Amniotic membrane transplantation for ocular surface burns / Transplante de membrana amniótica em queimaduras da superfície ocular

ABSTRACT Objective: To analyze the morphological and functional long-term outcomes of amniotic membrane transplantation after ocular surface chemical burns. Methods: This prospective study analyzed 7 patients who suffered from severe ocular surface burn and underwent amniotic membrane transplantation from 2015 to 2020 in Hospital de Clínicas - Universidade Federal do Paraná. Results: Out of the seven patients, six (85.7%) suffered unilateral burn and one (14.3%) suffered bilateral burn. Five of them had alkali burns (71.4%), one had acid burn (14.3%) and one suffered gunpowder fireworks burn (14.3%). Mean age was 29.4 years (±standard deviation 13.3, range 14.0 to 47.0 years). Mean visual acuity at first presentation was 1.83±0.79 logMAR (0.015 decimal) and mean VA after a follow-up of 1 year was 0.85±0.70 logMAR (0.141 decimal). The visual acuity significantly improved from 1.83±0.79 to 0.85±0.70 logMAR (p<0.05). Conclusion: Amniotic membrane transplantation is an effective adjunctive treatment in the management of ocular surface chemical burns with potential to improve the final vision outcome.

RESUMO Objetivo: Analisar os resultados morfológicos e funcionais a longo prazo do transplante de membrana amniótica após queimaduras químicas da superfície ocular. Métodos: Foi realizado um estudo prospectivo com análise de sete pacientes que sofreram queimaduras graves da superfície ocular e foram submetidos a transplante de membrana amniótica no período de 2015 a 2020 no Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. Resultados: Dos sete pacientes, seis (85,7%) sofreram queimadura unilateral e um (14,3%) sofreu queimadura bilateral. Cinco deles sofreram queimaduras por álcali (71,4%), um por ácido (14,3%) e um por pólvora de fogo de artifício (14,3%). A média de idade foi de 29,4 anos (±desvio-padrão de 13,3, intervalo de 14,0 a 47,0 anos). A acuidade visual média na primeira apresentação foi de 1,83±0,79 logMAR (0,015 decimal) e, após 1 ano de seguimento, foi de 0,85±0,70 logMAR (0,141 decimal). A acuidade visual melhorou significativamente, de 1,83±0,79 para 0,85±0,70 logMAR (p<0,05). Conclusão: O transplante de membrana amniótica é um tratamento adjuvante eficaz no manejo de queimaduras químicas da superfície ocular com potencial para melhorar a visão final.

Preclinical study of experimental burns treated with photobiomodulation and Human Amniotic Membrane, both isolated and associated / Estudo pré-clínico de queimaduras experimentais tratadas com fotobiomodulação e membrana amniótica humana, isoladas e associadas / Estudio preclínico de quemaduras experimentales tratadas con fotobiomodulación y membrana amniótica humana, solas y combinadas

Abstract Objective: to evaluate the effect of photobiomodulation with low-level 660 nm laser alone or associated with Human Amniotic Membrane in the repair of partial-thickness burns in rats. Method: an experimental study conducted with 48 male Wistar rats, randomized into four groups: Control, Human Amniotic Membrane, Low-Level Laser Therapy, and Low-Level Laser Therapy associated with Human Amniotic Membrane. The histopathological characteristics of the skin samples were analyzed 7 and 14 days after the burn. The data obtained were submitted to the Kolmogorov-Smirnov and Mann-Whitney tests. Results: the histological analysis of the burn injuries showed a decrease in inflammation (p<0.0001) and an increase in proliferation of fibroblasts (p<0.0001) mainly at 7 days in all treatments related to the control group. At 14 days, the greater effectiveness in accelerating the healing process was significant (p<0.0001) in the Low-Level Laser Therapy group associated with the Human Amniotic Membrane. Conclusion: the association of photobiomodulation therapies with the Human Amniotic Membrane allowed verifying a reduction in the healing process time of the experimental lesions, stimulating its proposal as a treatment protocol in partial-thickness burns.

Resumo Objetivo: avaliar o efeito da fotobiomodulação com laser de baixa intensidade 660 nm isoladamente ou associada à membrana amniótica humana no reparo de queimaduras de espessura parcial em ratos. Método: estudo experimental com 48 ratos Wistar machos, randomizados em quatro grupos: Controle, Membrana Amniótica Humana, Terapia a Laser de Baixa Intensidade e Terapia a Laser de Baixa Intensidade associado à Membrana Amniótica Humana. As características histopatológicas das amostras de pele foram analisadas aos 7 e 14 dias após a queimadura. Os dados obtidos foram submetidos aos testes de Kolmogorov-Smirnov e Mann Whitney. Resultados: a análise histológica das lesões por queimadura mostrou a diminuição da inflamação (p <0,0001) e aumento da proliferação de fibroblastos (p <0,0001), principalmente nos 7 dias em todos os tratamentos relacionados ao grupo controle. Aos 14 dias, a maior efetividade na aceleração do processo cicatricial foi significativa (p<0,0001) no grupo Terapia a Laser de Baixa Intensidade associado à Membrana Amniótica Humana. Conclusão: a associação das terapias de fotobiomodulação à membrana amniótica humana permitiu comprovar redução no tempo do processo cicatricial das lesões experimentais, estimulando sua proposição como protocolo de tratamento em queimaduras de espessura parcial.

Resumen Objetivo: evaluar el efecto de la fotobiomodulación con láser de baja intensidad 660 nm de sola o combinada con la membrana amniótica humana en la reparación de quemaduras de espesor parcial en ratas. Método: estudio experimental con 48 ratas Wistar macho, aleatorizadas en cuatro grupos: Control, Membrana Amniótica Humana, Terapia con Láser de Baja Intensidad y Terapia con Láser de Baja Intensidad combinada con la Membrana Amniótica Humana. Las características histopatológicas de las muestras de piel fueron analizadas a los 7 y 14 días después de la quemadura. Los datos obtenidos fueron sometidos a las pruebas de Kolmogorov-Smirnov y Mann-Whitney. Resultados: el análisis histológico de las lesiones por quemadura mostró una disminución de la inflamación (p <0,0001) y un aumento de la proliferación de fibroblastos (p <0,0001) principalmente a los 7 días en todos los tratamientos en comparación con el grupo control; a los 14 días, en el grupo de Terapia con Láser de Baja Intensidad combinada con la Membrana Amniótica Humana la mayor efectividad en la aceleración del proceso de cicatrización fue significativa (p<0,0001). Conclusión: la asociación de terapias de fotobiomodulación con la membrana amniótica humana permitió comprobar que hubo una reducción en el tiempo del proceso de cicatrización de lesiones experimentales, lo cual favorece que se proponga como protocolo de tratamiento en quemaduras de espesor parcial.

Amniotic membrane graft after excision of widespread conjunctival concretions / Enxerto de membrana amniótica após remoção de concreções conjuntivais

ABSTRACT Conjunctival concretions are single or clustered lesions frequently found on the palpebral conjunctiva. They are commonly present in older individuals, despite being rarely symptomatic. This case report describes an 83-year-old man with multiple conjunctival concretions, which were surgically treated. The patient was symptomatic on presentation and did not respond to conservative treatment. For this reason, a surgical approach was considered. After wide excision of the conjunctival lesions, a piece of amniotic membrane was fitted using fibrin glue. During follow-up, a markedly improvement in patient's symptoms was observed, along with nearly complete absence of conjunctival concretions. This is the first case report addressing extensive conjunctival concretions with a surgical approach using amniotic membrane. The authors conceived the technique described after noticing the limited clinical options in the literature. This technique was easily performed and achieved satisfactory results.

RESUMO As concreções conjuntivais representam lesões amareladas, simples ou múltiplas, frequentemente encontradas na conjuntiva palpebral. São mais prevalentes em idades avançadas e raramente sintomáticas. Este relato de caso descreve o quadro clínico de um paciente de 83 anos com múltiplas concreções conjuntivais, cirurgicamente tratadas. Por se tratar de um paciente sintomático com resposta insuficiente ao tratamento conservador, foi considerada a abordagem cirúrgica. Após remoção das lesões, foi aplicado um enxerto de membrana amniótica, adaptado com cola de fibrina. No acompanhamento pós-operatório, verificou-se melhoria significativa dos sintomas, com desaparecimento quase total das concreções conjuntivais. Este é o primeiro caso que descreve uma abordagem cirúrgica com utilização de membrana amniótica na resolução desse tipo de lesões. A técnica, de fácil execução e com resultados muito favoráveis, foi desenvolvida pelos autores após constatarem a escassez de alternativas na literatura.

Amniotic membrane transplantation in ocular surface diseases / Transplante de membrana amniótica em doenças da superfície ocular

Abstract Objective: To evaluate the clinical effectiveness of amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction. Methods: Prospective study including 23 eyes of 21 patients who underwent amniotic membrane transplantation at Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC-UFPR) and at Cirurgia e Diagnose em Oftalmologia do Paraná (CDOP) clinic, located in Curitiba, PR, Brazil, from may 2015 to july 2019. The amniotic membrane was collected from elective and term cesarean delivery, and conserved in preservation medium and glycerol 1:1, stored at -80° Celsius. The membrane was fixed on the ocular surface with 10-0 nylon, 8-0 vicryl, biological glue or a combination of these materials. Results: The ocular surface reconstruction was successful in 22 eyes (95.6%). Failure was observed only in 1 case (bullous keratopathy) in which the condition was maintained postoperatively. Patients' age ranged from 11-82 years, with a mean age of 37.4 years. There was a higher incidence in males (66.6%). A difference was perceived in the distribution of the affected eye (which was greater in the right eye - 65.2%). As for the previous ophthalmic surgery history, 12 of the 23 eyes had a positive history (52.2%). It was observed that all patients who had preoperative visual acuity assessed showed improvement or maintenance of corrected visual acuity. In the postoperative period, complications associated with the underlying disease were observed, although not particularly related to the amniotic membrane transplantation. There were not any cases of postoperative infection. Conclusions: There was an improvement in the general state of the ocular surface in almost all of the cases in which the transplant was performed. Therefore, the amniotic membrane can be considered a good alternative for reconstructing the ocular surface, as a single or supporting treatment.

Resumo Objetivo: Avaliar a eficácia clínica do transplante de membrana amniótica na reconstrução da superfície ocular. Métodos: Estudo prospectivo incluiu 23 olhos de 21 pacientes que realizaram transplante de membrana amniótica no Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (UFPR) e na clínica de Cirurgia e Diagnose em Oftalmologia do Paraná (CDOP), localizados em Curitiba, PR, Brasil, no período de maio de 2015 a julho de 2019. A membrana amniótica foi captada a partir de parto cesárea eletivo e a termo, conservada em meio de preservação e glicerol 1:1 e armazenada a -80° Celsius. A membrana foi fixada na superfície ocular com fio nylon 10-0 ou vicryl 8-0 e/ou cola biológica. Resultados: A idade dos pacientes variou de 11-82 anos, com média de 37,4 anos. Houve maior incidência no sexo masculino (66,6%). Ocorreu diferença na distribuição do olho acometido (maior no olho direito - 65,2%). Quanto à história de cirurgia oftalmológica prévia, 12 dos 23 olhos tinham história positiva (52,2%). Observamos que nos pacientes em que foi possível a avaliação da acuidade visual pré-operatória, todos apresentaram melhora ou manutenção da acuidade visual. No pós-operatório foi observado complicações associadas à doença de base e não propriamente ao transplante de membrana amniótica. Não foram registrados casos de infecção pós-operatória. Conclusão: Houve melhora do estado geral da superfície ocular em quase totalidade dos casos em que o transplante foi realizado. Portanto, a membrana amniótica pode ser considerada uma boa alternativa para reconstrução da superfície ocular, como tratamento único ou coadjuvante.

Surgical amniotic membrane transplantation after conjunctival and limbal tumor excision / Transplante de membrane amniótica após excisão de tumor limbar e conjuntival

ABSTRACT Purpose: To evaluate the clinical results of patients treated by amniotic membrane transplantation (AMT) following excision of conjunctival and limbal tumors. Methods: A total of 14 eyes of 14 patients who underwent AMT after total lesion-free tumor excision and perilesional cryotherapy were evaluated. Results: The excised tumors comprised 7 conjunctival intraepithelial neoplasia, 5 conjunctival nevus, 1 primary acquired melanosis, and 1 squamous cell carcinoma. Limbus was involved in 10 cases, whereas cornea was involved in 6 cases. The average measurement of the tumor base was 14.8 mm (range 6-20 mm, SD 16 mm). The mean follow-up time period was 17.5 months (range 6 -60 months, SD 20 months). Complete healing occurred in eight eyes, but limbal cell deficiency developed in two eyes. Four cases had recurrence and were treated with the same surgical and medical procedures; during follow-up after recurrence, superficial peripheral vascularization and corneal scar were noted to have developed. Conclusions: AMT was effective for reconstruction of tissue defect after excision and cryotherapy of limbal and conjunctival tumors. In most of these cases, complete healing was achieved with a smooth, stable, and translucent surface.

RESUMO Objetivo: Avaliar os resultados clínicos de pacientes tratados com transplante de membrana amniótica (TMA) após a excisão de tumores conjuntival e limbar. Métodos: Foram avaliados 14 olhos de 14 pacientes submetidos a transplante de membrana amniótica após excisão total de tumor e crioterapia perilesional. Resultados: Os tumores que foram excisados podem ser classificados como neoplasia intraepitelial conjuntival em 7, nevus conjuntival em 5, melanose adquirida primária e carcinoma espinocelular em 1 caso cada. O limbo foi envolvido em 10 casos e a córnea foi envolvida em 6 casos. A medida média da base do tumor foi de 14,8 mm (6-20, DP 16). O tempo médio de seguimento foi de 17,5 meses (6-60, DP 20). A cicatrização completa ocorreu em 8 olhos e deficiência de células limbares ocorreu em 2 olhos. A recorrência foi diagnosticada em 4 casos e tratada com o mesmo procedimento cirúrgico e médico e, após essa recorrência, a vascularização periférica superficial e a cicatriz corneana desenvolveram-se em 4 casos durante o seguimento. Conclusões: O transplante de membrana amniótica é um método eficaz para a reconstrução do defeito do tecido após a excisão de tumores limbares e conjuntivais com a combinação de crioterapia. Na maioria destes casos, a cicatrização completa pode ser conseguida com uma superfície lisa, estável e transparente.

Membrana amniótica: fonte alternativa de células-tronco mesenquimais em diversas espécies animais / Amniotic membrane: alternative source of mesenchymal stromal cells in several animals species

O crescente interesse do uso de células-tronco (CTs) na medicina regenerativa, estão baseadas na sua capacidade de autorrenovação, reparação tecidual e imunomodulação. A terapia utilizando células-tronco é uma ciência em formação considerada uma alternativa terapêutica promissora no tratamento de diversas patologias degenerativas, hereditárias e inflamatórias. A busca por fontes alternativas de CTs que possuam características como fácil obtenção e isolamento, tem levado ao estudo dos mais variados tecidos, onde se inclui os anexos embrionários como a membrana amniótica. Porém, para sua efetiva aplicação terapêutica são necessários estudos de suas características "in vitro", além de testes pré-clínicos e clínicos. Com isso, o objetivo deste trabalho é realizar uma revisão bibliográfica sobre a caracterização e aplicação clínica das células-tronco da membrana amniótica em diversas espécies de animais domésticos.(AU)

The increasing interest for the use of stem cells in regenerative medicine, is based on their self-renewal capacity, tissue repair and immunomodulation. The therapy with stem cells is a science in formation considered a promising therapeutic alternative for the treatment of various degenerative, hereditary and inflammatory disorders. The search for alternative sources of stem cells of easy obtention and isolation has led to the study of various tissues, includng embryonic attachments such as the amniotic membrane. However for effective therapeutic application are needed studies of the characteristics in vitro and preclinical and clinical trials. Thus, the aim of this study was a literature review regarding the characterization and clinical application of stem cells from the amniotic membrane in several domestic animal species.(AU)

Ultrasound biomicroscopy after palliative surgical procedures for bullous keratopathy: a descriptive comparative study / Biomicroscopia ultrassônica após procedimentos cirúrgicos paliativos na ceratopatia bolhosa: estudo comparativo descritivo

Purpose: To describe quantitative and qualitative features of eyes with advanced bullous keratopathy assessed using ultrasound biomicroscopy, before and after anterior stromal puncture (ASP) or amniotic membrane transplantation (AMT) procedures to relieve chronic pain. Methods: The present descriptive comparative study included 40 eyes of 40 patients with chronic intermittent pain due to bullous keratopathy who were randomly assigned to one of the two treatments (AMT or ASP). Ultrasound biomicroscopy (Humphrey, UBM 840, 50 MHz transducer, immersion technique) was used, and a questionnaire about pain intensity was completed preoperatively and postoperatively at days 90 and 180, respectively. Exclusion criteria were age<18 years, presence of concurrent infection, ocular hypertension, and absence of pain. Results: In a 180-day follow-up, the AMT group exhibited mean central corneal thickness (CCT), 899.4 µm preoperatively and 1122.5 µm postoperatively (p<0.001); mean epithelial thickness (ET), 156.4 µm preoperatively and 247.8 µm postoperatively (p<0.001); and mean stromal thickness (ST), 742.9 µm preoperatively and 826.3 µm postoperatively (p=0.005). The ASP group exhibited mean CCT, 756.7 µm preoperatively and 914.8 µm postoperatively (p<0.001); mean ET, 102.1 µm preoperatively and 245.2 µm postoperatively (p<0.001); and mean ST, 654.6 µm preoperatively and 681.5 µm postoperatively (p<0.999). Correlations between CCT and pain intensity in the AMT group (p=0.209 pre- and postoperatively) and the ASP group (p=0.157 preoperatively and p=0.426 at the 180-day follow-up) were not statistically significant. Epithelial and stromal edema, Descemet’s membrane folds, epithelial bullae, and the presence of interface fluid were frequently observed qualitative features. Conclusion: CCT increased over time in both groups. The magnitude of CCT did not correlate with pain intensity in the sample studied. The presence of interface ...

Objetivo: Descrever as características quantitativas e qualitativas da biomicroscopia ultrassônica (UBM) em olhos com ceratopatia bolhosa avançada, antes e após os procedimentos de punção estromal anterior (ASP) ou transplante de membrana amniótica (AMT) para alívio de dor crônica. Métodos: Estudo comparativo descritivo incluindo 40 olhos de 40 pacientes com dor crônica intermitente devido a ceratopatia bolhosa, randomizados em duas modalidades de tratamento (AMT e ASP). Biomicroscopia ultrassônica (Humphrey, UBM 840, transdutor de 50 MHz, técnica de imersão) foi utilizada, e um questionário de avaliação da intensidade da dor foi aplicado no pré-operatório, e após 90 e 180 dias de pós-operatório. Critérios de exclusão foram: idade abaixo de 18 anos, presença de infecção, hipertensão ocular, e ausência de dor. Resultados: No seguimento de 180 dias, o grupo Transplante de membrana amniótica apresentou: média da espessura corneana central (CCT): 899,4 µm (pré), 1.122,5 µm (pós-operatório) (p<0,001); média da espessura epitelial (ET): 156,4 µm (pré), 247,8 µm (pós-operatório) (p<0,001); média da espessura estromal (ST): 742,9 µm (pré), 826,3 µm (pós-operatório) (p=0,005), e, grupo ASP apresentou: CCT média: 756.7 µm (pré), 914,8µm (pós-operatório) (p<0,001); ET média: 102,1 µm (pré), 245,2 µm (pós-operatório) (p<0,001); ST média: 654,6 µm (pré), 681.5 µm (pós-operatório) (p<0,999). A correlação entre intensidade da dor e espessura corneana central no grupo AMT (p=0,209 pré e pós-operatórios) e no grupo ASP (p=0,157 pré-operatório e p=0,426 aos 180 dias de seguimento) não foi significativa. Edema epitelial e estromal, dobras na membrana de Descemet, bolhas epiteliais, e presença de fluido na interface foram características qualitativas frequentemente observadas. Conclusão: A espessura corneana central aumentou ao longo do tempo em ambos os grupos. A magnitude da espessura corneana central não interfere na intensidade da dor ...

Ruptura prematura de membranas: atualização e manejo / Premature rupture of fetal membranes: update and manegement

A ruptura prematura de membranas (RUPREMA) é a ruptura das membranas amnióticas antes do início do trabalho de parto, podendo ocorrer a termo (≥ 37 semanas de gestação) ou pré-termo (< 37 semanas de gestação). O diagnóstico é principalmente clínico e a história natural é o parto. O manejo da RUPREMA depende de diversos fatores, os mais importantes são a idade gestacional e as condições clínicas materno-fetais.

Premature rupture of membranes (PROM) refers to the rupture of membranes before the onset of labor. It may occur at term (≥37 weeks of gestation) or preterm (< 37 weeks of gestation). The diagnosis is primarily clinical and the natural course is delivery. The management of PROM depends upon several factors, most importantly the gestational age and the maternal-fetal clinical condition.

Cultivo de células madre limbares en membrana amniótica para reconstrucción de tejido corneal: una comparación de dos métodos / Limbal stem cell culture on amniotic membrane for corneal tissue reconstruction: a comparison of techniques / Cultivo de células mãe limbares em membrana amniótica para reconstrução de tecido corneano: uma comparação de dois métodos

Objetivo: Obtener un cultivo celular de células del limbus corneal en membrana amniótica como soporte por dos métodos diferentes, suspensión y explante, para obtener datos de confluencia, viabilidad y diferenciación en ambos métodos. Métodología: Muestras de LSC (limbal stem cells, por sus siglas en inglés) fueron obtenidas de 16 donantes cadavéricos. Se realizaron seis cultivos de cada muestra, 3 por el método de suspensión y 3 por el método de explante, todo por triplicado. Como control negativo se utilizó membrana amniótica sin LSCs. Las células fueron cultivadas con SHEM, 37°C, 5% CO2 y 95% de humedad. Los cultivos fueron mantenidos por 14 días con un recambio de medio cada 3 días. El día 14 los cultivos fueron analizados para evaluar viabilidad con azul de tripano, confluencia por microscopio y la diferenciación celular con Inmunohistoquímica para detectar citoqueratina 3/12. Resultados: Como resultado de los experimentos mencionados anteriormente, para los métodos de suspensión y explante, se encontró una viabilidad de 98.92% y 98.32%, una confluencia de 55.95% y 48.27%, una concentración celular de 38.83x104 células/ml y 36.484x104 celulas/ml, y una diferenciación de 22.93% y 16.55%, respectivamente. Conclusiones: Aunque éste estudio compare dos métodos, cultivos en suspensión de LSC y cultivo en explante de LSC, ambos con membrana amniótica como soporte, nosotros encontramos una pequeña diferencia en ellos. Como resultado, el cultivo en suspensión fue mejor que el explante, sin embargo los resultados no son conclusivos, por lo tanto es necesario realizar más investigaciones en este campo para lograr una conclusión con respecto al desempeño de estos dos métodos.

Objective: To grow cells on amniotic membrane corneal limbus with two different methods to assess the confluence, viability and differentiation of both.Methods: LSC samples were obtained from 16 deceased donors. Additionally, six cultures were made from each sample, 3 by LSC suspension method and 3 by LSC explant method, all in triplicate. Furthermore, AMs without oral mucosal cells were used as negative control cultures. The cells were seeded with SHEM, 37°C, 5% CO2, 95% humidity. Moreover, the cultures were maintained for 14 days and the culture medium was changed every other day or every 3 days. Also, on the 14th day, the cultures were analyzed to evaluate viability with trypan blue, confluence with microscopy and cell differentiation with immunohistochemistry to detect cytokeratin 3/12.Results: As a result of the experiments mentioned above, for suspension and explant cultures, we found a viability of 98.92% and 98.32%, a confluence of 55.95% and 48.27%, a final cellular concentration of 38.83x104 cells/ml and 36.484x104 cells/ml, and a differentiation of 22.93% and 16.55%, respectively.Conclusions: Although this study compared two methods, LSC suspension culture and LSC explant culture, both with AM as scaffold, we did find a slight difference between them. As a result, the suspension culture was better than the LSC explant culture, but the results are not conclusive. It is necessary to conduct more research in this field to reach a conclusion regarding the behavior of these two methods

Objetivo: Obter um cultivo celular de células do limbus corneano em membrana amniótica como suporte por dois métodos diferentes, suspensão e explante, para obter dados de confluência, viabilidade e diferenciação em ambos métodos. Métodos: Mostras de LSC (limbal stem cells, por suas siglas em inglês) foram obtidas de 16 doadores cadavéricos. Realizaram-se seis cultivos de cada mostra, 3 pelo método de suspensão e 3 pelo método de explante, tudo por triplicado. Como controle negativo se utilizou membrana amniótica sem LSCs. As células foram cultivadas com SHEM, 37°C, 5% CO2 e 95% de umidade. Os cultivos foram mantidos por 14 dias com uma troca de meio cada 3 dias. O dia 14 os cultivos foram analisados para avaliar viabilidade com azul de tripan, confluência por microscópio e a diferenciação celular com Imunoistoquímica para detectar citoqueratina 3/12. Resultados: Como resultado dos experimentos mencionados anteriormente, para os métodos de suspensão e explante, encontrou-se uma viabilidade de 98.92% e 98.32%, uma confluência de 55.95% e 48.27%, uma concentração celular de 38.83x104 células/ml e 36.484x104 células/ml, e uma diferenciação de 22.935% e 16.558%, respectivamente. Conclusão: Ainda que este estudo compare dois métodos, cultivos em suspensão de LSC e cultivo em explante de LSC, ambos com membrana amniótica como suporte, nós encontramos uma pequena diferença neles. Como resultado, o cultivo em suspensão foi melhor do que o explante, no entanto os resultados não são conclusivos, portanto é necessário realizar mais investigações neste campo para conseguir uma conclusão com respeito ao desempenho destes dois métodos

Ichthyosis follicularis, alopecia and photophobia syndrome (IFAP): report of the first case with ocular and cutaneous manifestations in Brazil with a favorable response to treatment / Síndrome de ictiose folicular, alopécia e fotofobia (IFAP): relato do primeiro caso com acometimento ocular e cutâneo do Brasil e da resposta favorável ao tratamento

Ichthyosis follicular, alopecia, and photophobia (IFAP) syndrome is a rare disease, with possible X-linked mode of inheritance. The patient presented with ocular findings of photophobia, corneal scarring and erosions, superficial and deep corneal vascularization and myopia. He was treated with artificial tears and punctal occlusion with small improvement of photophobia. After three months using systemic retinoid (Acitretina) and posterior amniotic membrane transplantation in the left eye, there was a significant improvement of photophobia, corneal erosions and neuropsychomotor development.

A síndrome de ictiose folicular, alopecia e fotofobia (IFAP) é uma doença rara, com possível modo de herança ligado ao cromossomo X. O paciente apresentou achados oftalmológicos de fotofobia, cicatrizes e erosão corneanas, neovascularização superficial e profunda da córnea e miopia. Foi iniciado uso de lubrificantes e oclusão do ponto lacrimal com discreta melhora da fotofobia. Após uso de retinóide sistêmico (Acitretina) por três meses e posterior transplante de membrana amniótica no olho esquerdo apresentou melhora importante da fotofobia, das erosões corneanas e do desenvolvimento neuropsicomotor.

Uso de células-tronco cultivadas ex vivo na reconstrução da superfície ocular / Use of stem cells cultured ex vivo for ocular surface reconstruction

Lesões na superfície ocular podem atingir as células-tronco do limbo e causar deficiência límbica. A deficiência límbica é caracterizada pela conjuntivalização, que pode ser definida como a invasão do epitélio conjuntival sobre a córnea. Este processo é acompanhado por graus variáveis de alterações corneanas, como neovascularização, inflamação, erosões recorrentes, defeitos epiteliais persistentes, destruição da membrana basal do epitélio e cicatrização estromal. Frequentemente, estas alterações estão associadas à diminuição da acuidade visual, fotofobia e desconforto ocular. O melhor tratamento para essa afecção não é conhecido e possibilidades variam em casos uni ou bilaterais. Entre os tratamentos disponíveis, o transplante de limbo autólogo ou alógeno é um dos mais utilizados. Para melhorar os resultados dos transplantes alógenos, alguns pesquisadores utilizam o transplante de epitélio da córnea cultivado em laboratório pela expansão ex vivo de células-tronco epiteliais límbicas. Mas devido à limitada disponibilidade de tecido autólogo do limbo e o risco de complicações associadas à imunossupressão em transplante de tecido alógeno, pesquisas de outras opções de células-tronco cultivadas ex vivo têm sido descritas em fase experimental e clínica. Essa revisão descreve os novos tipos de células-tronco cultivadas ex vivo, seus resultados atuais e potencialidades futuras.

Lesions on the ocular surface can destroy the stem cells from the limbus and cause limbal stem cell deficiency. The limbal stem cell deficiency is marked by conjunctivalization, which can be defined as the invasion of conjunctival epithelium over the cornea. This process is accompanied by varying degrees of corneal changes such as neovascularization, inflammation, recurrent erosions, persistent epithelial defects, destruction of basement membrane of epithelium and stromal healing. Often, these changes are associated with poor visual acuity, photophobia and ocular discomfort. The best treatment for this disease is not known and varies in unilateral or bilateral cases. Among the treatments available, transplantation of limbal autograft or allograft is one of the most used. To improve the outcome of allotransplantation, some researchers use the transplantation of corneal epithelium cultured in the laboratory by ex vivo expansion of limbal stem cells, but due to limited availability of autologous tissue from the limbus and the risk of complications associated with immunosuppression in allogeneic tissue transplantation, researches of others options of stem cell cultured ex vivo have been described in experimental and clinical stage. This review describes the new types of stem cells cultured ex vivo, their current results and future potential.

The use of amniotic membrane in the repair of duodenal wounds in Wistar rats / Uso da membrana amniótica no reparo de feridas duodenais em ratos Wistar

Purpose: In the search of a new material to repair duodenal wounds, a trial was conducted to assess the behavior of human amniotic membrane in the repair of the duodenal wall in rats. METHODS: Fifty Wistar rats weighing between 250 and 350g, male, were submitted to duodenotomy and randomly distributed into two groups. Group A (n=8) had no treatment and was used as the control group. In Group B (n=42) the duodenal wound was treated with a patch of human amniotic membrane. RESULTS: All animals in Group A died. In Group B no changes were observed with regards to death or the formation of duodenal fistula. All animals presented peritoneal adherences in the region on the duodenal wall repair and intestinal obstruction was observed in two animals. Healing of the duodenal wall in the region of the patch took place progressively as the post-operatory period increased, with regeneration of the mucosa and of the smooth muscle layer. CONCLUSION: From the clinical standpoint, the amniotic membrane proved to be a biological tissue which served as a temporary seal and allowed the wound to heal by second-intention, with re-establishment of the duodenal wall structure.

OBJETIVO: Na busca de um novo material para o reparo dos ferimentos duodenais, foi efetuado um estudo para avaliar o comportamento da membrana amniótica humana no reparo da parede duodenal em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 50 ratos Wistar, com peso entre 250 e 350g, machos, distribuídos, aleatoriamente, em dois grupos. Grupo A (n=8), submetido à duodenotomia sem tratamento, utilizados como controle. Grupo B (n=42), submetido a um remendo de membrana amniótica humana para tratamento de ferimento duodenal provocado. RESULTADOS: Todos os animais do grupo A foram a óbito. No grupo B não foram observadas alterações quanto a óbito ou formação de fístula duodenal. Observaram-se em todos os animais aderências peritoneais à região do reparo da parede do duodeno e obstrução intestinal em dois animais. O reparo da parede duodenal na área do remendo ocorreu de maneira progressiva com o aumento do período pós-operatório, com regeneração da mucosa e da camada muscular. CONCLUSÃO: A análise da membrana amniótica, do ponto de vista clínico, mostrou ser um tecido biológico que serviu para selar.

Tratamento cirurgico do pterigio primario: comparação entre as tecnicas de rotação de retalho conjuntival e transplante de membrana amniotica / Surgical treatment of the primary pterrygium: comparison between rotation of conjunctival flap and amniotic membrane transplant

Objetivo: Determinar se o transplante de membrana amniótica é um procedimento mais eficaz que a rotação de retalho conjuntival, no tratamento cirúrgico de pterígio primário, quanto à taxa de recidiva. Material e métodos: Foi realizado um estudo prospectivo, do tipo ensaio clínico randomizado, de 228 pacientes (228 olhos) com pterígio primário grau II. Os pacientes foram divididos em dois grupos: grupo teste (126 olhos) - exérese de pterígio seguida de transplante de membrana amniótica; grupo controle(102 olhos)- exérese de pterígio seguida de rotação de retalho conjuntival. Os procedimentos foram realizados no período de janeiro de 2001 a outubro de 2005 no bloco cirúrgico do Hospital Escola da Universidade Federal do Triângulo Mineiro. Os pacientes tiveram um seguimento de 1 ano e o critério de recidiva foi a invasão corneana por tecido fibrovascular. A análise estatística foi feita pelo teste de igualdade de duas proporções. Resultados: No grupo teste foram observados 8 quadros de recidiva (6,3%) sendo 6 em pacientes do sexo masculino e 2 no sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi de 39,6 anos, sendo que a recidiva ocorreu em média 3.3 meses pós-operatório. No grupo controle foram observadas 17 recidivas (16,7%) sendo 11 no sexo masculino e 6 no feminino.A média de idade dos pacientes foi de 35,7 anos sendo que a recidiva ocorreu em média 3,1 meses pós operatório . O z calculado foi de 2,48 evidenciando significância estatística e validando a hipótese proposta. Conclusão: O transplante de membrana amniótica é um procedimento efetivo e seguro no tratamento cirúrgico do pterígio primário apresentando baixa taxa de recidiva.

Objective: Determine the best procedure for the treatment of the surgical primary pterygium according to the recurrence rate. Design: Randomized clinical trials. Material and Methods: 228 patients (228 eyes) carrying primary pterygium level II diagnosed with biomicroscopy, having the surgical treatment from January 2001 to October 2005 in the surgical room of the School Hospital of UFTM. Patients were divided into two groups:Test group (126 eyes): exeresis of the pterygium followed by a transplant of amnionic membrana;Control group (102 eyes): exeresis of the pterygium followed by rotation of the conjunctival flap. Criterion of recidivation considered was the corneal invasion by the fibrovascular tissue in a period of a year after the surgery. Statistics analysis was done using the significance test for equality of two proportions. Results: In the test group we observed 8 tables of recidivation, being 6 in male patients and 2 in female ones. Average age of these patients was 39.6 (ranging from 22 to 53). Recidivation occurred on an average of 3.3 months (ranging from the 2nd to the 7th month). In the control group we observed 17 recidivations of the pterygium being 11 in the male sex and 06 in the female one. The average age of these patients was 35.7 years old (ranging from 20 to 50 years). Recidivation occurred on an average of 3.1 months (ranging from the 1st to the 8th month). The calculated z (2.48) was higher than the table z. Conclusions: Amniotic membrane transplantation is an effective and safe procedure for primary pterygium surgery with a relatively low recurrence rate. However, we couldn't affirm that the amniotic membrane transplant has to be considered the first choice in the primary pterygium surgery treatment.

Evolução morfométrica dos anexos embrionários e fetais bovinos obtidos por monta natural, com 10 a 70 dias da gestação / Biometrics evolution of the embryonic and fetal annexes in cows obtained by natural mating, at 10 to 70 days of gestation

O período inicial da gestação de bovinos é caracterizado por grandes perdas embrionárias. Considerando a importância deste fator no âmbito da reprodução animal foram estudados os anexos embrionários e fetais bovinos fecundados por monta natural de 15-70 dias de gestação, com o objetivo de estabelecer parâmetros morfométricos da placenta na fase inicial da gestação. Com uso de um paquímetro foram realizadas mensurações do comprimento (crânio caudal), largura (latero lateral) e altura (dorso ventral) das membranas corioalantóide e amniótica. O início da formação dos cotilédones foi observado e quantificado, assim como, o peso placentário. O peso médio do saco gestacional aumentou com o evoluir da idade gestacional, entretanto, o crescimento foi acelerado a partir de 20-30 dias de gestação. O comprimento crânio caudal e dorso ventral da membrana corioalantóide e do âmnio apresentaram crescimento lento e gradual com o evoluir dos períodos gestacionais analisados. Com 30-40 dias de gestação, os primeiro cotilédones já eram visualizados e contatos com facilidade na superfície coriônica. Os períodos de crescimento coincidiram com os maiores índices de perdas gestacionais em bovinos. Os parâmetros aqui analisados poderão servir para futuras investigações dos anexos embrionários de organismos manipulados em laboratório.

The main goal of this morphometrical study was to characterize the development of the extra-embryonic membranes of 15 to 70-day-old bovine embryos obtained by natural mating. With a millimeter paquimeter the cranio-caudal, latero-lateral and dorso-ventral measurements of chorion and amnion were determined. The development of the cotyledons and weight of the gestational sac were observed and quantified. The weight of the gestational sac increased during gestation; however, the growth was faster then 20 to 30 days. The cranial-caudal and dorsal-ventral length of the choriallantois and the amnion developed slowly and gradually with progress of the gestational period, and the cranio-caudal length decreased after 50 to 60 days of gestation, increasing in the next period. After 30 to 40 days of gestation, the first cotyledons were visualized and counted easily in the chorionic surface. The growth periods were the same of the main gestational losses in cattle. The parameters analyzed could be useful for investigations of extra-embryonic membranes in organisms manipulated in the laboratory.

Transplante de membrana amniótica em casos agudos graves de queimadura ocular química e síndrome de Stevens-Johnson / Amniotic membrane transplantation for severe acute cases of chemical ocular burn and Stevens-Johnson syndrome

OBJETIVO: Investigar o potencial terapêutico do transplante de membrana amniótica nos casos agudos graves de queimadura ocular química e síndrome de Stevens-Johnson. MÉTODOS: Foram analisados retrospectivamente os prontuários de oito pacientes, com um total de dez olhos, submetidos a transplante de membrana amniótica para tratamento de queimadura ocular química e síndrome de Stevens-Johnson na fase aguda entre janeiro de 1999 e maio de 2008 no Departamento de Oftalmologia da UNIFESP. Dados referentes a sexo, idade, grau da queimadura, etiologia, olho acometido, achados oftalmológicos, extensão da membrana amniótica, operações adicionais, tempo em dias entre a lesão e a cirurgia, acuidade visual antes e depois da cirurgia, defeito epitelial em dias, complicações e tempo de seguimento em meses foram coletados. RESULTADOS: A idade média dos pacientes foi de 35,7 ± 23,04 anos, dos quais seis eram homens e dois eram mulheres. Três pacientes (quatro olhos) apresentaram síndrome de Stevens-Johnson e cinco pacientes (seis olhos) apresentaram queimadura ocular química. O defeito epitelial foi cicatrizado em média de 27,8 ± 4,7 dias (variando de 20 a 35 dias). Todos os pacientes evoluíram com deficiência límbica em seguimento médio de 7,8 ± 2,8 meses (variando entre cinco e doze meses) e quatro olhos desenvolveram simbléfaro. CONCLUSÕES: Os resultados sugerem que o transplante de membrana amniótica representa um aditivo que pode ser realizado nos casos agudos graves de queimadura ocular química e síndrome de Stevens-Johnson com a finalidade de promover a epitelização e suprimir a inflamação e suas consequências, se comparado a outros trabalhos que trataram casos semelhantes com terapia medicamentosa somente. Por outro lado, não é capaz de evitar a deficiência límbica nesses casos, que futuramente necessitarão de transplante de células-tronco do limbo ou outras cirurgias para correção da superfície ocular.

PURPOSE: To study the therapeutic potential of amniotic membrane transplantation in cases of severe acute chemical ocular burn and Stevens-Johnson syndrome. METHODS: We retrospectively reviewed the records of eight patients, with a total of ten eyes, submitted to amniotic membrane transplantation for treatment of ocular chemical burns and Stevens-Johnson syndrome in the acute phase between January 1999 and May 2008 in the Ophthalmology Department of UNIFESP. Data relating to sex, age, degree of chemical burns, etiology, affected eye, ophthalmological findings, extension of amniotic membrane, surgeries, additional time between the injury and surgery in days, visual acuity before and after surgery, epithelial defect healing (days), complications and time of follow-up in months were collected. RESULTS: The average age of patients was 35.7 ± 23.04 years, with six men and two women. Three patients (four eyes) had Stevens-Johnson syndrome and five patients (six eyes) had chemical ocular burn. The epithelial defect was healed at an average of 27.8 ± 4.7 days (ranging from 20 and 35 days). All patients presented limbal stem cell deficiency in a median follow-up of 7.8 ± 2.8 months (ranging from six and twelve months) and four eyes developed symblepharon. CONCLUSIONS: The results suggest that the amniotic membrane transplantation represents an additive that can be carried out in the serious cases of ocular chemical burn and Stevens-Johnson syndrome with the finality of promoting the epithelialization and abolishing the inflammation and its consequences, if compared with other studies that treated similar cases with medical therapy only. On the other hand, it is not possible to avoid the limbic deficiency in these cases, which in the future will need limbal stem cell transplantation or other surgeries for correction of the ocular surface.

Transplante de células-tronco epiteliais límbicas alógenas expandidas ex vivo sobre membrana amniótica: relato de caso / Transplantation of allogenic limbal epithelial stem cells cultivated ex vivo on amniotic membrane: case report

Paciente apresentou falência de transplante de limbo e conjuntiva de doador vivo alógeno no olho direito após ceratoconjuntivite epidêmica. Após alguns meses, foi submetida a transplante de células-tronco epiteliais límbicas alógenas cultivadas ex vivo sobre membrana amniótica (primeiro caso no Brasil), tendo evoluído com epitelização total da córnea e melhora da acuidade visual. Após o 3º mês da cirurgia, iniciou-se neovascularização superficial periférica com piora da transparência corneana. A visão manteve-se 0,1 após um ano de cirurgia.

Case report of a patient who developed failure of an allogenic living related conjunctival limbal transplantation in the right eye after an episode of epidemic keratoconjunctivitis. After a few months, she underwent transplantation of allogenic limbal epithelial stem cells cultivated ex vivo on amniotic membrane (first case in Brazil). The patient evolved with total corneal epithelialization and improvement of the visual acuity. Three months after the surgery, peripheral superficial neovascularization with worsening of the corneal transparency was observed. The vision remained 0.1 after one year of the transplantation.

Assessment of the use of cryopreserved x freeze-dried amniotic membrane (AM) for reconstruction of ocular surface in rabbit model / Avaliação do uso da membrana amniótica (MA) criopreservada x liofilizada na reconstrução da superfície ocular em coelhos

PURPOSE: To determine the efficacy of freeze-dried amniotic membrane (AM) for reconstruction of the ocular surface in rabbit eyes. METHODS: The sterilized, freeze-dried amniotic membrane (lyophilized or FD-AM) is a preservative method that uses the drying by freezing process to maintain the AM well preserved for a long time even at room temperature. This paper is an experimental animal interventional study. One eye of each of 15 male New Zealand rabbits (1.5 - 3.0 kg) had the central cornea marked with a 6.0 mm trephine. The marked area was deepithelialized with a No.15 blade. The denuded corneal surface was covered as follows: Group 1: cryopreserved AM (n=6); Group 2: freeze-dried AM (n=6); and Group 3: not covered (control group, n=3). The AM in group 1 and 2 and the periphery of the denuded area in group 3 were secured with continuous 10-0 nylon sutures. The clinical evaluation was made by a blinded observer and graded on a four-point scale (1= minimal, 4= marked) for conjunctival and ciliary hyperemia, eyelid edema, corneal neovascularization, corneal opacity and reepithelialization on postoperative (PO) days 1, 7 and 30 . After PO day 30, the rabbits were euthanized and their corneas were sent for histopathological and ultrastructural analysis to evaluate tissue inflammation, reepithelialization, and basement membrane integrity. RESULTS: Two eyes in group 2 had a corneal infection and were excluded from the analysis. No statistically significant differences among the three groups were found (p>0.05) regarding the clinical evaluation on 1st, 7th and 30th PO days. On transmission electron microscopy, the basement membrane in lyophilized and control groups was more continuous and homogeneous than in the glycerol group. CONCLUSIONS: The freeze-drying method seems to be a good option to preserve human amniotic membrane to be used in ocular surface reconstruction. This preservative method reduces the preservation costs and may enhance...

OBJETIVO: Avaliar a eficácia da liofilização da membrana amniótica (MA) para a reconstrução da superfície ocular em coelhos. MÉTODOS: A liofilização é processo de preservação que mantém a MA estável durante longo tempo mesmo em temperatura ambiente. A córnea de um olho de cada coelho macho da raça Nova Zelândia foi marcada e desepitelizada. Essa área desepitelizada foi coberta com: Grupo 1: MA criopreservada (n=6); Grupo 2: MA liofilizada (n=6) e Grupo 3: Não coberta (n=3). A MA nos grupos 1 e 2 e a periferia da córnea no grupo 3 foram suturadas com nylon 10-0. A avaliação clínica foi realizada por um observador cego em relação à hiperemia, neovascularização e edema de córnea e reepitelização nos dia 1, 7 e 30 pós-operatórios. Após o dia 30 os ratos foram eutanizados e suas córneas enviadas para análise histopatológica e ultra-estrutural. RESULTADOS: Dois olhos no grupo 2 foram excluídos da análise devido à infecção. Não foi encontrada diferença estatisticamente significante entre os grupos em relação à avaliação clínica. Na microscopia eletrônica de transmissão, a membrana basal nos grupos de MA liofilizada e controle foi mais contínua e homogênea em relação ao grupo da MA criopreservada. CONCLUSÕES: O processo de liofilização parece ser boa opção para a preservação da membrana amniótica humana para utilização na reconstrução da superfície ocular.

Estudo retrospectivo da utilização do transplante de membrana amniótica em um serviço terciário de Oftalmologia / Retrospective study of amniotic membrane transplantation in a terciary ophthalmic health care service

OBJETIVO: Nos últimos anos , o transplante de membrana amniótica (MA) tem sido utilizado com freqüência na reconstrução da superfície ocular em diversas doenças oculares. Este estudo objetiva identificar as indicações mais freqüentes do transplante de MA, assim como avaliar os resultados deste procedimento. MÉTODOS: Foram analisados retrospectivamente os prontuários de 107 pacientes submetidos ao transplante de MA, avaliando a indicação do transplante de MA e a evolução do quadro no período pós-operatório. RESULTADOS: Dos 107 pacientes estudados, as indicações de MA mais freqüentes foram exérese de pterígio 33.64 por cento(n=36), defeito epitelial persistente 29.90 por cento(n=32), liberação de simbléfaro 18.69 por cento(n=20), queimadura química 6.54 por cento(n=7), cérato-conjuntivite primaveril 4.67 por cento(n=5), síndrome de Stevens-Johnson 2.80 por cento(n=3), penfigóide ocular cicatricial 1.86 por cento(n=2), ceratopatia bolhosa 1.86 por cento(n=2). No seguimento dos pacientes houve recidiva do pterígio em (6.25 por cento) nos pterígios primários e em (15 por cento) nos pterígios recidivados. Não houve recidiva nos pacientes com simbléfaro, tendo como causa pterígio recidivado. Houve fechamento do epitélio com o uso de MA nos pacientes do estudo variando de 50 a 80 por cento, dependendo da doença de base. Na fase aguda da queimadura química houve fechamento epitelial em 50 por cento dos casos. Já nos que utilizaram MA na fase crônica da queimadura a restauração da superfície ocular ocorreu em 33 por cento dos casos. Uso da MA na cérato-conjuntitivite primaveril com papilas gigantes, 80 por cento não apresentaram recidiva das papilas.Todos os pacientes que tiveram indicação de MA, devido à ceratopatia bolhosa apresentaram diminuição da dor . Os pacientes que tiveram como causa da utilização de membrana a Síndrome de Stevens-Johnson (SSJ) na fase aguda apresentaram diminuição importante do processo inflamatório. Dos pacientes que...

OBJECTIVE: During the last years amniotic membrane (AM) autograft has been frequently used for reconstruction of the ocular surface in many diseases. This study intends to analyze the major indications for AM as well the results of this procedure. METHODS: Data of 107 patients who had done AM autograft surgery were retrospectively analised regarding the indications and postoperatory follow-up. RESULTS: The indications for AM autograft was ptherygium 33.64 percent (n=36), persistent epithelial defect 29.90 percent (n=32), simblepharum 18.69 percent (n=20), chemical injury 6.54 percent(n=7), vernal conjunctivitis 4.67 percent (n=5), Stevens-Johnson 2.80 percent (n=3), ocular cicatricial penfigoid 1.86 percent (n=2), bullous keratopathy 1.86 percent(n=2). At the follow-up of ptherygium was observed recurrence between 6,25 percent(in primary ptherygium) and 15 percent (in recurrence ptherygium). No recurrence was observed in simblepharum surgery for complications due ptherygium. Recovery of epithelial integrity was between 50 and 80 percent depending the disease. In the acute phase of chemical burns recovery was observed in 50 percent, however in chronic chemical burns the recovery was only in 33 percent of the cases. The AM in vernal conjunctivitis to resolve giant papillae, 80 percent of the cases showed good evolution. In 100 percent of the case due bullous keratopathy the patients had improvement of the pain. In Steven-Johnsons syndrome (SJS) at the acute phase the patients had improevment of the inflammatory component. In the chronic phase of SJS, 50 percent of the patients had favorable evolution after the procedure. CONCLUSION: Amniotic membrane autograft showed promising results for the majority ocular surface diseases enrroled in this study. This surgical tecnic cheap and easy doing asweel a good therapeutic alternative for many ocular surface diseases.

Membrana amniótica na reconstrução da superfície ocular após exérese de carcinoma de células escamosas da conjuntiva / Amniotic membrane for ocular surface reconstruction after conjunctival squamous cell carcinoma resection

OBJETIVO: Investigar a utilização da membrana amniótica humana na reconstrução da superfície ocular após exérese de carcinoma de células escamosas da conjuntiva. MÉTODOS: A membrana amniótica foi captada a partir de parto cesárea, conservada em meio de preservação de córnea e glicerol 1:1 e armazenada a -80º C. Os critérios de inclusão foram: pacientes portadores de lesão proliferativa conjuntival com características de carcinoma de células escamosas (lesão esbranquiçada plana ou elevada com aspecto em "carne de peixe"), envolvendo conjuntiva, limbo e córnea. Oito olhos de 8 pacientes portadores de "carcinoma de células escamosas" da conjuntiva foram submetidos a cirurgia de exérese do tumor conjuntival, associado a transplante de membrana amniótica. Destes, 3 foram submetidos a epiteliectomia total da córnea e a transplante de limbo do olho contralateral. RESULTADOS: O tempo médio de seguimento foi de 17,8 meses (variação entre 10 e 35 meses). Cinco pacientes (71,4 por cento) obtiveram sucesso com o tratamento cirúrgico, com adequada reconstrução da área conjuntival retirada. Dois pacientes (28,6 por cento) obtiveram sucesso parcial, com presença de alterações cicatriciais leves (simbléfaro pequeno ou pequena fibrose). Um paciente foi excluído porque apresentou recidiva agressiva do tumor, com invasão intraocular, necessitando ser submetido a exenteração. CONCLUSÃO: O uso de membrana amniótica humana pode constituir uma importante opção para a reconstrução da superfície ocular após remoção de carcinoma de células escamosas.

PURPOSE: This study was designed to evaluate the use of human amniotic membrane for ocular surface reconstruction after conjunctival squamous cell carcinoma resection. METHODS: Amniotic membrane was obtained at the time of cesarean section and was preserved at -80ºC in glycerol and cornea culture media at a ratio of 1:1. The inclusion criteria were patients presenting proliferating lesions suggestive of squamous cell carcinoma (flat or elevated white lesions resembling "fish meat") that involve the conjunctiva, limbus and cornea. Eight eyes of 8 patients with conjunctival "squamous cell carcinoma" underwent tumor resection with amniotic membrane transplantation. Three of these cases underwent total corneal epitheliectomy and amniotic membrane transplantation associated with limbal autograft. RESULTS: Mean follow-up time was 17.8 months (range, 10-35 months). In four patients (71.4 percent) surgical treatment was successful, with good ocular surface stability. In two patients (28.6 percent) results were partially successful, with mild cicatricial alterations. One patient was excluded from the study due to aggressive tumor recurrence with intraocular invasion that needed to be removed with exenteration. CONCLUSION: This study suggests that amniotic membrane transplantation is a good alternative for ocular surface reconstruction after conjunctival squamous cell carcinoma resection.

Neovaginoplastia com membrana amniótica na síndrome de Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser / Neovaginoplasty using amniotic membrane in Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome

OBJETIVO: avaliar resultados da neovaginoplastia com utilização de enxerto amniótico humano em pacientes portadoras da síndrome de Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser (MRKH). MÉTODOS: o estudo foi uma análise retrospectiva de uma série de 28 casos de pacientes com síndrome de MRKH, tratadas entre 1990 e 2003. As pacientes foram atendidas no Ambulatório de Ginecologia Infanto-Puberal (AGIP) do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (FMRP-USP), sendo submetidas a neovaginoplastia pela técnica de McIndoe e Bannister modificada pela utilização de enxerto de membrana amniótica humana. Foram avaliadas epitelização, amplitude e profundidade das neovaginas com sete e 40 dias do procedimento e, no pós-operatório tardio, a satisfação das pacientes, a presença de desconforto e dispareunia às relações sexuais. RESULTADOS: no pós-operatório, sete pacientes (25 por cento) apresentaram estenose vaginal. Destas, seis foram submetidas a nova intervenção cirúrgica, uma teve encurtamento da neovagina, corrigido com o uso de exercícios com molde vaginal, três (10,7 por cento) tiveram fístula retovaginal, uma (3,6 por cento) fístula uterovesical e uma (3,6 por cento) teve excesso de pele no intróito vaginal - todas corrigidas com êxito com nova cirurgia. Quatro pacientes (14,3 por cento) apresentaram infecção do trato urinário. Dois meses após a cirurgia, 11 de 19 pacientes (57,8 por cento) apresentaram atividade sexual satisfatória e 42 por cento relataram dispareunia e, no período máximo de quatro anos, 20/21 pacientes (95,2 por cento) tiveram atividade sexual satisfatória e 4,8 por cento dispareunia. CONCLUSÕES: o enxerto de membrana amniótica é uma boa opção no tratamento da agenesia vaginal. O acompanhamento perioperatório envolve questões educacionais, de orientação quanto ao uso do molde e em relação à sexualidade da paciente, com vistas à redução das queixas de coito disfuncional na presença de evolução...

PURPOSE: to evaluate the results of neovaginoplasty with the use of a human amniotic graft in patients with the Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser (MRKH) syndrome. METHODS: the study was a retrospective analysis of a series of 28 patients with the MRKH syndrome conducted from 1990 to 2003. The patients were attended and treated at the Ambulatório de Ginecologia Infanto-Puberal (AGIP) of the Hospital Universitário of the Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto of the Universidade de São Paulo (FMRP-USP), being submitted to neovaginoplasty by the technique of McIndoe and Bannister, modified by the use of a human amniotic membrane graft. Epithelization, amplitude and depth of the neovaginas were evaluated 7 and 40 days after the procedure. Patient satisfaction was determined during the late postoperative period in terms of the presence of discomfort and dyspareunia during sexual relations. RESULTS: postoperatively, seven patients (25 percent) presented vaginal stenosis and six of them were submitted to a new surgical intervention, one had shortening of the neovagina, corrected with the use of exercises with a vaginal mold, three (10.7 percent) developed a rectovaginal fistula, one (3.6 percent) a uterovesical fistula, and one (3.6 percent) excess skin in the vaginal introitus - all successfully corrected with surgery. Four patients (14.3 percent) presented urinary tract infection. Two months after surgery, 11/19 patients (57.8 percent) presented satisfactory sexual activity and 42 percent dyspareunia, and within a maximum period of four years, 20/21 patients (95.2 percent) had satisfactory sexual activity and 4.8 percent dyspareunia. CONCLUSIONS: an amniotic membrane graft is a good option for the treatment of vaginal agenesis. Perioperative follow-up involves educational guidance regarding the use of the mold and regarding patient sexuality in order to reduce the complaints of dysfunctional coitus in the presence of a favorable surgical evolution...