First report of detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp.) in the state of Maranhão / Primeiro relato da detecção de DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp.) no Estado do Maranhão

Abstract The aim of this study was to report on detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp.) in the state of Maranhão. To conduct this study, 200 farmed oysters were acquired in the municipality of Raposa and 100 in Paço do Lumiar; and a further 100 oysters were taken from the natural stock in the municipality of Primeira Cruz. This total of 400 specimens sampled was divided into 80 pools composed of five animals each. The gills and visceral mass of each oyster were removed for DNA extraction (per pool of oysters), using a commercial kit. The nested PCR technique (with the primer SAG-1) was then used to investigate any presence of protozoa. This molecular technique demonstrated the presence of DNA of T. gondii in 2.5% of the pools of oysters (n = 2/80): these oysters were exclusively from farms. The results from this study allow the conclusion that oysters of the genus Crassostrea that are farmed in the state of Maranhão are capable of filtering oocysts of T. gondii and maintaining them in their tissues. They are therefore potential sources of contamination for humans and other animals.

Resumo: Objetivou-se com este estudo relatar a detecção do DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp.) no estado do Maranhão. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa, e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz. Do total de 400 exemplares amostrados, formaram-se 80 pools em que cada pool foi constituído por cinco animais. De cada ostra foi procedida à retirada das brânquias e massa visceral, seguido da extração de DNA de cada pool de ostras, com a utilização de kit comercial. Posteriormente, realizou-se a pesquisa do protozoário por meio da técnica de nested PCR (primer SAG-1). Com a técnica molecular utilizada, foi diagnosticado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools de ostras oriundas exclusivamente de cultivo. Com os resultados obtidos neste estudo, conclui-se que ostras do gênero Crassostrea sp., cultivadas no estado do Maranhão, são capazes de filtrar e manter nos seus tecidos oocistos de T. gondii, sendo, portanto, fontes potenciais de contaminação para seres humanos e outros animais.

Virulence genes in Escherichia coli isolates from commercialized saltwater mussels Mytella guyanensis (Lamarck, 1819) / Presença de genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes de sururu Mytella guyanensis (Lamarck, 1819) comercializado

Abstract The isolation of Escherichia coli from food is a major concern. Pathogenic strains of these bacteria cause diseases which range from diarrhea to hemolytic-uremic syndrome. Therefore the virulence genes in E. coli isolates from the mussel ( Mytella guyanensis) commercialized in Cachoeira, Bahia, Brazil were investigated. Samples were purchased from four vendors: two from supermarkets and two from fair outlets. They were conditioned into isothermal boxes with reusable ice and transported to the laboratory for analysis. E. coli strains were isolated in eosin methylene blue agar, preserved in brain-heart infusion medium with 15% glycerol and stored at -20 °C, after microbiological analysis. Virulence genes in the isolated strains were identified by specific primers, with Polymerase Chain Reaction. Twenty-four isolates were obtained, with a prevalence of elt gene, typical from enterotoxigenic infection, in 75% of the isolates. The stx and bfpA genes, prevalent in enterohemorragic and enteropathogenic E. coli, respectively, were not detected. The occurrence of elt virulence-related gene in the E. coli isolates of Mytella guyanensis reveals urgent improvement in food processing, including good handling practices, adequate storage and cooking before consumption, to ensure consumer's health.

Resumo O isolamento de Escherichia coli a partir de alimentos é uma grande preocupação, pois cepas patogênicas desta bactéria podem causar desde diarreia até síndrome hemolítico-urêmica. Diante do exposto, o objetivo do trabalho foi pesquisar genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes do sururu Mytella guyanensis comercializado na cidade de Cachoeira, Bahia, Brasil. As amostras foram adquiridas de quatro comerciantes, sendo duas de mercados e duas em pontos de venda na feira livre da cidade de Cachoeira, acondicionadas em caixas isotérmicas com gelo reutilizável e transportadas até o laboratório para a análise. Após a análise microbiológica, as cepas de Escherichia coli foram isoladas em ágar Eosina Azul de Metileno e preservadas em caldo Brian Heart Infusion e glicerol a 15% e mantidas a - 20° C. A identificação dos genes de virulência nas cepas isoladas foi realizada utilizando primers específicos, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase. Foram obtidos 24 isolados de Escherichia coli, destes a prevalência do gene elt , característico de Escherichia coli enterotoxigênica, foi de 75% dos isolados. Não houve a detecção dos genes stx e bfpA nos isolados, os quais são prevalentes nas cepas de Escherichia coli enterohemorrágica e Escherichia coli enteropatogênica, respectivamente. A presença do gene elt relacionado à virulência de Escherichia coli nos isolados de Mytella guyanensis revela a necessidade da melhoria no processamento, incluindo boas práticas de manipulação, armazenamento adequado e cocção previa ao consumo, visando a garantia da saúde do consumidor.

Virulence genes in Escherichia coli isolates from commercialized saltwater mussels Mytella guyanensis (Lamarck, 1819)

Abstract The isolation of Escherichia coli from food is a major concern. Pathogenic strains of these bacteria cause diseases which range from diarrhea to hemolytic-uremic syndrome. Therefore the virulence genes in E. coli isolates from the mussel ( Mytella guyanensis) commercialized in Cachoeira, Bahia, Brazil were investigated. Samples were purchased from four vendors: two from supermarkets and two from fair outlets. They were conditioned into isothermal boxes with reusable ice and transported to the laboratory for analysis. E. coli strains were isolated in eosin methylene blue agar, preserved in brain-heart infusion medium with 15% glycerol and stored at -20 °C, after microbiological analysis. Virulence genes in the isolated strains were identified by specific primers, with Polymerase Chain Reaction. Twenty-four isolates were obtained, with a prevalence of elt gene, typical from enterotoxigenic infection, in 75% of the isolates. The stx and bfpA genes, prevalent in enterohemorragic and enteropathogenic E. coli, respectively, were not detected. The occurrence of elt virulence-related gene in the E. coli isolates of Mytella guyanensis reveals urgent improvement in food processing, including good handling practices, adequate storage and cooking before consumption, to ensure consumers health.

Resumo O isolamento de Escherichia coli a partir de alimentos é uma grande preocupação, pois cepas patogênicas desta bactéria podem causar desde diarreia até síndrome hemolítico-urêmica. Diante do exposto, o objetivo do trabalho foi pesquisar genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes do sururu Mytella guyanensis comercializado na cidade de Cachoeira, Bahia, Brasil. As amostras foram adquiridas de quatro comerciantes, sendo duas de mercados e duas em pontos de venda na feira livre da cidade de Cachoeira, acondicionadas em caixas isotérmicas com gelo reutilizável e transportadas até o laboratório para a análise. Após a análise microbiológica, as cepas de Escherichia coli foram isoladas em ágar Eosina Azul de Metileno e preservadas em caldo Brian Heart Infusion e glicerol a 15% e mantidas a - 20° C. A identificação dos genes de virulência nas cepas isoladas foi realizada utilizando primers específicos, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase. Foram obtidos 24 isolados de Escherichia coli, destes a prevalência do gene elt , característico de Escherichia coli enterotoxigênica, foi de 75% dos isolados. Não houve a detecção dos genes stx e bfpA nos isolados, os quais são prevalentes nas cepas de Escherichia coli enterohemorrágica e Escherichia coli enteropatogênica, respectivamente. A presença do gene elt relacionado à virulência de Escherichia coli nos isolados de Mytella guyanensis revela a necessidade da melhoria no processamento, incluindo boas práticas de manipulação, armazenamento adequado e cocção previa ao consumo, visando a garantia da saúde do consumidor.

Perfil socioeconômico dos marisqueiros e condições higiênicas adotadas na cadeia produtiva de ostra (mollusca, bivalvia) / Socio economic profile of shellfish collector and hygienic conditions in the production chain of oysters (mollusca, bivalvia) / Perfil socioeconómico de marisqueros y condiciones higiénicas adoptadas en la cadena productiva de ostra (mollusca, bivalvia)

O consumo de ostras na forma in natura exige muito cuidado e práticas higiênicas e sanitárias corretas pelos marisqueiros e demais manipuladores desse alimento durante o processo de beneficiamento à comercialização, para que não haja contaminação por microrganismos patogênicos e deteriorantes. O presente estudo teve como objetivo avaliar o perfil socioeconômico de marisqueiros e as condições higiênicas e sanitárias praticadas na cadeia produtiva de ostras do gênero Crassostrea desde a extração até a comercialização. No período de janeiro a abril de 2014, por meio da técnica de amostragem "Bola de Neve" foram selecionados 40 marisqueiros na Ilha de São Luís - MA, os quais foram entrevistados utilizando-se questionário semiestruturado. De acordo com os resultados, a maioria dos marisqueiros, possui ensino fundamental incompleto, faixa etária entre 21 e 30 anos e encontram-se em união estável ou casados. Parte das ostras são extraídas em bancos naturais na área de estudo, enquanto outra parte é proveniente de atravessadores oriundos de outros municípios maranhenses.Após a aquisição, pode demorar até três dias para serem comercializadas. Concluiu-se que as condições higiênicos sanitárias adotadas na atividade de extração de ostras até a comercialização são insatisfatórias, indicando falta de boas práticas em todas as etapas ao longo do processo de produção, o que pode representar riscos à saúde da população apreciadora do consumo in natura desse bivalve. Além disso, indica a necessidade de fiscalização dessa atividade, já que os organismos são transportados de forma inadequada e passam muito tempo até chegar ao consumidor final.

Consumption of fresh oysters requires very careful and correct hygienic and sanitary practices by shellfish collectors and other food handlers during the handling process to marketing, in order to avoid contamination by pathogenic microorganisms or deterioration. This study aimed to evaluate the socio-economic profile of shellfish collectors and the hygienic conditions applied in the production chain of Crassostrea oysters from extraction to marketing. In the period from January to April 2014, through a snowball sampling technique, a total of 40 shellfish collector were selected in Ilha de São Luís ­ MA. These collectors were interviewed using a semi-structured questionnaire. According to the results, most shellfish collector had not completed elementary school, aged between 21 and 30 years and married or co-habiting. Part of the oysters is extracted from natural stocks in the study area, while other oysters come from middlemen who bring them from other cities in Maranhão. After acquisition, they can take up to three days to be marketed. Therefore, it was concluded that although it is an important source of income, hygienic and sanitary conditions adopted in the oyster extraction activity are unsatisfactory, indicating a lack of good practices throughout the production process, which can pose risks to the population who consume this bivalve fresh. It also shows the need for supervision of the activity, since the organisms are improperly transported, spending much time until reaching the end consumer.

El consumo de ostras en la forma fresca, in natura, requiere gran cuidado y prácticas higiénicas sanitarias correctas por los marisqueros y otros manipuladores de ese alimento durante el proceso de beneficiación a la comercialización, para que no haya contaminación por microorganismos patógenos y de deterioración. Este estudio tuvo como objetivo evaluar el perfil socioeconómico de marisqueros y las condiciones higiénicas sanitarias practicadas en la cadena productiva de ostras del género Crassostrea, desde la extracción hasta la comercialización. En el período de enero a abril de 2014, a través de la técnica de muestreo "Bola de Nieve" se seleccionaron 40 marisqueros en la Isla de São Luís - MA, que fueron entrevistados mediante cuestionario semiestructurado. De acuerdo con los resultados, la mayoría de los marisqueros tiene enseñanza primaria incompleta, con edades comprendidas entre 21 y 30 años y se encuentran en unión estable o casados. Parte de las ostras son extraídas en bancos naturales en el área del estudio, mientras otra parte proviene de los intermediarios de otros municipios de Maranhão. Después de la adquisición, puede tardar hasta tres días para que sean comercializadas. Se concluye que las condiciones higiénicas sanitarias adoptadas en la actividad de extracción de ostras hasta la comercialización son insatisfactorias, indicando falta de buenas prácticas en todo el proceso de producción, lo que puede plantear riesgos a la salud de la población aficionada al consumo in natura de ese bivalvo. Además, indica la necesidad de supervisar esta actividad, ya que los organismos son transportados inadecuadamente y pasan mucho tiempo para llegar al consumidor final.

Population structure of the bivalve Anomalocardia brasiliana, (Gmelin, 1791) in the semi-arid estuarine region of northeastern Brazil / Estrutura populacional do bivalve Anomalocardia brasiliana, (Gmelin, 1791) em região estuarina do semi-árido do nordeste brasileiro

For several decades, the bivalve mollusk Anomalocardia brasiliana has been extracted in estuarine areas in the semi-arid region of northeastern Brazil. However, information on both dynamics and abundance of their populations are missing. In this context, the present study, therefore, investigated several aspects of the population structure of A. brasiliana on beaches near the estuary of the Apodi River in Northeast Brazil. The aims were to determine the population density of A. brasiliana during different times of the year, to estimate population parameters, and to relate species density and distribution to the abiotic characteristics of the region. Sampling was performed from March/2007 and May/2008, we collected samples of sediments and mollusks along 180 m transects in the intertidal area on the beaches Barra and Pernambuquinho, Grossos - RN. At each sampling site, samples of sediments and mollusks were collected in the intertidal area along 180 m transects. The highest and lowest average densities on Pernambuquinho beach were 1148 (April/2007), and 100 individuals.m2 (May/ 2008), respectively. On Barra beach, the highest and lowest densities were 1813 (April/2007) and 951 individuals.m2, (November/2007), respectively. The densities of A. brasiliana on both beaches were significantly different only in the months of January, April and May/ 2008. Length of the individuals ranged from 1 to 28 mm, with most individuals measuring between 22 and 24 mm. Length growth rate parameters for A. brasiliana were L = 28.68 mm and k = 0.61 year1 on Barra beach, and L = 29.87 mm and k = 0.48 year1 on Pernambuquinho beach. The growth rate curves for A. brasiliana suggest the presence of three well defined cohorts, thus pointing to a continuous reproduction cycle with peak recruitment between October/2007 and March/2008. A. brasiliana density decreased predominantly during the heavy rains of 2008, probably due to an accumulation of sediments and decreasing salinity. This disturbance probably affected population of this species in the region.

O molusco bivalve Anomalocardia brasiliana há décadas vem sendo coletado em região estuarina do semi-árido do nordeste Brasileiro. No entanto, são escassas as informações sobre a dinâmica e abundância de suas populações na região. Neste contexto, o presente trabalho objetivou estudar aspectos da estrutura populacional de A. brasiliana em praias localizadas próximas à região de estuário do rio Apodi/Mossoró - RN no intuito de verificar a densidade populacional de A. brasiliana durante as diferentes épocas do ano; estimar os parâmetros populacionais e relacionar as características abióticas de região com a distribuição e densidade desta espécie. As coletas foram realizadas no período de março/2007 a maio/2008 nas praias de Barra e Pernambuquinho no município de Grossos - RN. Em cada ponto foram realizados transcectos de 180 metros na região de entremarés e coletadas amostras de sedimento e de moluscos. O maior valor médio de densidade na praia de Pernambuquinho foi de 1148 indivíduos/m2, no mês de abril/07 e o menor foi em maio/08 (100 indivíduos/m2). Na praia de Barra o maior valor foi de 1813 indivíduos/m2, no mês de abril/08 e o menor foi em novembro/07 com 951 indivíduos/m2. Os comprimentos variaram de 1 a 28 mm, sendo mais frequentes indivíduos com comprimentos entre 22 a 24 mm. Foram constatadas diferenças significativas entre as densidades de A. brasiliana em ambas as praias, apenas nos meses de janeiro, abril e maio de 2008. Os parâmetros que descrevem o crescimento em comprimento de A. brasiliana na praia de Barra foram: L = 28,68 mm e k = 0,61 ano1, enquanto que para a praia de Pernambuquinho foram: L = 29,87 mm e k = 0,48 ano1. As curvas de crescimento de A. brasiliana sugerem a presença de três coortes bem definidas, indicando uma reprodução contínua com picos de recrutamento ocorrerendo entre os meses de outubro/07 a março/08. Pode-se verificar uma diminuição da densidade de A. brasiliana, especialmente no período de chuvas intensas do ano de 2008, o que provavelmente esteve associado ao aporte de sedimentos e a diminuição da salinidade. Esta perturbação provavelmente afetou as populações desta espécie na região.