Comprehensive Analysis of CLCA1 Expression, Immune Infiltration and Immune Checkpoints in Colon Adenocarcinoma / Análisis Completo de la Expresión de CLCA1, Infiltración Inmune y Puntos de Control Inmunológico en Colonadenocarcinoma

SUMMARY: Colon adenocarcinoma (COAD) is a prevalent disease worldwide, known for its high mortality and morbidity rates. Despite this, the extent of investigation concerning the correlation between COAD's CLCA1 expression and immune cell infiltration remains insufficient. This study seeks to examine the expression and prognosis of CLCA1 in COAD, along with its relationship to the tumor immune microenvironment. These findings will offer valuable insights for clinical practitioners and contribute to the existing knowledge in the field. In order to evaluate the prognostic significance of CLCA1 in individuals diagnosed with colorectal cancers, we conducted a comprehensive analysis using univariate and multivariate Cox regression models along with receiver operating characteristic curve (ROC) analysis. This study was performed on the patient data of COAD obtained from The Cancer Genome Atlas (TCGA) database. Nomograms were developed to anticipate CLCA1 prognostic influence. Furthermore, the CLCA1 association with tumor immune infiltration, immune checkpoints, immune checkpoint blockade (ICB) response, interaction network, and functional analysis of CLCA1-related genes was analyzed. We found that Colon adenocarcinoma tissues significantly had decreased CLCA1 expression compared to healthy tissues. Furthermore, the study revealed that the group with high expression of CLCA1 demonstrated a significantly higher overall survival rate (OS) as compared to the group with low expression. Multivariate and Univariate Cox regression analysis revealed the potential of CLCA1 as a standalone risk factor for COAD. These results were confirmed using nomograms and ROC curves. In addition, protein-protein interaction (PPI) network analysis and functional gene enrichment showed that CLCA1 may be associated with functional activities such as pancreatic secretion, estrogen signaling and cAMP signaling, as well as with specific immune cell infiltration. Therefor, as a new independent predictor and potential biomarker of COAD, CLCA1 plays a crucial role in the advancement of colon cancer.

El adenocarcinoma de colon (COAD) es una enfermedad prevalente a nivel mundial, conocida por sus altas tasas de mortalidad y morbilidad. Sin embargo, el alcance de la investigación sobre la correlación entre la expresión de CLCA1 de COAD y la infiltración de células inmunes sigue siendo insuficiente. Este estudio busca examinar la expresión y el pronóstico de CLCA1 en COAD, junto con su relación con el microambiente inmunológico del tumor. Estos hallazgos ofrecerán conocimientos valiosos para los profesionales clínicos y contribuirán al conocimiento existente en el campo. Para evaluar la importancia de pronóstico de CLCA1 en personas diagnosticadas con cáncer colorrectal, realizamos un análisis exhaustivo utilizando modelos de regresión de Cox univariados y multivariados junto con un análisis de la curva característica operativa del receptor (ROC). Este estudio se realizó con los datos de pacientes de COAD obtenidos de la base de datos The Cancer Genome Atlas (TCGA). Se desarrollaron nomogramas para anticipar la influencia pronóstica de CLCA1. Además, se analizó la asociación de CLCA1 con la infiltración inmunitaria tumoral, los puntos de control inmunitarios, la respuesta de bloqueo de los puntos de control inmunitarios (ICB), la red de interacción y el análisis funcional de genes relacionados con CLCA1. Descubrimos que los tejidos de adenocarcinoma de colon tenían una expresión significativamente menor de CLCA1 en comparación con los tejidos sanos. Además, el estudio reveló que el grupo con alta expresión de CLCA1 demostró una tasa de supervivencia general (SG) significativamente mayor en comparación con el grupo con baja expresión. El análisis de regresión de Cox multivariado y univariado reveló el potencial de CLCA1 como factor de riesgo independiente de COAD. Estos resultados se confirmaron mediante nomogramas y curvas ROC. Además, el análisis de la red de interacción proteína- proteína (PPI) y el enriquecimiento de genes funcionales mostraron que CLCA1 puede estar asociado con actividades funcionales como la secreción pancreática, la señalización de estrógenos y la señalización de AMPc, así como con la infiltración de células inmunes específicas. Por lo tanto, como nuevo predictor independiente y biomarcador potencial de COAD, CLCA1 desempeña un papel crucial en el avance del cáncer de colon.

Rastreamento, diagnóstico e estadiamento do adenocarcinoma de cólon / Screening, diagnosis and staging of the colon adenocarcinoma

Introdução: O Câncer de Cólon (CC) é uma doença extremamente prevalente e letal quando não diagnosticada em tempo hábil para tratamento, o que justifica a necessidade de programas de rastreio na população. Métodos: Foram selecionados dezessete artigos das bases de dados Pubmed, Medline, Lilacs e Embase para compor uma revisão de literatura. Resultados: O objetivo do rastreamento do CC é detectar lesões precursoras (pólipos adenomatosos) ou câncer em estágio inicial, enquanto ainda são passíveis de tratamento. Pode-se utilizar diversos métodos para realizar este rastreamento, sendo a colonoscopia o exame padrão-ouro devido a capacidade de estabelecer diagnóstico histopatológico da doença e fornecer oportunidade de tratamento no mesmo procedimento em casos de lesão precursoras. O estadiamento é clínico e envolve exame físico, radiografia torácica e tomografia computadorizada (TC) de abdome e pelve. Conclusão: O CC é uma das neoplasias mais frequentes em adultos no mundo inteiro e é possivelmente curável se diagnosticado precocemente. O método padrão-ouro para rastreamento e diagnóstico é a colonoscopia, uma vez que ela permite biópsia para análise histopatológica na presença de lesão. O estadiamento deve ser feito para avaliar a extensão local e sistêmica da doença por meio do exame físico e exames complementares.

Introduction: The colorectal cancer (CC) is an extremely common disease that is lethal if not diagnosed in early stages, which justifies the need for screening in the general population. Methods: Seventeen publications from Pubmed, Medline, Embase and Lilacs databases were selected to compose a literature review. Results: The goal of screening for CC is to detect precursor lesions (polyps) or early stage cancer. There is a variety of methods available in order to perform this screening, being colonoscopy the gold standard due to the possibility of establishing both histopathological diagnosis of the disease and offering treatment in case of precursor lesions. The staging is clinical and includes physical examination, chest imaging and abdominal and pelvic CT scans. Conclusion: The CC is one of the most common cancers in adults and possibly treatable if early diagnosed. The gold standard method for screening is colonoscopy, since it allows biopsy for histopathological analysis. The staging needs to be done to assess the local and systemic extent of the disease through physical examination and complementary tests.

Estudo epidemiológico de pacientes portadores de câncer colorretal atendidos no serviço de oncologia do Hospital Universitário Evangélico de Curitiba / Epidemiological study of patients with colorectal cancer attended on oncology service of Evangelical University Hospital of Curitiba

O câncer colorretal (CCR) é a quarta causa de morte por neoplasias malignas no Brasil e a segunda mais frequente no mundo. O rastreamento precoce e mudanças nos hábitos de vida são fatores determinantes para a diminuição da mortalidade. Objetivo: identificar o perfil epidemiológico dos pacientes atendidos no serviço de oncologia do Hospital Universitário Evangélico de Curitiba. Métodos: estudo retrospectivo com análise de 139 prontuários entre 2013 a 2016 de pacientes diagnosticados com carcinoma colorretal, transcrição e exposição dos dados através de tabelas e gráficos. Resultados: maior incidência de CCR no gênero masculino e nas faixas etárias entre 61 a 80 anos. O tempo de diagnóstico foi comumente inferior a três meses. O exame de rastreamento mais utilizado foi a colonoscopia. Conclusão: a prática de prevenção ao CCR não é amplamente adotada pelos pacientes, o rastreamento só é empregado em fase de sintomatologia evidente

Colorectal cancer (CRC) is the fourth cause of death due to malignant neoplasm in Brazil and the second more common in the world. The early tracking and changes in lifestyle are determinant factors for mortality reduction. Objective: identify the epidemiological profile of patients attended at the oncology service of Evangelical University Hospital of Curitiba. Methods: retrospective study with analysis of 139 medical records between 2013 and 2016 of patients with colorectal cancer diagnosis, transcription and display of data through tables and graphs. Results: higher incidence of CRC in men and in the age groups between 61 and 80 years. The diagnosis time was usually less than three months. The most commonly used screening test was colonoscopy. Conclusion: the practice of CRC prevention is not widely adopted by patients, the tracing is only used in an evident symptomatology phase

Sigmoidoanal intussusception with exteriorization of sigmoid adenocarcinoma

The intestinal intussusception is a rare disease in adults, and is mostly caused by malignant neoplasm. Symptoms are usually nonspecific and chronic, and in most cases suggesting intestinal obstruction. Treatment consists of removing the malignant tumor. This article reports the case of a patient with hematochezia and apparent mass in the anus who underwent anterior rectosigmoidectomy and had the diagnosis of adenocarcinoma of the sigmoid confirmed. (AU)

A intussuscepção intestinal é uma doença rara em adultos, sendo na maior parte dos casos causada por neoplasia maligna. Os sintomas são geralmente inespecíficos e crônicos, na maioria das vezes sugerindo obstrução intestinal. O tratamento consiste na remoção oncológica do tumor. Este artigo relata o caso de uma paciente com quadro de hematoquezia e exteriorização de massa através do ânus que foi submetido à retossigmoidectomia anterior alta em bloco e confirmado o diagnóstico de adenocarcinoma de sigmoide. (AU)

Cáncer de colon: una causa infrecuente de fiebre de origen desconocido / Colon cancer: a rare cause of fever of unknown origin

El cáncer de colon se presenta raramente como fiebre de origen desconocido sin otra sintomatología orientadora. Este artículo reporta un enfermo con fiebre diaria de 38-39 ºC, durante 4 meses y medio a quien se le diagnosticó un adenocarcinoma moderadamente diferenciado de colon ascendente, se le practicó hemicolectomía laparoscópica y se observó resolución del cuadro febril en 48 h.

Colon cancer rarely appears as a fever of unknown origin without another orienting symptomatology. This article reports a patient with daily fever between 38 ºC and 39 ºC for 4 and a half months. The patient was diagnosed a moderately differentiated adenocarcinoma of ascending colon. Laparoscopic hemicolectomy was performed and resolution of the febrile picture was observed in 48 hours.

Estudo da expressão citofotométrica do marcador tumoral Caspase-3 no adenocarcinoma de cólon / Citophotometric expression study of tumoral marker Caspase-3 on colon adenocarcinoma

RACIONAL: O adenocarcinoma de cólon é a segunda causa mais comum de morte por câncer em homens e mulheres, sendo responsável por mais de cinco milhões de mortes por ano. No momento do diagnóstico apenas 70% dos tumores são ressecáveis, 75% são curáveis e 25% poderão ter recorrência da doença. A apoptose é uma das responsáveis pelo equilíbrio homeostático entre as células. Durante o desenvolvimento do processo de degeneração maligna celular o desequilíbrio na apoptose é considerado um dos principais marcos neoplásicos. A caspase-3 é uma das mais importantes moléculas na apoptose, sendo sua efetora principal. Sua expressão e prognóstico têm sido relatados em vários estudos e revisões com seu papel valorizado desde o surgimento do pólipo até a sua transformação maligna, com a taxa de apoptose diminuindo progressivamente. OBJETIVOS: Avaliar a expressão citofotométrica computadorizada do marcador Caspase-3 no adenocarcinoma de cólon; avaliá-lo nas fases evolutivas na classificação modificada de Dukes e comparar sua expressão nos tumores do lado direito e esquerdo do cólon. MÉTODOS: Utilizaram-se 19 casos de câncer recuperados de blocos de parafina confirmados por hematoxilina-eosina e submetidos à técnica imunoistoquímica da estreptavidina-biotina com anticorpo policlonal anti-caspase-3. Após este processo as lâminas marcadas foram submetidas à leitura pelo sistema SAMBA com o software IMUNNO 4.00. Foram analisados três índices: marcagem (Label index), heterogeneidade e densidade óptica. Utilizaram-se a marcagem individual, avaliação da expressão do marcador e grupos definidos de tumores com classificação Dukes e pelo lado do tumor. RESULTADOS: A média do índice de marcagem da caspase-3 foi de 85,24 e da densidade óptica de 39,55. Na classificação Dukes de 12 tipos B tiveram índice de marcagem de 86,20 e a densidade óptica de 37,72 e para os 7 tipos C a área de marcagem foi de 85,66 e a densidade óptica foi de 42,71 não sendo possível identificar diferença em relação a classificação de Dukes. Quanto ao lado do tumor os 11 tumores à esquerda tiveram índice de marcagem de 86,65 e densidade óptica de 43,29 e os 8 à direita tíndice de marcagem de 83,29 e densidade óptica de 39,44 não sendo possível observar diferença estatística significante. CONCLUSÕES: A caspase-3 possui alta expressão individual revelando-se marcador de boa utilidade no estudo do adenocarcinoma de cólon e da fase pró-apoptóica da sua tumorigênese pelo seu alto grau de índice de marcagem e densidade óptica. Em relação à classificação Dukes não houve diferença entre os tipos B e C, como também em relação ao lado direito e esquerdo do cólon.

BACKGROUND: Colon adenocarcinoma is the second cause of cancer death in men and women, responsible for more than five million deaths each year. At the diagnosis, only 70% of tumors are resectable, 75% curative and 25% might have disease recurrence. Apoptosis is responsible for homeostatic equilibrium among cells. During the development of the cellular malignant degeneration, an abnormal apoptosis plays an important role in the neoplasm transformation. Caspase-3 is one of the most important molecules in apoptosis, considered as the principal executioner. Caspase-3 expression and its prognosis have been mentioned in a variety of study and revision as its role being emphasized since the onset of polyp formation until the malignant transformation, as apoptosis declines progressively. AIM: To evaluate the computerized image cytophotometric expression of Caspase-3 in colon adenocarcinoma; to evaluate in the respective phases of Dukes-modified Classification and to compare its expression on right-sided and left-sided colon tumors. METHODS: Nineteen recovery of sampled-tissue in paraffin blocks confirmed by hematoxylin-eosin and submitted to immunohistochemistry estreptavidin-biotin method using antibody polyclonal anti-caspase-3. Following this process, marked slides were submitted SAMBA reading using software IMUNNO 4.00. Three indexes were analyzed: label index, heterogeneity and optical density. Individual labeling, marker expression evaluation and predefined tumors groups under Dukes Classification and side of tumor occurrence were considered. RESULTS: The average labeling index for caspase-3 was 85,24, where as for optical density was 39,55 pixels. According to Dukes Classification, 12 type B presented labeling index of 86,20 and optical density of 37,72 and for 7 samples type C labeling index corresponded to 85,66 and optical density equals to 42,71, unable to identify the difference regarding to Dukes Classification. Regarding to the side of tumor occurrence, 11 left-sided tumors had labeling index of 86,65 and optical density of 43,29 and the 8 right-sided tumors had labeling index of 83,29 and optical density of 39,44, unable to observe significant statistical difference. CONCLUSION: Caspase-3 presents a distinct value expression, revealing as useful marker in colon adenocarcinoma study and its proapoptotic phase at the tumorigenesis due to its high labeling index and optical density. Regarding to Dukes Classification there was no difference between types B and C, as well as right and left sided-related colon tumor occurrence.

Reseccionea hepáticas en el servicio de cirugía general del Hospital Privado: 13 años de experiencia resecciones hepátidas / Liver resection in hospital privado's general surgery department: 13- year experience liver resections

Las resecciones hepáticas constituyen el tratamiento de elección en las neoplasias hepáticas primárias y en algunos casos de tumores metastáticos, pero conllevan tasas significativas de morbilidad y mortalidad. Objetivo: Presentar nuestra experiencia en cirurgías hepáticas. Material y método: Se incluyeron 40 paciente sometidos a hepatectomías en nuestra Institución desde diciembre de 1991 a diciembre de 2004. Los datos fueron recolectados en forma retrospectiva y analizados mediante método estadístico descriptivo. Resultados: Los diagnósticos incluyeron enfermedades hepáticas primarias benignas (n=9, 22.5%) y malígnas (n=7, 17.5%) y enfermedades hepáticas metastásicas (n=24, 60%). Dentro de las metástasis, la más frecuente fue el adenocarcinoma de colon (n=7, 17.42%). El índice de complicaciones quirúrgicas inmediatas fue del 55% (n=22). Hubo 4 muertees peri-operatorias (10%) y la tasa promedio de estadía hospitalaria fue de 10,8 días. Conclusiones: Nuestros hallazgos demostraron que la indicación más frecuentes de resección hepática en nuestra experiencia es las metástasis de adenocarcinoma de colon y que los resultados observado en nuestra serie son comparables a los obtenidos por otras Instituciones a nivel mundial con similar flujo de pacientes.

Liver resection constitutes the treatment of choice in the liver primary neoplasms and some cases of metastatic tumors, but entail significant morbidity and mortality rates. OBJECTIVE: To present our experience in hepatic surgery. MATERIAL AND METHODS: We included 40 patients who underwent hepatectomies in our Institution from December 1991 through December 2004. The information was collected retrospectively and was analized descriptive and statistically. RESULTS: 40 patients underwent 40 hepatectomies. The diagnosis included primary benign hepatic disease (n= 9, 22.5%), primary hepatic malignancy (n= 7, 17.5%) and metastatic hepatic disease (n= 24, 60%). In the metastatic group, the most frecuent pathology was colonic adenocarcinoma (n= 17, 42%). There were 4 perioperatory deaths (10%) and the average hospitaly stay was 10.8 days. CONCLUSIONS: our data shows that the most frequent indication of hepatic resection in our experience was metastatic colonic adenocarcinoma as compared to the other Institutions with similar experience.

Modulação do processo de adesão célula-célula por prostaglandina E2 em células de adenocarcinoma de cólon humano

A enzima ciclooxigenase-2 juntamente com a prostaglandina E2 (PGE2), tem sido descrito como potentes indutores da proliferação, migração e invasividade celular em câncer colo-retal. Neste trabalho nós investigamos os efeitos do tratamento da PGE2 no complexo juncional (CJ) de células epiteliais derivadas de adenocarcinoma de c610n humano, Caco-2. As células foram tratadas com PGE2 (1 μM) e os efeitos no complexo juncional faram monitorados em diferentes tempos de tratamento. Alterações nas proteínas de junção tight e aderente foram observadas pela medida da resistência elétrica transepitelial (TER), por imunofluorescência e immunoblotting e microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Nossos resultados mostraram que células tratadas por 15 minutos com com PGE2 (1 μM) apresentaram uma diminuição de aproximadamente 40% na TER. Quando a monocamada de células foi analisada por TEM, foi possível observar grandes espaços na região das junções aderentes nas células tratadas durante 15, 30 e 60 minutos quando comparada a células não tratadas, que apresentaram um CJ bem definido. As junções tight apareceram aparentemente preservadas durante os tempos de tratamento utilizados com PGE2. No entanto, usando a técnica do vermelho de rutênio, mostramos que as junções tight não estavam funcionais como verificado pela passagem dessas partículas através do espaço intercelular. Alterações no perfil de distribuição das proteínas do complexo juncional foram observadas para E-caderina,, β-catenina, ocludina, ZO-1 e claudinas -1 e -4, principal mente nos primeiros minutos de tratamento. O presente estudo mostra que a PGE2 causa alterações no complexo juncional, provocando alterações da permeabilidade paracelular a íons e moléculas, rompimento do contato célula-célula e redistribuição das principais proteínas das junções tight e aderentes em células Caco-2

Cyclooxygenase and its derived, prostaglandin E2 (PGE2), have been shown to stimulate the growth of cancer cells and promote migration and invasiveness in colorectal carcinoma cells. Here, we have investigated the effects of PGE2 treatment on the junctional complex (JC) in an epithelial cell line derived from human colon adenocarcinoma, Caco-2. Cells were treated with PGE2 (1μM) and the effects on the junctional complex were monitored at different times. Alterations of tight and adherens junction components were observed by measuring the transepithelial electrical resistance (TER), by immunofluorescence and immunoblotting and electron microscopy analyses (TEM). Our results showed that cells treated for 15 minutes with PGE2 (1μM) presented a decrease of the TER in about 40%. When cell monolayers were analyzed by TEM, it was possible to observe wide spaces at the adherens junction region in cells treated for 15, 30 and 60 minutes compared to non-treated cells, which present well defined JC. In addition, we found that the tight junctions were apparently preserved after all times of treatment with PGE2. However, using the ruthenium red technique, we showed that the tight junctions are not functional, as verified by the junction's permeability to the markes. Alterations in the pattern of junctional proteins distribution were observed for E-cadherin, β-catenin, occludin, ZO-1 and claudin-1, -4, mainly after the first minutes of treatment. Our results shown that PGE2 caused alterations of the junctional complex, leading to disturbance of the paracellular permeability to ions, disruption of cell-cell contact, redistribution of the main proteins of tight and adherens junctions in Caco-2 cells