Optimization of parameters for obtaining callus, suspension, and root cultures of meadowsweet (filipendula ulmaria) to isolate the largest number of biologically active substances with geroprotective properties / Otimização de parâmetros para obtenção de culturas de calos, suspensão e raiz de Ulmária (Filipendula ulmaria) para isolar o maior número de substâncias biologicamente ativas com propriedades geroprotetoras

The study of biologically active substances-secondary metabolites of plants that exhibit geroprotective properties is an actual and popular direction in medicine to prevent early aging. This work aims to select the cultivation parameters for obtaining in vitro cell cultures of meadowsweet containing the largest amount of biologically active substances (BAS) for their further extraction as candidate substances for geroprotectors. To specify the effectiveness of the selected cell culture cultivation parameters, biomass growth for callus and root cultures, growth index, specific growth rate, and viability for suspension cultures was carried out. The study results made it possible to select the nutrient media for the cultivation of cell cultures of meadowsweet. It has been found that the greater the antioxidant activity of the extracts, the greater the antimicrobial properties it exhibits. In this study, cell cultures in vitro and alcohol extracts from the plant Filipendula ulmaria were considered as raw materials rich in candidate substances for geroprotectors. According to the data obtained, the plant is rich in hydroxybenzoic and salicylic acids, spireoside, avicularin, and hyperoside.

O estudo de substâncias biologicamente ativas - metabólitos secundários de plantas que apresentam propriedades geroprotetoras - é uma tendência atual e popular no campo da medicina para a prevenção do envelhecimento precoce. O objetivo deste trabalho foi selecionar os parâmetros de cultivo para obtenção de culturas celulares in vitro de Ulmária contendo a maior quantidade de substâncias biologicamente ativas (SBA), para sua posterior extração como substâncias candidatas a serem geroprotetoras. Para especificar a eficácia dos parâmetros selecionados de cultivo em cultura de células, foi realizada a análise de crescimento de biomassa para culturas de calos e raízes, índice de crescimento, taxa de crescimento específica e viabilidade para culturas em suspensão. Os resultados do estudo possibilitaram a seleção do meio nutriente para o cultivo de células de Ulmária. Verificou-se que, quanto maior a atividade antioxidante dos extratos, maiores eram as propriedades antimicrobianas exibidas. Neste estudo, culturas celulares in vitro e extratos alcoólicos da planta Filipendula ulmaria foram considerados matérias-primas ricas em substâncias candidatas a serem geroprotetoras. De acordo com os dados obtidos, a planta é rica em ácidos hidroxibenzoico e salicílico, espirosídeo, avicularina e hiperosídeo.

Antimicrobial and antioxidant activity of Panax ginseng and Hedysarum neglectum root crop extracts / Atividade antimicrobiana e antioxidante de extratos de raízes de Panax ginseng e Hedysarum neglectum

In order to ensure the timely and uninterrupted supply of medicinal plant raw materials, the methods of cultivation of plant cell cultures, namely, the production of plant root cultures, are relevant. In this paper, the geroprotective potential of Hedysarum neglectum Ledeb and Panax ginseng C. A. Mey root cultures is studied. They were cultured under in vitro conditions by transforming the rhizome (H. neglectum) and seed seedlings (P. ginseng) with Agrobacterium rhizogenes 15834 Swiss. To identify the geroprotective potential, the antimicrobial disc-diffusion method and the antioxidant activity were analyzed by titration of KMnO4 extracts of plant root cultures. The qualitative and quantitative composition was analyzed using high-performance liquid chromatography, thin-layer chromatography, and gas chromatography with mass spectrometry. In the course of the work, the presence of antimicrobial and antioxidant activity of plant root culture extracts was established. Biologically active substances contained in extracts of Hedysarum neglectum Ledeb root crops and Panax ginseng C. A. Mey are characterized by geroprotective potential, so they can act as a source of natural antioxidants in the functional nutrition of the geroprotective orientation.

Para garantir o abastecimento em tempo e ininterrupto de matérias-primas de plantas medicinais, são relevantes os métodos de cultivo de culturas de células vegetais, nomeadamente a produção de culturas de raízes vegetais. Neste trabalho, foi estudado o potencial geroprotetor de culturas de raízes de Hedysarum neglectum Ledeb e Panax ginseng C. A. Mey. Eles foram cultivados em condições in vitro pela transformação do rizoma (H. neglectum) e mudas de sementes (P. ginseng) com Agrobacterium rhizogenes 15834 Swiss. Para identificar o potencial geroprotetor, o método antimicrobiano de difusão em disco e a atividade antioxidante foram analisados por titulação de extratos de KMnO4 de raízes de plantas. A composição qualitativa e quantitativa foi analisada por cromatografia líquida de alta eficiência, cromatografia em camada delgada e cromatografia gasosa com espectrometria de massa. No decorrer do trabalho, foi constatada a presença de atividade antimicrobiana e antioxidante dos extratos de raízes de plantas. Substâncias biologicamente ativas contidas em extratos de raízes de H. neglectum Ledeb e P. ginseng C. A. Mey são caracterizadas pelo potencial geroprotetor, podendo atuar como fonte de antioxidantes naturais na nutrição funcional da orientação geroprotetora.

Optimization of parameters for obtaining callus, suspension, and root cultures of meadowsweet (filipendula ulmaria) to isolate the largest number of biologically active substances with geroprotective properties

Abstract The study of biologically active substances-secondary metabolites of plants that exhibit geroprotective properties is an actual and popular direction in medicine to prevent early aging. This work aims to select the cultivation parameters for obtaining in vitro cell cultures of meadowsweet containing the largest amount of biologically active substances (BAS) for their further extraction as candidate substances for geroprotectors. To specify the effectiveness of the selected cell culture cultivation parameters, biomass growth for callus and root cultures, growth index, specific growth rate, and viability for suspension cultures was carried out. The study results made it possible to select the nutrient media for the cultivation of cell cultures of meadowsweet. It has been found that the greater the antioxidant activity of the extracts, the greater the antimicrobial properties it exhibits. In this study, cell cultures in vitro and alcohol extracts from the plant Filipendula ulmaria were considered as raw materials rich in candidate substances for geroprotectors. According to the data obtained, the plant is rich in hydroxybenzoic and salicylic acids, spireoside, avicularin, and hyperoside.

Resumo O estudo de substâncias biologicamente ativas metabólitos secundários de plantas que apresentam propriedades geroprotetoras é uma tendência atual e popular no campo da medicina para a prevenção do envelhecimento precoce. O objetivo deste trabalho foi selecionar os parâmetros de cultivo para obtenção de culturas celulares in vitro de Ulmária contendo a maior quantidade de substâncias biologicamente ativas (SBA), para sua posterior extração como substâncias candidatas a serem geroprotetoras. Para especificar a eficácia dos parâmetros selecionados de cultivo em cultura de células, foi realizada a análise de crescimento de biomassa para culturas de calos e raízes, índice de crescimento, taxa de crescimento específica e viabilidade para culturas em suspensão. Os resultados do estudo possibilitaram a seleção do meio nutriente para o cultivo de células de Ulmária. Verificou-se que, quanto maior a atividade antioxidante dos extratos, maiores eram as propriedades antimicrobianas exibidas. Neste estudo, culturas celulares in vitro e extratos alcoólicos da planta Filipendula ulmaria foram considerados matérias-primas ricas em substâncias candidatas a serem geroprotetoras. De acordo com os dados obtidos, a planta é rica em ácidos hidroxibenzoico e salicílico, espirosídeo, avicularina e hiperosídeo.

Antimicrobial and antioxidant activity of Panax ginseng and Hedysarum neglectum root crop extracts

Abstract In order to ensure the timely and uninterrupted supply of medicinal plant raw materials, the methods of cultivation of plant cell cultures, namely, the production of plant root cultures, are relevant. In this paper, the geroprotective potential of Hedysarum neglectum Ledeb and Panax ginseng C. A. Mey root cultures is studied. They were cultured under in vitro conditions by transforming the rhizome (H. neglectum) and seed seedlings (P. ginseng) with Agrobacterium rhizogenes 15834 Swiss. To identify the geroprotective potential, the antimicrobial disc-diffusion method and the antioxidant activity were analyzed by titration of KMnO4 extracts of plant root cultures. The qualitative and quantitative composition was analyzed using high-performance liquid chromatography, thin-layer chromatography, and gas chromatography with mass spectrometry. In the course of the work, the presence of antimicrobial and antioxidant activity of plant root culture extracts was established. Biologically active substances contained in extracts of Hedysarum neglectum Ledeb root crops and Panax ginseng C. A. Mey are characterized by geroprotective potential, so they can act as a source of natural antioxidants in the functional nutrition of the geroprotective orientation.

Resumo Para garantir o abastecimento em tempo e ininterrupto de matérias-primas de plantas medicinais, são relevantes os métodos de cultivo de culturas de células vegetais, nomeadamente a produção de culturas de raízes vegetais. Neste trabalho, foi estudado o potencial geroprotetor de culturas de raízes de Hedysarum neglectum Ledeb e Panax ginseng C. A. Mey. Eles foram cultivados em condições in vitro pela transformação do rizoma (H. neglectum) e mudas de sementes (P. ginseng) com Agrobacterium rhizogenes 15834 Swiss. Para identificar o potencial geroprotetor, o método antimicrobiano de difusão em disco e a atividade antioxidante foram analisados por titulação de extratos de KMnO4 de raízes de plantas. A composição qualitativa e quantitativa foi analisada por cromatografia líquida de alta eficiência, cromatografia em camada delgada e cromatografia gasosa com espectrometria de massa. No decorrer do trabalho, foi constatada a presença de atividade antimicrobiana e antioxidante dos extratos de raízes de plantas. Substâncias biologicamente ativas contidas em extratos de raízes de H. neglectum Ledeb e P. ginseng C. A. Mey são caracterizadas pelo potencial geroprotetor, podendo atuar como fonte de antioxidantes naturais na nutrição funcional da orientação geroprotetora.

Actividad antimicrobiana de extractos de plantas frente a Staphylococcus aislados de pacientes con conjuntivitis bacteriana / Antimicrobial Activity of Plant Extracts against Isolated Staphylococcus Infection in Patients with Bacterial Conjunctivitis / Atividade antimicrobiana de extratos vegetais contra Staphylococcus isolados de pacientes com conjuntivite bacteriana

Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis son los principales agentes etiológicos de las conjuntivitis bacterianas, que al tratarse con antibióticos de manera empírica, incrementan la resistencia antimicrobiana después de exposiciones repetidas. Se están buscando alternativas naturales para el tratamiento de infecciones bacterianas autolimitadas de la conjuntiva. Objetivo: determinar la actividad antimicrobiana de ocho extractos de las plantas frente a bacterias aisladas de pacientes con conjuntivitis bacterianas. Materiales y métodos: se tomaron muestras de 15 pacientes con conjuntivitis bacterianas. Se cultivaron en agar sangre y chocolate durante 24 h a 37 °C y se identificaron mediante el sistema automatizado vitek y pruebas de susceptibilidad antimicrobiana por el método de Kirby-Bauer. A cada aislamiento identificado con el género Staphylococcus se le evaluó su susceptibilidad frente a siete extractos: Ocimum basilicum, Sambucus nigra L., Delphinium elatum, Calendula officinalis, Bixa ore-llana (parte aérea y fruto independiente), Clinopodium brownei y Laurus nobilis, con un uso tradicional reportado para el tratamiento de infecciones oculares. Resultados: las bacterias aisladas con más frecuencia fueron S. epidermidis, S. hominis y S. aureus, las cuales presentaron resistencia antimicrobiana a oxacilina, tetraciclinas y eritromicina. Todos los aislamientos fueron inhibidos por los extractos de O. basilicum (cmi: >0.9 mg/mL) y L. nobilis (cmi: hasta 15 mg/mL). Conclusión: los extractos de C. officinalis y D. elatum tuvieron actividad antimicrobiana solo frente a los aislados con mayor sensibilidad antimi-crobiana. Los extractos etanólicos de O. basilicum y L. nobilis pueden ser una alternativa de tratamiento de las infecciones de la conjuntiva.

Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis are the primary etiological agents of bacterial conjunctivitis which are empirically treated with antibiotics. This results in an increase in antimicrobial resistance due to repeated exposure. Currently, natural treatment alternatives are being sought for self-limited bacterial infections of the conjunctiva. Objective: To determine the antimicrobial activity of eight extracts from Colombian plants against bacteria isolated from patients with bacterial conjunctivitis. Materials and methods: Samples were taken from 15 patients with bacterial conjunctivitis which were grown on blood and chocolate agar for 24 h at 37 °C. These samples were identified by the vitek automated system and antimicrobial susceptibility tests by the Kirby Bauer method. Each isolate identified with the genus Staphylococcus was evaluated for susceptibility to the following eight plant extracts of seven plant: Ocimum basilicum (basil), Sambucus nigra L. (elderberry), Delphinium elatum(belladonna), Calendula officinalis (marigold), Bixa orellana (annatto) (aerial part and independent fruit), Clinopodium brownei (pennyroyal), and Laurus nobilis (laurel), with traditional use previously reported for treating eye infections. Results: The most frequently isolated bacteria were S. epidermidis, S. hominis, and S. aureus, which exhibited antimicrobial resistance mainly to oxacillin, tetracyclines, and erythromycin. All isolates were inhibited by O. basilicum extracts (mic > 0.9 mg/mL) and L. nobilis (mic < 15 mg/mL). Conclusion: The extracts of C. officinalis y D. elatum showed antimicrobial activity only against isolates with higher antimicrobial sensitivity. Ethanolic extracts of O. basilicum y L. nobilis can be used as an alternative treatment for infections of the anterior segment of the eye.

Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis são os principais agentes etiológicos da conjuntivite bacteriana, estes são tratados empiricamente com antibióticos, causando aumento da resistência antimicrobiana após repetidas exposições aos mesmos. Atualmente, estão sendo estudadas alternativas naturais para o tratamento de infecções bacterianas autolimitadas da conjuntiva. Objetivo: determinar a atividade antimicrobiana de oito extratos de sete vegetais contra bactérias isoladas de pacientes com conjuntivite bacteriana. Materiais e métodos: foram retiradas amostras de 15 pacientes com conjuntivite bacteriana. As amostras foram cultivadas em ágar sangue e ágar chocolate por 24 horas a 37°C e os isolados foram identificados pelo sistema automatizado vitek, além de testes de susce-tibilidade antimicrobiana pelo método Kirby Bauer. Cada isolado identificado como sendo pertencente ao gênero Staphylococcus foi avaliado quanto à suscetibilidade a oito extratos vegetais: Ocimum basili-cum (manjericão), Sambucus nigra L. (sabugueiro), Delphinium elatum (belladona), Calendula officinalis(calêndula), Bixa orellana (urucum; parte aérea e fruto independente), Clinopodium brownei (poejo) e Laurus nobilis (louro), anteriormente relatados como uso tradicional para o tratamento de infecções ocu-lares. Resultados: as bactérias mais frequentemente isoladas foram S. epidermidis, S. hominis e S. aureus, que apresentaram resistência antimicrobiana principalmente à oxacilina, tetraciclinas e eritromicina. Todos os isolados foram inibidos por extratos de O. basilicum (cim: >0,9 mg/mL) e L. nobilis (cim: até 15 mg/mL). Conclusão: os extratos de C. officinalis e D. elatum apresentaram atividade antimicrobiana apenas contra os isolados com maior sensibilidade antimicrobiana. Os extratos etanólicos de O. basilicum e L. nobilis podem ser uma alternativa de tratamento para infecções conjuntivais.

Avaliação da atividade antimicrobiana e antitumoral, frente ao sarcoma 180, do extrato bruto de luffa operculata cogn. (cucurbitaceae) / Assessment of antimicrobial and anti-tumor activity, against sarcoma 180, of the crude extract of luffa operculata cogn. (cucurbitaceae) / Evaluación de la actividad antimicrobiana y antitumoral frente a sarcoma 180 del extracto crudo de luffa operculata cogn. (cucurbitaceae)

Luffa operculata Cogn. pertence à família Cucurbitaceae, sendo popularmente denominada como buchinha, cabaçinha e purga-dos-paulistas. Sua análise fitoquímica demonstrou a presença de glicosídeos, saponina e resina, esteróis livres, ácidos orgânicos, fenóis e, com ausência de taninos. Além disso, essa família é produtora de triterpenos com esqueletos modificados denominados de cucurbitacinas, substâncias de alto valor farmacológico. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antitumoral, frente ao Sarcoma 180, do extrato bruto da Luffa operculata Cogn.. No ensaio antimicrobiano foram utilizadas espécimes bacterianas e fúngicas da origem clínica e de coleção. Para analisar a atividade antitumoral, células tumorais foram implantadas na região axilar de camundongos albinos Swiss (Mus musculus). O grupo controle recebeu solução salina 0,9% e no grupo padrão administrou-se metotrexato (10 mg/kg de peso corpóreo). Os grupos tratados receberam por via intraperitoneal doses nas concentrações de 0,3, 0,6 ou 1,0 mg/kg de peso corpóreo do extrato bruto etanólico de Luffa operculata Cogn.. Os resultados demonstraram que o extrato do Luffa operculata Cogn. apresenta atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Candida albicans e Candida tropicalis. No que diz respeito a atividade antitumoral, os animais tratados com o extrato nas doses 0,3 e 0,6 mg/kg não apresentaram redução relevante dos tumores de Sarcoma 180, quando comparado com o grupo controle. Entretanto, os animais tratados com a dose 1,0 mg/kg obtiveram índice de inibição de 61,7%. Dessa forma, concluímos que o extrato bruto de Luffa operculata Cogn. apresenta atividade antimicrobiana e, na dose de 1 mg/kg, apresenta atividade antitumoral reduzindo significativamente os tumores de Sarcoma 180.

Luffa operculata Cogn. belongs to the Cucurbitaceae family, popularly known as buchinha, cabaçinha and purga-dos-paulistas. Its phytochemical analysis demonstrated the presence of glycosides, saponin and resin, free sterols, organic acids, phenols and the absence of tannins. In addition, this family produces triterpenes with modified skeletons called cucurbitacins, substances of high pharmacological value. This work aimed to evaluate the antimicrobial and antitumor activity, against Sarcoma 180, of the crude extract of Luffa operculata Cogn.. In the antimicrobial assay, bacterial and fun- gal specimens of clinical and collection origin were used. To analyze the antitumor activ- ity tumor cells were implanted in the axillary region in albino Swiss mice (Mus musculus). The control group received 0.9% saline solution; and the standard group received meth- otrexate (10 mg/kg per body weight). The treated groups received intraperitoneal doses at concentrations of 0.3, 0.6; and 1.0 mg/kg per body weight of crude ethanolic extract of Luffa operculata Cogn., respectively. The results demonstrated that the extract of Luffa operculata Cogn. has antimicrobial activity against Staphylococcus aureus, Staphylococ- cus epidermidis, Candida albicans, and Candida tropicalis. Concerning antitumor activ- ity, the animals treated with the extract at doses of 0.3 and 0.6 mg/kg did not show a relevant reduction in Sarcoma 180 tumors, when compared to the control group. How- ever, animals treated with a dose of 1mg/kg had an inhibition rate of 61.7%. Thus, we concluded that the crude extract of Luffa operculata Cogn. it has antimicrobial activity; and only at the highest dose (1 mg/kg) did it significantly reduce Sarcoma 180 tumors. KEYWORDS: Luffa Operculata Cogn.; Antimicrobian Activity; Sarcoma 180.

Luffa operculata Cog. pertenece a la familia de las Cucurbitáceas, siendo popularmente conocida como buchinha, cabaçinha y purga-dos-paulistas. Su análisis fi- toquímico demostró la presencia de glucósidos, saponina y resina, esteroles libres, ácidos orgánicos, fenoles y ausencia de taninos. Además, esta familia es produtora de triterpenos con esqueletos modificados llamados cucurbitacinas, sustancias de alto valor farmacoló- gico. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar la actividad antimicrobiana y antitumoral, contra el Sarcoma 180, del extracto crudo de Luffa operculata Cogn.. En el ensayo anti- microbiano se utilizaron especímenes bacterianos y fúngicos de origen clínico y de co- lección. Para analizar la actividad antitumoral, se implantaron células tumorales en la región axilar de ratones albinos suizos (Mus musculus). El grupo control recibió solución salina al 0,9% y el grupo estándar recibió metotrexato (10 mg/kg por peso corporal). Los grupos tratados recibieron dosis intraperitoneales a concentraciones de 0,3, 0,6 y 1,0 mg/kg por peso corporal de extracto etanólico crudo de Luffa operculata Cogn., respec- tivamente. Los resultados demostraron que el extracto de Luffa operculata Cogn. tiene actividad antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Candida albicans y Candida tropicalis. En cuanto a la actividad antitumoral, los animales tratados con el extracto a dosis de 0,3 y 0,6 mg/kg no mostraron una reducción relevante de tumores Sarcoma 180, al compararlos con el grupo control. Sin embargo, los animales tratados con una dosis de 1 mg/kg tuvieron una tasa de inhibición del 61,7 %. Por lo tanto, concluimos que el extracto crudo de Luffa operculata Cogn. tiene actividad antimicro- biana y solo en la dosis más alta (1 mg/kg) redujo significativamente los tumores Sarcoma 180.

Evaluation of methanolic crude extract of Linum usitatissimum for the removal of biofilm in diabetic foot isolates / Avaliação do extrato em bruto metanólico de Linum usitatissimum para remoção de biofilmes em isolados diabéticos de pé

Abstract Linum usitatissimum L is a widely used traditionally for multiple ailments. The present research was carried out to explore the antimicrobial, and anti-biofilm activity of crude extract of Linum usitatissimum L (Lu. Cr). Phytochemical and proximate analyses were performed. The bandages of diabetic foot patients were collected from the various hospitals. The bandages were cultured to isolate the bacterial strains present on it. The disc diffusion method was used to identify the antimicrobial potential whereas the minimum inhibitory concentration of the Lu.Cr were also determined. Proximate analysis confirms moisture content 8.33%, ash content 4.33%, crude protein 21.20%, crude fat 49.2% and crude fiber 5.63%. It was revealed that Gram-positive bacteria are most prevalent among all study groups. Lu.Cr possess significant bactericidal potential against S. aureus among all other microbes. Owing to this potential, linseed coated bandages can be used alternatively for the treatment of diabetic foot.

Resumo Linum usitatissimum L é amplamente utilizado tradicionalmente para doenças múltiplas. O presente trabalho foi realizado para explorar a atividade antimicrobiana e antibiofilme do extrato bruto de Linum usitatissimum L (Lu.Cr). Foram realizadas análises fitoquímicas e aproximadas. As ataduras de pacientes diabéticos com pé foram recolhidas nos vários hospitais. As bandagens foram cultivadas para isolar as cepas bacterianas presentes nas mesmas. O método de difusão em disco foi utilizado para identificar o potencial antimicrobiano e a concentração inibitória mínima do Lu.Cr também foi determinada. A análise aproximada confirma o teor de umidade 8,33%, teor de cinzas 4,33%, proteína bruta 21,20%, gordura bruta 49,2% e fibra bruta 5,63%. Foi revelado que as bactérias Gram-positivas são mais prevalentes entre todos os grupos de estudo. Lu.Cr possui potencial bactericida significativo contra S. aureus entre todos os outros micróbios. Devido a esse potencial, as ligaduras revestidas com linhaça podem ser utilizadas alternativamente para o tratamento do pé diabético.

Portrayal of Punica granatum L. peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation / Retrato do extrato de casca de Punica granatum L. por meio de cromatografia líquida de alto desempenho e avaliação da atividade antimicrobiana

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Evaluation of methanolic crude extract of Linum usitatissimum for the removal of biofilm in diabetic foot isolates / Avaliação do extrato em bruto metanólico de Linum usitatissimum para remoção de biofilmes em isolados diabéticos de pé

Linum usitatissimum L is a widely used traditionally for multiple ailments. The present research was carried out to explore the antimicrobial, and anti-biofilm activity of crude extract of Linum usitatissimum L (Lu. Cr). Phytochemical and proximate analyses were performed. The bandages of diabetic foot patients were collected from the various hospitals. The bandages were cultured to isolate the bacterial strains present on it. The disc diffusion method was used to identify the antimicrobial potential whereas the minimum inhibitory concentration of the Lu.Cr were also determined. Proximate analysis confirms moisture content 8.33%, ash content 4.33%, crude protein 21.20%, crude fat 49.2% and crude fiber 5.63%. It was revealed that Gram-positive bacteria are most prevalent among all study groups. Lu.Cr possess significant bactericidal potential against S. aureus among all other microbes. Owing to this potential, linseed coated bandages can be used alternatively for the treatment of diabetic foot.

Linum usitatissimum L é amplamente utilizado tradicionalmente para doenças múltiplas. O presente trabalho foi realizado para explorar a atividade antimicrobiana e antibiofilme do extrato bruto de Linum usitatissimum L (Lu.Cr). Foram realizadas análises fitoquímicas e aproximadas. As ataduras de pacientes diabéticos com pé foram recolhidas nos vários hospitais. As bandagens foram cultivadas para isolar as cepas bacterianas presentes nas mesmas. O método de difusão em disco foi utilizado para identificar o potencial antimicrobiano e a concentração inibitória mínima do Lu.Cr também foi determinada. A análise aproximada confirma o teor de umidade 8,33%, teor de cinzas 4,33%, proteína bruta 21,20%, gordura bruta 49,2% e fibra bruta 5,63%. Foi revelado que as bactérias Gram-positivas são mais prevalentes entre todos os grupos de estudo. Lu.Cr possui potencial bactericida significativo contra S. aureus entre todos os outros micróbios. Devido a esse potencial, as ligaduras revestidas com linhaça podem ser utilizadas alternativamente para o tratamento do pé diabético.

Portrayal of Punica granatum L peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation / Retrato do extrato de casca de Punica granatum L por meio de cromatografia líquida de alto desempenho e avaliação da atividade antimicrobiana

ncreasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These [...].

A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia [...].

Evaluation of methanolic crude extract of Linum usitatissimum for the removal of biofilm in diabetic foot isolates

Abstract Linum usitatissimum L is a widely used traditionally for multiple ailments. The present research was carried out to explore the antimicrobial, and anti-biofilm activity of crude extract of Linum usitatissimum L (Lu. Cr). Phytochemical and proximate analyses were performed. The bandages of diabetic foot patients were collected from the various hospitals. The bandages were cultured to isolate the bacterial strains present on it. The disc diffusion method was used to identify the antimicrobial potential whereas the minimum inhibitory concentration of the Lu.Cr were also determined. Proximate analysis confirms moisture content 8.33%, ash content 4.33%, crude protein 21.20%, crude fat 49.2% and crude fiber 5.63%. It was revealed that Gram-positive bacteria are most prevalent among all study groups. Lu.Cr possess significant bactericidal potential against S. aureus among all other microbes. Owing to this potential, linseed coated bandages can be used alternatively for the treatment of diabetic foot.

Resumo Linum usitatissimum L é amplamente utilizado tradicionalmente para doenças múltiplas. O presente trabalho foi realizado para explorar a atividade antimicrobiana e antibiofilme do extrato bruto de Linum usitatissimum L (Lu.Cr). Foram realizadas análises fitoquímicas e aproximadas. As ataduras de pacientes diabéticos com pé foram recolhidas nos vários hospitais. As bandagens foram cultivadas para isolar as cepas bacterianas presentes nas mesmas. O método de difusão em disco foi utilizado para identificar o potencial antimicrobiano e a concentração inibitória mínima do Lu.Cr também foi determinada. A análise aproximada confirma o teor de umidade 8,33%, teor de cinzas 4,33%, proteína bruta 21,20%, gordura bruta 49,2% e fibra bruta 5,63%. Foi revelado que as bactérias Gram-positivas são mais prevalentes entre todos os grupos de estudo. Lu.Cr possui potencial bactericida significativo contra S. aureus entre todos os outros micróbios. Devido a esse potencial, as ligaduras revestidas com linhaça podem ser utilizadas alternativamente para o tratamento do pé diabético.

Portrayal of Punica granatum L. peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus / Atividade antagonista de bactérias lácticas isoladas de queijos Minas artesanais contra Brucella abortus

This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis,n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.(AU)

Ensayo in vitro de extractos de Lippia graveolens y Lippia alba contra Aeromonas spp aisladas de tilapia (Oreochromis niloticus) / In vitro assay of Lippia graveolens and Lippia alba extracts against Aeromonas spp isolated from tilapia (Oreochromis niloticus) / Ensaio in vitro de extratos da Lippia graveolens e Lippia alba sobre Aeromonas spp isolados de tilápia (Oreochromis niloticus)

Resumen El presente estudio evaluó la actividad antimicrobiana de extractos y aceites esenciales de Lippia graveolens y Lippia alba, frente a nueve cepas de Aeromonas spp., aisladas de Oreochromis niloticus. Los extractos crudos se obtuvieron por la técnica de percolación y a través de la extracción de CO2 supercrítico, mientras que los aceites esenciales se realizaron mediante la técnica de hidrodestilación empleando un equipo Clevenger. La actividad antimicrobiana para cada extracto y aceite esencial se verificó mediante el método de difusión en disco a las 24 horas. El aceite esencial de L. graveolens mostró mayor efectividad para inhibir patógenos bacterianos de peces (100%), en comparación con los extractos. Se obtuvo un diámetro de inhibición que osciló entre 25,20 a 36,94 mm. Los extractos de fluido supercrítico y de la técnica de percolación con acetato de etilo y ciclohexano presentaron la misma efectividad (77,78%). El extracto crudo obtenido con etanol al 95% mostró efecto antimicrobiano limitado (22,22%), presentando el menor halo de inhibición (8,34 y 9,57 mm). Por otro parte, L. alba mostró menor actividad antibacteriana. El aceite esencial inhibió únicamente el 66,67% de las bacterias patógenas, presentando un halo de inhibición que oscila entre 10,68 a 16,29 mm. El resultado de este estudio indica que los aceites esenciales de L. graveolens y L. alba son una alternativa prometedora para el control del crecimiento de Aeromonas spp.

Abstract This study evaluated the antimicrobial activity of Lippia graveolens and Lippia alba extracts and essential oils against nine strains of Aeromonas spp., isolated from Oreochromis niloticus. The crude extracts were obtained by percolation technique and CO2 supercritical fluid extraction, while the essential oils by applying hydro-distillation technique using a Clevenger apparatus. The antimicrobial activity for each extract and essential oils was verified through the disc diffusion method at 24 hours. The essential oil of L. graveolens showed higher effectiveness to inhibit fish bacterial pathogens (100%) than the extracts, revealing an inhibition zone diameter that ranged from 25.20 - 36.94 mm. The extracts from supercritical fluid and from the percolation technique with ethyl acetate and cyclohexane presented the same effectiveness (77.78%). The crude extract obtained with ethanol 95% showed limited antimicrobial effect (22.22%), presenting the smallest inhibition zone (ranged from 8.34 to 9.57 mm). On the other hand, L. alba displayed a lower antibacterial activity, being the essential oil 66.67% effective, presenting an inhibition zone ranging between 10.68 to 16.29 mm. The result of this study indicates that essential oils from both L. graveolens and L. alba offer a promising alternative for the control of Aeromonas spp. growth.

Resumo Neste estudo avaliou-se a atividade antimicrobiana de extratos e óleos essenciais de Lippia graveolens e Lippia alba, contra nove cepas de Aeromonas spp., isoladas de Oreochromis niloticus. Os extratos brutos foram obtidos pela técnica de percolação e por extração supercrítica com CO2, enquanto os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger. A atividade antimicrobiana para cada extrato e óleo essencial foi verificada pelo método de disco-difusão em 24 horas. O óleo essencial de L. graveolens apresentou maior eficácia na inibição de patógenos bacterianos em peixes (100%), comparado aos extratos. Obteve-se um diâmetro de halo de inibição que variou entre 25,20 e 36,94 mm. Os extratos do fluido supercrítico e da percolação com acetato de etila e ciclohexano apresentaram a mesma eficácia (77,78%). O extrato bruto obtido com etanol 95% apresentou efeito antimicrobiano limitado (22,22%), apresentando o menor diámetro de halo de inibição (8,34 e 9,57 mm). Por outro lado, L. alba apresentou menor atividade antibacteriana. O óleo essencial inibiu apenas 66,67% das bactérias patogênicas, apresentando um halo de inibição que varia de 10,68 a 16,29 mm de diámetro. Os resultados deste estudo indica que os óleos essenciais de L. graveolens e L. alba são uma alternativa promissora para o controle do crescimento de Aeromonas spp.

Estudio de la actividad antimicrobiana de Xenophyllum poposum sobre microorganismos de la cavidad bucal por el método de difusión radial / Study of the antimicrobial activity of Xenophyllum poposum on microorganisms of the oral cavity by the radial diffusion method

Resumen En este estudio se evaluó la actividad antimicrobiana in vitro de extractos de Xenophyllum poposum sobre microorganismos bucales como Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans y Veillonella sp. Se empleó el método de difusión radial en agar y como controles negativo y positivo de inhibición se emplearon etanol y clorhexidina al 0,12% (Plac out NF®) respectivamente. Los extractos con mayor actividad antimicrobiana fueron el etanólico y el clorofórmico. La diferencia entre ambos no fue estadísticamente significativa (p≥0,05). Tampoco se observó diferencia significativa con respecto a la clorhexidina, excepto sobre Veillonella sp., ya que el extracto etanólico presentó halos de inhibición significativamente menores sobre este microorganismo. Esto es importante ya que Veillonella se considera indicador de salud en relación a la caries dental. En base a esto, el extracto etanólico de Xenophyllum poposum podría ser usado como control químico de la biopelícula dental.

Abstract In this study, the in vitro antimicrobial activity of Xenophyllum poposum extracts on oral microorganisms such as Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans, Veillonella sp. was evaluated. The radial diffusion method in agar was used and 0.12% ethanol and chlorhexidine (Plac out NF®) were used as negative and positive inhibition controls, respectively. The extracts with the highest antimicrobial activity were the ethanolic and chloroform extracts. The difference between the two was not statistically significant (p≥0.05). No significant difference was observed with respect to chlorhexidine, except on Veillonella sp., since the ethanolic extract presented significantly lower inhibition halos on this microorganism. This is important as Veillonella is considered an indicator of health in relation to dental caries. Based on this, the ethanolic extract of Xenophyllum poposum could be used as chemical control of dental biofilm.

Resumo Neste estudo, a atividade antimicrobiana de extratos de Xenophyllum poposum sobre microrganismos orais como Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans e Veillonella sp. Foi utilizado o método de difusão radial em ágar e etanol 0,12% e clorexidina (Plac out NF®) como controles de inibição negativa e positiva, respectivamente. Os extratos com maior atividade antimicrobiana foram os extratos etanólico e clorofórmio. A diferença entre os dois não foi estatisticamente significativa (p≥0,05). Não foi observada diferença significativa em relação à clorexidina 0,12%, exceto em Veillonella sp., uma vez que o extrato etanólico apresentou halos de inibição significativamente menores neste microrganismo. Isso é importante, pois a Veillonella é considerada um indicador de saúde em relação à cárie dentária. Com base nisso, o extrato etanólico de Xenophyllum poposum pode ser utilizado como controle químico do biofilme dental.

Ação antimicrobiana e antibiofilme de flavonóis isolados ou incorporados em hidrogéis termossensíveis e sua influência sobre marcadores de mineralização em células odontoblastóides para aplicação em endodontia / Antimicrobial/antibiofilm action of flavonols alone or incorporated in thermosensitive hydrogels and their influence on mineralization markers in odontoblast-like cells for endodontic applications

Ainda não foi encontrado um medicamento capaz de desinfetar os canais radiculares e permitir a recuperação celular e a regeneração tecidual em dentes permanentes jovens com comprometimento endodôntico. Dois importantes flavonóis detectados no vinho tinto, morina (MO) e miricetina (MY), são atualmente estudados por suas amplas propriedades biológicas, incluindo atividade antimicrobiana. No entanto, o desenvolvimento de sistemas de liberação controlada pode ser útil para a liberação desses flavonóis para fins de terapia endodôntica. Este estudo avaliou a citocompatibilidade e os efeitos antimicrobianos/antibiofilme de MO e MY, isolados ou incorporados em hidrogéis termorreversíveis de quitosana-poloxamer-ß-glicerofosfato de sódio (CPG), além dos efeitos de MO e MY, isolados e combinados sobre a viabilidade, atividade de ALP e produção de nódulos de mineralização em células MDPC-23. A atividade antimicrobiana dos compostos foi avaliada em Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii e Fusobacterium nucleatum em condições planctônicas, em biofilmes dual-espécies e multiespécies e analisadas por contagem bacteriana e microscopia de varredura. Os hidrogéis CPG foram caracterizados por reometria de fluxo e oscilatória, temperatura de gelificação, perfil de textura e análise de bioadesão em espécimes de dentina. MO, MY e controles (hidróxido de cálcio ­ CH e clorexidina ­ CHX) foram incorporados em hidrogéis de CPG e o efeito do antibiofilme sobre biofilmes multiespécies formados em amostras de dentina radicular foi avaliado por microscopia confocal. O efeito de toxicidade dos compostos isolados ou incorporados em hidrogéis de CGP foi determinado em cultura de fibroblastos por ensaios de resazurina. Os dados foram analisados estatisticamente pelos testes ANOVA e Tukey considerando p < 0,05. A combinação de MO e MY foi sinérgica ou aditiva contra bactérias endodônticas testadas a partir de concentrações de 0,03 mg/mL MO + 0,06 mg/mL MY e não foram tóxicas para fibroblastos até 0,125mg/mL. MO + MY apresentou melhor efeito sobre biofilmes dual-espécies e multiespécies considerando suas menores concentrações quando comparados com os flavonóis isolados. Os hidrogéis CPG foram caracterizados como termorreversíveis e com propriedades mecânicas e bioadesivas adequadas. Hidrogéis de CPG carregados com MO+MY, CH e CHX apresentaram efeitos inibitórios semelhantes quando aplicados em biofilmes multiespécies formados no interior dos túbulos dentinários radiculares por 48h e seus extratos apresentaram citotoxicidade acima de 50% de diluição. As células semelhantes a odontoblastos (MDPC-23) foram expostas a diferentes concentrações de MO, MY, isoladamente ou em combinação e CH como controle positivo por 24h e 48h, e troca contínua de meio osteogênico por 8 dias e 14 dias. As combinações de MO+MY ou CH também foram incorporadas em hidrogéis de quitosana-poloxamer-ß-glicerofosfato e seus extratos em meio de cultura celular foram coletados após 48h e 7 dias. Viabilidade celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP) e ensaios de deposição de nódulos mineralizados (MN) foram realizados pelo método de resazurina, ensaios de monofosfato de timolftaleína e coloração com vermelho de alizarina, respectivamente. Todos os compostos não causaram citotoxicidade nas concentrações testadas em 24h e 8 dias e 0,5 mg/mL MO e MY isolados reduziram a viabilidade celular em 48h. A atividade de ALP e a deposição de MN foram aumentadas para a combinação MO+MY e CH em células MDPC-23. Extratos de hidrogel de 7 dias contendo ou não MO+MY não foram citotóxicos até diluição de 25% em 48h e em baixas concentrações estimularam a atividade de ALP e deposição de MN aos 8 e 14 dias de avaliação. Em conclusão, a combinação de morina e miricetina incorporada ou não em hidrogéis de CPG apresentou efeito antibiofilme sobre patógenos orais e baixa toxicidade sobre fibroblastos. Morina e miricetina em baixas concentrações, isoladas, em combinação ou em hidrogéis CPG não foram citotóxicas e foram eficazes na indução de marcadores de mineralização em células semelhantes a odontoblastos(AU)

A drug capable of disinfecting the root canals and allow cell recovery and tissue regeneration in permanent young teeth with endodontic problems has not been found yet. Two important flavonols detected in red wine, morin (MO) and myricetin (MY), are currently studied for their wide biological properties including antimicrobial activity. However, the development of controlled release systems could be useful for the delivery of these flavonols for endodontic therapies. This study evaluated the cytocompatibility and antimicrobial/antibiofilm effects of MO and MY, alone or incorporated in thermoreversible chitosanpoloxamer hydrogels containing sodium ß-glycerophosphate (CPG), in addition to the effects of isolated and combined morin and myricetin flavonols on viability, ALP activity and production of mineralization nodules in MDPC-23 cells. Antimicrobial activity of the compounds was evaluated on Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii, and Fusobacterium nucleatum under planktonic conditions, on dual-species and multispecies biofilms and analyzed by bacterial counts and scanning microscopy. CPG hydrogels were characterized by flow and oscillatory rheometry, gelation temperature, texture profile and bioadhesion analysis in dentin specimens. MO, MY and controls (calcium hydroxide ­ CH and chlorhexidine ­ CHX) were incorporated in CPG hydrogels and antibiofilm effect on multispecies biofilms formed in radicular dentin samples were evaluated by confocal microscopy. Cytotoxicity of the compounds alone or incorporated in CGP hydrogels was determined on fibroblasts culture by resazurin assays. Data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey considering p < 0.05. The combination of MO and MY had synergistic or additive against oral bacteria tested starting at concentrations of 0.03 mg/mL MO + 0.06 mg/mL MY and they were not toxic to fibroblasts up to 0.125mg/mL. MO + MY had better effect on dual-species and multispecies biofilms considering their lower concentrations when compared with the flavonols alone. CPG hydrogels were characterized as thermoreversible and with adequate mechanical and bioadhesive properties. CPG hydrogels loaded with MO+MY, CH and CHX have similar inhibitory effects when applied on multispecies biofilms formed inside root dentin tubules for 48h and their extracts were cytotoxicity above 50% dilution. Furthermore, the effects of morin, myricetin, alone or in combination or incorporated in chitosan-based hydrogels on cytotoxicity and expression of mineralization markers in odontoblast-like cells. The MDPC-23 cells were exposed to different concentrations of morin (MO), myricetin (MY), alone or in combination and calcium hydroxide (CH) as a positive control for 24h and 48h, and continuous osteogenic medium changing for 8 days and 14 days. The combinations of MO+MY or CH were also incorporated in chitosan-poloxamer-ß- glycerophosphate hydrogels and their extracts in cell culture media were collected after 48h and 7 days. Cell viability, alkaline phosphatase (ALP) activity and assays mineralized nodules (MN) deposition were performed using resazurin method, thymolphthalein monophosphate assays and alizarin red staining, respectively. Data were statistically analyzed considering p< 0.05. All compounds were non-toxic at the concentrations tested at 24h and 8 days and 0.5 mg/mL MO and MY alone reduced cell viability at 48h. ALP activity and deposition of MN were increased for MO+MY combination and CH in MDPC-23 cells. 7 days hydrogel extracts containing or not MO+MY were not cytotoxic up to 25% dilution at 48h and at low concentrations stimulated ALP activity and MN deposition at 8 and 14 days of evaluation. In conclusion, the combination of morin and myricetin incorporated or not in CPG hydrogels presented antibiofilm effect on oral pathogens and low cytotoxicity on fibroblasts. Morin myricetin at low concentrations, alone, in combination or in CPG hydrogels were not cytotoxic and were effective in inducing mineralization markers in odontoblast-like cells(AU)

Phytochemical and biological attributes of Bauhinia variegata L. (Caesalpiniaceae) / Atributos fitoquímicos e biológicos de Bauhinia variegata L. (Caesalpiniaceae)

Bauhinia variegata plant is a very popular and traditionally potent ethnomedicine. Therefore, it is need of hour to study ameliorative characteristics of B. variegata for novel secondary metabolites. The current study was designed to explore antiproliferative potential of B. variegata due to scant reports on this aspect. Extracts of various parts (flowers, leaves, bark, stem, and roots) were prepared by successive maceration using organic solvents in increasing order of polarity (n-hexane, ethyl acetate, methanol, and water). The determination of polyphenolic contents was done by using colorimetric methods while antioxidant potential was measured using reducing power assay. Brine shrimp lethality assay was performed for determining preliminary cytotoxicity and antiproliferative activity against breast cancer MCF-7 cell line using MTT protocols. Moreover, antimicrobial activities were detected by using disc diffusion assay. The alpha-amylase assay was performed to monitor the antidiabetic potential of the plant. In case of phytochemical analysis methanolic extract of leaves and bark showed highest phenolic and flavonoids contents. n-Hexane and ethyl acetate extracts of stem and roots exhibited more than 90% mortality with LD50 ranges between 1-25 µg/mL when studied by brine shrimp lethality assay. n-Hexane and ethyl acetate extracts of roots and stem also showed antiproliferative activity against human breast cancer MCF-7 cell line with IC50 values ranges between 12.10-14.20 µg/mL. Most of the extracts displayed moderately high antibacterial and antifungal activities. The n-hexane extract of roots showed antidiabetic activity with 60.80 ± 0.20% inhibition of alpha-amylase. In sum, these preliminary results will be useful for further compound isolation from selected plant parts for the discovery of antibacterial, antidiabetic, and anticancer lead candidates.

A planta Bauhinia variegata é uma etnomedicina muito popular e tradicionalmente potente. Portanto, as características de melhoria de B. variegata foram estudadas. Foi avaliada a determinação dos teores antioxidantes e polifenólicos. O ensaio de letalidade do camarão de salmoura foi realizado para determinar a citotoxicidade preliminar e a atividade antiproliferativa contra linhas de células de câncer de mama MCF-7 usando protocolos de MTT. Além disso, foram detectadas atividades antimicrobianas. O ensaio da alfa-amilase foi realizado para monitorar o potencial antidiabético da planta. Dentre vinte amostras diferentes, o extrato metanólico (EM) da casca apresentou os maiores teores fenólicos totais. A EM das folhas apresentou excelente conteúdo de flavonoides, atividade antioxidante significativa foi exibida pelo extrato hexânico do caule. O extrato do caule de hexano exibe 77,40% como citotóxico em DL50 10,50 µg/mL quando avaliado através do ensaio de letalidade de artêmia. Extratos de hexano e acetato de etila de raiz e caule mostraram atividade antiproliferativa contra a linhagem celular MCF7 de câncer de mama humano (IC50 12,10-14,20 µg/mL). Para potencial antimicrobiano importante, vários extratos exibiram excelentes atividades antibacteriana e antifúngica, enquanto o extrato de n-hexano da raiz mostrou atividade antidiabética (60,80 ± 0,20% na concentração de 200 µg/mL). Em suma, estes resultados preliminares serão úteis para isolamento adicional de compostos a partir de partes de plantas selecionadas para a descoberta de candidatos a antibacterianos, antidiabéticos e anticâncer.

Phytochemical composition and biological activities of extracts from ten species of the family Melastomataceae Juss / Composição fitoquímica e atividades biológicas de extratos de dez espécies da família Melastomataceae Juss

Plants possess a renewable source of metabolites with enormous chemical structural diversity, which may have potential therapeutic relevance. Furthermore, this chemical diversity favors the possibility of finding new and different chemical constituents with antimicrobial, antioxidant and anti-tumor activities. This work analyzed preliminary phytochemical profiles and evaluated the antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activities of hexane extracts of leaves of ten species of the family Melastomataceae. Phytochemical screening was performed using staining methods while total phenols and flavonoids were quantified by spectrophotometry. Antimicrobial activity was evaluated using the disk diffusion method. Antioxidant activity was determined by the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH) method. Toxicity was recorded using the lethality test with Artemia salina Leach (1819). Cytotoxic activity of the extracts was assessed in vitro with acute monocytic leukemia cells (THP-1). Phytochemical analysis detected the presence of tannins, terpenes, steroids, polyphenols and flavonoids and the absence of alkaloids. Clidemia capitellata (Bonpl.) D. Don had the greatest amount of polyphenols (205.95 mg/g ± 4.14) while Clidemia hirta (L.) D. Don had the highest content of total flavonoids (143.99 mg/g ± 4.18). The hexane extracts did not show antimicrobial activity nor toxicity against Artemia salina. The extract of Tibouchina francavillana Cogn. was the most active in sequestering the DPPH radical. The extracts showed cytotoxicity in THP-1 cells with the appearance of apoptotic bodies and cell death. The extracts of Miconia amoena, Clidemia sericea and Clidemia capitellata are non-toxic against Artemia salina and induce the formation of apoptotic bodies and cell death of the THP-1 lineage.

Os vegetais apresentam uma fonte renovável de metabólitos com enorme diversidade química estrutural, os quais podem apresentar potencial relevante na terapêutica, aumentando as possibilidades de encontrar novos e diferentes constituintes químicos com atividades antimicrobiana, antioxidante e antitumoral. Este trabalho analisou o perfil fitoquímico preliminar e as atividades antimicrobiana, antioxidante, citotóxica dos extratos em hexano das folhas de dez espécies da família Melastomataceae. A triagem fitoquímica foi executada utilizando métodos de coloração e quantificação de fenóis e flavonoides totais por espectrofotometria. A atividade antimicrobiana foi realizada pelo método de difusão em disco. A atividade antioxidante foi determinada pelo método 2,2-difenil1-picrilhidrazila (DPPH). A toxicidade foi registrada utilizando o ensaio de letalidade com Artemia salina Leach (1819). A atividade citotóxica dos extratos foi realizada in vitro com células leucêmicas monocítica aguda (THP-1). A análise fitoquímica detectou a presença de taninos, terpenos, esteroides, polifenóis, flavonoides e ausência de alcaloides. A maior quantificação de polifenóis foi da Clidemia capitellata (Bonpl.) D. Don (205,95 mg/g ± 4,14) e o extrato de Clidemia hirta (L.) D. Don apresentou maior teor de flavonoides totais (143,99 mg/g ± 4,18). Os extratos hexânicos não demostraram atividade antimicrobiana e nem toxicidade frente à Artemia salina. O extrato de Tibouchina francavillana Cogn. foi o mais ativo no sequestro do radical DPPH. Os extratos apresentaram citotoxicidade em células THP-1, com visualização de corpos apoptóticos e morte celular. Os extratos de Miconia amoena, Clidemia sericea e Clidemia capitellata são atóxicos contra Artemia salina e induzem a formação de corpos apoptóticos e morte celular da linhagem THP-1.

Evaluation of antibacterial properties and shear bond strength of orthodontic composites containing silver nanoparticles, titanium dioxide nanoparticles and fluoride: An in vitro study

ABSTRACT Objective: The study aimed at determining the antibacterial properties of composites containing silver nanoparticles (Ag NPs) or titanium dioxide nanoparticles (TiO2 NPs), and a fluoride-releasing composite against Streptococcus mutans and Lactobacillus acidophilus, and to evaluate the effect on shear bond strength (SBS) of nanoparticles-modified composites. Materials and Methods: An orthodontic composite was modified by adding 1% w/w Ag NPs or 1% w/w TiO2 NPs. Composite discs were prepared to evaluate the antibacterial properties of these modified composites against Streptococcus mutans and Lactobacillus acidophilus, using three different antibacterial tests, namely: Disk agar diffusion test, Biofilm inhibition test and eluted component test. For evaluating the shear bond strength, 80 extracted premolars were collected and divided into four groups (n=20 each), which were bonded with stainless steel preadjusted Edgewise brackets, by using these modified composites. Their SBS was then compared with that of the control group, using a universal testing machine. Results: Composite discs containing nanoparticles and fluoride were capable of producing growth inhibition zones for all bacterial types. Results of the biofilm inhibition test showed that all the study groups inhibited the bacterial count, in comparison to the control group. A significant difference of SBS was observed between all groups. Conclusion: The antibacterial activity of orthodontic composites modified with Ag and TiO2 nanoparticles was significant, compared with conventional and fluoride-containing composites. The control group showed the highest SBS, followed by fluoride, titanium, and silver groups, with statistically significant difference in mean SBS values among all groups.

RESUMO Objetivo: O objetivo do presente estudo foi determinar a eficácia das propriedades antibacterianas de compósitos contendo nanopartículas de prata (Ag NPs) ou nanopartículas de dióxido de titânio (TiO2 NPs) e de um compósito com liberação de flúor, contra as bactérias Streptococcus mutans e Lactobacillus acidophilus e, também, avaliar o efeito na resistência ao cisalhamento (RC) desses compósitos modificados com nanopartículas. Métodos: Os compósitos ortodônticos foram modificados pela adição de 1% p/p de Ag NPs e 1% p/p de TiO2 NPs. Discos de compósito foram preparados para avaliar as propriedades antibacterianas desses grupos contra as bactérias Streptococcus mutans e Lactobacillus acidophilus, usando três testes antibacterianos diferentes: teste de disco-difusão em ágar, teste de inibição da formação de biofilme e teste de componentes eluídos. Para avaliar a resistência ao cisalhamento dos compósitos, 80 pré-molares extraídos foram coletados e divididos em quatro grupos, contendo 20 dentes cada. Foram utilizados braquetes Edgewise pré-ajustados de aço inoxidável para colagem nos dentes usando as resinas modificadas. A RC desses compósitos modificados foi comparada à dos grupos controle, usando uma máquina universal de testes. Resultados: Os discos de compósito contendo as nanopartículas e flúor foram capazes de produzir halos de inibição de crescimento para todos os tipos de bactérias. Os resultados do teste de inibição do biofilme mostraram que houve uma redução na contagem de bactérias em relação ao grupo controle. Diferenças significativas na RC foram observadas entre todos os grupos. Conclusão: A atividade antibacteriana dos compósitos ortodônticos modificados com nanopartículas de Ag e TiO2 foi significativa, quando comparada ao compósito convencional e ao compósito com flúor. O grupo controle apresentou a maior RC, seguido pelos grupos Flúor, Titânio e Prata, com diferença estatisticamente significativa nos valores médios da RC entre todos os grupos.

Óleo essencial de Pataqueira (Conobea scoparioides Cham. & Schltdl.) como conservante natural em Cosméticos / Pataqueira essential oil (Conobea scoparioides Cham. & Schltdl.) as a natural preservative in cosmetics

Um dos principais grupos de conservantes utilizados na maioria dos cosméticos são os parabenos que em muitos estudos demonstraram que podem provocar reações alérgicas como dermatite de contato, entre outras sensibilizações cutâneas. A fim de minimizar esses problemas, a indústria está produzindo cosméticos livres de conservantes ou de origem natural e em associações aos sintéticos. Dentre os conservantes naturais utilizados, podemos citar os óleos essenciais como uma alternativa viável. Diante deste contexto o presente trabalho visa avaliar experimentalmente o potencial antimicrobiano do óleo essencial de Conobea scoparioides Cham. & Schltdl., conhecida popularmente como pataqueira, o efeito de sua associação com parabenos e de sua eficácia como conservante em bases cosméticas. A composição do óleo essencial foi avaliada, indicando que este é composto em sua maior parte por terpenos, tendo éter metílico do timol (39,2%), timol (33,8 %) e α-felandreno (15,9%) como compostos majoritários. A atividade antimicrobiana do óleo essencial e do timol foi acessada através da concentração inibitória mínima (CIM), cujos resultados em µg/mL para o óleo essencial e o timol foram respectivamente: Staphylococcus aureus 650,70 e 284,90, Escherichia coli 721,53 e 271,20, Pseudomonas aeruginosa 1748,00 e > 2.000, Burkholderia cepacia 833,03 e 1.077,70, Candida albicans 521,43 e 172,61 e Aspergillus brasiliensis 300 e 400. O efeito sinérgico da associação do óleo essencial com os parabenos foi realizado através de um delineamento experimental centroide simplex para uma mistura de metilparabeno, propilparabeno e óleo essencial frente aos mesmos micro-organismos utilizados na determinação da atividade antimicrobiana. As concentrações ideais obtidas pela análise estatística para cada componente em µg/mL foram: 1120 para o metilparabeno, 350 para o propilparabeno e 675 para o óleo essencial. O teste de eficácia do sistema conservante em formulação cosmética foi efetuado empregando as concentrações ideais e mais duas concentrações superiores e uma abaixo do ideal. Para todas as cepas microbianas desafiadas o resultado do teste foi de redução total da carga microbiana inoculada nos sete dias de ensaio e nenhum aumento até o vigésimo oitavo dia o que demonstra a eficácia da associação do óleo essencial com os conservantes sintéticos. O óleo essencial de C. scoparioides apresentou um potencial antimicrobiano importante tanto sozinho como em associação com conservantes sintéticos. Estes resultados sugerem que esse óleo pode ser usado para compor um sistema conservante para formulações cosméticas contendo uma menor quantidade de sintéticos

One of the main groups of preservatives used in most cosmetics are parabens, that many studies have shown that they can cause allergic reactions such as contact dermatitis, among other skin sensitizations. To minimize these problems, the industry is producing cosmetics preservative free or using natural products instead and their combination with the synthetics. Among the natural preservatives used, we can mention essential oils as a viable alternative. In this context, the present work aims to experimentally evaluate the antimicrobial potential of the Conobea scoparioides Cham. & Schltdl. essential oil, popularly known as pataqueira, the effect of its association with parabens and its effectiveness as a preservative in cosmetic bases. The essential oil composition was analyzed, indicating that it is composed mostly of terpenes, with thymol methyl ether (39.2%), thymol (33.8%) and -phelandrene (15.9%) as major compounds. The antimicrobial activity of essential oil and thymol was accessed through the minimum inhibitory concentration (MIC), whose results in µg/mL for essential oil and thymol were respectively: Staphylococcus aureus 650.70 and 284.90, Escherichia coli 721, 53 and 271.20, Pseudomonas aeruginosa 1748.00 and > 2,000, Burkholderia cepacia 833.03 and 1,077.70, Candida albicans 521.43 and 172.61 and Aspergillus brasiliensis 300 and 400. The synergistic effect of the association of essential oil with parabens was performed through a centroid simplex experimental design for a mixture of methylparaben, propylparaben and essential oil against the same microorganisms used in the antimicrobial activity evaluation The ideal concentrations obtained by statistical analysis for each component in µg/mL were: 1120 for methylparaben, 350 for propylparaben and 675 for essential oil. The effectiveness test of the preservative system in cosmetic formulation was carried out using the ideal concentrations plus two higher concentrations and one below the ideal. For all challenged microbial strains, the test result was a total reduction of the inoculated microbial load in the seven days of testing and no increase until the twenty-eighth day, which demonstrates the effectiveness of the association of essential oil with synthetic preservatives. C. scoparioides essential oil showed an important antimicrobial potential both alone and in association with parabens. These results demonstrated that it can be used to compose a preservative system for cosmetic formulations containing lower amounts of synthetics