del Clotrimazol y disminuye a mayor tiempo de incubación (pasadas las 168 horas). La cepa más sensible al extracto acuoso es el Trichophyton mentagrophytes ATCC 24953. CONCLUSIONES: La Jarilla pertenece a la familia Zygophyllaceae, Orden Zygphyllales y Clase Magnoliopsida, División Magnoliophyta, Reino Plantae. El Estracto Acuoso Liofilizado es de aspecto: Polvo grueso, pardo moderado, olor característico y poco higroscópico y la solubilidad del EA es mayor en el solvente agua destilada. Por el Tamizaje Fitoquímico destacan: alcaloides, triterpenos, flavonoides, saponinas, trazas de azucares reductores, fenoles y taninos. El grado de Inhibición del EA y Clotrimazol frente a Trichophyton mentagrophytes a las 72 horas se obtuvo que a mayor concentración del EA y el Clotrimazol (16, 8, 4, 2 ug/ml) la inhibición es de 100%; y a las 168 horas a las mismas concentraciones del EA(16 , 8, 4, 2 mg/dl.) en un 75% de inhibición; a las 168 horas la inhibición de EA en concentracines mayores(16 , 8, 4, 2 mg/dl.)se mantuvo en 75% pero el Clotrimazol bajo su inhibición hasta 25% a las mismas concentraciones.

Differential accumulation of defense-related isoflavonoids inhypocotyls/roots of common bean (Phaseolus vulgaris L. ) cultivars treatedwith salicylic acid and structurally related compounds / Acumulación diferencial de isoflavonoides relacionados con la defensa en hipocótilos/raíces de variedades deporoto (Phaseolus vulgaris L. ) tratados con ácido salicílico y compuestos estructuralmente relacionados

Hypocotyls/roots of four (anthracnose-resistant: ICA Quimbaya and CORPOICA 106; anthracnose-susceptible: Cargamanto Rojo and Cargamanto Mocho) common bean cultivars treated with salicylic acid (SA) as elicitor, were analyzed to determine the capacity for synthesizing defense-related isoflavonoids. Time-course and dose-response studies indicated that the maximum levels of isoflavonoids, occurred at 1.45 mM SA and between 96 and 144 h post-induction. Overall, anthracnose-resistant cultivars produced the defense-related isoflavonoids to superior amounts than the susceptible ones. Additionally, crude isoflavonoid extracts from SA-treated tissues cvs. ICA Quimbaya and Cargamanto Rojo displayed higher inhibitory effect against C. lindemuthianum than those from water-treated tissues. A comparison of the isoflavonoid-eliciting activity of a series of structurally-related compounds to SA revealed that isoflavonoid production may be differentially controlled. Acetyl-salicylic acid showed the best isoflavonoid-inducing effect. Results might be useful for crop protection programs through the selecting of common bean cultivars with better prospects of disease resistance, and the development of better isoflavonoid-eliciting agents.

Los hipocótilos/raíces de cuatro variedades de poroto (resistente a antracnosis: ICA Quimbaya y CORPOICA 106; susceptible a antracnosis: Cargamanto Rojo y Cargamanto Mocho) tratados con ácido salicílico (AS) como elicitor, se analizaron para determinar la capacidad para sintetizar isoflavonoides relacionados con la defensa. Los estudios en el curso del tiempo y dosis-respuesta indicaron que los niveles máximos de isoflavonoides, ocurrieron a una concentración de AS de 1.45 mM y entre 96 y 144 h post-inducción. En general, las variedades resistentes a la antracnosis produjeron los isoflavonoides relacionados con la defensa en cantidades superiores en comparación con las variedades susceptibles. Adicionalmente, los extractos de isoflavonoides crudos provenientes de tejidos tratados con AS var. ICA Quimbaya y Cargamanto Rojo desplegaron un efecto inhibitorio contra C. lindemuthianum mayor que aquellos resultantes de tejidos tratados con agua. Una comparación de la actividad inductora de isoflavonoides de una serie de compuestos estructuralmente relacionados con el AS reveló que la producción de isoflavonoides puede ser controlada diferencialmente. El ácido acetilsalicílico mostró el mejor efecto inductor de isoflavonoides. Los resultados pueden ser útiles para los programas de protección a cultivos a través de la selección de variedades con mejores perspectivas de resistencia a enfermedades, y el desarrollo de mejores agentes elicitores de isoflavonoides.

Actividad antifúngica de melanina en cepas clínicas de Candida spp / Antifungal activity of melanin in clinical isolates of Candida spp

Background: Melanocytes are cells located in epidermis and mucous membranes that synthesize melanin and cytokines. It is known that melanin has antimicrobial activity and that melanocytes are melanized in presence of microbial molecules. Objective: To study the antifungal activity of melanin on Candida spp. Methodology: The minimum inhibitory concentration (MIC) to melanin was determined in 4 Candida ATCC strains (C. albicans SC5314, C. parapsilosis 22019, C. glabrata 2001, C. krusei 6258) and 56 clinical isolates of Candida spp. (33 C. albicans, 12 C. glabrata, 3 C. famata, 3 C. krusei, 3 C. parapsilosis, 2 C. tropicalis) using a broth microdilution method. In addition, the antifungal activity of melanocytes and mice melanoma cells was tested against C. albicans. Results: Melanin inhibited the tested isolates, including the susceptible dose-dependent and fluconazole-resistant strains; MIC range and MIC50 were 0.09-50 μg/mL and 6.25 μg/mL, respectively. Pigmented cells lysates inhibited C. albicans. Conclusions: Melanin is able to inhibit clinical isolates of Candida spp. Melanization could be an important protective mechanism of melanocytes.

Introducción: Los melanocitos son células presentes en piel y en mucosas que sintetizan melanina, además de citoquinas. Es sabido que melanina presenta actividad antimicrobiana y que los melanocitos se melanizan al ser expuestos a moléculas microbianas. Objetivo: Estudiar la actividad antifúngica de melanina en cepas clínicas de Candida spp. Metodología: Se midió la concentración inhibitoria mínima (CIM) a melanina, de 4 cepas de Candida ATCC (C. albicans SC5314, C. parapsilosis 22019, C. glabrata 2001 y C. krusei 6258) y 56 aislados clínicos de Candida spp. (33 C. albicans, 12 C. glabrata, 3 C. famata, 3 C. krusei, 3 C. parapsilosis, 2 C. tropicalis) mediante un método de microdilución en caldo. Además se estudió el efecto antifúngico de lisados de melanocitos y células de melanoma de ratón en C. albicans. Resultados: Melanina inhibió las cepas analizadas, incluso cepas susceptibles dosis-dependiente y resistentes a fluconazol, siendo los rangos de CIM y CIM50 de 0,09-50 μg/mL y 6,25 μg/ mL, respectivamente. Los lisados de células pigmentadas inhibieron C. albicans. Conclusiones: Melanina es capaz de inhibir cepas clínicas de Candida spp. La melanización podría ser un importante mecanismo protector de los melanocitos.

Biological activity of a furanoeremophilane isolated from Senecio filaginoides var. filaginoides / Actividad biológica de un furanoeremofilano aislado de Senecio filaginoides var. filaginoides

Compound, 10H-9-oxofuranoeremophilane was isolated from Senecio filaginoides var. filaginoides, and its structure established on the basis of spectral analysis and and comparison with literature data. Antimicrobial activity was demonstrated against Candida spp but not against bacteria (Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomona aeruginosa). Besides, the compound showed antifungal activity and effect on mycelial growth of the phytopathogenic fungus Botrytis cinerea. and comparison with literature data.

Un compuesto, 10H-9-oxofuranoeremofilano fue aislado de Senecio filaginoides var. filaginoides, esta estructura fue establecida sobre la base del análisis espectral y comparación con datos bibliográficos. La actividad antimicrobiana fue demostrada contra Candida spp pero no contra las bacterias (S.aureus, E.coli y P. aeruginosa). Además el compuesto mostró actividad antifúngica y efectos sobre el crecimiento micelial del hongo fitopatógeno Botrytis cinerea.

Actividad antifúngica in vitro y concentración mínima inhibitoria mediante microdilución de ocho plantas medicinales / In vitro antifungal activity and minimum inhibitory concentration by microdilution of eight medicinal plants

Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los extractos metanólicos, etanólicos e hidroalcohólicos de Hypericum laricifolium (partes aéreas), Ilex guayusa Loes (hojas), Juglans neotropica Diels (corteza), Piper lineatum (hojas), Piper spp. (hojas), Psidium guajava (hojas), Cassia reticulata Wild (planta entera) y Terminalia catappa (hojas); recolectadas en los departamentos de Amazonas y Cajamarca. La actividad antifúngica se evaluó mediante el método de difusión en agar frente a Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404 y Microsporum canis cepa clínica y la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) por el método de microdilución colorimétrico, utilizando como controles ketoconazol y fluconazol. Todos los extractos presentaron actividad antifúngica importante frente a C. albicans y M. canis, y ninguno tuvo actividad frente a A. niger. Las condiciones de laboratorio para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de C. albicans mediante el método de microdilución colorimétrico fueron: temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 24 h, inóculo final 0,5-2,5 x 103 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo; y, para M. canis fueron temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 4 días, inóculo final de 1,2 ­ 6 x 104 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo. Mediante microdilución se determinó que 19 (79%), 18 (75%) y 24 (100 %) de los extractos investigados presentaron CMIs ≤ 1000 µg/mL, frente a Candida albicans ATCC 10231, Candida albicans cepa clínica y Microsporum canis, respectivamente. Los extractos con la mayor actividad antifúngica fueron los de Juglans neotropica Diels, Psidium guajava y Terminalia catappa; con CMIs < 100 µg/mL. El método de microdilución colorimétrico usando resazurina demostró ser útil para el screening antifúngico de extractos de plantas.

Actividad antifúngica del extracto de etanol schinus molle y el fluconazol sobre candida albicans / Antifungal activity schinus molle ethanol extract and fluconazole against candida albicans

Objetivo. Determinar la actividad antifúngica del extracto de etanol Schinus molle y fluconazol sobre Candida albicans. Material y métodos. El estudio es experimental y transversal. La planta se recolectó en el departamento de Huancavelica provincia de Junín, se utilizó las hojas para preparar el extracto etanolico de Schinus molle. Los discos de extracto de etanol Schinus molle se obtuvieron en la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. El fluconazol tuvo actividad antifungica se obtuvo del laboratorio de análisis microbiológico. 30 placas petri fueron divididas en 2 grupos, 30 de muestras de extracto etanolico de Schinus molle y 30 muestras de fluconazol, se aplicó en el disco el extracto etanolico de Schinus molle y otro disco se utilizó para elfluconazol y se colocaron en el agar dextrosa sabouraud que se esterilizó, en frio y se mantuvo a 45 grados centígrados. Se procedió a medir el halo inhibitorio con el instrumento pie de rey en un tiempo de 24 horas para el fluconazol y el extracto de etanol schinus molle. Resultados. El extracto de Schinus molle mostró actividad antifúngica con 25λg/ml, con un halo de inhibición mayor e igual 20mm, y el fluconazol con 25 λg/ml con un halo de inhibición de mayor e igual 31mm. (p=0.0001). Conclusiones. El extracto etanólico de Schinus molle utilizando las hojas de la planta con 25 λg/ml presentó un halo de inhibición de mayor e igual 20 mm mostrando así actividad antifúngica frente a cepas clínicas de candida albicans ATCC 10231.

Objective. To determine the antifungal activity of ethanol extract of Schinus molle and fluconazole on Candida albicans. Materials and methods. It was an experimental and cross study. The plant was collected in the department of Huancavelica; Junín Province. The ethanol extract of Schinus molle was prepared using the leaves. Discs of Schinus molle ethanol extract had an antifugal activity of 25ug/mL. It was obtained at the Faculty of Pharmacy and Biochemistry, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Flucanozole had an antifungal activity of 25λg/mL and this was obtained from the microbiogical laboratory. Followed by 30 petri plaques divided into 2 groups, 30 samples of ethanol extract of Schinus molle and 30 samples of fluconazole. It was applied on a disk theethanol extract of Schinus molle and on another disc the fluconazole and they were placed on the agar of Sabouraud dextrose which was sterilized, cold and kept at 45 gradesC. The inhibitory halo was measured with the calipertoolin on a time of 24 hours to fluconazole and ethanol extract of Schinus molle. Results. The extract of Schinus molle showed antifungal activity with 25 ug/ml, with an inhibition halo of more equal 20mm, and the flucanozole with 25λg/ml, with an inhibition halo of more equal 31mm. p=0.0001. Conclusions. The ethanol extract of Schinus molle using the leaves of the plant with a concentration of 10mg/ml presented an inhibitionzone of more equal 20mm thus showing activity against clinical isolates of Candida albicans ATCC10231.

Actividad antifúngica del aceite esencial de Eugenia caryophyllata sobre cepas de Candida tropicalis de aislados clínicos / Antifungal activity of the essential oil of Eugenia caryophyllata on Candida tropicalis strains from clinical isolates

Candidiasis is an opportunistic fungal infection caused by Candida yeasts. In Brazil, C. tropicalis is the second most frequently isolated microorganism after C. albicans. The arising of strains resistant to conventional antifungal agents has increased the search for new alternatives from natural products, especially essential oils. This research investigated essential oil activity against strains of C. tropicalis by disk diffusion method. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) were also determinate. In the disk diffusion, the essential oils of Cinnamomum zeylanicum, Eugenia caryophyllata and Origanum vulgare had the highest inhibition zones values. MIC and MFC values of E. caryophyllata essential oil were 512 and 1024 ug/mL, respectively. MIC and MFC amphotericin B values were identical (2 ug/mL). Therefore, it was concluded that E. caryophyllata essential oil has strong antifungal activity and may be subject to further studies.

La candidiasis es una infección fúngica oportunista causada por levaduras del género Candida. En Brasil, la especie C. tropicalis esta siendo aislada frecuentemente, es el segundo microorganismo más aislado después de C. albicans. La aparición de cepas resistentes a los antifúngicos convencionales ha aumentado la búsqueda de nuevas alternativas provenientes de productos naturales, especialmente los aceites esenciales. En este estudio se investigó la actividad de los aceites esenciales contra las cepas de C. tropicalis, utilizando el método de difusión en disco, la concentración inhibitoria mínima (CIM) y la concentración fungicida mínima (CFM). En el método de difusión en disco, con los aceites esenciales de Cinnamomum zeylanicum, Eugenia caryophyllata y Origanum vulgare se obtuvieron mayores valores de inhibición. La CIM y CFM del aceite esencial de Eugenia caryophyllata fueron 512 y 1024 ug/mL, mientras que los de la anfotericina B fueron idénticos, 2 ug/mL. Por lo tanto, se puede concluir que el aceite esencial de E. caryophyllata tiene potente actividad antifúngica y puede ser objeto de nuevos estudios sobre esta actividad.

Efectos antimicrobianos de extractos de plantas chilenas de las familias Lauraceae y Atherospermataceae / Antimicrobial effects of extracts from Chilean plants of Lauraceae and Atherospermataceae families

Introducción: las familias Lauraceae y Atherospermataceae son fuentes importantes de aceites esenciales, en los que se ha observado actividad frente a microorganismos. Este estudio se realizó en las especies chilenas: Cryptocarya alba Looser (Peumo), Persea lingue (Ruiz & Pav.) Nees (Lingue) de la familia Lauraceae y Laurelia sempervirens (Ruiz & Pav.) Tul. (laurel chileno) de la familia Atherospermataceae. De estas solo se conocen antecedentes morfológicos y usos populares, sin presentar estudios acabados sobre la composición química ni la actividad biológica. Objetivo: evaluar la actividad de sus aceites esenciales frente a microorganismos y aportar antecedentes de su composición química. Métodos: las muestras se recolectaron en la región del Bío-Bío. Se obtuvieron aceites esenciales por hidrodestilación. La caracterización química se realizó por CG-MS. La actividad antimicrobiana se evaluó a través de ensayos antifúngicos por el método de dilución en agar y difusión de vapor frente a Penicillium sp. y Fusarium oxysporum; los ensayos antibacterianos a través del método del pocillo y papel frente a Escherichia coli, Bacillus subtillis, Pseudomonas aeruginosa y Staphyloccoccus aureus. Resultados: estos indican que los aceites esenciales de las 3 especies poseen un efecto selectivo frente a hongos y bacterias, lo cual sugiere que su naturaleza química diferente tendría un papel en el mecanismo de acción. Conclusiones: se sugiere la continuación de estudios concentrando esfuerzos en el desarrollo de productos para el control de microorganismos que provocan pérdidas económicas y en la salud humana.

Introduction: the antimicrobial activity has been reported for the essential oils of some species in the families Lauraceae and Atherospermataceae. The present study was conducted with three Chilean species: Cryptocarya alba Looser (Peumo) and Persea lingue (Ruiz & Pav.) Nees (Lingue) from the family Lauraceae, and Laurelia sempervirens (Ruiz & Pav.) Tul. (Chilean laurel) from the family Atherospermataceae. The morphological aspects and the popular uses of these species are the only known aspects. Thorough studies of their chemical composition and biological activity are lacking. Objective: to evaluate the activity of the essential oils against microorganisms and to provide information on the chemical composition of these species. Methods: samples were collected in the Bío-Bío Region and essential oils were obtained by steam distillation. Chemical characterization was done using GC-MS. Antimicrobial activity was evaluated against Penicillium sp. and Fusarium oxysporum through antifungal agar dilution and vapor diffusion assays. Antibacterial tests against Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus aureus, were carried out using agar disk and well diffusion assays. Results: the results for the essential oils from the three species indicated selective activity against fungi and bacteria, suggesting that the different chemical features of these oils may play a role in their mechanisms of action. Conclusions: further studies focusing efforts on developing products to control microorganisms that cause economic losses and affect human health.

Síntesis y evaluación in vitro de la actividad antifúngica de oximas, éteres de oxima e isoxazoles / Síntese e avaliação in vitro da atividade antifúngica de oximas, éteres de oxima e isoxazóis / Synthesis and in vitro assessment of antifungal activity of oximes, oxime ethers and isoxazoles

Objetivo. Sintetizar y realizar la evaluación preliminar de la actividad antifúngica in vitro de oximas, éteres de oxima e isoxazoles. Materiales y métodos. Las oximas se sintetizaron a partir de aldehídos o cetonas con NH2OH.HCl y K2CO3. Los éteres de oxima se obtuvieron mediante alquilación de oximas con bromuro de propargilo o bromuro de 2-bromobencilo, empleando como base NaOH y acetona como solvente. Los isoxazoles se obtuvieron mediante cicloadiciones 1,3-dipolares empleando nitrato cérico amónico (NAC), cloramina-T (CAT) y NaOCl. Los productos fueron identificados y/o caracterizados por resonancia magnética nuclear (RMN) y espectrometría de masas (EM). Se realizaron pruebas de inhibición de crecimiento radial sobre Aspergillus niger y Fusarium roseum. Resultados. Se obtuvieron cinco oximas, siete éteres de oxima, cuatro de ellos nuevos y cuatro nuevos isoxazoles. Las sustancias evaluadas presentaron actividad antifúngica a cantidades de 1,5 mg y 3,0 mg. Conclusiones. Aunque las cicloadiciones 1,3-dipolares permitieron obtener los isoxazoles esperados, se observó que ésta metodología generó una amplia variedad de subproductos lo que disminuyó los rendimientos e hizo difícil la purificación del producto de interés. Cuatro de las sustancias evaluadas presentaron porcentajes de inhibición superiores al 80%...

Synthesis and in vitro assessment of antifungal activity of oximes, oxime ethers and isoxazoles. Objective. To synthesize and carry out a preliminary evaluation of the in vitro antifungal activity of oximes, oxime ethers and isoxazoles. Materials and methods. Oximes were synthesized from aldehydes or ketones with NH2OH.HCl and K2CO3. Oxime ethers were prepared by alkylation of oximes with propargyl bromide or 2-bromobenzyl bromide, using NaOH as base and acetone as solvent. The isoxazoles were obtained by 1,3-dipolar cycloadditions using ceric ammonium nitrate (CAN), chloramine T (CAT) and NaOCl. Products were identified or characterized using nuclear magnetic resonance (NMR) and mass spectrometry (MS). Radial growth inhibition assays against Aspergillus niger and Fusarium roseum were carried out. Results. Five oximes, seven oxime ethers, four of them new, and four new isoxazoles were obtained. The assessed substances exhibited antifungal activity in amounts of 1,5 mg and 3,0 mg. Conclusions. Although 1,3-dipolar cycloadditions allowed to obtain the desired isoxazoles, this methodology produced a wide variety of side products that reduced yields and made difficult the purification of the target products. Four of the tested compounds showed inhibition percentages greater than 80%...

Síntese e avaliação “in vitro” da atividade antifúngica de oximas, éteres de oxima e isoxazóis. Objetivo. Sintetizar e realizar a avaliação preliminar da atividade antifúngica in vitro de oximas, éteres de oxima e isoxazóis. Materiais e métodos. As oximas foram sintetizadas a partir de aldeídos ou cetonas com NH2OH.HCl e K2CO3. Os éteres de oxima foram obtidos pela alquilação de oximas com brometo de propargilo ou brometo de 2-bromobenzilo, utilizando NaOH como base e acetona como solvente. Os isoxazóis foram obtidos por cicloadição 1,3-dipolar usando nitrato cérico de amônio (NCA), cloramina-T (CAT) e NaOCl. Os produtos foram identificados e / ou caracterizados por ressonância magnética nuclear (RMN) e espectrometria de massas (EM). Foram realizados testes de inibição sobre o crescimento radial de Aspergillus niger e Fusarium roseum. Resultados. Foram obtidas cinco oximas, sete éteres de oxima, quatro deles novos e quatro novos isoxazóis. As substâncias testadas apresentaram atividade antifúngica em quantidades de 1,5 mg e 3,0 mg. Conclusões. Embora as cicloadições 1,3-dipolares permitiram obter os isoxazóis esperados, observou-se que esta metodologia resultou numa grande variedade de subprodutos que reduziram os rendimentos e tornaram difícil a purificação do produto de interesse. Quatro das substâncias testadas apresentaram porcentagens de inibição acima de 80%...

Anti-Candida albicans activity, cytotoxicity and interaction with antifungal drugs of essential oils and extracts from aromatic and medicinal plants / Actividad contra Candida albicans, citotoxicidad e interacción con antifúngicos de aceites esenciales y extractos de plantas medicinales y aromáticas

Objective: To determine anti-Candida albicans activity, cytotoxicity and drug interaction of essential oils and extracts from plants collected in Colombia. Materials and methods: The antifungal activity was evaluated following the AFST-EUCAST protocol. With most active samples, the inhibition of the formation of germ tubes and budding, the in vitro pharmacodynamics, using time-kill assays, and the interaction with itraconazole and amphotericin B following the chequerboard technique were evaluated. The cytotoxicity assay for all samples was done using MTT. Results: Strong activity in 17.57% of the samples was found. The lowest MIC values were obtained with Piper bredemeyeri Jacq and Lippia origanoides Kunth (B) oils and Morinda royoc L extract. The three samples inhibited the formation of germ tubes and budding. P. bredemeyeri Jacq oil and M. royoc L extract samples showed fungicidal activity at 2xMIC. A synergistic effect was obtained with the combination of P. bredemeyeri Jacq oil and itraconazole, but not for the combination with amphotericin B. Active samples against C. albicans were not cytotoxic on Vero cells ATCC CCL-81, excluding P. bredemeyeri Jacq oil. Conclusions: The results of this study suggest that Colombian medicinal and aromatic plants represent an untapped source of compounds with anti-C. albicans activity that could be a resource in the development of new therapeutic natural products.

Objetivo. Determinar la actividad anti-Candida albicans, la citotoxicidad y la interacción con antifúngicos de aceites y extractos de plantas recolectadas en Colombia. Materiales y métodos. La actividad antifúngica fue evaluada siguiendo el protocolo Antifungal Susceptibility Testing Subcommittee of the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (AFST-EUCAST). Con las muestras más activas se evaluó la inhibición de la formación de tubo germinal y la gemación, la farmacodinamia mediante curvas de tiempo muerte y la interacción con itraconazol y anfotericina B. Se determinó la citotoxicidad mediante la técnica MTT. Resultados. Se encontró actividad en 17,57 % de las muestras. La mayor actividad se obtuvo con los aceites de Piper bredemeyeri Jacq y Lippia origanoides Kunth (B) y el extracto de Morinda royoc L. Las tres muestras inhibieron la formación de tubo germinal y la gemación. El aceite de P. bredemeyeri Jacq y el extracto de M. royoc L mostraron actividad fungicida con dos veces la concentración inhibitoria mínima. Se encontró un efecto sinérgico por la combinación del aceite de P. bredemeyeri Jacq e itraconazol, pero no con anfotericina B. Las muestras activas no fueron citotóxicas, excepto el aceite de P. bredemeyeri Jacq. Conclusión. Los resultados de este estudio sugieren que las plantas de Colombia son una fuente no explorada de compuestos con actividad anti-C. albicans, útiles para el desarrollo de nuevos productos terapéuticos.