Trasplante alogénico en leucemia mieloide aguda y la importancia genética en desarrollo de nuevos tratamientos / Allological transplant in acute myeloid leukemia, the genetic importance for the development of new treatments

La Leucemia Mieloide Aguda es una enfermedad caracterizada por la alteración en la producción de células madre hematopoyéticas y la proliferación celular. Es más común en adultos; a pesar de ello solo se presenta en el 1 % en los Estados Unidos. Entre los 65-68 años se observa una mayor incidencia existiendo de 2-3 casos por cada año en 100.000 habitantes, siendo aproximadamente el 10 % de los cánceres de este tipo. Los diagnósticos más recomendados para esta enfermedad son los de carácter sanguíneo, la realización de citometrías de flujo en muestra de médula ósea. Según estudios, los análisis citogenéticos en un gran número de pacientes han demostrado translocaciones e inversiones en los cromosomas somáticos, mientras que solo una minoría tiene una organización de cromosomas somáticos balanceada. La terapia de consolidación se acompaña del trasplante de células madre hematopoyéticas, conocido como el trasplante alogénico, que puede ser potencialmente curativo en algunos pacientes.

The acute myeloid leukemia, is a disease which is a characterized by an irregular production of hematopoietic cells and cellular proliferation. It´s most common in adults, however only 1% of American adults will be diagnosed throughout their lives. Between the ages of 65-68 there is a high incidence with only 2-3 cases per 100.000 patients; making up only 10% of this type of cancer. It´s mainly diagnosed by using blood test, flow cytometry (on Bone Marrow samples). Some cytogenetic studies suggest that in a significant number of patients both somatic chromosomal inversion and translocation are present, while only a small percentage show no somatic chromosomal mutations. Consolidation therapy with a hematopoietic Stem Cells transplant, also known as a "allogenic transplant", can be potentially curative in some special cases.

Papila Apical Dentaria como fuente de Células Madre: Relato del Caso / Papila Apical Dentária como Fonte de Células Tronco: Relato de Caso / Dental Apical Papila Stem Cell: Case Report

Las células madre mesenquimales (MSCs) son células madre adultas que tienen la capacidad de diferenciarse en varios tipos de células. Una rica fuente de células madre mesenquimales puede ser obtenida de tejidos dentales como la papila apical. El objetivo de este trabajo fue extraer las células madre de la papila apical de terceros molares humano para mirar su viabilidad de usarse en la práctica clínica. La de separación celular con Stro-1 y estudio de cinéticas fueron realizados. Como resultado, esas células, presentaron alta tasa de proliferación, formación de colonias y fácil acceso. Concluimos que el uso de células madre obtenidas de diente puede ser una buena alternativa por ser de fácil acceso, alta viabilidad celular y expresión positiva para marcadores celulares mesenquimales. La regeneración tisular o la formación de estructuras craneofaciales constituyen el futuro de la medicina regenerativa, ofreciendo una posibilidad para el tratamiento de malformaciones congénitas, traumas y otras enfermedades.

As células tronco mesenquimais (CTMs) são células-tronco adultas que têm a capacidade de diferenciar em vários tipos de células. Uma rica fonte de células tronco mesenquimais pode ser obtida de tecidos dentais como a papila apical. O objetivo deste trabalho foi extrair as células tronco da papila apical de terceiros molares humano para ver sua viabilidade de ser usado na prática clinica. Teste separação celular com Stro-1 e estudo de cinéticas foram realizados. Como resultado essas células apresentaram alta taxa de proliferação, formação de colônias e de fácil acesso. Concluímos que o uso de células tronco obtidas de dente pode ser uma boa alternativa por ser fácil acesso, alta viabilidade celular e expressão positiva para marcadores celulares mesenquimais. A regeneração tecidual ou a formação de novo de estruturas craniofaciais é o futuro da medicina regenerativa, oferecendo uma possibilidade para tratamento de malformações congênitas, traumas e outras doenças.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult stem cells that have the ability to diffe-rentiate into various cell types. A rich source of mesenchymal stem cells can be obtained from dental tissues such as the apical papilla. The objective of this work was to extract stem cells from the apical papilla of third human molars to see its feasibility to be used in clinical practice. Testing of cell separation with Stro-1 and study of kinetics were performed. As a result, these cells had a high rate of pro-liferation, formation of colonies and easy access. We conclude that the use of stem cells obtained from teeth can be a good alternative because they are easy to ac-cess, high cell viability and positive ex-pression for mesenchymal cell markers. Tissue regeneration or new formation of craniofacial structures is the future of re-generative medicine, offering a possibili-ty for treatment of congenital malforma-tions, traumas and other diseases.

Evaluación de formulaciones inmunoterapéuticas experimentales en el modelo hibrido murino de Reaccion del Injerto contra el Hospedador / Evaluation of experimental immunotherapeutic formulations in the hybrid murine model of Graft-versus-Host Reaction

Introducción: La Enfermedad del Injerto Contra el Hospedador es la complicación más frecuente de los Trasplantes de Células Madre Hematopoyéticas y de todos los trasplantes que contengan células inmunocompetentes alogénicas, el 100 por ciento la padecen y cerca del 30 por ciento mueren por su causa; una proporción alta de casos son esteroide-refractarios, asimismo otras medidas inmunosupresoras modernas fracasan. En los campos de la Inmunoterapia y la Vaccinología también existe una escasez preocupante de inmunomoduladores de origen biológico potentes, efectivos, seguros y de amplio espectro. Existe un modelo híbrido murino de gran utilidad metodológica para estudios experimentales. Objetivo: Evaluar dos formulaciones novedosas de origen biotecnológico, una de ellas inmunopotenciadora y otra inmunosupresora, desarrolladas como cocleatos. Material y Métodos: Mediante Microscopia Electrónica y RT-PCR se caracterizaron las formulaciones como nanopartículas y su capacidad de regular la expresión del ARNm de linfoquinas definitorias de sus perfiles, respectivamente. Empleando el modelo de Enfermedad del Injerto Contra el Hospedador en ratón híbrido F1 (CBAxC57BL), se evaluó su carácter inmunomodulador in vivo . Resultados: Partiendo de los proteoliposomas de Neisseria meningitidis, se obtuvieron dos formulaciones en forma de cocleatos, ambas con diámetros de partícula inferior a 100nm. La Formulación 1mostró un perfil proinflamatorio con potente capacidad de aumentar el IFNγ y el TNFα y potenció el Índice de Bazo hasta 2,05 en el modelo EICH con p=0,0002. La Formulación 2 mostró un perfil supresor-regulatorio con potente capacidad de aumentar la IL-10 y el TGFβ y además de suprimir la producción de TNFα. En el modelo usado, esta formulación, suprimió el Índice de Bazo de manera dosis dependiente y con alta significación estadística. Se corroboró el conocido perfil de seguridad y ausencia de reactogenicidad de ambas formulaciones. Conclusiones: Ambas formulaciones tienen potencial aplicación en los campos de la terapia de Enfermedad del Injerto Contra el Hospedador en otras patologías y en Vaccinología. Los resultados obtenidos en el presente trabajo fundamentan la conveniencia de continuar el desarrollo farmacéutico y completar la preclínica de ambas formulaciones(AU)

Introduction: Graft-versus-host disease is the most frequent complication of Hematopoietic Stem Cell Transplants and all transplants containing allogeneic immunocompetent cells; 100 percent of patients suffer from this complication and about 30 percent die for this particular cause. A high proportion of cases are steroid-refractory; likewise, other modern immunosuppressive measures fail. In the fields of Immunotherapy and Vaccinology, there is also a worrying shortage of powerful, effective, safe and broad spectrum immunomodulators of biological origin. There is a hybrid murine model of great methodological utility for experimental studies. Objective: To evaluate two novel formulations of biotechnological origin: an immunopotentiator formulation and an immunosuppressive one, which were developed as cochleates. Material and Methods: The formulations assayed by Electron Microscopy and RT-PCR were characterized as nanoparticles and for their capacity to regulate lymphokine mRNA expression profile, respectively. The immunomodulatory character was evaluated in vivo using Graft-versus-host disease in (CBAxC57BL) F1 hybrid mice. Results: Starting from the proteoliposomes derived from Neisseria meningitides, two cochleate formulations were obtained, both with particle diameters below 100 nm. Formulation 1 showed a proinflammatory profile with potent capacity to increase IFNγ and TNFα, and potentiated the Spleen Index up to 2.05 in the GVDH model with p = 0.0002. Formulation 2 showed a suppressor/regulatory profile with potent capacity to increase IL-10 and TGFβ and suppress the production of TNFα. In the model used, this formulation suppressed the Spleen Index in a dose-dependent manner with high statistical significance. The known safety profile and absence of reactogenicity of both formulations was corroborated. Conclusions: Both formulations have potential application in the fields of GVHD therapy and other pathologies as well as in Vaccinology. The results obtained in the present work suggest the usefulness to continue with the pharmaceutical development and complete the preclinical studies of both formulations(AU)

Papel de la medicina regenerativa y los sellantes en la enfermedad de Crohn perianal / Role of regenerative medicine and sealants in perianal Crohn's disease

La enfermedad de Crohn constituye una enfermedad inflamatoria crónica que puede cursar con fistulas complejas en hasta un 20% de los pacientes. A pesar de la intensificación del tratamiento, asociado o no a la cirugía, todavía es considerable el porcentaje de pacientes que no responden al tratamiento. En los últimos años se ha empezado a desarrollar nuevas terapias que permitan conseguir una mayor tasa de curación de estos pacientes, con las mínimas complicaciones posibles. Es cuando aparecen agentes que pretenden de forma directa el sellado o intervienen en la reducción local de la inflamación. Es objetivo de este artículo mostrar el papel de la Medicina Regenerativa en el tratamiento de estos pacientes.

Crohn's disease is a chronic inflammatory disease that can occur with complex fistulas in up to 20% of patients. Despite the intensification of treatment, associated with no surgery, the percentage of patients who do not respond to treatment is still considerable. In recent years, new therapies have been developed to achieve a higher cure rate for these patients, with the minimum possible complications. It is when agents appear to pretend as seal fistula tract as the local reduction of inflammation. The aim of this article is to show the role of Regenerative Medicine in the treatment of these patients.

Fibrosis pulmonar idiopática tratada con células madres mesenquimales alogénicas derivadas de tejido adiposo. Reporte de caso / Idiopathic pulmonary fibrosis treated with mesenchymal stem cells Allogenic derived from adipose tissue. Case report

Introducción: La fibrosis pulmonar idiopática representa una patología con pobre pronóstico que cuenta con escasas opciones terapéuticas de alto costo, es por ello que las células madres representan una opción viable que podría mejorar la calidad de vida de estos pacientes Reporte: Se presenta el caso de un paciente varón de 75 años con fibrosis pulmonar idiopática y múltiples comorbilidades que logró recuperar la deambulación y reducir los requerimientos de oxígeno gracias a la aplicación de células madres derivadas del tejido adiposo de uno de sus hijos. Conclusión: Las células madre constituyen una valiosa alternativa terapéutica para los pacientes con fibrosis pulmonar al promover la regeneración de los tejidos y reducir las condiciones inflamatorias de su patología mejorando su calidad de vida.

Enfermedad injerto contra huésped cutánea crónica tipo vitiligo. Caso clínico / Vitiligo type cutaneous manifestation of chronic graft-versus-host disease. Case report

Resumen: Introducción: La enfermedad injerto contra huésped (EICH) se produce por una respuesta patoló gica y destructiva del organismo, como resultado de la interacción entre linfocitos T inmunocompetentes del donante y los antígenos del tejido receptor. Se considera la complicación más grave del trasplante de células madres hematopoyéticas, descrito con mayor frecuencia posterior al trasplante de médula ósea (TMO). La piel suele ser el primer órgano y el más comúnmente afectado, tanto en su forma aguda como crónica, con un espectro clínico de presentación variable. Objetivo: Reportar un caso de vitiligo como manifestación de EICH cutánea crónica, signo de baja prevalencia, cuyo reconocimiento podría ayudar a la sospecha de esta grave complicación. Caso clínico: Escolar de sexo masculino de 8 años de edad, con antecedente de leucemia linfoblástica aguda (LLA) diagnosticada a los 3 años de edad, con recaída combinada medular y del sistema nervioso central (SNC) con enfer medad mínima positiva en los 3 años siguientes. Cuatro años posterior al diagnóstico de LLA, recibió TMO alogénico y siete meses después presentó múltiples nevos melanocíticos con hipopigmentación perilesional y máculas acrómicas en cara, tronco y extremidades, asintomáticas. La biopsia de piel fue compatible con EICH crónica tipo vitiligo y esclerodermiforme. Recibió tratamiento tópico con Tacrolimus, logrando estabilización del cuadro. Conclusiones: La EICH conlleva a la aparición de autoanticuerpos que podrían actuar como un factor desencadenante en la aparición de enfermedades autoinmunes, como lo es el vitiligo. En consecuencia podría explicar esta manifestación, poco descri ta en la literatura, de la EICH cutánea crónica.

Abstract: Introduction: Graft-versus-host disease (GVHD) is caused by a pathologic and destructive response of the organism as a result of the interaction between donor immunocompetent T lymphocytes and the recipient tisular antigens. It's considered the most serious complication of hematopoietic stem cell transplantation, most frequently described after bone marrow transplantation (BMT). The skin is usually the first and most commonly affected organ, in both acute and chronic, with a variable clinical spectrum of presentation. Objective: To report a case of vitiligo as a manifestation of cutaneous chronic GVHD, a low prevalence sign, which recognition could help to suspect this severe compli cation. Case report: 8 years old male, diagnosed with acute lymphoblastic leukemia (ALL) at 3 years old, had a combined medullary and central nervous system (NCS) relapse with minimal positive disease 3 years afterwards. After 4 years ALL was diagnosed, he received an allogeneic bone marrow transplant. Seven months after the BMT he presented multiple melanocytic nevi with peripheral hypopigmentation, and some isolated asymptomatic, confluent achromic macules on the face, trunk and limbs. The skin biopsy was compatible with chronic vitiligo and sclerodermiform type GVHD. He received topical treatment with Tacrolimus, achieving clinical stabilization. Conclusions: GVHD leads to the appearance of autoantibodies that could act as a trigger in the onset of autoimmune diseases, such as vitiligo. Consequently it could explain this poorly described manifestation in the literature of chronic cutaneous GVHD.

Sugestões de orientações para alta de crianças no pós-transplante de células-tronco hematopoiéticas* / Suggestions for the improvement of guidance at the hospital discharge of children in post hematopoietic stem cell transplantation / Sugerencias de orientaciones para alta de niños en el pos trasplante de células madres hematopoyéticas

Estudo qualitativo descritivo com sugestões de aprimoramento de orientações para a alta hospitalar de crianças no pós-transplante de células-tronco hematopoiéticas. Realizado em serviço público de transplante de medula óssea do sul do Brasil com 58 participantes, entre eles profissionais da equipe multiprofissional e familiares cuidadores, entrevistados de janeiro de 2014 a março de 2016. Utilizou-se a análise de conteúdo temático categorial. As possibilidades de aprimoramento são capacitação dos profissionais envolvidos no cuidado, construção e aplicação de planejamento de alta pela equipe multiprofissional, inclusão da criança na orientação, utilização de formas variadas para orientar, e elaboração de material didático apropriado. O processo de alta hospitalar é complexo e a equipe envolvida na assistência ao paciente e cuidador é responsável por tornar esse momento de transição um período de aprendizagem, para auxiliá-los nos cuidados em casa (AU).

Qualitative descriptive study with suggestions for the improvement of guidelines for hospital discharge of children in post-hematopoietic stem cell transplantation. The study was conducted in a public service specialized in bone marrow transplantation in southern Brazil, with 58 participants, including professionals of the multidisciplinary team and family caregivers, interviewed in the January 2014-March 2016 period. Thematic content analysis was used. The possibilities of improvement identified here are as follows: training of the professionals involved in care, construction and implementation of discharge planning by the multidisciplinary team, guidance provided also to the patients (children), use of various ways to guide and prepare the appropriate teaching materials. The discharge process is complex, and the staff that supports patients and caregivers is responsible for turning this moment of transition of care from hospital to home into a period of learning, assisting them in home care (AU).

Estudio cualitativo descriptivo que trae sugerencias de perfeccionamiento de orientaciones para el alta hospitalar de niños en el pos trasplante de células madres hematopoyéticas. Fue realizado en el servicio público de trasplante de médula osea en sur de Brasil con 58 participantes, entre profesionales del equipo multiprofesional y familiares cuidadores. Estos fueron entrevistados de enero de 2014 a marzo de 2016. Se utilizó el análisis de contenido temático categorial. Las posibilidades de perfeccionamiento son capacitación de los profesionales participantes en cuidado, construcción y aplicación de planeamiento de alta por el equipo multiprofesional, inclusión del niño en la orientación, uso de formas distintas para orientar y elaboración de material didático adecuado. El proceso de alta hospitalaria es complejo, y el equipo integrado en la asistencia al paciente y cuidador es responsable por ayudar en los cuidados en casa y para que ese momento de transición sea un periodo de aprendizado (AU).

Inyección intracordal de células madres mesenquimáticas en el manejo de la fibrosis cordal: Experiencia preliminar / Intracordal inyection of mesenchymal stem cells in scarred vocal folds: Preliminary report

Introducción: Las células madres son células no especializadas capaces de transformarse en células con funciones específicas actuando como sistema de reparación. Las células madres mesenquimáticas (CMM) son las más utilizadas actualmente. La fibrosis cordal altera la estructura de las cuerdas vocales afectando seriamente su función, no existiendo hoy una terapia que pueda manejar exitosamente esta condición. Objetivo: Evaluar la acción de la inyección intraoperatoria e intralesional de CMM autólogas en el proceso de reparación de lesiones cicatriciales crónicas en cuerdas vocales en pacientes con fracaso previo a terapias habituales. Material y método: Estudio piloto prospectivo de 3 casos. Se realizó punción de cresta ilíaca para extracción de CMM de médula ósea, que se concentran y expanden. En una segunda etapa se realiza resección de fibrosis cordal bajo laringoscopía directa e inyección intralesional del concentrado de CMM. Se realizó seguimiento videoestroboscópico. Resultados: No hubo complicaciones en sitio de punción de cresta ilíaca ni en laringe tras la inyección. Se observó retorno de la vibración cordal en los 3 pacientes, con mejoría vocal importante en 2 de ellos. Conclusión: La inyección intralesional de CMM aparece como una alternativa promisoria en el manejo de la fibrosis cordal con molestias mínimas para el paciente, requiriendo de mayores estudios.

Introduction: Stem cells are unspecialized cells in the body capable of developing into specialized cells with specific functions workingas a repair system. Mesenchymal stromal cells (MSC) are the most currently used. Scarred vocal folds cause severe voice problems. Nowadays there is no therapy that can successfully treat this condition. Aim: Evaluate the results of intraoperative and intralesional injection of autologous MSCs in the repair and healing process of chronic scarred vocal folds in patients with prior failure to usual therapies. Material and method: Prospective pilot study that includes three patients. MSCs were isolated and expanded from bone marrow taken from the Iliac crest of the patients. In a second stage, fibrosis resection was performed under direct laryngoscopy, and MSCs were injected intralesionally. Patients were followed up using videostroboscopy. Results: There were no complications after iliac crest puncture or laryngeal injection. Vocal fold vibration appeared in all 3 patients, with significant improvement in voice quality in two of them. Conclusions: Local injection of mesenchymal stromal cells appears to be a promising alternative in management of scarred vocal fold with minimal discomfort for the patient. Further studies are needed.

Células madre y cáncer / Stem cells and cancer

La cirugía, la radioterapia y la quimioterapia siguen siendo los tratamientos reconocidos universalmente como los más efectivos en la lucha contra el cáncer, a pesar de los avances logrados para elucidar sus mecanismos moleculares y haber desarrollado nuevas y sofisticadas técnicas para su tratamiento. Al ser esta enfermedad un importante problema de salud pública, el descubrimiento y estudio de las células madres tumorales ha creado nuevas líneas de investigación dirigidas a comprender y controlar la recurrencia de un tumor, la resistencia a los medicamentos y los mecanismos que hacen posible las metástasis. De esta forma, con una mejor comprensión de las células tumorales, surgen nuevas alternativas terapéuticas que hacen más factible el control y la posible solución que permita la cura definitiva del cáncer. Por la importancia fundamental del tema, el presente artículo tiene como objetivo resumir las características y propiedades de las células madres tumorales, las investigaciones en curso y las nuevas estrategias para la prevención y control de los mecanismos que llevan a la recurrencia de los tumores en los pacientes de cáncer que han sido tratados.

Surgery, radiotherapy and chemotherapy are universally recognized as the most effective anti-cancer therapies. Despite significant advances directed towards elucidating molecular mechanisms and developing clinical trials, cancer still remains a major public health issue. Cancer stem cells are a subpopulation of the cells that form the tumor. The discovery of these human cancer cells opens a perspective for understanding tumor recurrence, drug resistance and metastasis; and opens up new research directions on how cancer cells are capable of switching from dormancy to malignancy. Therapeutic alternatives emerge from a better understanding of the biology and the environment of tumor stem cells. The present paper aims to summarize the characteristics and properties of cancer stem cells, the ongoing research, as well as the best strategies for prevention and control of the mechanisms of tumor recurrence.

Ciencia y ficción en la utilización terapéutica de las células madres / Science and fiction in the therapeutic use of stem cells

En los últimos años ha surgido un fuerte interés en las investigaciones que apuntan a utilizar células madres como fuente de distintos tipos celulares, tejidos y órganos para terapias de reemplazo en distintas enfermedades. Se han identificado distintas fuentes de células madrtes o pñuripotentes, como la médula ósea, la sangre de cordón umbilical, y el embrión. Recientemente se ha demostrado que es posbile reprogramar células adultas de la piel de manera que tengan un potencial similar a las células embrionarias. Sin embargo, a la fecha, sólo se utilizan células de méducla ósea o de sangre de cordón umbilical en el tratamiento de enfermedades hematológicas, y cualquier otro tratamiento se encuentra aún en experimentación. Cada tipo de células madres tiene potencialidades y limitaciones técnicas, que son acompañadas por distintos grados de objeciones éticas. Este trabajo tiene como objetivo describir los tipos de células madres más estudiados hay en día y discutir cuáles son sus fortalezas y sus limitaciones...

Caracterización fenotípica de células madre mesenquimales humanas de médula ósea y tejido adiposo. Resultados preliminares / Phenotypic characterization of mesenchymal human stem cell from bone marrow and adipose tissue. preliminary results

Introducción:las células madre mesenquimales (CMM) poseen características fenotípicas y funcionales que les confieren un amplio potencial terapéutico por su posible uso en la terapia celular regenerativa, en el rechazo del trasplante alogénico y en enfermedades inflamatorias crónicas. Objetivo: evaluar la expresión de moléculas de membrana que permiten identificar la expresión de patrones moleculares característicos de CMM humanas mantenidas en cultivo. Métodos: se estudió la expresión fenotípica de células mononucleares procedentes de médula ósea obtenidas mediante aspiración medular, separadas por gradiente de Ficoll y cultivadas ex vivo entre los pases o subcultivos 3 y 16; y adipocitos cultivados procedentes de la extracción enzimática de tejido adiposo de donantes sanos. Se realizó doble marcaje para las moléculas CD34/CD45, CD34/CD90, CD34/CD117, y CD34/CD44. Resultados: en los resultados preliminares obtenidos se observó que las células cultivadas procedentes de médula ósea, entre los pases 4 y 8 de cultivo expresaron 45,13 por ciento de células CD34-/CD45- (doblemente negativas), lo que correspondió con el 25,24 por ciento de células CD34-/CD90+ y el 96,90 por ciento de CD34-/CD117-. En las células procedentes de cultivo de adipocitos se observó el 52,3 por ciento de CD34-/CD45- (doblemente negativas),12,31 por ciento de CD34-/CD90+,43,31 por ciento de CD34-/CD117- y 64,68 por ciento de CD34-/CD44+.Estos resultados sugieren que ambos cultivos se diferenciaron a CMM. Las CMM procedentes de adipocitos mostraron el 64,68 por ciento de células con expresión de la molécula de adhesión CD44 a la que se atribuyen propiedades funcionalescomo el asentamiento tisular. Conclusiones: estos resultados preliminares permiten corroborar que ambos métodos experimentales de cultivo son efectivos para la obtención de CMM con fines terapéuticos

Introduction:mesenchymal stem cells (MSCs) have phenotypic and functional characteristics whichgives them a broad therapeutic potential for possible use in regenerative cell therapy, allogeneic transplant rejection and chronic inflammatory diseases. Objective: to evaluate the expression of moleculemembranes expression to identify molecular patterns characteristic of human MSCs maintained in culture. Methods:the phenotypic expression of mononuclear cells from bone marrow wereobtained by bone marrow aspiration, separated by Ficoll and cultured ex vivo between passages or subcultures 3 and 16 and adipocytes cultured obtained from enzyme extraction of adipose tissue of healthy donor. Double staining was performed for molecules CD34/CD45, CD34/CD90, CD34/CD117 and CD34/CD44. Results:preliminary results showed that cultured mononuclear cells from bone marrow between passage 4 and 8 of culture expressed 45,13 percent CD34-/CD45- cells (double-negative), corresponding to 25,24 percent CD34-/CD90+ cells and 96,90 percent of CD34-/CD117-. Adipocytes from culture cells showed 52,3 percent CD34-/CD45- (double-negative), 12,31 percent cells CD34-/CD90+, 43,31 percent CD34-/CD117- (double-negative). Our results suggest that both cultures were differentiated to MSCs. Adipocytes from MSCs showed 64,68 percent of cells with expression of CD44 adhesion molecule conferring functional homing properties Conclusions:these preliminary results corroborate that the experimental methods used in cultivation are effective for obtaining MSCs with therapeutic purposes

Identificación de células madres hematopoyéticas fetales y de adultos: mitos y realidades de los trasplantes / Identification of fetal and adults hematopoietic stem cells: myths and realities of the transplants

Las cédulas madres y hematopoyéticas son células indiferenciadas con una amplia capacidad de proliferación y de autorrenovación; están presentes en medula ósea (1%-3%) y en sangre (0,1%), identificándose por la expresión del marcador CD34. Pueden ser movilizadas desde la médula ósea a la sangre después de quimioterapia o con citoquinas, En este estudio se identificaron células madres en sangre de fetos, neonatos y adultos. Se analizaron 278 muestras de sangre de fetos de 17-32 semanas, neonatos, y en productos de aféresis de células madres de pacientes con enfermedades malignas. La cantidad de células CD34 ± disminuyó con el aumento de la edad gestacional de 6,10% a 1,03%. De estas células se obtuvo la formación de colonias granulocíticas y eritrocíticas en cultivos. En sangre de cordón se obtuvieron 0,86 ± 0,33% células CD34+. Se analizan las indicaciones y resultado de trasplantes de médula ósea y de sangre de cordón en diferentes patologías. Hasta ahora no existe indicación médica para el uso de células madres autólogas de sangre de cordón en leucemias infantiles, ni en enfermedades genéticas. En infarto del miocardio no se han obtenido resultados satisfactorios con los protocolos clínicos evaluados, mientras que en daño neurológico, el uso de células madres permanece todavía como una aproximación experimental.

Hematopoietic stem cells are undifferentiated cells with high proliferative rate and autorenovation; they are found in bone marrow (1%-3%) and blood (0.1%), being identified by the expression of the marker CD34. They may be mobilized from bone marrow (B.M.) into the blood after chemotherapy or cytokine treatment. In this study, stem cells were identified in fetal and adult blood. Two hundred and seventy eigh blood samples were analyzed; they were obtained from fetuses (17-32 weeks-old), neonates, and in the products from apheresis performed to patients with malignancies. The amount of CD34+ cells decreased as the gestational age increased (6.10% to 1.03%). These cells grew in culture to produce granulocytic and erytrocytic colonies. In cord blood CD34+ cell were identified (0,86% ± 0,33%). Indications and results of bone marrow and cord blood stem cell transplants in different pathologies are analyzed. The transplant of allogeneic cord blood stem cells in patients not having a compatible donor is the worldwide approved indication for this procedure. No satisfactory results has been obtained in cases of myocardial infarct. The treatment of neurological damage remains experimental.

Mieloma múltiple: Clínica, paraclínica y principales esquemas de tratamiento Hospital de San José de Bogotá DC. 2003 a 2010 / Multiple myeloma: Clinical and laboratory manifestations and main treatment regimens Hospital de San José de Bogotá dc. 2003 to 2010

El mieloma múltiple es una neoplasia de células plasmáticas incurable, con morbilidad discapacitante por la gran sintomatología y una alta mortalidad. Afecta todas las razas y áreas geográficas, y su edad media de diagnóstico es de 66 años con solo 10% menores de 50 años y 2% por debajo de 40. Objetivo: describir las características clínicas, paraclínicas y los principales esquemas de tratamiento en primera línea de los pacientes manejados y tratados en el Hospital de San José de Bogotá DC, entre enero 2003 y diciembre 2010. Método: cohorte retrospectiva de mayores de 18 años de edad con diagnóstico de mieloma múltiple sintomático. Los datos fueron extraídos de las historias clínicas. Resultados: 39 pacientes se diagnosticaron durante ocho años, 59% hombres cuya edad promedio fue de 59,7 años (DE de 10,7). El 70% fue considerado candidato a trasplante y en el 33,0% (n=7/21) de estos se efectuó el procedimiento. El esquema de quimioterapia más usado fue talidomida-dexametasona (23%); la respuesta al tratamiento más común fue muy buena parcial (40,9%) y el 23,7% alcanzaron por lo menos una completa.

Multiple myeloma is an incurable cancer of the plasma cells featuring disabling morbidity due to its many possible symptoms and high mortality rate. It affects all races and geographic regions. The average age at diagnosis is 66 years. Only 10% are under age 50 and 2% under 40. Objective: to describe the clinical and laboratory manifestations and main first-line therapies of patients managed and treated at Hospital de San José, Bogotá DC, between January 2003 and December 2010. Method: a retrospective cohort study of patients with diagnosed symptomatic multiple myeloma aged more than 18 years based on data compiled from clinical records. Results: thirty-nine (39) patients were diagnosed in an 8-year period, 59% were men with a mean age of 59.7 years (SD 10.7). Seventy percent (70%) were considered candidates for a transplant and this procedure was actually performed in 33.0% (n= 7/21). The chemotherapy regimen most commonly used was a thalidomide–dexamethasone combination (23%). The most frequently observed response to therapy was a very good partial response (40.9%) and 23.7% achieved at least one complete response.

Proliferación de células madres mesenquimales obtenidas de tejido gingival humano sobre una matriz de quitosano: estudio in vitro / Proliferation of mesenchymal stem cells from human gingival tissue on chitosan scaffold: an in vitro study

Objetivo: Comprobar la proliferación de células madres mesenquimales (MSCs) provenientes de tejido conjuntivo gingival humano sobre una matriz de quitosano. Método: Estudio experimental in vitro en el cual se aislaron MSCs a partir de cultivos por explante de tejido conjuntivo gingival. La presencia de MSCs, se caracterizó mediante citometría de flujo, utilizando para ello anticuerpos CD34, CD45, CD73, CD90, CD105, diferenciación hacia tres linajes celulares: adipocitos, osteoblastos y condroblastos. La diferenciación fue corroborada mediante microscopía óptica con tinciones Oil Red, Alizarin Red y Safranina O respectivamente. La matriz de quitosano fue analizada mediante microscopía óptica. Las MSCs en pasaje 5, fueron sembradas en presencia de la matriz de quitosano. La proliferación de las células madres fue analizada mediante microscopía óptica y tinción con cristal violeta. Resultados: A partir del explante de tejido gingival humano se obtuvieron MSCs, que cumplieron con los criterios de caracterización morfológica y fenotípica correspondiente a una MSC. Las MSC adoptaron una morfología fibroblastoide, adherencia al plástico, confluencia de un 80 por ciento y sobre un 90 por ciento expresaron los marcadores CD73, CD90 y CD105 y bajo un 10 por ciento fueron negativas para CD34, y CD45 por técnica de citometria de flujo. Las MSC cultivadas en presencia de quitosano proliferan, sin embargo observamos que a mayor concentración de quitosano en el cultivo disminuye la proliferación y densidad celular. La matriz de quitosano en presencia del medio de cultivo pierde sus propiedades físicas, disolviéndose y formando un gel no transportable. Conclusiones: A pesar de existir proliferación celular de MSCs de origen gingival humano en presencia de la matriz de quitosano, su utilidad como andamiaje y medio de transporte de MSC es deficiente debido a que se alteran sus propiedades físicas, disolviéndose y formando un gel no transportable en contacto con el medio de...

Aim: The purpose of this study was to assess the proliferation of mesenchymal stem cells (MSCs) from human gingival tissue on chitosan matrix. Methods: Experimental study in vitro. Gingival connective tissue samples were obtained from healthy volunteers from the maxillary tuberosity. The explants were minced and cultured on tissue culture dishes. MSC were characterized by flow cytometry using markers for CD34, CD45, CD73, CD90, CD105 and for differentiation into, adipogenic, osteogenic and chondrogenic lineages. The tissue differentiated was analyzed with light microscopy and evaluated by culture staining using Oil Red, Alizarin Red y Safranina O respectively. MSC from passage 5 were cultured with chitosan scaffold. Proliferation of MSC was analyzed with light microscopy and crystal violet staining. Results: MSCs were obtained from gingival explants, and developed the standard of the morphologic and phenotypic characterization as a stem cell. The MSC adopted a fibroblastoid morphology, adherence to plastic, confluence of 80 percent and over 90 percent were consistently positive for CD90, CD105, CD73 markers and under 10 percent were negative for hematopoietic markers CD34 and CD45 by flow cytometry analysis. The MSC cultured in presence of chitosan matrix proliferated, however complete medium, it was dissolved forming a gel structure. We also observed that at higher concentrations of chitosan, MSC has less density and growth. Chitosan matrix in presence of cell culture medium loses physical properties, dissolving and forming a non-transportable gel. Conclusions: Despite the existence of proliferation of MSCs from human gingival tissue with chitosan matrix, its ability to act as a cell carrier and scaffold is deficient, since its physical properties are altered, dissolving and forming a non-transportable gel in contact with cell culture medium.

Técnicas del futuro: ingeniería de tejidos y uso de células madre en medicina reproductiva / Future's technology: tissue engineering and stem cells in reproductive medicine

Últimamente ha cobrado gran interés en la comunidad médica y científica, el avance experimentado por la medicina regenerativa, la ingeniería de tejidos y el uso de terapias celulares en base a células autólogas maduras, como también el uso de células madre. Desde que se levantó en Estados Unidos, la prohibición de investigar con células madre embrionarias, se ha producido un aumento de las investigaciones en este campo. El interés por estas investigaciones, se ha traspasadoa la comunidad no científica, que se encuentra expectante frente al progreso que se logre, con las terapias derivadas de tales estudios. En medicina reproductiva, existe la esperanza de poder producir células germinales tanto femeninas como masculinas (ovocitos o sus precursores y espermatozoides o sus precursores), a partir de células madre, para tratar pacientes con falla gonadal (ovárica o testicular), que hasta ahora resuelven su problema de infertilidad, mediante el uso de gametos donados, prevaleciendo la falla endocrina, que se resuelve con la administración de reemplazo hormonal. Las células madre son células indiferenciadas, toti potenciales que bajo ciertas condiciones, pueden diferenciarse a células especializadas. La medicina regenerativa se vale de la ingeniería de tejidos y las terapias celulares con células autólogasmaduras y también con células madre. Este artículo es una revisión bibliográfica sobre las últimas investigaciones en el campo de la medicina regenerativa y el uso de células madre en medicina reproductiva. Se describen los diferentes tipos de células madre y los tejidos que se ha logrado reproducir in vitro hasta ahora, como también algunos estudios en animales y su aplicación en humanos.

In the last years, the scientific and non-scientific community have been motivated by the great advances in the field of regenerative medicine, tissue engineering and cell therapies (using either mature autologous cells or stem cells). Since the beginning of 2009, once the prohibition of research in embryonic stem cells was abolished, there has been an increase in research in this field. There is great expectation, specially in the field of reproductive medicine and infertility where there exists the hope to produce germinal cells (oocytes and sperms) to treat couples with gonadal failure (ovarian o testicular). In these patients, gamete donation and permanent hormonal replacement therapy have resolved their fertility and/or endocrine problems. Regenerative medicine uses tissue engineering, and cell therapies to repair the function of a damaged organ. Stem cells are undifferentiated, toti potentially cells, that under certain conditions or milieu may differentiate to specialized cells. This article is a bibliographic review of the most recent investigations in the field of regenerative medicine and stem cell therapies, using animal models and their application to humans.

Aspectos celulares y moleculares de las células madres involucrados en la regeneración de tejidos con aplicaciones en la práctica clínica odontológica / Cellular and molecular aspects of stem cells involved in tissue regeneration applications in clinical practice dentistry

The medicine and dentistry entering a new era in which the news therapy approaches like genetic therapy, cellular therapy, engineering tissue and medicine regenerative they extended the arsenal of possibilities for our patients. The Stem cells in the field of the regenerative medicine, by its characteristics of self renewal, expansion and differentiation, have shown to be an important alternative for the treatment of pathologies and to alterations in the teeth and periodontal structures. The tissue regeneration it implies the replacement of weaves affected with identical cells that can be generated from the stimulation of Mesenchymal Stem Cells (MSCs) by different involved molecular and cellular mechanisms in the dental morphogenetic; for that reason different options look for to facilitate the use of MSCs like clinical treatment of periodontal diseases and functional oral injury

La medicina y odontología clínica están entrando en una nueva era en la cual los nuevos enfoques terapéuticos como la terapia génica, la terapia celular, la ingeniería tisular y la medicina regenerativa ampliaran el arsenal de posibilidades para nuestros pacientes. Las células Madres en el campo de la medicina regenerativa, por sus características de autorrenovación, proliferación y diferenciación, han mostrado ser una importante alternativa para el tratamiento de patologías y alteraciones en los dientes y estructuras periodontales. La regeneración tisular implica el reemplazo de tejidos afectados con células idénticas que pueden ser generadas a partir de la estimulación de células Madres mesenquimatosas (MSCs) por diferentes mecanismos moleculares y celulares involucrados en la morfogénesis dental; por ello se buscan diferentes opciones para facilitar la utilización de MSCs como tratamiento clínico de enfermedades periodontales y traumas bucales funcionales. La estandarización de protocolos para la obtención de ASCs autólogas de diferentes tejidos, eliminará problemas de rechazo inmunológico, permitiendo una completa regeneración funcional de los tejidos de la cavidad bucal

Trasplante de células hemopoyéticas: en los síndromes mielodisplásicos / Transplant of hemopoyetic cells: in myelodisplastic syndrome

En el presente trabajo se realizó un estudio retrospectivo de 22 pacientes diagnosticados con síndrome mielodisplásico y a los cuales se les realizó un trasplante de células hemopoyéticas con el fin de evitar el progreso de la enfermedad a un proceso mieloproliferativo. El estudio comprende el período entre octubre de 1988 y diciembre de 2005, y su objetivo es comparar los resultados y evolución de los pacientes con otros centros de trasplante. La sobrevida de nuestros pacientes es similar a la reportada en otros centros.

In the present work a retrospective study of 22 patients with myelodispastic syndrome who underwent a transplant of hemopoyetic cells in order to avoid the progression of the disease in to a myloproliferative process. The study takes into account all the data beginning October 1988 and ending December to 2005, and its objective is to compare the results and the prognosis of these patients against the results of other transplant centers. The super life of our patients is similar to the reports of other centers.

Stem cell, una alternativa al trasplante cardíaco en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca / Stem cell, an alternative to heart transplant in the treatment of heart failure

El concepto tradicional mantenido por años sobre la incapacidad del corazón adulto para renovar sus células ha tenido que ser revisado ante la evidencia de los resultados obtenidos por numerosos estudios que demuestran la existencia en el corazón humano de células con capacidad proliferativa. El trasplante cardíaco aunque ha demostrado ser solución definitiva de la insuficiencia cardíaca no es aplicable a todos los pacientes, fundamentalmente por el déficit de donantes, los avances terapéuticos y quirúrgicos, si bien mejoran la calidad de vida, no son capaces de mejorar la contractilidad miocárdica ni sustituir el cardiomiocito. La terapia celular en la regeneración miocárdica surge como una de las estrategias terapéutica con un futuro prometedor en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca, aunque no exenta de controversias, lo que obliga a un mayor conocimiento ante su aplicación clínica, lo cual no contrapone el iniciar ensayos clínicos que permitan un avance en esta dirección.

The traditional concept maintained for years on the incapacity of the adult heart to renew its cells had to be reviewed taking into account the results obtained by numerous studies that demonstrate the existence of cells with proliferative capacity in the human heart. Although the heart transplant has proved to be the definitive solution for heart failure, it may not be applied to all patients due mainly to the deficit of donors. The therapeutic and surgical advances improve the quality of life, but they cannot enhance the myocardial contractility, or replace the cardiomyocite. The cellular therapy in the myocardial regeneration appears as one of the strategical therapeutics with a promising future in the treatment of heart failure, even though it is not exempt from controversies that oblige to have a greater knowledge about its clinical application, but do not impede to start making clinical trials that allow to advance in this direction.