Resistencia Bacteriana por beta lactamasas de epectro extendido: un problema creciente / BACTERIAL RESISTANCE BY EXTENDED SPECTRUM BETA LACTAMASE: A GROWING PROBLEM

Las ß-lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas que generan resistencia a la mayoría de los b-lactámicos, incluyendo a penicilinas, cefalosporinas de primera, segunda, tercera generación, monobactámicos, excepto a la cefamicina y carbapenémicos. Esta resistencia se vio incrementada por el indiscriminado uso de cefalosporinas para infecciones incluso leves. También cuentan con frecuencia con genes para otros antimicrobianos como ser aminoglucosidos, tetraciclinas y cotrimoxazol. Además, las cepas BLEE (+) son más frecuentemente resistentes a quinolonas que las cepas no productoras de BLEE. La resistencia actual que existe a las betalactamasas de espectro extendido aumenta las tasas de mortalidad, ya que en pacientes con infecciones se inician tratamientos empíricos, que al no tener buena respuesta ocasionan que el cuadro clínico llegue a evolucionar hasta la sepsis. El tratamiento de elección en estos casos es el uso de carbapenémicos, recomendación que se basa principalmente en el resultado de resistencia observada in vitro. Los nuevos carbapenémicos, como ertapenem o doripenem parecen tener una excelente actividad. Se realiza una revisión de los aspectos básicos de la aparición de cepas BLEE y su importancia en el manejo de pacientes con cuadros infecciosos, que son de frecuente presentación en los Hospitales de referencia

Genes blaTEM, blaSHV y blaCTX-M en enterobacterias productoras de b-lactamasas de espectro extendido aisladas de pacientes con infección intrahospitalaria / blaTEM, blaSHV y blaCTX-M genes in extended-spectrum b-lactamases producing enterobacterias isolated from patients with hospital-acquired infections

El objetivo de este estudio fue identificar los genes blaTEM, blaSHV y blaCTX-M en aislados clínicos de enterobacterias productoras de b-lactamasas de espectro extendido (BLEE), recolectadas entre septiembre y noviembre de 2005. Además de la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, los aislados también mostraron resistencia a cloranfenicol (59,2%) amikacina (37,0%) y gentamicina (40,7%) y se mostraron sensibles a imipenem y meropenem. Nueve cepas lograron transferir la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, así como la producción de BLEE. En los aislados clínicos se detectaron los genes blaSHV, blaTEM y blaCTX-M, donde los tipos blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a y blaCTX-M-1 fueron los prevalentes; mientras que en las transconjugantes sólo se detectaron blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a. Se identificaron en total siete tipos de genes, de los cuales cinco eran codificantes de enzimas tipo BLEE, lo que demuestra que en el centro hospitalario la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación es debida a diversas enzimas.

The objective of the present investigation was to identify the blaTEM, blaSHV and blaCTX-M genes on extended-spectrum b-lactamases (ESBL) producing Enterobacteriaceae from clinical isolates, collected between September and November 2005. In addition to third-generation cephalosporin resistance, the isolates also showed resistance to chloramphenicol (59.2%), amikacin (37.0%) and gentamicin (40.7%), and demonstrated sensitivity to imipenem and meropenem. Nine strains were capable of transferring third-generation cephalosporin resistance, as well as the production of ESBL. In the clinical isolates, the genes blaSHV, blaTEM and blaCTX-M were detected, being more prevalent the types blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a and blaCTX-M-1; while in the trans-conjugated only blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a were found. In total, seven types of genes were identified, five of which were codifying genes for ESBL-type enzymes. This demonstrates that in the hospital center, resistance to third-generation cephalosporin is mediated by several enzymes.

Actividad del (2E)-3-(2, 3-dimetoxifenil)-1-(4-metilfenil) prop-2-en-1-ona en presencia del poli(ácido maleico-co-2-vinil-pirrolidona) sobre un aislamiento clínico de Staphylococcus aureus / Activity of (2E)-3-(2, 3-dimetoxifenil)-1-(4-metilfenil) prop-2-en-1-ona in the presence of poli(maleic acid-co-2-vinyl-pyrrolidone)

Introducción: debido a la problemática actual de fármaco-resistencia hacia los antibióticos b-lactámicos, se ha hecho necesario, en busca de una solución, trabajar con nuevas moléculas con potencial farmacológico, así como utilizar novedosos sistemas poliméricos como matrices o excipientes farmacéuticos. Objetivo: evaluar la actividad antibiótica de la ampicilina, combinada con un compuesto sintético de tipo chalcona, denominado (2E)-3-(2,3-dimetoxifenil)-1-(4-metilfenil)prop-2-en- 1-ona, sobre un aislamiento clínico de Staphylococcus aureus resistente a penicilinas, en presencia de una matriz polimérica hidrosoluble denominada poli(ácido maleico-co-2-vinilpirrolidona). Materiales y métodos: el compuesto sintético y la matriz polimérica se obtuvieron por métodos descritos en la literatura. Se usó un aislamiento clínico de Staphylococcus aureus resistente a penicilinas y se hicieron ensayos de actividad antibiótica por la técnica de macrodilución en caldo, de la cual se obtuvieron las concentraciones inhibidoras mínimas de los compuestos evaluados. Resultados: la mezcla ampicilina-chalcona muestra un efecto antibiótico menor que el de su referente ampicilina-sulbactam. No obstante, cuando se utiliza la matriz polimérica en combinación con la ampicilina-chalcona se aprecia un incremento significativo de la actividad antibiótica, evidenciado en que la concentración inhibidora mínima es la mitad de la del referente comercial.

Introduction: Due to the current problem of resistance to b-lactam antibiotics, it has become necessary, in search of a solution, to work with new molecules with pharmacological potential, and to use novel polymeric systems as matrices or pharmaceutical excipients. Objective: To evaluate the antibiotic activity of ampicillin combined with a synthetic chalcone-type compound, the (2E)-3-(2,3-dimethoxyphenyl)-1-(4- methylphenyl) prop-2-en-1-one, on a clinical isolate of penicillin-resistant Staphylococcus aureus in the presence of a water soluble polymer matrix known as poly(maleic acid-co-2-vinyl-pyrrolidone). Materials and methods: The synthetic compound and the polymeric matrix were obtained by previously described methods. Tests for antibiotic activity against the strain of penicillin-resistant Staphylococcus aureus were done by the broth dilution technique which provided the minimal inhibitory concentrations of the compounds tested. Results: The chalcone-ampicillin mix shows lesser antibiotic effect than the ampicillin-sulbactam used as referent. However, when such mix is combined with the polymer matrix, antibiotic activity significantly increases as evidenced by decrease in the minimal inhibitory concentration with respect to the ampicillin-sulbactam referent.

Detección de cepas productoras de b-lactamasas de espectro extendido por el sistema DIRAMIC: Comparación con los métodos doble difusión con discos y E-test / Detection of expanded-espectrum-betalactamases by DIRAMIC system: Comparison with the double-disk synergy test and E-test

The capacity of the DIRAMIC system to detect strains producing extended-spectrum-betalactamase (ESBL) was evaluated through the comparison with two phenotypic confirmatory tests: double-disk synergy test and E-test. Ninety seven clinical isolates of Escherichia coli y Klebsiella spp. previously characterized; not repeated and suspected of being ESBL producers were studied by the three methods. In comparison with E-test and double-disk synergy test, DIRAMIC system showed a sensitivity of 85.7 percent and 92.7 percent as well as specificity of 100 percent and 92.9 percent; respectively. The values found have a very high degree of concordance (kappa index > 0.80). The results obtained vouch for the utility of the DIRAMIC as a rapid method to alert about the presence of strains producing ESBL enzymes.

Se evaluó la capacidad del sistema DIRAMIC-Cuba para detectar cepas productoras de p-lactamasas de espectro extendido (BLEE), mediante la comparación con dos métodos fenotípicos confirmatorios: doble difusión con discos y E-test. Noventa y siete aislados clínicos de Escherichia coli y Klebsieüa spp previamente caracterizados, no repetidos, sospechosos de producir BLEE se estudiaron por los tres procedimientos para determinar sensibilidad, especificidad y concordancia entre los resultados. Para el sistema DIRAMIC se encontró una sensibilidad de 85,7 y 92,7 por ciento y una especificidad de 100 y 92,9 por ciento en comparación con E-test y doble difusión con discos, respectivamente. Los valores de concordancia encontrados fueron muy altos (índice kappa > 0,80). Los resultados obtenidos avalan la utilidad del sistema DIRAMIC como vía rápida, para alertar al médico acerca de la presencia de cepas productoras de BLEE, aunque es necesario profundizar y ampliar el estudio a modo de emitir resultados más precisos.

Salmonelosis extraintestinal: clínica, epidemiología y resistencia antimicrobiana / Salmonella extraintestinal infection: clinic features, epidemiology and antimicrobial resistance

Se evaluaron retrospectivamente las características clínicas de 59 pacientes con aislamientos extraintestinales de Salmonella enterica no Typhi y la resistencia antibiótica entre 1988 y 2004. En el 95% de los casos se conocieron las condiciones de base del huésped que consistieron en: enfermedad oncohematológica (15), lupus eritematoso sistémico (11), síndrome de inmuno deficiencia adquirida (10), pacientes internados en neonatología (8), colecistitis (4) y otras (7). Las formas clínicas halladas fueron: bacteriemias primarias (26), bacteriemias secundarias a gastroenteritis (15), artritis séptica (7), infección urinaria (12), infección intraabdominal (5), meningitis (1) y pericarditis (1). En 29 pacientes se aisló Salmonella enterica no Typhi en más de una localización. El 15,8% y el 21,0% de 59 aislamientos presentaron resistencia a cefalosporinas de 3ª generación y a ampicilina, respectivamente. Salmonella Agona causó un brote epidémico en la sala de cuidados intensivos de neonatología, aislándose de sangre en 5 pacientes y en uno también de LCR. Este serotipo fue multirresistente. Imipenem, trimetroprima-sulfometoxazol y ciprofloxacina fueron los antibióticos más activos (CIM 50: 0,5; 0,5 y 0,002 µg/mL, respectivamente).

The clinical and antimicrobial resistance of 59 patients with extraintestinal infection by nontyphi Salmonella was retrospectively evaluated from 1988 to 2004. In 95% of the patients there were underlying diseases, which included: oncohematologic disease (15), systemic lupus erythematosus (11), acquired immunodeficiency disease (AIDS) (10), patients of neonatal units (8), colecistitis (4), and other disorders (7). The clinical manifestation were primary bacteremias (26), bacteremias secondary to gastroenteritis (15), arthritis (7), urinary tract infections (12), abdominal infections (5), meningitis (1) and pericarditis (1). In 29 patients Salmonella enterica no Typhi was isolated in more than one site. Resistance to third generation cephalosporins was observed in 15,8 % of these isolates, and resistance to ampicillin in 21,0%. Salmonella Agona was isolated from an outbreak in neonatal ICU; the organism was recovered from blood samples of five neonates and in one patient also isolated from CSF. These isolates showed multiresistance. Imipenem, trimetoprim-sulfametoxazol and ciprofloxacin were the three most active antimicrobial agents (MIC 50: 0.5, 0.5 and 0.002 µg/mL, respectively).

Caracterización fenotípica y genotípica de la resistencia enzimática a las cefalosporinas de tercera generación en Enterobacter spp. / Phenotypic and genotypic characterization of resistance to third-generation cephalosporins in Enterobacter spp.

Enterobacter spp. es un patógeno intrahospitalario que presenta múltiples mecanismos de resistencia a los antibióticos b-lactámicos. Se caracterizaron fenotípica y genotípicamente las diferentes b-lactamasas presentes en 27 aislamientos consecutivos e ininterrumpidos de Enterobacter spp. (25 Enterobacter cloacae y 2 Enterobacter aerogenes). También se evaluó la habilidad de diferentes métodos fenotípicos para detectar b-lactamasas de espectro extendido (BLEE) en estos microorganismos. En 15/27 aislamientos (63%) se observó resistencia a las cefalosporinas de tercera generación. En 12 de los aislamientos resistentes se detectó un alto nivel de producción de cefalosporinasa cromosómica, siendo 6 de ellos también productores de PER-2. Dicha resistencia en los 3 aislamientos restantes se debió exclusivamente a la presencia de BLEE, PER-2 en 2 de ellos y CTX-M-2 en un caso. Sólo CTX-M-2 se detectó con todas las cefalosporinas probadas en los ensayos de sinergia, utilizando el método de difusión, mientras que cefepima mejoró la detección de PER-2 en 7/8 aislamientos productores de esta BLEE, 4/8 utilizando la prueba de doble disco y 7/8 comparando discos de cefepima con y sin el agregado de ácido clavulánico. El método de dilución empleado solo detectó 1/9 BLEE al comparar las cefalosporinas con y sin el agregado de inhibidor.

Enterobacter spp. are becoming increasingly frequent nosocomial pathogens with multiple resistance mechanism to b-lactam antibiotics. We carried out the phenotypic and genotypic characterization of beta-lactamases in 27 Enterobacter spp. (25 Enterobacter cloacae y 2 Enterobacter aerogenes), as well as the ability of different extended spectrum b-lactamase (ESBL) screening methods. Resistance to third generation cephalosporins was observed in 15/27 (63%) isolates. Twelve resistant isolates produced high level chromosomal encoded AmpC b-lactamase; 6 of them were also producers of PER-2. Resistance to third generation cephalosporins in the remaining 3 isolates was due to the presence of ESBLs, PER-2 in 2 cases, and CTX-M-2 in the other. Only CTX-M-2 production was detected with all tested cephalosporins using difusion synergy tests, while cefepime improved ESBLs detection in 7/8 PER-2 producers, 4/8 in the inhibitor aproximation test and 7/8 with double disk test using cefepime containing disk with and without clavulanic acid. Dilution method, including cephalosporins with and without the inhibitor detected 1/9 ESBLs producers.