Evaluation of protection against bovine viral diarrhea virus type 2 after vaccination of the calves with bovine viral diarrhea virus type 1 combo inactivated vaccine / Avaliação da proteção contra o vírus da diarreia viral bovina tipo 2 após vacinação de bezerros com vacina combinada inativada do vírus da diarreia viral bovina tipo 1

This study was designed to evaluate the extent of the protection for bovine viral diarrhea virus type 2 (BVDV-2) infection, afforded by vaccination with a combo inactivated vaccine, which contains bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1) and infectious bovine rhinotracheitis virus (IBRV). Five 3-4-month-old calves were intramuscularly vaccinated with a single dose of the combo vaccine and boosted with same dose three weeks after the first vaccination, with five mock immunized calves serving as a control group. Twenty-one days after the second vaccination, all calves were challenged with BVDV-2 SX08 strain by spray into nostril. The unvaccinated animals developed typical clinical signs of high rectal temperature, diarrhoea with erosions and a dramatic drop in leukocyte counts. These signs occured markedly less in all vaccinated animals, the rectal temperature, leukopenia and virarmia of which, were significantly less than the mock immunized calves. It can be concluded that vaccination with the combo inactivated vaccine affords cross-protection against clinical effects of a challenge-infection with BVDV-2 SX08 strain, although it was part protection.(AU)

Este estudo foi desenvolvido para avaliar a extensão da proteção contra a infecção pelo vírus da diarréia viral bovina tipo 2 (BVDV-2) através da vacinação com uma vacina combinada inativada contendo o vírus da diarréia viral bovina tipo 1 (BVDV-1) e vírus da rinotraqueíte de bovinos infecciosos (IBRV). Cinco bezerros com 3 a 4 meses de idade foram vacinados via intramuscular com uma dose única da vacina combinada e reforçados com a mesma dose três semanas após a primeira vacinação, com cinco bezerros imunizados em simulação servindo como grupo controle. Vinte e um dias após a segunda vacinação, todos os bezerros foram desafiados com a cepa BVDV-2 SX08 por spray na narina. Os animais não vacinados desenvolveram sinais clínicos típicos, como alta temperatura retal, diarréia com erosões e queda drástica na contagem de leucócitos. Estes sinais tiveram ocorrência significativamente menor em todos os animais vacinados, cuja temperatura retal, leucopenia e virarmia eram significativamente menores do que os bezerros simulados. É possível concluir que a vacinação com a vacina combinada inativada proporciona proteção cruzada contra os efeitos clínicos de uma infecção provocada pela cepa BVDV-2 SX08, embora tenha sido parcialmente protegida.(AU)

Primera evidencia del Virus de Diarrea Viral Bovina (VDVB) genotipo 2 en Colombia / First evidence of Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) genotype 2 in Colombia

RESUMEN El Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB) es un patógeno que afecta los hatos bovinos. El virus ha sido clasificado en dos biotipos (citopático y no citopático) y en 3 genotipos (1, 2 y 3) según su secuencia nucleotídica. El propósito de este estudio fue determinar la presencia del VDVB genotipo 2 (VDVB-2) en Colombia, mediante el estudio de cuatro zonas representativas de producción ganadera por medio de RT-PCR en muestras de suero y cartílago de oreja. Para ello, se recolectaron los sueros preparto de 379 vacas, de 274 terneros precalostrales (antes de que se les diera calostro), y de 145 terneros de 25 días post-nacimiento. Adicionalmente, se tomaron 181 biopsias de cartílago de oreja de estos terneros. Se realizó RT-PCR a todas las muestras para determinar la presencia o ausencia del VDVB. Aquellas muestras que resultaron positivas se evaluaron adicionalmente mediante dos métodos para determinar su genotipo: a) una nueva RT-PCR con primers específicos para el VDVB-2, y b) una PCR diferente con la que se obtuvo un producto de 296 pb, el cual se sometió a digestión enzimática. Los resultados mostraron que 17 (4,48%) muestras de suero preparto fueron positivas para Pestivirus, de las cuales 6 correspondieron al VDVB-2 (1,58%). Ninguna de las muestras de suero obtenidas de los terneros resultó positiva para el VDVB-2. Finalmente, 18 (9,9%) biopsias de cartílago de oreja fueron positivas al VDVB, 14 (7,7%) de las cuales resultaron positivas para el VDVB-2. El presente estudio es la primera evidencia documentada de la presencia del VDVB-2 en bovinos de Colombia.

ABSTRACT The bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a pathogen that affects cattle. The virus has been classified into two biotypes (cytopathic and non-cytopathic) and three genotypes (1, 2 or 3) according to their nucleotide sequence. The objective of this study was to determine the presence of the BVDV genotype 2 (BVDV-2) in Colombia, through the study of four representative areas of cattle production by means of RT-PCR conducted on serum and ear notches. For this purpose, sera were collected from 379 prepartum cows, 274 calves born to these cows (before they were given colostrum), and 145 25-day- old calves. Additionally, 181 ear notches were taken from these calves. RT-PCR was performed on all samples to determine the presence or absence of BVDV. Tha samples that tested positive were further assessed by two methods to determine their genotype: a) a new RT-PCR with specific primers for BVDV-2, and b) a different PCR obtaining a product of 296 bp, which was further subjected to enzymatic digestion. The results showed that 17 (4.48%) prepartum sera samples were positive for Pestiviruses, from which 6 corresponded to BVDV-2 (1.58%). None of the sera obtained from the calves were positive for BVDV-2. Finally, 18 (9.9%) ear notches were positive for BVDV, 14 (7.7%) of which were positive for BVDV-2. The present study is the first documented evidence of the presence of the BVDV-2 in cattle from Colombia.

Ocorrência de animais persistentemente infectados pelo vírus da diarréia viral bovina em rebanhos bovinos nos Estados de Minas Gerais e São Paulo / Occurrence of persistently infected animals with bovine viral diarrhoea virus in cattle herds from the States of Minas Gerais and São Paulo, Brazil

A pesquisa de animais persistentemente infectados (PI) pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) foi realizada em 26 rebanhos bovinos, não vacinados contra o BVDV, localizados nos Estados de Minas Gerais e São Paulo, Brasil. Utilizando uma estratégia de amostragem, de cada rebanho foram obtidas cinco amostras de sangue de bezerros, entre 6 e 12 meses de idade, e os soros sanguíneos foram submetidos ao teste de virusneutralização (VN) para o BVDV-1 e o BVDV-2. Os rebanhos que apresentaram pelo menos três das cinco amostras reagentes a um dos genótipos do BVDV, e com títulos de anticorpos superiores a 128, foram selecionados para a pesquisa de animais PI. Em três rebanhos que apresentaram tal condição, foram colhidas amostras pareadas de sangue de todos os bovinos do rebanho, com intervalo de 30 dias entre as colheitas, e o soro sanguíneo foi submetido ao teste de VN para o BVDV-1 e o BVDV-2. Nas amostras não reagentes a pelo menos um dos genótipos do BVDV e naquelas provenientes de bovinos com menos de seis meses de idade, realizou-se a pesquisa do BVDV pela reação em cadeia da polimerase precedida pela transcrição reversa (RT-PCR). Dos rebanhos analisados, foram detectados dois animais PI a partir de amostras obtidas nas colheitas pareadas provenientes de um rebanho localizado no Estado de Minas Gerais.

The research on persistently infected (PI) animals with bovine viral diarrhoea virus (BVDV) was conducted in 26 cattle herds, which were not BVDV vaccinated, located in the states of Minas Gerais and São Paulo, Brazil. Using a sampling strategy, five samples of blood were collected from 6 to 12-month-old calves of each herd, and the blood sera were tested by virusneutralization test (VN) to BVDV-1 and BVDV-2. The herds that had at least three out of five samples reacting to one of the genotypes of BVDV and antibody titers greater than 128 were selected to PI animals research. In three of the herds that matched the before-mentioned criteria, paired blood samples were collected from all its individuals considering a collection interval of 30 days. The blood sera of these samples were VN tested against BVDV-1 and BVDV-2. In samples not reacting to at least one of the BVDV genotypes and also in those collected from calves of less than six months of age, virus research was undertaken by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). From the examined herds, two PI animals were detected in paired samples obtained from a herd located in the state of Minas Gerais.

Comparação dos testes de virusneutralização contra os genótipos 1 e 2 do vírus da diarreia viral bovina (BVDV-1 e BVDV-2) em bovinos de rebanhos naturalmente infectados / Comparison of virusneutralization tests against genotypes 1 and 2 of the bovine viral diarrhoea virus (BVDV-1 and BVDV-2) in cattle of naturally infected herds

Os resultados dos testes de virusneutralização (VN) contra os genótipos do vírus da diarreia viral bovina (BVDV-1 e BVDV-2), bem como os respectivos títulos de anticorpos, foram comparados em 1.925 amostras de soro sanguíneo obtidas de rebanhos bovinos naturalmente infectados e não vacinados contra o BVDV, provenientes dos Estados de São Paulo e Minas Gerais. A proporção de amostras reagentes entre os genótipos foi analisada pelo Teste de McNemar, e os títulos de anticorpos das amostras reagentes ao BVDV-1 e ao BVDV-2 foram comparados pelo Teste de Wilcoxon. Não foi verificada discordância na proporção de bovinos reagentes ao BVDV-1 e ao BVDV-2 (P>0,05). No entanto, houve discordância entre os títulos de anticorpos detectados nos testes de VN contra os genótipos 1 e 2 do BVDV (P<0,0001). Embora a proporção de animais reagentes contra ambos os genótipos do BVDV tenha sido semelhante, resultados falso-negativos seriam obtidos se 67 amostras (3,5 por cento) tivessem sido submetidas apenas ao teste de VN, para o BVDV-1, e em 51 amostras (2,65 por cento), apenas para o BVDV-2. Alguns rebanhos apresentaram títulos de anticorpos superiores para o BVDV-1, enquanto outros para BVDV-2, demonstrando assim a ocorrência da infecção pelos diferentes genótipos do vírus entre os rebanhos analisados. Portanto, tais resultados demonstraram a necessidade da inclusão de ambos os genótipos do BVDV nos testes de VN.

The virusneutralization test (VN) results against bovine viral diarrhoea virus genotypes (BVDV-1 and BVDV-2), and the respective titers of antibodies, were compared in 1,925 serum samples collected from unvaccinated and naturally infected cattle herds, located in the states of São Paulo and Minas Gerais, Brazil. The proportion of reagent samples among the genotypes was evaluated by McNemar test and the antibody titers against BVDV-1 and BVDV-2 were compared by Wilcoxon test. There were no disagreement in the proportion of BVDV-1 and BVDV-2 reagent samples (P>0.05). However, there was a disagreement among titers of antibodies detected in the VN tests against BVDV genotypes (P<0.0001). Although the proportion of reagent animals to BVDV genotypes was similar, false negative results would be obtained if 67 samples (3.5 percent) had been submitted only to VN test against BVDV-1, and 51 samples (2.65 percent) only against BVDV-2. Some herds had higher titers of antibodies for BVDV-1, while others for BVDV-2, thus demonstrating the occurrence of infection by different virus genotypes among the analyzed herds. Therefore, these results demonstrated the need for inclusion of both BVDV genotypes in VN tests.