Caracterização dos estágios iniciais do câncer colorretal utilizando microscopia de autofluorescência 3D: um estudo preliminar / Early stages of colorectal cancer characterization by autofluorescence 3d microscopy: a preliminary study

ABSTRACT Background: Colorectal cancer is one of the most prevalent pathologies worldwide whose prognosis is linked to early detection. Colonoscopy is the gold standard for screening, and diagnosis is usually made histologically from biopsies. Aiming to reduce the inspection and diagnostic time as well as the biopsies and resources involved, other techniques are being promoted to conduct accurate in vivo colonoscopy assessments. Optical biopsy aims to detect normal and neoplastic tissues analysing the autofluorescence spectrum based on the changes in the distribution and concentration of autofluorescent molecules caused by colorectal cancer. Therefore, the autofluorescence contribution analysed by image processing techniques could be an approach to a faster characterization of the target tissue. Objective: Quantify intensity parameters through digital processing of two data sets of three-dimensional widefield autofluorescence microscopy images, acquired by fresh colon tissue samples from a colorectal cancer murine model. Additionally, analyse the autofluorescence data to provide a characterization over a volume of approximately 50 µm of the colon mucosa for each image, at second (2nd), fourth (4th) and eighth (8th) weeks after colorectal cancer induction. Methods: Development of a colorectal cancer murine model using azoxymethane/dextran sodium sulphate induction, and data sets acquisition of Z-stack images by widefield autofluorescence microscopy, from control and colorectal cancer induced animals. Pre-processing steps of intensity value adjustments followed by quantification and characterization procedures using image processing workflow automation by Fiji's macros, and statistical data analysis. Results: The effectiveness of the colorectal cancer induction model was corroborated by a histological assessment to correlate and validate the link between histological and autofluorescence changes. The image digital processing methodology proposed was then performed on the three-dimensional images from control mice and from the 2nd, 4th, and 8th weeks after colorectal cancer chemical induction, for each data set. Statistical analyses found significant differences in the mean, standard deviation, and minimum parameters between control samples and those of the 2nd week after induction with respect to the 4th week of the first experimental study. This suggests that the characteristics of colorectal cancer can be detected after the 2nd week post-induction. Conclusion: The use of autofluorescence still exhibits levels of variability that prevent greater systematization of the data obtained during the progression of colorectal cancer. However, these preliminary outcomes could be considered an approach to the three-dimensional characterization of the autofluorescence of colorectal tissue, describing the autofluorescence features of samples coming from dysplasia to colorectal cancer.

RESUMO Contexto: O câncer colorretal é uma das patologias mais prevalentes em todo o mundo, cujo prognóstico está ligado à detecção precoce. A colonoscopia é o padrão ouro para triagem, e o diagnóstico geralmente é feito histologicamente a partir de biópsias. Visando reduzir o tempo de inspeção e diagnóstico, bem como as biópsias e recursos envolvidos, outras técnicas estão sendo promovidas para realizar avaliações precisas de colonoscopia in vivo. A biópsia óptica visa detectar tecidos normais e neoplásicos analisando o espectro de autofluorescência com base nas mudanças na distribuição e concentração de moléculas autofluorescentes causadas pelo câncer colorretal. Portanto, a contribuição da autofluorescência analisada por técnicas de processamento de imagem poderia ser uma abordagem para uma caracterização mais rápida do tecido-alvo. Objetivo: Quantificar parâmetros de intensidade por meio do processamento digital de dois conjuntos de dados de imagens de microscopia de autofluorescência em campo amplo tridimensionais, adquiridas por amostras de tecido fresco de cólon de um modelo murino de câncer colorretal. Adicionalmente, analisar os dados de autofluorescência para fornecer uma caracterização em um volume de aproximadamente 50 µm da mucosa do cólon para cada imagem, na segunda (2ª), quarta (4ª) e oitava (8ª) semanas após a indução do câncer colorretal. Método: Desenvolvimento de um modelo murino de câncer colorretal usando indução de azoximetano/sulfato de sódio dextrano, e aquisição de conjuntos de dados de imagens Z-stack por microscopia de autofluorescência em campo amplo, de animais controle e induzidos ao câncer colorretal. Etapas de pré-processamento de ajustes de valores de intensidade seguidas por procedimentos de quantificação e caracterização usando automação de fluxo de trabalho de processamento de imagem por macros do Fiji, e análise estatística de dados. Resultados: A eficácia do modelo de indução de câncer colorretal foi corroborada por uma avaliação histológica para correlacionar e validar a ligação entre as mudanças histológicas e de autofluorescência. A metodologia de processamento digital de imagem proposta foi então realizada nas imagens tridimensionais de camundongos controle e das 2ª, 4ª e 8ª semanas após a indução química do câncer colorretal, para cada conjunto de dados. Análises estatísticas encontraram diferenças significativas nos parâmetros médios, desvio padrão e mínimos entre amostras de controle e aquelas da 2ª semana após a indução em relação à 4ª semana do primeiro estudo experimental. Isso sugere que as características do câncer colorretal podem ser detectadas após a 2ª semana pós-indução. Conclusão: O uso de autofluorescência ainda apresenta níveis de variabilidade que impedem uma maior sistematização dos dados obtidos durante a progressão do câncer colorretal. No entanto, esses resultados preliminares podem ser considerados uma abordagem para a caracterização tridimensional da autofluorescência do tecido colorretal, descrevendo as características de autofluorescência de amostras que vão da displasia ao câncer colorretal.

Efficacy of non-invasive diagnostic methods in the diagnosis and screening of oral cancer and precancer / Eficácia de métodos diagnósticos não invasivos no diagnóstico e triagem de lesões pré-malignas e malignas na cavidade oral; revisão sistemática e meta-análise

Abstract Introduction: Traditional meta-analyses on the diagnostic accuracy of oral lesions have been conducted, but they were inherently limited to direct pairwise comparisons between a single method and a single alternative, while multiple diagnostic options and the ranking thereof were methodologically not possible. Objective: To evaluate the diagnostic values of various methods in patients with oral potential malignant disease by performing a network meta-analysis. Methods: Two authors independently searched the databases (MEDLINE, SCOPUS, the Cochrane Register of Controlled Trials, and Google scholar) up to June 2020 for studies comparing the diagnostic accuracy of various tools (autofluorescence, chemiluminescence, cytology, narrow band imaging, and toluidine blue) with visual examination or other tools. The outcomes of interest for this analysis were sensitivity, specificity, negative predictive value, positive predictive value and accuracy. Both a standard pairwise meta-analysis and network meta-analysis were conducted. Results: Treatment networks consisting of six interventions were defined for the network metaanalysis. The results of traditional meta-analysis showed that, among six methods, narrow band imaging showed higher sensitivity, specificity, negative predictive value, positive predictive value, and accuracy compared to visual examination. The results of network meta-analysis showed that autofluorescence, chemiluminescence, and narrow band imaging had higher sensitivity compared with visual examination, and that chemiluminescence and narrow band imaging had higher negative predictive value compared with visual examination. However, autofluorescence and chemiluminescence had lower specificity compared with visual examination. There were no significant differences in positive predictive value and accuracy among the six interventions. Conclusion: This study demonstrated that narrow banding imaging has superiority in terms of sensitivity and negative predictive value compared with the other five tested agents.

Resumo Introdução: Metanálises tradicionais sobre a precisão diagnóstica de lesões orais têm sido conduzidas, mas são inerentemente limitadas a comparações pareadas diretas entre um único método e uma única opção, enquanto múltiplas opções de diagnóstico e suas classificações ainda não foram metodologicamente possíveis. Objetivo: Avaliar os valores diagnósticos de vários métodos em pacientes com doença oral potencialmente maligna e fazer uma metanálise de rede. Método: Dois autores pesquisaram independentemente os bancos de dados (Medline, Scopus, Cochrane Register of Controlled Trials e Google Scholar) até junho de 2020 para estudos que comparassem a precisão diagnóstica de várias ferramentas (autofluorescência, quimioluminescência, citologia, imagem de banda estreita e cloreto de tolônio) com exame visual ou outras ferramentas. Os resultados de interesse para esta análise foram sensibilidade, especificidade, valor preditivo negativo, valor preditivo e precisão. Tanto uma metanálise pareada padrão quanto uma metanálise de rede foram conduzidas. Resultados: Redes de tratamento compostas por seis intervenções foram definidas para a metanálise de rede. Os resultados da metanálise tradicional mostraram que, entre seis métodos, a imagem de banda estreita apresentou maior sensibilidade, especificidade, valor preditivo negativo, valor preditivo e precisão em comparação ao exame visual. Os resultados da metanálise de rede mostraram que a autofluorescência, a quimioluminescência e a imagem de banda estreita obtiveram maior sensibilidade em comparação com o exame visual e que a quimioluminescência e a imagem de banda estreita apresentaram maior valor preditivo negativo em comparação com o exame visual. Entretanto, a autofluorescência e a quimioluminescência mostraram especificidade inferior em comparação com o exame visual. Não houve diferenças significativas no valor preditivo e na precisão entre as seis intervenções. Conclusão: Este estudo demonstrou que a imagem de banda estreita demonstra superioridade em termos de sensibilidade e valor preditivo negativo em comparação com os outros cinco agentes testados.

Oral ID® as an adjunctive tool for surgical margin assessment in patients with oral squamous cell carcinoma: a comparative study / Oral ID® como uma ferramenta adjuvante para avaliação da margem cirúrgica em pacientes com carcinoma oral de células escamosas: um estudo comparativo

Objective: The condition of the resected margin in oral squamous cell carcinoma continues to be an important prognostic factor; the use of optic technology could help surgeons in determining the margin status at real time. This study aims to evaluate Oral ID, a hand held device that uses the principal of auto-fluorescence to determine surgical safe margins in patients with oral squamous cell carcinoma, and to compare the results with those of the conventional 1 cm margin method. Material and Methods: This study was a descriptive, comparative analytical study carried out at Khartoum Dental Teaching Hospital and Oral Histopathology Diagnostic Laboratory, Faculty of Dentistry, University of Khartoum. A total of 92 margins obtained from 31 patients, 46 margins were taken by Oral ID and the other 46 were taken by the traditional 1cm method. All margins were examined histologically with conventional Hematoxylin and Eosin stain. Results: It was found that all tumors showed fluorescence loss; A significant association was found between the use of Oral ID and obtaining a free margin P (0.02) the sensitivity of Oral ID was found to be 74% the specificity was found to be 89%. Ten out of the 46 margins obtained by fluorescence showed mild dysplasia and two margins showed high grade dysplasia. The 46 margins obtained by the traditional 1cm margin showed different field alterations two were involved, one was close, five showed high grade dysplasia and 14 showed mild dysplasia yielding a specificity of 52.2%. Conclusion: Using Oral ID for surgical margin assessment increases the accuracy to 74% compared to the conventional method which was found to be 52.2%. The results of the device are comparable to other auto-fluorescence devices of different trademarks. Further development of the device to help overcome its limitations is strongly advised (AU)

Objetivo: A condição da margem ressecada no carcinoma oral de células escamosas continua sendo um importante fator prognóstico; o uso de tecnologia óptica pode ajudar cirurgiões a determinar o status da margem em tempo real. O objetivo deste estudo é avaliar o Oral ID, um aparelho portátil que utiliza o princípio da autofluorescência para determinar margens de segurança cirúrgicas em pacientes com carcinoma oral de células escamosas, e comparar os resultados com o método convencional de margem de 1 cm. Material e Métodos: Este estudo foi um estudo descritivo, analítico e comparativo realizado no Khartoum Dental Teaching Hospital e no Laboratório de Diagnóstico de Histopatologia Oral da Faculdade de Odontologia, Universidade de Khartoum. Um total de 92 margens foram obtidas de 31 pacientes, 46 margens foram obtidas por Oral ID e as outras 46 foram obtidas pelo método tradicional de 1 cm. Todas as margens foram examinadas histologicamente com coloração convencional de Hematoxilina e Eosina. Resultados: Verificou-se que todos os tumores apresentaram perda de fluorescência; uma associação significativa foi encontrada entre o uso de Oral ID e a obtenção de uma margem livre P (0,02), a sensibilidade de Oral ID foi de 74% e a especificidade de 89%. Dez das 46 margens obtidas por fluorescência mostraram displasia leve e duas margens mostraram displasia de alto grau. As 46 margens obtidas pela margem tradicional de 1cm apresentaram diferentes alterações de campo, duas estavam envolvidas, uma estava próxima, cinco apresentaram displasia de alto grau e 14 apresentaram displasia leve com especificidade de 52,2%. Conclusão: O uso de Oral ID para avaliação da margem cirúrgica aumenta a acurácia para 74% em comparação com o método convencional, que foi encontrado em 52,2%. Os resultados do dispositivo são comparáveis a outros dispositivos de autofluorescência de diferentes marcas comerciais. O desenvolvimento do dispositivo para ajudar a superar suas limitações é fortemente recomendado. (AU)

Drusas papilares asociadas a pérdida de campo visual / Optic disc drusen associated to visual field loss

Paciente de 14 años remitida para valorar fondo de ojo por cefalea. Presenta agudeza visual de 8/10 en ambos ojos y en fundoscopia se visualizan papilas de contornos escasamente definidos. Se solicita Autofluorescencia identificando lesiones autofluorescentes compatibles con drusas (Figura 1A,B). La OCT de fibras revela afectación sectorial bilateral sin papiledema (Figura 1C,D) y el campo visual mostró una afectación del hemicampo nasal bilateral (Figura 1E,F). Las drusas en el nervio óptico representan habitualmente un hallazgo casual. Pueden progresar paulatinamente generando gran deterioro campimétrico. No existe un tratamiento eficaz. Solo en casos donde aparezca neovascularización asociada, puede estar indicado el tratamiento con fármacos antiangiogénicos.

Autofluorescência em um caso de distrofia macular anular concêntrica benigna / Fundus autofluorescence in a case of benign concentric annular macular dystrophy

Resumo A distrofia macular anular concêntrica benigna (DMACB) é uma patologia retiniana rara e provavelmente subdiagnosticada em nosso meio, que se caracteriza por um defeito retiniano em bull's eye sem uso prévio de antimaláricos, associado à preservação relativa da acuidade visual. Devido à escassez de publicações sobre o tema, existem poucos dados referentes aos resultados dos exames complementares nesta patologia. No presente artigo, apresenta-se a descrição da autofluorescência em um caso clássico de DMACB, ainda inédita na literatura, podendo acrescentar achados importantes para auxiliar no diagnóstico e seguimento da doença.

Abstract The benign concentric annular macular dystrophy (BCAMD) is a very rare and probably underdiagnosed eye disease, characterized by a retinal fault in bull's eye pattern, without the association with antimalarial use, but related with good visual acuity. Since there aren't many publications about this condition, is hard to find data regarding the results of complementary examination. In this article, is presented the description of fundus autofluorescence in a classic BCAMD case, yet unpublished, and capable of helping the diagnosis and follow-up of this pathology.

Drusa de nervo ótico associada à estafiloma peripapilar congênito / Optic disk drusen associated with congenital peripapillary staphyloma

Resumo Nós descrevemos uma rara associação entre estafiloma peripapilar congênito e drusa de disco óptico em uma mulher de 47 anos de idade e visão normal.

Abstract We described a rare association between peripapillary staphyloma and optic disk drusen in a woman with 47 years old and normal vision.

Autofluorescencia: un método innovador en la identificación intraoperatoria de adenomas paratiroideos / Autofluorescence: an innovative method in the intraoperative identification of parathyroid adenomas

RESUMEN Introducción El tratamiento definitivo del hiperparatiroidismo primario es la resección quirúrgica de la glándula paratiroidea anómala. Su identificación resulta un desafío aun para cirujanos expertos. Hasta el momento no se han descripto métodos inocuos y efectivos para la identificación intraoperatoria de las glándulas. Tenemos como objetivo reportar la experiencia del uso de autofluorescencia en la identificación de las glándulas paratiroideas. Método Se incluyeron pacientes con hiperparatiroidismo primario evaluados preoperatoriamente con laboratorio, ecografía cervical y centellografía con Tc-99 MIBI. Durante el acto operatorio se utilizó un método de autofluorescencia (VINFLUO-P) para identificar las glándulas paratiroides (GP). Se analizó la intensidad lumínica de las (GP) normales y anómalas (AP) y distintas covariables. Se dosó PTH ultra rápida post resección del AP y se evaluó la histopatología de la pieza intraoperatoriamente. Resultados Se incluyeron 59 pacientes. La ecografía preoperatoria predijo la ubicación correcta en el 68% y el centellograma Tc-99 MIBI el 75% de los AP. La localización más frecuente fue inferior derecha (29%). El VINFLUO-P facilitó la visualización de las GP y los AP en el 100% de los pacientes con un aumento del 27% respecto a la luz blanca. Se evidenció un descenso postoperatorio de PTH del 76,44% y de la calcemia en 1,8 mg/dl. La intensidad de la luz reflejada por los AP fue mayor que la de las GP normales (p <0,001). Se observó una relación lineal entre PTH e intensidad lumínica de AP. (CC = 0,448; p = 0,045). El patrón arquitectural sólido de los AP evidenció una asociación negativa (CC = -0,4709 p = 0,03). Conclusión La utilización del VINFLUO-P demostró ser efectivo para la identificación de las GP normales y patológicas. Las glándulas anómalas resultaron con mayor fluorescencia que los tejidos normales.

ABSTRACT Introduction The treatment of primary hyperparathyroidism consists on the resection of the abnormal parathyroid gland (PG). Identification of PGs is challenging even for expert surgeons. Currently, there are no effective and harmless methods for intraoperative identification of PGs. The aim of this study is to report our experience with the identification of PGs using autofluorescence. Materials and methods Patients with diagnosis of primary hyperparathyroidism were included in the study. Patients were preoperatively worked up with labs [parathyroid hormone (PTH), serum calcium], neck ultrasound (US) and Technetium (99mTc) sestamibi. The parathyroid gland Intraoperative fluorescent visualization (PG-IFV) method was used during the surgery to identify PGs. The fluorescent intensity ratio of normal PGs and parathyroid adenomas (PA) was analyzed and correlated to different variables. All patients underwent a post-resection rapid PTH analysis and frozen section. Results Fifty-nine patients were included in the study. The US accurately predicted the location of the PA in 68% of the cases, while 99mTc sestamibi was accurate in 75% of the cases. The most frequently reported localization of the adenoma was right inferior (29%). PG-IFV facilitated the visualization of the PGs in 100% of the cases, with a 27% increase in the visualization of the PGs when compared to white light. The postoperative PTH decreased 76.4% and the calcium 1.8 mg/dl. The fluorescent intensity ratio of the PAs was significantly higher than normal PGs (44.4 vs 27.2, p <0.001). There was positive correlation between the PTH and the fluorescent intensity ratio of the PAs [Spearman's correlation coefficient (SCC) = 0.448; p = 0.045]. The solid histoarchitectural pattern of the PAs presented a negative correlation with fluorescent intensity ratio (SCC = -0.4709, p = 0.03). Conclusion The use of PG-IFV is an effective method for intraoperative identification of normal and abnormal PGs. The fluorescent intensity ratio of abnormal PGs was significantly higher than normal PGs.

Avances en videobroncoscopia / Advances in videobronchoscopy

La Broncoscopia es sin duda el ámbito de medicina respiratoria que más ha sufrido cambios en los últimos 30 años. Principalmente dado por los avances tecnológicos que han permitido llegar, ver y hacer mucho más de lo que se pensó que era factible por vía endoscópica.

The most evolved area in the respiratory medicine in the last 30 years, is without any doubt the Bronchoscopy. This are the results of the tecnological advances, that let us go, see and do, further than we thougth by endoscopy.

Genotype and expression of the enhanced gree fluorescent protein in LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc rats / Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

The Green fluorescent protein (GFP) was first described after being extracted from Aequorea victoria in 1987; Since then, GFP and its derivatives have been widely used in several experiments as cell and protein marker. In the present study it was verified the genotype of the offspring from crosses between heterozygote Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc rats and analyzed the expression of the enhanced green fluorescent protein (EGFP) in different cell types and genotypes. The genotype of the offspring was assessed by PCR and analysis of EGFP expression in different cells and genotypes, including mesenchymal stem cells (MSC) derived from adipose tissue and calvarial osteoblast cells. Expression of EGFP was verified by flow cytometry, fluorescence microscopy, and immunostaining. Through these methods, it was identified the genotypes of the offspring and determined the levels of expression of EGFP in two cell types. A difference in expression between the (EGFP +/+) and (EGFP +/-) genotypes was also observed in addition to the presence of autofluorescence. Further studies on the natural fluorescence of cells with the (EGFP +/-) genotype and that induced by presence of the EGFP are necessary.

A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP.

Ontogenia de los estróbilos, desarrollo de los esporangios y esporogénesis de Equisetum giganteum (Equisetaceae) en los Andes de Colombia

Ontogeny of strobili, sporangia development and sporogenesis in Equisetum giganteum (Equisetaceae) from the Colombian Andes. Studies on the ontogeny of the strobilus, sporangium and reproductive biology of this group of ferns are scarce. Here we describe the ontogeny of the strobilus and sporangia, and the process of sporogenesis using specimens of E. giganteum from Colombia collected along the Rio Frio, Distrito de Sevilla, Piedecuesta, Santander, at 2 200m altitude. The strobili in different stages of development were fixed, dehydrated, embedded in paraffin, sectioned using a rotatory microtome and stained with the safranin O and fast green technique. Observations were made using differential interference contrast microscopy (DIC) or Nomarski microscopy, an optical microscopy illumination technique that enhances the contrast in unstained, transparent. Strobili arise and begin to develop in the apical meristems of the main axis and lateral branches, with no significant differences in the ontogeny of strobili of one or other axis. Successive processes of cell division and differentiation lead to the growth of the strobilus and the formation of sporangiophores. These are formed by the scutellum, the manubrium or pedicel-like, basal part of the sporangiophore, and initial cells of sporangium, which differentiate to form the sporangium wall, the sporocytes and the tapetum. There is not formation of a characteristic arquesporium, as sporocytes quickly undergo meiosis originating tetrads of spores. The tapetum retains its histological integrity, but subsequently the cell walls break down and form a plasmodium that invades the sporangial cavity, partially surrounding the tetrads, and then the spores. Towards the end of the sporogenesis the tapetum disintegrates leaving spores with elaters free within the sporangial cavity. Two layers finally form the sporangium wall: the sporangium wall itself, with thickened, lignified cell walls and an underlying pyknotic layer. The mature spores are chlorofilous, morphologically similar and have exospore, a thin perispore and two elaters. This study of the ontogeny of the spore-producing structures and spores is the first contribution of this type for a tropical species of the genus. Fluorescence microscopy indicates that elaters and the wall of the sporangium are autofluorescent, while other structures induced fluorescence emitted by the fluorescent dye safranin O. The results were also discussed in relation to what is known so far for other species of Equisetum, suggesting that ontogenetic processes and structure of characters sporoderm are relatively constant in Equisetum, which implies important diagnostic value in the taxonomy of the group. Rev. Biol. Trop. 59 (4): 1845-1858. Epub 2011 December 01.

Estudios sobre la ontogenia del estróbilo, los esporangios y la biología reproductiva de Equisetum son escasos, por lo tanto, para la especie E. giganteum, se estudiaron estos aspectos en especímenes recolectados a orillas del Río Frío, Santander, Colombia (2 200m). Los estróbilos en diferentes etapas de maduración fueron fijados, deshidratados, embebidos en parafina, seccionados en micrótomo rotatorio y teñidos con safranina O-fast green. Las observaciones se efectuaron mediante un microscopio óptico de alta resolución con contraste diferencial de interferencia (DIC) y microscopio de fluorescencia. Los estróbilos se inician a partir del meristemo apical, tanto en el eje principal como en los laterales, sin diferencias en el proceso de ontogenia y esporogénesis entre estróbilos de diferentes ejes. Sucesivas mitosis y diferenciación celular conducen al crecimiento del estróbilo, y a la formación de los esporangióforos peltados, formados por el manubrio, o porción basal con aspecto de pedicelo, el escutelo, o porción apical aplanada y las iniciales del esporangio, los cuales se diferenciarán para formar la pared del esporangio, los esporocitos y el tapete. No se forma arquesporio y los esporocitos experimentan meiosis para formar tétradas de esporas. El tapete mantiene la integridad histológica hasta la formación de las tétradas y en esa etapa forma un plasmodio que invade la cavidad esporangial la cual rodea parcialmente las tétradas y luego las esporas, y aparecen las cámaras plasmodiales, un término propuesto aquí para las formaciones designadas en inglés "tapetal gaps". La pared del esporangio queda reducida a dos capas celulares: una externa con engrosamientos lignificados en todas las paredes celulares y una interna picnótica. Al finalizar la esporogénesis, el tapete degenera, y las esporas, con exosporio, perisporio delgado, casi membranáceo y eláteres quedan libres en la cavidad esporangial. El esporodermo, los núcleos y nucléolos presentan fluorescencia roja, inducida por coloración con safranina O, mientras que los eláteres y las células de la pared del esporangio presentan autofluorescencia amarillo-naranja.

Autofluorescencia de fondo en pacientes con coriorretinopatía serosa central / Fundus autofluorescence in patients with central serous chorioretinopathy

OBJETIVO: Describir las características de la autofluorescencia de fondo en pacientes con coriorretinopatía serosa central y determinar su relación con las alteraciones funcionales y anatómicas de la región macular. MÉTODOS: Estudio descriptivo, transversal en 21 ojos (21 pacientes) con coriorretinopatia serosa central en diferentes estadios evolutivos. Se identificó el patrón de autofluorescencia en el área de desprendimiento neurosensorial, se usó el angiógrafo retinal de Heidelberg a 30°. Con la tomografía de coherencia óptica, se midió el grosor macular central y se describieron los cambios anatómicos. A 12 de los pacientes se les realizó angiografía fluoresceínica en el Angiógrafo Retinal de Heidelberg. RESULTADOS: Se encontró hipoautofluorescencia en el 51,90 por ciento, hiperautofluorescencia en el 42,86 por ciento; coexisten ambos en el 4,76 por ciento. No hubo diferencia significativa entre la hiperautofluorescencia y la hipoautofluorescencia en cuanto a agudeza visual mejor corregida (media de 0,43 y 0,49, respectivamente; p= 0,184), ni respecto al grosor macular central (media de 371,3 µm y 388,1 µm , respectivamente; p= 0,867), pero si entre el tiempo de evolución y el patrón de autofluorescencia, (p= 0, 023). En ojos con hiperautofluorescencia se observó por tomografía de coherencia óptica irregularidad en capas externas y en epitelio pigmentario de la retina. El 83,3 por ciento de los casos que requirieron angiografó fluoresceínica presentaron hiperfluorescencia que coincidió con la hipoautofluorescencia del sitio de fuga. CONCLUSIONES: En la coriorretinopatía serosa central se encuentran diferentes patrones de autofluorescencia, los que reflejan cambios en la retina externa y epitelio pigmentario de la retina. La autofluorescencia puede ayudar a identificar el sitio de difusión focal en el epitelio pigmentario de la retina

OBJECTIVES: To describe the peculiarities of the Fundus Autofluorecense in patiens with Central Serous Chorioretinopathy (CSC), and determine the relationship with functional and anatomic disturbances of the macular region. METHODS: Cross-sectional descriptive study performed in 21 eyes (21 patients), suffering from central serous chorioretinopathy in different statings. The pattern of autofluorecense in the neurosensoral detachment was detected with the Heidelberg´s Retinal Angiograph (HRA2) on 30° position. The optical coherence tomography (3D-OCT-Topcon) (Nidek) measured the central macular thickness and exposed the anatomic changes. Flourescein angiografy with HRA2 was performed on 12 patients. RESULTS: Hypoautofluorescense was detected in 51,90 percent and hyperautofluorescense in 42,86 percent of cases respectively; both disorders were present in 4,76 percent of the patients. There was no significant difference between hyperautofluorecense and hypoautofluorescense as to the best corrected visual acuity (mean of 0,43 and 0,49, respectively; p= 0.184), and the central macular thickness (mean of 371.3 µm and 388.1 µm , respectively; p= 0.867). However, the difference was significant between time of evolution and the pattern of autoflorescence (p= 0.023). In those eyes affected by hyperautofluorescense, the optical coherence tomography allowed observing irregularities on the external layers and on the retinal pigmentary epithelium. The 83,3 percent of cases who needed AGF presented with hyperautofluorescense that matched with hypoautofluorescence in the leakage site. CONCLUSIONS: In the central serous chorioretinopathy, different autofluorescense patterns may be found that reflect changes in the external retina and the retinal pigmentary epithelium. The autofluorescense may help to identify the focal diffusion site