Effects of atracurium besylate on corneal endothelium of chickens: in vitro study / Avaliação dos efeitos do besilato de atracúrio no endotélio corneano de galinhas: estudo in vitro

The aim of this study was to investigate the acute effects of atracurium besylate on cellular damage in corneal endothelium of chickens. Twenty healthy chicken eyes were assigned to the following groups: Group 1 (G1), experimental group (n=10); and Group 2 (G2), control (n=10). Excised corneoscleral buttons were immediately placed on glass microscopy slides with endothelial region faced up. Corneal endothelium of eyes in G1 were covered with AB (0.2mL, 10mg/mL) for 3 min and then rinsed with balanced salt solution (BSS), while the corneal endothelium of eyes in G2 were covered with BBS for 3 min. Corneas from both groups were stained with alizarin red/trypan blue and visualized by light microscopy. Ten random photographs were taken from each cornea. The area of cellular damage was measured by software in all samples and cell loss of each group was averaged and compared. Endothelial area of denudation and Descemet's membrane exposure were higher in G1 than G2. In conclusion, atracurium besylate induced an acute damage on corneal endothelium of chickens.(AU)'

Objetivou-se avaliar os efeitos agudos do besilato de atracúrio sobre o endotélio corneano de galinhas. Vinte olhos saudáveis de galinhas foram aleatoriamente separados em dois grupos com 10 olhos cada, sendo G1 o grupo controle e G2 o grupo tratamento. Imediatamente após a excisão dos botões corneoesclerais estes foram colocados em lâminas de microscopia de vidro com o lado endotelial voltado para cima. No Grupo 1, o endotélio corneano foi recoberto com 0,2ml de besilato de atracúrio (10mg/ml) durante 3 minutos e depois lavado com solução salina balanceada. No Grupo 2, o endotélio corneano foi recoberto apenas com solução salina balanceada durante 3 min. As córneas de ambos os grupos foram coradas com vermelho de alizarina e azul de tripano e visualizadas com microscópio óptico. Foram obtidas dez fotografias aleatórias de cada amostra. As imagens foram analisadas e com auxílio de um software as áreas com ausência de células endoteliais calculadas. A perda celular endotelial foi significativamente maior no grupo tratamento comparativamente ao grupo controle. Com base nos resultados apresentados foi possível concluir que o besilato de atracúrio induziu dano agudo nas células do endotélio da córnea de galinhas.(AU)

Morphology of endothelial cells from different regions of the cornea of dogs / Morfologia das células endoteliais de diferentes regiões da córnea de cães

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the morphology of endothelial cells from different areas of the cornea of dogs. Twenty healthy eyes from 10 dogs, females or males, of different ages were studied. Corneal endothelium morphology of superior, inferior, central, nasal and temporal areas was assessed by 0.2% alizarin red staining using an optic microscope. One hundred endothelial cells from each corneal area were analyzed. In all areas of the cornea studied were found endothelial cells with four sides, five sides, six sides and seven sides. There was no significant difference regarding endothelial cell morphology in all corneal regions evaluated. Thus, the morphology of the central cornea area represents the entire endothelial mosaic and may be applied to peripheral areas. Therefore, analysis of the central area is sufficient to estimate the shape of endothelial cells of peripheral areas of healthy dog corneas.

RESUMO: Objetivou-se avaliar a morfologia das células endoteliais de diferentes regiões da córnea de cães. Vinte olhos saudáveis de 10 cães, fêmeas ou machos, de diferentes idades foram estudados. A morfologia do endotélio corneano das regiões superior, inferior, central, nasal e temporal foi avaliada pela coloração vermelho de alizarina 0,2% com microscópio óptico. Foram analisadas 100 células endoteliais de cada região da córnea. Em todas as regiões da córnea estudadas foram encontradas células endoteliais com quatro lados, cinco lados, seis lados e sete lados. Não houve diferença significativa em relação à morfologia de células endoteliais da córnea em todos as regiões estudadas. Assim, a morfologia da região central da córnea representa todo o mosaico endotelial e pode ser aplicada em áreas periféricas. Portanto, a análise da área central é suficiente para estimar a forma das células endoteliais das áreas periféricas de córneas de cães saudáveis.

Morphology of endothelial cells from different regions of the equine cornea / Morfologia das células do endotélio de diferentes regiões da córnea de equinos

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the morphology of different regions of the equine cornea using optical microscopy. Both healthy eyes of eight horses, male or female, of different ages were evaluated. Corneas were stained with alizarin red vital dye and subsequently examined and photographed using optical microscopy. Corneal endothelial morphology of central, superior, inferior, temporal and nasal areas was assessed. One hundred endothelial cells from each corneal area were analyzed. The shape of the corneal endothelial cells of each corneal region was analyzed. Statistical data analysis was conducted using the Student's t test. Values of P<0.01 were considered significant. Regarding morphological analysis, no statistically significant differences were reported between the equine corneal regions analyzed. The present research suggested that there are no morphological differences between regions of the equine cornea. The values obtained in any region of the equine cornea can be extrapolated to other regions of the cornea and are representative of the cell morphology present in all regions of the cornea.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi o de avaliar a morfologia das diferentes regiões da córnea equina usando microscopia óptica. Foram avaliados ambos os olhos saudáveis ​​de oito equinos, machos ou fêmeas, de diferentes idades. As córneas foram coradas com corante vital vermelho de alizarina, examinadas com microscópio óptico e fotografadas. A morfologia endotélio corneano de áreas centrais, superior, inferior, temporal e nasal foi avaliada. Foram analisadas ​​células endoteliais da córnea de cada área. A forma das células endoteliais da córnea de cada região da córnea foi analisada. Análise estatística dos dados foi realizada por meio do teste t. Valores de P<0.01 foram considerados significativos. Em relação à análise morfológica estatisticamente significativa, não foram encontradas diferenças entre as regiões da córnea equina analisadas. O presente trabalho sugere que não houve diferença entre a morfologia das regiões da córnea de equino. Os valores obtidos em qualquer região da córnea equina podem ser extrapolados para outras regiões da córnea e são representativos da morfologia celular em todas as regiões da córnea.

Prenatal stress caused by movement restriction induces changes in the development of skull bone in CF-1 mice progeny / El estrés prenatal causado por restricción de movimiento induce cambios en la anatomía ósea de cráneo en la progenie de ratones CF-1

Prenatal stress is associated with changes in body weight and size, and with disorders of the skeletal bone development process. However, there is a lack of documentation on the impact of prenatal stress on skull bone anatomy during the gestation period. Therefore, this research focuses on the short-term effects of prenatal stress on the skull bone anatomy of CF-1 mice on the day of birth. Methodology: Gestating females were divided at random into two groups (control and stressed). The experimental group was subjected to the stress of movement restriction during the final week of gestation. Upon birth the body weight of the progeny was evaluated (control group, n=34; stressed group, n=29). They were then cleaned and stained with alizarin red in order to evaluate the length, width and suture spaces of the skull bone anatomy from superior and inferior views. Results: Gestational stress significantly altered the skull bone anatomy (p<0.05) of the offspring at birth in comparison with the control group. Conclusion: Prenatal stress alters the skull bone anatomy of the CF-1 mouse at birth.

El estrés prenatal se ha asociado con alteraciones en el peso y tamaño corporal, además de trastornos en el proceso de osificación del esqueleto en desarrollo. Sin embargo, existen escasos antecedentes acerca del impacto del estrés prenatal sobre la anatomía ósea craneal durante el periodo de gestación. Por lo tanto, la presente investigación estudió los efectos a corto plazo del estrés prenatal sobre la anatomía ósea craneal del ratón CF-1 en el día de nacimiento. Las hembras gestantes fueron divididas aleatoriamente en dos grupos (control y estresado), el grupo experimental fue sometido a estrés por restricción de movimiento durante la última semana de gestación. Al nacimiento se evaluó el peso corporal de la progenie (grupo control n:34; grupo estresado n:29), para posteriormente diafanizar y teñir con alizarina roja, evaluando dimensiones longitudinales, anchos y espacios suturales de la anatomía de los huesos de cráneo por la vista superior e inferior. El estrés gestacional alteró significativamente la anatomía de los huesos de cabeza ósea (p<0,05) de las crías en el momento del nacimiento con respecto a los controles. El estrés prenatal altera la anatomía de los huesos craneales del ratón CF-1 evaluado al nacer.

Prenatal stress caused by movement restriction induces changes in the appendicular osseous development of CF-1 mice progeny / El estrés prenatal causado por restricción de movimiento induce cambios en el desarrollo óseo apendicular de la progenie de ratones CF-1

Prenatal stress has been associated with alterations in weight and body size, as well as disturbances in the process of developing skeletal ossification, occurring during childbirth and the early stages of life. However, the effect evidence of prenatal stress on bone grow thand development during the gestation period has been low; therefore, it is unknown whether these alterations are associated with potential for growth disorders Because of this, the study aims to determine the short-term effects of prenatal stress on the CF-1mouse bone structure growth in your date of birth. The female mice were divided randomly in two groups: controlled (n=2) and stressed (n=3). The latter was put under stress by means of movement restriction during the last week of gestation. Second, an evaluation of their gestational development was made, obtaining measurements of their weight. Finally, diaphanization with KOH and staining with Alizarin red was used to measure the length of their appendicular bones and their flat pelvic bones, of 53 P0 mice (25 control; 28 stressed during gestation). The stressed mice's body weight (p=0.02) and the length of their appendicular bones (radii, p=0.0011; ulnae, p= 0.0001; humeri, p=0.0001; femorae, p=0.0006; tibiae, p=0.0015) were affected significantly in contrast with the controlled group. On the other hand,there were nosignificant differences inmaternal bodyweightand length ofthe mice pelvic bones (isquium, ilium; p>0.05). The prenatal stress by means of movement restriction alters the osseous appendicular morphology of the CF-1 mouse evaluated at birth...

El estrés prenatal se ha asociado con alteraciones en el peso y el tamaño corporal, así como trastornos en el proceso osificación en el esqueleto en desarrollo, que se producen durante el parto y las primeras etapas de vida. Sin embargo, la evidencia de los efectos del estrés prenatal sobre el crecimiento de los huesos y el desarrollo durante el período de gestación ha sido baja, desconociéndose si estas alteraciones están relacionadas con trastornos del crecimiento. El objetivo fue determinar los efectos a corto plazo del estrés prenatal en la estructura ósea del ratón CF-1 en el día de nacimiento. Las hembras gestantes fueron divididas aleatoriamente en dos grupos: control (n=2) y estresado (n=3). Este último fue puesto bajo estrés por restricción de movimiento durante la última semana de gestación. Evaluando el peso corporal en la progenie al nacer (grupo control n=25; grupo estresado n=28), para posteriormente diafanizar mediante KOH y teñir con alizarina roja, midiendo la longitud de huesos largos apendiculares y huesos planos de pelvis en el plano coronal. El peso de los ratones estresados (p = 0,02) y la longitud de los huesos apendiculares fueron significativamente menores en comparación con el grupo control (radio, p = 0,0011; ulna, p = 0,0001; húmero, p = 0,0001; fémur, p = 0,0006; tibia, p = 0,0015). Por otro lado, no hubo diferencias significativas en el peso corporal de la madre y la longitud de los huesos pélvicos de las crías (isquion, íleon, p> 0,05). El estrés prenatal por restricción de movimiento altera la morfología ósea apendicular del ratón CF-1, evaluados al nacimiento...

Estudo microscópico e macroscópico, com enfoque radiográfico e de alizarina, no desenvolvimento embrionário e fetal de gatos domésticos (Felis catus) em diferentes idades gestacionais / Microscopic and macroscopic study focusing ray and alizarin on embryonic and fetal development in cats (Felis catus) in different gestational ages

The domestic cat was named Felis catus by Carolus Linnaeus in his book Systema Na turae, in 1798. The family Felidae has many morphological similarities with wild felines. The study of the embryology of the domestic cat is of great value considering its importance as an experimental model for the wild cats endangered from extinction, especially in the research related to reproductive biology. The objective of this study is the descriptive embryology of the domestic cat at different stages of pregnancy, through macroscopic description of photographic records, radiographic and alizarin technique, and microscopic description of photographic records by light microscopy. In embryos with an estimated gestational age of 17 days we observed macroscopically an expansion corresponding to the rostral forebrain, the placoid site of lens, cervical flexure, the four pharyngeal arches with grooves dividing the cardiac prominence, a sign of the limb bud, and the presence of somites. In the caudal region of the embryo, we saw the cranio-caudal bend, allowing the same position in format of a "C". In embryos with an estimated age of 22 days, we noticed macroscopically the forebrain, optic vesicle pigmentation of the retina, the optic vesicle, fourth ventricle, liver, fore and hind limbs with a slight distinction between the digits and superficial vascularization. In embryos with an estimated age of 25 days we noticed presence of the forebrain and midbrain, the pronounced cervical curvature of the optic vesicle with strong pigmentation of the retina, the optic vesicle, limbs and chest well developed, distinguishing the digits and pronounced the liver Fetuses with estimated age of 52 days have internal and external structures easily identified in adult animals. With respect to the bone structure we noted that they did not have any radial bone formed, only bone shafts. Microscopically, the embryo of the domestic cat with CR of 0.9cm and estimated age of 19 days revealed the presence of beak, oral cavity with upper and lower nasal cavity, eye and opening of the 4th ventricle of the brain, esophagus, heart with atrium and ventricle, lung, liver, mesonephric ridge, primitive gonad, stomach, forelimb bud, spine and spinal cord in development. This paper is of great importance for study of the internal and external morphology of domestic cats for better understanding of the embryonic development of the species.

O gato doméstico (Felis catus) foi nomeado por Carolus Linnaeus em seu livro Systema Naturae, em 1798. A família Felidea apresenta muita semelhança morfológica com os felinos selvagens. O estudo da embriologia do gato doméstico é de grande valia, uma vez que, é considerado um importante modelo animal quando comparado aos gatos selvagem em extinção, especialmente relacionado às pesquisas sobre biologia reprodutiva. Este trabalho objetivou análisar e comparar as fases embrionárias de quatro embriões e um feto de felinos domésticos. Nos embriões com idade gestacional estimada em 17 dias (0,5cm CR) podemos observar pela análise macroscópica a presença de dilatação rostral correspondente ao prosencéfalo, o local placóide do cristalino, a flexura cervical, os quatro arcos faríngeos com os sulcos que o dividem, a proeminência cardíaca, o indício do brotamento do membro pélvico, além da presença de somitos. Na região caudal do embrião, visualizamos a curvatura cranio-caudal, permitindo ao mesmo uma posição em formato de "C". Nos embriões com idade gestacional estimada em 22 dias (1,2cm CR), na análise macroscópica foi visualizado o prosencéfalo, vesícula óptica com pigmentação da retina, vesícula ótica, quarto ventrículo, fígado, membros torácicos e pélvicos com discreta distinção dos dígitos e vascularização superficial. Nos embriões com idade gestacional estimada em 25 dias (1,5cm CR) notamos a presença do prosencéfalo e mesencéfalo, a curvatura cervical pronunciada, vesícula óptica com forte pigmentação da retina, vesícula ótica, membros pélvicos e torácicos bem desenvolvidos, com distinção dos dígitos e fígado bem pronunciado. Os fetos com idade gestacional estimada em 52 dias (10cm CR) possuem estruturas internas e externas facilmente identificadas em animais adultos. Com relação às estruturas ósseas notamos que as mesmas não apresentam nenhuma epífise óssea formada, sendo visíveis somente as diáfises ósseas. Na análise microscópica, o embrião de idade gestacional de 19 dias (0,9cm CR) revelou a presença do rostro, cavidade oral com lábio superior e inferior, cavidade nasal, olho e a abertura do 4º ventrículo encefálico, esôfago, coração com átrio e ventrículo, pulmão, fígado, crista mesonéfrica, gônada primitiva, estômago, broto do membro torácico, coluna vertebral e a medula espinhal em formação. Esse trabalho é de grande importância para o estudo da morfologia externa e interna de gatos domésticos, principalmente no que diz respeito ao desenvolvimento ósseo e articular, considerando as alterações que podem ou não ser promovidas pelo uso de terapias medicamentosas ou celulares durante o desenvolvimento embrionário e fetal.

Ontogeny of the cranial bones of the giant amazon river turtle Podocnemis expansa Schweigger, 1812 (Testudines, Podocnemididae ) / Ontogenia dos ossos do crânio em tartaruga-da-amazônia Podocnemis expansa Schweigger, 1812 (Testudines, Podocnemididae)

In order to determine the normal stages of formation in the sequence ofossification of the cranium of Podocnemis expansa in its various stages of development,embryos were collected starting on the 18th day of natural incubation and were subjected tobone diaphanization and staining. In the neurocranium, the basisphenoid and basioccipitalbones present ossification centers in stage 19, the supraoccipital and opisthotic in stage 20,the exoccipital in stage 21, and lastly the prooptic in stage 24. Dermatocranium: thesquamosal, pterygoid and maxilla are the first elements to begin the ossification process,which occurs in stage 16. However, ossification centers begin to appear in stage 17 in mostof these bone elements, i.e., the frontal, jugal, postorbital, parietal, premaxilla andprefrontal, followed by the palatine and quadratojugal in stage 19 and lastly by the vomer instage 25. The quadrate bone of the splanchnocranium ossifies in stage 23. The mandibleand hyoid apparatus, the dentary, coronoid and supra-angular, show ossification centers instage 16 and the branchial horn I in stage 17. The sequence and synchronization ofossification in P. expansa show similarities as well as differences when compared with otherspecies of Testudines.

Com o propósito deestabelecer etapas normais de formação da sequência de ossificação do crânio em Podocnemisexpansa, nos diferentes estágios de desenvolvimento, coletaram-se embriões a partir do 18ºdia de incubação natural, os quais foram submetidos à técnica de diafanização e coloraçãodos ossos. No neurocrânio, no estágio 19, o basisfenoide e o basioccipital apresentam centrode ossificação; no estágio 20, o supraoccipital e o opistótico; no estágio 21, o exoccipital;somente no estágio 24, o proótico. Dermatocrânio: o esquamosal, o pterigoide e a maxilasão os primeiros elementos a iniciar o processo de ossificação, que ocorre no estágio 16. Masa maioria desses elementos ósseos apresenta centros de ossificação no estágio 17, são eles:frontal, jugal, pós-orbital, parietal, pré-maxila, pré-frontal, seguido do palatino equadradojugal no estágio 19 e, por último, o vômer no estágio 25. O osso quadrado doesplancnocrânio, no estágio 23. Ossificação da mandíbula e aparelho hioide: tanto odentário, coronoide e o supra-angular apresentam centros de ossificação no estágio 16; ocorpo branquial I, no estágio 17. A sequência e a sincronização da ossificação em P. expansaexibem similaridades, bem como diferenças, quando comparada com outras espécies deTestudines.

Skeletal Organization of Caudal Fin in Syngnathus abaster (Osteichthyes, Syngnathidae) / Organización Esqueletal de la Paleta Caudal en Syngnathus abaster (Osteichthyes, Syngnathidae)

The caudal skeleton is one of the most important tools to evaluate teleostean interrelationships, but just the anatomy of few species have been investigated. Black-striped pipefish (Syngnathus abaster) has never been examined for its caudal morphology. Here, red alizaryn is applied as specific staining for calcified structures, providing a better understanding of caudal skeleton organization. Our results and interpretation just partially fit with previous knowledge on other Syngnathus species. This emphasizes both the importance of facing same problems with new technics and methodologies, and the existence of a heterogeneous situation between close-related taxa.

El esqueleto caudal es una de las más importantes herramientas para evaluar las interrelaciones de teleósteros, pero la anatomía de pocas especies han sido investigada. Nunca se ha estudiado la morfología de la cauda del pez aguja de río de rayas negras (Syngnathus abaster). Se usó una técnica específica de tinción con alizarina roja, para visualizar estructuras calcificadas, obteniéndose un gran conocimiento de la organización del esqueleto caudal. Los resultados e interpretación de ellos coinciden parcialmente con los hallazgos en otras especies de Syngnathus. En ambos casos se enfatiza la importancia de tratar los problemas con nuevas técnicas y metodologías.