Testate Amoebae (Amebozoa: Arcellinida) in Tropical Lakes of Central Mexico / Amebas testadas (Amebozoa, Arcellinida) en lagos tropicales del centro de México

AbstractTestate amoebae are common single-celled eukaryotic organisms in aquatic ecosystems. Despite their important role in these ecosystems, and their potential as bioindicators and paleoindicators, they remain poorly studied in Mexico. The major objectives of this study were to: 1) increase knowledge of testate amoebae in Mexico's tropical lakes, and 2) create a catalog of high-quality scanning electron micrographs that can be used for future ecological and paleoenvironmental studies. We collected surface-sediment samples from 29 lakes, located in the Transmexican Volcanic Belt, one at each lake during June and October 2011, and March 2013. Sediments were collected with an Ekman grab and preserved in anhydrous ethanol. Sub-samples were observed under a stereomicroscope and morphometric data for each species were recorded. Total diameter and aperture diameter were measured on circular tests. Irregularly shaped tests were measured for length and width of the aperture and for the size of the whole test. If a specimen possessed spines, the length of one randomly selected spine was measured. The best-preserved specimen of each taxon was photographed with an optical microscope and a scanning electron microscope (SEM). We found 41 taxa of testate amoebae belonging to the genera: Arcella, Argynnia, Centropyxis, Cucurbitella, Cyclopyxis, Cyphoderia, Difflugia, Euglypha, Lesquereusia, Pentagonia, Pseudodifflugia and Scutiglypha. Twelve species not previously reported for Mexico were recorded, along with 13 varieties. The average number of taxa recorded in each lake was eight, and the highest taxonomic richness was 18. The taxon found in the greatest number of lakes was Centropyxis aculeata var. aculeata. Taxonomic richness varied among lakes in the same region. This could reflect lake-specific differences in environmental conditions, underscoring the need for more detailed studies that include collection of data on physical and chemical variables in the lakes. Our results highlighted the need of further studies for the distribution patterns and ecology of lacustrine testate amoebae. Rev. Biol. Trop. 64 (1): 377-397. Epub 2016 March 01.

ResumenLas amebas testadas son organismos eucariontes unicelulares frecuentes en ecosistemas acuáticos. A pesar de su importante rol en estos ecosistemas, y su potencial como bioindicadores y paleoindicadores, son poco estudiados en México. Los principales objetivos de este estudio fueron: 1) incrementar el conocimiento de las amebas testadas en lagos tropicales de México y 2) crear un catálogo de microfotografías electrónicas de barrido de alta calidad que pueda ser usado en futuros estudios ecológicos y paleoambientales. Recolectamos muestras de sedimentos superficiales de 29 lagos, ubicados en la Faja Volcánica Transmexicana, una vez en cada lago durante junio y octubre 2011 y marzo 2013. Los sedimentos se recolectaron con una draga tipo Ekman y se preservaron en etanol anhidro. Las sub-muestras se observaron al microscopio estereoscópico. Para cada especie fueron registrados sus datos morfométricos. En testas circulares fueron medidos el diámetro y la apertura total. En testas irregulares fueron medidos el largo y ancho de la apertura y el tamaño de toda la testa. Si un ejemplar poseía espinas, se seleccionó una al azar y se midió su longitud. El ejemplar mejor preservado de cada taxón fue fotografiado con un microscopio óptico y en microscopio electrónico de barrido (MEB). Encontramos 41 taxa de amebas testadas pertenecientes a los géneros Arcella, Argynnia, Centropyxis, Cucurbitella, Cyclopyxis, Cyphoderia, Difflugia, Euglypha, Lesquereusia, Pentagonia, Pseudodifflugia y Scutiglypha. Se registraron 12 especies y 13 variedades que no estaban reportadas previamente en México. El número promedio de taxa registrados en cada lago fue de ocho, y la riqueza taxonómica mayor fue de 18. El taxón encontrado en el mayor número de lagos fue Centropyxis aculeata var. aculeata. La riqueza taxonómica compartida por lagos de la misma región no fue muy similar. Esto puede reflejar diferencias en las condiciones ambientales, evidenciando la necesidad de elaborar estudios más detallados que incluyan la recolección de datos de las variables físico-químicas en los lagos. Nuestros resultados resaltan la necesidad de estudios posteriores acerca de los patrones de distribución y la ecología de las amebas testadas lacustres.

Validación del método de formación de coágulo para la determinación de endotoxinas bacterianas en inmunoglobulinas (IgG) nacionales / Method validation clot formation for determining bacterial endotoxins national immunoglobulin (IgG)

Las endotoxinas bacterianas son lipopolisacáridos (LPS) localizados exclusivamente en la membrana externa de las bacterias gramnegativas, su ingreso al organismo a través de productos parenterales puede causar fiebre, taquicardia, aumento de presión sanguínea y en algunos casos ocasiona la muerte. Existen normativas internacionales acerca del límite de endotoxina para productos farmacéuticos inyectables, tal como las inmunoglobulinas (IgG), que pueden estar expuestas a contaminación durante el proceso de producción y por lo tanto es necesario realizar pruebas para la determinación de endotoxinas bacterianas. El método del lisado de amebocitos de Limulus (LAL) es una de ellas.Este método se fundamenta en la reacción del LAL, el cual es un extracto de células sanguíneas que interaccionan con endotoxinas, activando la cascada del proceso de coagulación y originando la formación de la coagulina. En diversas ocasiones algunas proteínas intervienen en la activación o desactivación de esta cascada, bien sea potenciando o inhibiendo la formación del coágulo. En el caso de la potenciación, el calentamiento es uno de los métodos recomendados por la farmacopea estadounidense (USP) para eliminar interferencias, puesto que desnaturaliza las proteínas que causan la potenciación sin pérdida de endotoxinas. En este trabajo se validó la determinación de endotoxinas bacterianas en IgG mediante el método LAL, el cual es un método rápido y de fácilejecución, por lo que puede implementarse como ensayo de rutina en control de calidad y por ende nos permite agilizar las Liberaciones de Lotes de estos productos.

Bacterial endotoxins are lipopolysaccharides (LPS) located exclusively in the outer membrane of gram-negative bacteria, their entry into the body through parenteral products can cause fever, tachycardia, increased blood pressure and in some cases cause death. There are international standards for endotoxin limit for injectable pharmaceuticals, such as immunoglobulins (IgG), which may be exposed to contamination during the production process and therefore it is necessary to test for determination of bacterial endotoxins. The method of the Limulus amebocyte lysate (LAL) is one of them. This method is based on the LAL reaction, which is an extract of blood cells which interact with endotoxin, triggering the cascade of the coagulation process and causing the formation of coagulin. On several occasions some proteins involved in the activation or deactivation of this waterfall, either by enhancing or inhibiting clot formation. In the case of empowerment, the warming is one of those recommended by the US Pharmacopoeia (USP) to eliminate interference, since denatures proteins that cause endotoxin enhancement lossless methods. In this paper the determination of bacterial endotoxins in IgG was standardized by the LAL method, which is quick and easy to implement method, which can be implemented as a routine test in quality control and thus allows us to streamline releases Lots of these products.

Cancer metastases: challenges and opportunities

Cancer metastasis is the major cause of cancer morbidity and mortality, and accounts for about 90% of cancer deaths. Although cancer survival rate has been significantly improved over the years, the improvement is primarily due to early diagnosis and cancer growth inhibition. Limited progress has been made in the treatment of cancer metastasis due to various factors. Current treatments for cancer metastasis are mainly chemotherapy and radiotherapy, though the new generation anti-cancer drugs (predominantly neutralizing antibodies for growth factors and small molecule kinase inhibitors) do have the effects on cancer metastasis in addition to their effects on cancer growth. Cancer metastasis begins with detachment of metastatic cells from the primary tumor, travel of the cells to different sites through blood/lymphatic vessels, settlement and growth of the cells at a distal site. During the process, metastatic cells go through detachment, migration, invasion and adhesion. These four essential, metastatic steps are inter-related and affected by multi-biochemical events and parameters. Additionally, it is known that tumor microenvironment (such as extracellular matrix structure, growth factors, chemokines, matrix metalloproteinases) plays a significant role in cancer metastasis. The biochemical events and parameters involved in the metastatic process and tumor microenvironment have been targeted or can be potential targets for metastasis prevention and inhibition. This review provides an overview of these metastasis essential steps, related biochemical factors, and targets for intervention.